Mikroskopické vyšetrenie mozgovomiechového moku

Cytosis Stanovenie

V mozgovomiechovom moku zdravých jedincov obsahoval veľmi malé množstvo buniek. Klinický význam majú hlavne leukocyty (lymfocyty). Ak chcete spočítať bielych krviniek neruší erytrocyty, Oni zničiť tým, že pridá neriedený cerebrospinálny mok 1/10 dielov kyseliny octovej fuchsínu. Magenta farby jadrových buniek v červenom. Pre lakovanie leukocytov pomocou činidla Samson (zmiešaný 30 ml ľadová kyselina octová, 2 ml skvapalneného fenolu, 2 ml alkoholickým roztokom fuchsínu 1 : 10 a prikrývali 100 ml destilovanej vody). Reagent odolný, dobré škvrna bunky a počas niekoľkých hodín, im bráni cytolýzy.

Aplikujte ako riešenie, zahŕňajúce 5 ml 10 % octová kyselina 0,1 Pán metilvioleta. To je menej stabilná,, Bunky škvrna modrý.

Vzhľadom k vlastnostiam cytolytických mozgovomiechového moku spočítať počet buniek by malo byť bezprostredne po prijatí. Kvapalina sa dávkuje do trubice alebo mikropipeta klesá úmerne 10 diely mozgovomiechového moku a 1 časť farbivo riešenie a ľavú pre 10-25minuta na farbenie buniek. K chovu možno použiť zmiešavacie leukocytov. Bunky mozgovomiechového moku veľmi rýchlo usadzovať na stenách trubiek, takže kvapalina, box in vitro, Pred štúdie musia byť dôkladne premiešať rotačné pohyby medzi dlaňami.

Pre výpočet počtu buniek sa použije Komora Fuchs-Rosenthal. Počítanie produkty po celej siete prostredníctvom 5 min po naplnení komory. Počet článkov 1 L je daná:

X =(* 11)/(3.2*10)

kde X - počet buniek v 1 l; - Počet buniek, počítajú na povrchu obrazovky; 3,2 - Objem komory; 11/10 - Riedenie.

Povolené registrácia hrabať ako zlomok, napr 14/3, kde 14 - Počet buniek počíta v komore, 3 - Objem Zaokrúhľovanie komory. Vďaka veľké množstvo buniek, je dostatočná pre spočítať v jednej polovici siete a počtu prijatých dvojitý. S výrazným pleocytózou (významný nárast počtu buniek) povolené počítať bunky 16 Malé námestie a vynásobte toto číslo o 16.

V neprítomnosti komory Fuchs-Rosenthalová môže byť použitý Počítanie komora Goryaeva s výrazne nižšou kapacitou, preto sa počíta bunky aspoň tri štvorce, vypočíta sa aritmetický priemer a množte sa, že na 1,2. Faktor 1,2 získa zo vzorca

X =(* 11)/(0.9*10)

kde 0,9-kapacita komora, 11/10 - Riedenie.

Pri počítaní buniek v mozgovomiechovom moku neriedenej jedného z prvých kvapiek, vyplývajúce z punkčná ihly, umiestni do Fuchs-Rosenthal a stanovenie počtu buniek, ako je uvedené vyššie.

Za normálnych okolností, počet buniek (lymfocyty) v 1 l mozgovomiechového moku z komorách mozgu a mozočku mozgu nádrži 0-1, a kvapalný, získaný lumbálna punkcia - 2-4.

Deti mladšie ako tri mesiace 1 l mozgovomiechového moku je zistené, že 20 až 23 buniek, až na jeden rok - 14-15, do dvoch rokov - 11-14, dve-pětroků - 10-12, päť-sedmrok, 8-10, sedem až desať rokov - 6-8, viac ako desať rokov - 4-5.

Keď meningitída, nádory mozgu abscesu a počet buniek v mozgovomiechovom zvyšuje tekutín.

V štúdii hemoragickej mozgovomiechového moku v niektorých prípadoch je potrebné stanoviť jeho skutočný cytosis. Za týmto účelom Friedman metóda: hemoragickej tekutina zisk činidlo Samson pre stanovenie počtu buniek a izotonický roztok chloridu sodného pre počítanie počtu červených 1 l mozgovomiechového moku.

Napríklad, počet buniek v 1 l - 20, počet červených krviniek - 3600. Počet červených krviniek a bielych krviniek rozpoznať pacienta z všeobecného analýzy, vykonáva pred lumbálna punkcia. Napríklad, v 1 ml krvi 4 200 000 erytrocytov, 7000 leukocyty. Preto musí človek leukocytov 4200000/7000 = 600 erytrocytov.

