Anemi, assosiert med folsyremangel

Uansett årsak folsyre mangel anemi er preget av utseendet i benmargen megaloblasts, intramedullært ødeleggelse erythrokaryocytes, patsitopeniey, makrocytose og hyperchromia røde blodlegemer og noen ganger - psykiske lidelser.

Folievaya (pteroilglutaminovaya) syre (vitamin B₉) Den består av tre komponenter:

• pteridin ring;
• P-aminobenzosyre (sammen utgjør pteroievuyu syre);
• glutaminsyre.

Molekylvekten av folsyre - 441. Folsyre er aktiv i form av tetrahydrosyrederivater. Folsyre innhold i ulike former i kroppen er ca 5-10 mg. Aksjer i strid med sin innrømmelse i kroppen kan bli tømt i løpet av 4 i måneden.

Det daglige behovet for folsyre er 100-200 mikrogram, Graviditet, hemolytisk anemi, øker det mange ganger.

Den totale mengden av folsyre i kosten med full effekt av 500-600 mikrogram per dag. Folat - folater som finnes i store mengder i leveren, gjær, spinat, kjøtt. Mer 50 % folsyre, i mat, Det kan bli ødelagt når kokt.

Folsyre er absorbert i den øvre tynntarm. Evnen av tarmen for å absorbere folsyre er mye høyere enn dens daglige behov.

Folsyre deltar i syntesen av pyrimidin og purin baser, sammen med methylcobalamin - syntesen av uridinmonofosfata timidinm nofosfata. Folat koenzymer Mer involvert i en rekke reaksjoner. Spesielt, tetrahydrofolat deltar i syntesen av glutaminsyre histidin.

Etiologi og patogenese av anemi i løpet av folsyremangel

Folsyremangel, samt underskudd av cobalamin, Det fører til utvikling av megaloblastisk anemi.

Malabsorpsjon av folat observert hos individer, reseksjon av tynntarmen, spesielt jejunum, samt i langsiktig tar antiepileptika som difenylhydantoin (difenina) og fenobarbital (luminal). Inntak av folsyre er brutt når sprue og cøliaki. Folsyremangel, samt underskudd av cobalamin, observert ved blind sløyfe syndrom. Beskrevet sjeldne tilfeller av arvelige lidelser av folsyre transport over tarmveggen og inn i cerebrospinalvæsken. Absorpsjon av andre stoffer uten lidelse.

Folsyremangel hos nyfødte observert i prematuritet, brudd på intestinal absorpsjon, matet geitemelk, inneholder en liten mengde folsyre.

En betydelig opptak av folsyre kan forekomme hos pasienter, alkoholikere.

Økt forbruk av folsyre under svangerskapet Det kan føre til mangel på folsyre, Men i utviklede land i dag er det sjelden. Folsyremangel hos gravide kvinner er funnet i lav effekt, tilstedeværelsen av hemolytisk anemi, bruk før graviditet et stort antall av alkoholholdige drikker.

Kliniske manifestasjoner av folatmangel

Folsyremangel hos barn og unge kvinner. På samme tid, pasienter klager av generell svakhet, svimmelhet. I motsetning kobalamin-mangel sår tunge sjelden observert. Parestesier, og andre tegn på Fløibanen myelosis savnede. Sclera ofte ikterichnost.

I motsetning til underskudd på kobalamin-mangel på folsyre er sjelden observert gistaminoupornaya Akhil, gastratrophia, Selv om reduksjon av gastrisk sekresjon er ofte.

For folatmangel, samt for mangel av cobalamin, karakteriseres ved forekomst i det perifere blod macrocytosis, megalocitov og megaloblasts, tilstedeværelsen av hyperchromic anemi, å redusere antall retikulocytter, blodplater og leukopeni med nøytrofil skift til venstre og høyre. I benmargen - megaloblasts.

Endringene i nervesystemet er forskjellige fra de manifestasjoner på B₁₂-mangel anemi.

