Beinmarg – Utarbeidelse av materialet og formulering av preparater for mikroskopisk undersøkelse av benmargen

En detaljert studie av den cellulære sammensetning og struktur av benmargen har begynt med innføring i klinisk praksis sternal punktering metode, slått M. OG. Arinkin i 1927 by, og så prïjïznennogo gïstologïçeskogo Forskning punktat ilium bruker trepanobiopsy.

Metoden for sternal punktering

For å utføre sternal punktering for M. OG. Arinkin brukt punktering nålebiopsi, å ha et beskyttelsesskjold, som kan innstilles ved en ønsket dybde i forhold til tykkelsen av huden og subkutant fett, sikre punktering bakplaten av sternum.

Benmargs nasasyvayut sprøyte 10-20 ml sittende stempel for å gi den nødvendige vakuum. Punktering produsert i test posisjon liggende på ryggen på nivå med festing av III-IV ribber midtlinjen, som frontveggen av legemet av sternum er tynnere og har en flat eller svakt konkav flate, mest praktisk for punktering. Foruten, i feltet av benmargceller inneholder et stort antall.

Kan punktert ribbe og vertebrae spinous prosesser (ofte - III og IV korsrygg). Når punktering av spinous prosesser av ryggvirvlene pasienten sitter, lener seg fremover. Hos barn, er risikoen for brystbenet punktering på grunn av sin større elastisitet, og individuelle forskjeller i tykkelsen av benet. Derfor barn, spesielt nyfødte og spedbarn, å foretrekke å lage en punktering i den øvre tredjedel av tibia på den indre side av den distale femoral epiphysis eller calcaneus. Punktering av hofte produsere 10-20 mm posterior til anterior ryggraden.

Metoden for å skaffe benmarg studie av sternal punktering

Stikkestedet desinfiseres med alkohol og en alkohol løsning av jod. Så huden, underhudsfett og periosteum infiltrert tynn nål 2 ml 1-2 % Novocaine. Kanskje punktering uten smertelindring eller bedøvelse av huden ved hjelp kloretyl-.

Sprøyten og punktering kanylen er sterilisert ved tørr-metoden eller ved å koke, tørkes grundig med alkohol, deretter med eter.

Før du gjør en punktering, ved hjelp av en skruegjenge, et beskyttelsesskjold til den ønskede dybde og punktering innsettes doren. Omtrentlig data, som skal følges under installeringen av beskyttelsesskjoldet ved en punktering av sternum, er vist i tabell.

Kobler nålen vinkelrett på dens midtlinjen av sternum, rask bevegelse pierce huden, underhudsfett og en ytre plate av sternum. På dette punktet, motstanden reduseres og nålen, som om synker, inkludert i benmargen. Dermed er vertikalt satt, ubevegelig. Hvis nålen ikke er i en vertikal stilling, da, uten å fjerne den, skyve sikringen er litt høyere og re-fremmende nålen.

Det bør tas i betraktning, at kreft, multippelt myelom, osteomyelitt og andre osteolytic prosess nål, komme inn i lesjonen, møter mindre motstand og er ikke fast til benet.

Etter at nålen har kommet inn i beinmargen, stilett er fjernet og sprøyten er presset fast. Lenger, dra stempelet på sprøyten, nasasyvayut ikke mer 0,5 ml av benmarg (når mer punktat det kan bli mye av perifert blod).

Hvis du får en benmargs svikter, da, uten å fjerne nålen, fjern sprøyten, gjeninnføres i nålen sonden og overført til en annen stilling - oven, Nedenfor eller til siden. Så igjen nasasyvayut sprøyte litt punktat. Etter benmargen høsting nål, uten å koble sprøyten, fjernet fra sternum, og stikkstedet er stengt steril klistremerke.

Det resulterende materiale ble overført til et urglass og raskt i mikseren nasasyvayut leukocytter eller røde blodlegemer til mark 0,5 (ved normal eller forhøyet antall leukocytter i perifert blod er anbefalt å bruke en mikser-melanzhera erytrocytter, og hvis leukopeni --mixer for leykotsytov melanger).

Så, til en label "11" for leukocytter i mikseren eller til en label "101" til mikseren for erytrocytt få 3-5 % eddiksyre. Innholdet i blanderen blir grundig blandet, slippes ut fra det kapillære del av væske, og påfølgende dråper og fylle tellekammer ble regnet som leukocytter blodceller, vurderer fortynning i en passende blander. Totalt myelokaryocytes (celler med kjerner) som strekker seg fra 50 Til G 250 T i 1 l, tilsynelatende, på grunn av benmargs ulik sammensetning i sine ulike områder.