Ak chcete získať skutočnú hodnotu cytosis znamienko rovnosti:

na 600 červené krvinky - 1 leukocyt;

na 3600 erytrocyty - X leukocyty, Teda,

X = 3600/600 = 6 леикоцитов.

Pravda mozgovomiešnej tekutiny cytosis 20-6 = 14 bunky 1 l.

Použitie tejto metódy je obmedzený, od mozgovomiechového moku sa značným prímesou krvi nie je vhodné pre takéto štúdie.

Stanovenie počtu erytrocytov v mozgovomiechovom moku Je nastavený na stanovenie závažnosti intrakraniálnych krvácaní pacienta.

V prítomnosti 1 l 2000-5000 erytrocyty cerebrospinálny mok stáva ružová, 900-1000 Erytrocyty - len mierne opaleskujúca. Bezfarebná kvapalina môže byť detekovaný nižšia červených krviniek. Klinický význam je zvýšenie dynamiky úrovne červených krviniek.

Diferenciácie buniek mozgovomiechového moku držaný v počítacie komôrke vo forme natívny a zafarbené.

Pri vysokom zväčšení (okulár 10X alebo 15X, 40X objektív) V počítacie komôrke pozor na množstvo buniek, formulár, umiestnenie a veľkosť jadier, prítomnosť inklúzií v cytoplazme. Je ľahké odlíšenie lymfocytov, neutrofilné granulocyty, makrofágy. Za normálnych okolností, v mozgovomiechovom moku, obsahujúce len lymfocyty.

Pre úplnú charakterizáciu bunkové zloženie mozgovomiechového moku študoval farebného prípravky. Bunky boli zafarbené tekutina horšie, než krvných buniek. Existuje niekoľko spôsobov, ako sfarbenie: by Rosina, Vyvádzanie, Papanicolaou, Alekseev, Môže Gryunvalydu, Pappengeymw.

Určenie povahy metódy fluorescenčnej mikroskopie pleocytózou

Skim potiahnutého podložné sklíčko a kvapku mozgovomiechového moku zmiešať s fluorochrómy farbivom (zmes vodných roztokov solí s akridínové Orange na rhodamin v chove 1:20000). Zmiešaná droga je skúmaná pod fluorescenčným mikroskopom ML-2 v modro-fialové svetlo vo viditeľnom spektre, za použitia kombinácií budiacich filtrov: FS 1-4, FBS 14-4, BS 8-2 a blokovacie filter LS-1 ponorenie šošovka. Ako neflyuorestsiruyuschego ponorenie olej používaný pre výskum dimetyl (kyselina ortoftalovej dimetylester).

V tmavom pozadí zorného poľa a lymfocyty polynuclears ľahko identifikovať zelenú žiaru cytoplazmy. Počet riadkov 100 bunka, vzhľadom k počtu lymfocytov a neutrofilov.

Lymfocyty odlišná od povahy neutrofilov jadra (glybchatoy konštrukcia s oranžovými inklúzií) a jasne zelené fluorescencie.

Neutrofilných granulocytov majú jasnú štruktúru, Ich jadra chromatín difúzne zapálil, jednotný svetlý- zelená. Cytoplazmatický žltý- zelená, IT rozptýlené tehlovo červená granule.

V prípade menšieho cytosis je natívny mozgovomiechového moku odstredí a zrazenina štúdie.

Fluorescenčné mikroskopické vyšetrenie mozgovomiechového moku uľahčuje k záveru, že neutrofilov, lymfocytárnej alebo polymorfonukleárne bunka príroda pleocytózou.

Morfologické charakteristiky buniek mozgovomiechového moku

Lymfocyty

V mozgovomiechovom moku zdravých ľudí nájdených malé a stredné lymfocyty (1-2 1 l) veľkosť 4-6 mikrónov. Tento okrúhly tvar bunky s veľkým jadrom a glybchatym veľmi úzky cytoplazmy.

Keď lymfatické pleocytózou (tuberkulóznej meningitída, cysticerkóza) spolu s malé a stredné veľké lymfocyty javia (8-9 M), Občas je možné detekovať bunky s priamym štiepenie.

Počet lymfocytov (spolu s ostatnými bunkami) zvýšenie mozgovomiechového moku v mozgových nádorov, Počas chronickej meningitíde. Pri zvýšení neurochirurgické ochorení počtu lymfocytov v pooperačnom období dochádza po zvýšení počtu neutrofilov a naznačuje priaznivý výsledok.