Påviste, at personer med epilepsi, Folsyremangel fører til hyppige angrep, deres større alvorlighetsgrad. Dette er spesielt viktig på grunn av det faktum, som tar antiepileptika kan føre til dårlig opptak av folat. Ifølge litteraturen, hos personer med schizofreni folsyremangel fører til forverring av sykdommen, mer alvorlige symptomer og mindre effektiv behandling.

Differensialdiagnose av kobalamin-mangel og folsyre

For differensialdiagnose av kobalamin-mangel og folsyre brukes radioimmunoassay metode for bestemmelse av folsyre i serum og spesielt i erytrocytter. Innholdet av cobalamin bestemmes ved mikrobiologisk metode. Som en testorganisme anvendes som Streptococcus faecalis og Lactobacillis casei. Normalt innhold av folsyre i blodet serum serier, Ifølge forfatterne, ved hjelp av ulike forskningsmetoder, fra 3 til 25 ng / ml, og erytrocytt - fra 100 til 425 ng / ml.

I folsyremangel synker som nivået av serum, og i erytrocytter. Ved mangel kolabaminov folsyre innhold i blodet serum ofte stiger, og erytrocytter kan noen ganger bli redusert, selv om nedgangen, vanligvis, en liten.

For diagnostisering av folsyremangel er også brukt Load metode histidin (15 g), deretter definere innholdet av syre i urinen formiminglutaminovoy. Normalt, mesteparten av de former for glutaminsyre- histidin. Med urinmengde 1-18 mg formiminglutaminovoy syre. Ved mangel på folsyre for 8 timer etter dens innføring i kroppen frigjøres fra urinen 20 til 1500 mg formiminglutaminovoy syre. Et betydelig antall formiminglutaminovoy syre utskilles i urinen etter inntak av histidin i personer, behandlet med metotreksat. Ved mangel på kobalamin, skrumplever urinutskillelsen av syre øker formiminglutaminovoy, i mindre grad, enn med et underskudd på folsyre. Normale nivåer av urin metylmalonsyre innholdet øker formiminglutaminovoy syre histidin etter å ha mottatt bevis på mangel på folsyre, i stedet for kobalamin.

Det hjelper å skille disse to statene og radionuklide studie. Ved mangel på kobalamin, knyttet til brudd på utskillelse av indre faktor, nedsatt absorpsjon av merket cyanokobalamin, en mangel på folsyre, er det absorberes ordentlig.

Ved mangel av folsyre, dens innføring i kroppen, fører til et høyere innhold av retikulocytter, mens injeksjon av cyanokobalamin (derivater) ineffektiv. Folsyremangel methylcobalamin øker nivået av retikulocytter.

Definere index segmentering nøytrofile

Tell antall nøytrofile, med 4 segment og mer (Total 200 celle). Bestemme prosentandelen av celler, med 5 segmenter og mer i forhold til mengden av celler, med 4 segment. Indeksen er bestemt ved formelen:

IS =(KS (5 og mer))/KS(4);

der IC - index segmentering;

KS (5 og mer) - Antallet segmenterte nøytrofile (på 200 celle), hvor antallet segmenter er lik 5 eller mer;

KS (4) - Antallet segmenterte nøytrofile, hvor antallet segmenter er lik 4.

Normalt denne indeksen serier 2,5 til 25 %. Hvor, når den overstiger 30 % (svingninger 120%), Du kan snakke om hypersegmentering nøytrofile. Det observert mangel på folsyre, metilkoʙalamina, og uremia.

Fastsettelse av metylmalonsyre i urinen ved Giordio og Plaud

Reagenser.

1. Ionebytterharpiksen Dowex-zx4 (kloridform, 200-400 Mesh). Harpiksen ble vasket med fem volumer destillert vann 3 ganger, ble oppslemmet i to volumdeler destillert vann og lagret i et mørkt tallerken ved 4 ° C.