Telle det absolutte antallet er ikke avgjørende myelokaryocytes. I de fleste tilfeller begrenset til å telle hvor mange prosent av smøre punktformet rekke av kjerneinneholdende cellene. På samme tid ble antall celler dømt beregnet smøre.

For utarbeidelse av legemidler fra sternum punktat på en klokke glasspartikler samles benmarg og forberede dem tynne streker, blod blanding fjernes via et filterpapir eller en Pasteur pipette.

Av stor praktisk betydning er riktig forberedelse av en sverte av beinmarg vev, som en blanding av perifert blod forvrenger sammensetning av cellene. I et skikkelig forberedt prøven cellene er tett, men hver for seg, og deres struktur er klart synlig. Det anbefales å fremstille en serie av slag, ved hjelp av hele materialet oppnås i punktering. Flekker bør være forberedt på raskt, siden folding av benmarg skjer først, enn det perifere blod levrer, og cellene kan bli skadet, at de ikke kan skille.

Når sier aplastisk benmarg utstryk avslørte et lite antall celler, noen ganger er det ingen. For å klargjøre, Dette er en konsekvens av sykdomsprosessen eller feil utført punktering, nødvendig gjentas punktering og forskning punktat.

Feste og malestrøk utføres på samme punktat, samt utstryk av perifert blod, best av alt de er malt på Pappenheim-Kryukov.

Biopsi av ilium

Behovet for in vivo studie av histologiske preparater av benmarg, oppnådd ved trepanobiopsii, oppstår, når punktering ikke er mulig å få nok materiale til å bekrefte tilstedeværelsen av en patologisk prosess.

Spesielt viktig overtar histologiske metoder for sykdommer slike, Som leukemi, polycytemi vera (erythremia), osteomyelofibrosis, gipoplasticheskaya anemi.

For å punktere og utvinning av benvev er foreslått å bruke en nål-trocar, bygget på prinsippet om punkterings biopsinål. Tykkelsen av den nål-trokaren 3 mm, den indre diameter 2 mm, lengde 40 mm. Den distale enden av nålen som en kutter, spiral, hvorved det er mulig under rotasjon for å skjære benvevet. Nålen består av en dor (stylet med en spiss ende) og håndtak.

Metoden for å oppnå benmarg studie av trepanobiopsy

Punktering produsert i hoftekammen, litt avstand 20-30 mm posteriort for øvre front ryggrad. Teknisk sett er det mer praktisk å gjøre en biopsi av venstre-fløyen.

Stikkestedet desinfiseres med alkohol og en alkoholisert løsning av jod. Nålen er pre-sterilisert ved koking eller tørr metode, og tørkes deretter med alkohol og eter. Med gjenger, en sikkerhets nålebeskytteren til ønsket stikkedybde, tar hensyn til tykkelsen av subkutant fett.

Før innføringen av trokaren nålen produsere anestesi av huden, subcutaneous vev og periosteum 2 % løsning av novocaine.

Trengende nål-trocar i bløtvev, lansen dor føler for en plass på beinet, der du ønsker å gjøre en punktering. Nålen er da dreiebevegelser under et visst trykk blir innført i benet. Når du føler deg sterk fiksering av nålen stylet fjernes. Koble fra spindelen og håndtaket, sistnevnte er skrudd fast på nålen, festet i benet. Sirkulære bevegelser urviseren nål settes inn i benet. Deretter, som rotasjonsbevegelsen er det utvinnes. Sylindriske kolonne bein, i forespørsels pins, skyve stilett fra lumen i nålen på et lysbilde, og derfra overført til en krukke med formalin og sendt for histologisk undersøkelse.

Av de resterende glass, nål og stylet av beinmargsflekker gjøre. Oftest klarer å kutte og fjerne et stykke av bein i lengde 6 til 10 mm, og noen ganger mer.

I benmarg fra friske individer og pasienter med hyperplastiske prosesser avslører mange ulike celler. Ved alvorlig hypoplastisk (aplasticheskogo) trepanat prosessen er gul, på grunn av den nesten fullstendig mangel på benmarg og erstatte den med fettvev.

I alle former for osteomyelofibrosis myelofibrose og hentet et stykke bein ser "tørr" og fra er det mulig å trekke ut bare en svært liten mengde beinmarg for utarbeidelse av utstryk.