Plazmatické bunky

Plazmatické bunky môžu byť detekované v mozgovomiechovom moku len vtedy, keď je aktuálna dlho zápal v mozgu a mozgových blán. Morfológia plazmatické bunky, ako sú, v krvi alebo kostnej drene pozoroval po biopsii.

Tento okrúhly tvar bunky s excentricky umiestneného jadra a intenzívne farebné, bazofilné cytoplazmy. V niektorých prípadoch môže byť množstvo dosiahnuť svoj 26%. Tam sú plazmatické bunky v pooperačnom období a pomalý priebeh opravných procesov v mozgu.

Gistiocitы

V normálnom mozgovomiechovom moku sú niekedy nachádza vo forme jednotlivých kópií.

Zafarbené prípravky histiocyty majú veľkú jadro a relatívne úzke cytoplazmu. Množstvo buniek 7 na 10 m, okrúhle alebo nepravidelný tvar. Jadro fazuľa alebo nesprávneho tvare čepele, normohromnaja. Jadierka sú viditeľné v natívnej prípravky s fázovým kontrastom mikroskopia.

Keď tuberkulóznej meningitídy v mozgovomiechovom moku odhalila veľké množstvo histiocyty, odstupu a klastre, ich cytoplazmy bázomilné, intenzívnejšie maľované.

Podľa dostupných údajov, Niektoré typy gliových buniek môže transformovať do histiocyty. Je detekovaný Veľký počet histiocytov v mozgovomiechovom moku pacientov, prekonal chirurgický zákrok na mozgu alebo chrbtice (ktorý označuje aktívne tkanivovú reakciu a normálne hojenie rán), a u jedincov, trpí tuberkulóznej meningitídy a cysticerkózy v súčasnej stagnujúci zápalu. Keď nádory mozgu s inváziou do subarachnoidálneho priestoru alebo histiocyty v komorovej stene sa môže objaviť v mozgovomiechovom moku v spojení s zmenených buniek a makrofágov, ktorý je typický pre vznik okolo nádoru reaktívne zóny.

Makrofágy

Makrofágy sú vytvorené z jediného- endoteliálne bunky a multi-pavučinovce, pri ktorých a monocyty. Prvky endoteliálneho pavučinovce, pri ktorých je oddelená od syncytium a stať sa zaoblené bunky, vlastniť amoeboid pohyb a prienik do mozgovomiechového moku.

Makrofágy aktívne pohltiť a stráviť bunky a ďalšie prvky, spadajú do mozgovomiechového moku v patologických procesov, prispieva k jeho čistenie. Tieto inklúzie v cytoplazme makrofágov ľahko rozlíšiť v komore a v zafarbené.

Makrofágy phagocytose erytrocyty, zničené alebo nemodifikované neutrofilné granulocyty, tukové kvapôčky, gematoidina kryštály, atď.. Často sa v cytoplazme makrofágových vakuolách rôznych veľkostí, sú k dispozícii, alebo jeden veľký vakuola, ktorá zaberá takmer celú cytoplazmy, pričom jadro je posunutá k obvodu. V takých prípadoch, bunka má tvar prstenca - cricoid makrofágov.

Normálne makrofágy do neprítomného spinálnej tekutiny. Ich vzhľad v normálnom počte buniek svedčí o krvácanie alebo zápal v centrálnom nervovom systéme,. Veľký počet makrofágov v mozgovomiechovom moku v pooperačnom období označuje aktívne sanácie (pozitívny výhľad). Malý počet makrofágov či ich absencia, ak sú vyjadrené pleocytózou - nepriaznivý prognostický znak.

Granulované gule – penové bunky

Granulované gule (penové bunky) Makrofágy sú veľké s viac inklúzií tukových kvapôčok v cytoplazme.

To je najčastejšie bunky zaoblený tvar, magenta farebné v tmavo hnedej farbe. Pri liečbe moku Sudan III granulovaných gule natretým oranžovo-červené.

Detekovaný v mozgovomiechovom moku je v styku s kvapalinou v nej z cýst rôznych etiológiou, rozpad mozgového tkaniva (s kvapkami tuku), niekedy v pooperačnom období, v niektorých mozgových nádorov (kraniofaringiome, ependymomas a ďalšie.). Ak je nádor nachádza v blízkosti komôr, granulované gule často detekovaná v mozgovomiechovom moku z komôr. Zdrojom granulovaných loptičky sú mikroglie, a oligodendrocytes, bunky vonkajšieho plášťa nádoby a arachnoidální.

Neutrofilných granulocytov

Neutrofilných granulocytov v mozgovomiechovom moku podobné krvi neutrofilné granulopitami, ich cytoplazma (V počítacie komôrke a natívne prípravky) často pretiahol, alebo má výčnelok (pseudopodiami). Táto rozmanitosť buniek pozorovaných v prvých 10-15 minút po požití mozgovomiechového moku a označuje zachovanie neutrofilných- schopnosť granulocytov pohybovať. Charakteristický je segmentovaný jadro, počet segmentov, v ktorej sa pohybuje od dvoch do piatich; stab neutrofilné granulocyty sú zriedkavé.

Pri ukladaní mozgovomiechového moku neutrofilné granulocyty zmenené pred, než ostatné bunky. Jadrá neutrofilných granulocytov môžu byť lyžovaní alebo segmenty sú zaokrúhlené, s jasnými kontúrami, spojené tenkým mostíkom; neskôr podobu jednotlivých peliet. Microphage, ktorý je uložený len jedno jadro segmentom zaoblený tvar, vzhľadu sa podobá Loevit bunku. Tam opuchnuté neutrofilné granulocyty s nezreteľné obrysy segmentov, zaberá takmer celú cytoplazmy. V farebného prípravkoch môže sledovať všetky fázy kolapsu neutrofilných granulocytov - opuch jadra k úplnej deštrukcii bunkovej štruktúry, keď obrysy nie sú viditeľné cytoplazmy, a kľúčové segmenty sú beztvarý, skladajúci sa z mäkkej mesh chromatínu. Členstvo v týchto buniek neutrofilných granulocytov je možné nastaviť len reakciou na peroxidázu: prítomnosť zeleno-žltý alebo hnedými granúl v cytoplazme zničený.

Niekedy, v mozgovomiechovom moku nájdených neutrofilných granulocytov s pyknotické jadrom vo forme hrudiek nepravidelný tvar hyperchromatická.

Neutrofilných granulocytov sa objaví v mozgovomiechovom moku s krvácania v subarachnoidálnom priestore, zápalové ochorenia nervového systému, po neurochirurgických operáciách. Prítomnosť neutrofilných granulocytov v krvi v mozgovomiechovom moku indikuje zápal mozgových blán.

Prevaha neutrofilov nezmenených dôkaz akútneho zápalu.

Náhly vzhľad neutrofilné pleocytózou je vidieť na lámanie absces pod mozgových blán.

Keď absces, Nachádza sa hlboko v mozgovom tkanive, zvyčajne pozorované vyjadril mierne pleocytózou s prevahou lymfocytov.

Keď je útlm zápalu v mozgovomiechovom moku sa objaví degenerované formy neutrofilných granulocytov.

Prítomnosť zmien a nezmenených neutrofilov je charakteristický pre prebiehajúci zápalový proces. Malo by sa vziať do úvahy, že nemodifikovanej neutrofilných granulocytov sa objaví v mozgovomiechovom moku, v zmesi čerstvej krvi, V takých prípadoch, nápravné definície cytosis.

Eozinofilné granulocyty

Eozinofilná granulocyty v natívnych vzorky mozgovomiechového moku diferencovať s ostatnými bunkami prítomnosťou charakteristické veľké lesklé zrnitosti, plnenie do cytoplazmy. Bunky sa dvoma čepeľou jadra zriedkavé, často pozoroval mononukleárnych forma. Morfológia v zafarbených eozinofilných granulocyty rovnakými, v krvi. Mozgovomiechového moku často nájdených zničenej eozinofilná granulocyty.

Obsah eozinofilných granulocytov do mozgovomiechového moku v rozmedzí od cysticerkózy 1 na 46%.

Výskyt meningitídy ako komplikácia arachnoiditídy tsistitserkoznogo je sprevádzané neutrofilním pleocytózou a zníženie počtu eozinofilných granulocytov. Pre abstsedirovaniya Echinococcus bubliny v mozgu, vyznačujúci sa tým, že sa jej obsah, neutrofilných a eozinofilných granulocytov, ktorá slúži ako pomocná funkcia sa v odlišujúceho abscesu. Niekedy veľký počet eozinofilných granulocytov možno nájsť v obsahu cysty nádorov mozgu a miechy (neurom, kraniofaringiome, ependymom, rakovinové metastázy v mozgu). Výrazný nárast počtu eozinofilných granulocytov v mozgovomiechovom moku môže byť pozorovaný po komorovej tsisternoskopii.

Po odstránení mozgových nádorov s aktívnou rany operačnej rany zvyšuje počet eozinofilných granulocytov, , Ktoré môžu byť považované za lokálne alergické reakcie na traumu z mozgových blán a absorpciu produktov rozkladu tkaniva.

Upravené bunky a tieňovej bunky

Vďaka cytolytickej vlastnosti mozgovomiechového moku buniek, v ňom obsiahnuté po dlhú dobu, zachovať iba obrysy cytoplazmy a jadra zvyškov. Ak chcete zistiť ich morfologickú vzťah nie je možný. Vo väčšine prípadov sa tieto zmeny sú predmetom neutrofilných granulocytov, niekedy je to sú bunky zhubných nádorov. Ľahké podstúpiť cytolýze pavučinovitý bunky a ependymal komory.

Tkanivovej bazofily sa nachádzajú v moku po neurochirurgii.

Bunky pavučinovce, pri ktorých v mozgovomiechovom moku

Bunky pavučinovce, pri ktorých (arahnoэndoteliya) - Jedna vrstva buniek epitelu, že môžu byť rozlíšené ako počet počítacie komôrke buniek, a v morený, pripravený z kalu mozgovomiechového moku. Tento pomerne veľký nepravidelného tvaru bunky, alebo zaoblené s relatívne malým kruhovým alebo oválnym jadrom, centrálne umiestnený.

Bunkové jadrá sú sfarbené hypochromic, a cytoplazmy - bledá- alebo sivasto modrej farby, a preto je často nerovnostiam a obsahuje inklúziu častíc fagocytované (tukové kvapôčky, bunkové elementy, vakuola). Cytoplazme buniek pavučinovce, pri ktorých často zničený, V takýchto prípadoch sú zistené charakteristiku jadre a cytoplazme fragmenty. Chromatín má melkopetlistuyu jadra alebo štruktúru zŕn, niekedy oveľa jeden modrý jadierko. Veľkosť jadier 5 na 19 m.

Prítomnosť v mozgovomiechovom moku jednotkových buniek arachnoidales nie je ešte dôkaz patológia, pretože tieto bunky lemujú subarachnoideálnom priestor a, exfoliačný, spadajú do mozgovomiechového moku. Zvýšenie počtu buniek pozorovaných v arachnoidales arachnoiditídy, mozog cysticerkóza. Obsah arachnoidales cysty sa nachádzajú v oddelených miestach arachnoidální bunky a ich symplast ako skupiny jadier rôznych veľkostí a intenzite farby, obklopený svetle cytoplazmy bez jasných hraníc medzi bunkami.

Bunky choroid plexus

Z choroid plexus komôr do mozgovomiechového moku môže vstúpiť mnohouholníkový, zaoblený, niekedy veľký valcovitý (15-19 M) bunka. Malý (4-5 M) Nachádza sa v centre jadra, alebo excentricky, hyperchromatická, eozinofilná cytoplazmy, sfarbený intenzívnejšie. V cytoplazme buniek choroid plexus zrnitosť, niekedy vo forme inklúzií a zhlukov, veľkosť 1-3 mikrónov, okrúhle alebo nepravidelný tvar, zelenkavá alebo namodralý farebný. Niektoré bunky môžu byť detekované alebo zajatý červených krviniek vakuol.

Bunky choroid plexus Najčastejšie je nachádzanie v kvapaline od komorách mozgu.

Bunky ependymal ventrikulárna cerebrospinálny mok v mozgu

Bunky ependymal ventrikulárna cerebrospinálny mok v mozgu, získané lumbálna punkcia, Je ľahko zničený v procese varenia a farbenie. V zafarbených náterov majú druh vzdelania, skladajúci sa z oválnych jadier s jemnou štruktúrou. V niektorých bunkách zachovaný cytoplazmy obklopujúcu jadro vo forme úzkeho okraja.

Tekutina z komôr mozgu sú najčastejšie ependymal bunky s zachovalou štruktúrou, morfologicky podobajú bunky pavučinovce, pri ktorých, ale jadro ich maľované bledšia a majú väčšiu ponuku, homogénnu distribúciu chromatínu. Póly oválnych ependymal buniek často poukázal, Cytoplazmy má šedavý odtieň. Tam sú oddelene umiestnené a veľké zhluky buniek, ktoré nemôžu byť určená hranica jednotlivých buniek.