2. En oppløsning av para-nitroanilin 0,075 % fremstilt ved å oppløse 37,5 mg reagent 500 ml 0,2 M løsning av saltsyre. Oppbevares i et mørkt pott, Det holdt seg stabilt i flere måneder ved romtemperatur.

3.Acetatbuffer (pH 4,3) laget 1 M natriumacetat og 1 M løsning av eddiksyre.

4.Diazoreaktiv: 4 ml 0,5 % natriumnitratoppløsning ble blandet med 15 ml para-nitroaniline. Blandingen ble plassert i et kjøleskap ved 4 ° C, og den avkjølte oppløsning ble det tilsatt 4 ml 0,2 M natriumacetat. Reagens stabilt ved temperaturer 4 ° C i en dag.

5.Normal 0,05 M oppløsning av metylmalonsyre: 295 mg metylmalonsyre oppløses i 50 ml vann.

Metode

Urin ble oppsamlet i en glassflaske og frosset inntil studien. For å studere kostnad del av urin (20- 25 ml), tint, tsentrifugiruyut, og supernatanten ble samlet opp ved hjelp av en svak løsning av natriumhydroksid eller saltsyre for å justere pH-verdien 6,5.

Kromatografikolonne høyde 20 cm og en diameter 1 cm var fylt med harpiks Dowex®-zx4. Harpikslaget skal være innenfor 3 cm. Føres gjennom harpiks 5 ml urin, vasket med destillert vann (2 × 50 ml med en hastighet på ikke mer enn 15 ml 1 fra). Metylmalonsyre kan elueres fra harpiksen 20 ml 0,1 M løsning av saltsyre. Lenger 2 ml av eluatet ble blandet med 3 ml 1 M acetatbuffer pH 4,3 i et reagensrør med en glasspropp (15×2cm). Til blandingen tilsettes 3 ml kaldt diazoreaktiva, karakterisert ved at pH-verdien heves til 4,0. Blandingen ble oppvarmet i et vannbad ved en temperatur på 94 ° C. 3 min og 2 ml 3 M natriumhydroksidløsning. Røret ble deretter fjernet fra vannbadet, lukket og innholdet ble omrørt. Blandingen ble avkjølt ved romtemperatur 10 minutter og ved fotometriruyut 620 nm i en kyvette med en veilengde 1 cm.

Som en kontroll ble en blanding av, bestående av 2 ml 0,1 M løsning av saltsyre, 3 ml og diazoreaktiva 3 ml acetatbuffer. Metylmalonsyre standard løsning består av de samme komponenter og 0,02 ml 0,05 M oppløsning av metylmalonsyre. Absorbansen av disse løsninger ble målt under de samme betingelser.

Innhold metylmalonsyre (mg) per enhet volum av urin (1 l) definert ved formelen::

(IS_Eksempel-IS_kontroll)/(IS_standard-IS_kontroll)*EN*((1000*T)/M)

hvor E - absorbans av forskjellige prøver;

A - mengden av metylmalonsyre i en standard prøverør, ml;

1000 - Mengden av urin, tatt for forskning, ml;

T - mengden av saltsyre, tatt for eluering, ml;

M - antallet eluatet, tatt for forskning, ml.

Under de ovenfor angitte betingelser, kan formelen forenkles som følger::

(IS_Eksempel-IS_kontroll)/(IS_standard-IS_kontroll)*236

Hvor, når mengden av metylmalonsyre i urin er større enn 300 mg / l, bør re-blandet med acetatbuffer eluat og diazoreaktivom, men i stedet 2 ml eluat er hensiktsmessig å ta 4- 10 ganger lavere og bringe volumet til 2 ml 0,1 M saltsyreløsning. Beregningen bør ta hensyn til fortynning.

Normalt per dag med urinmengde 0,6-4,7 mg metylmalonsyre. Ved mangel på kobalamin daglig utskillelse av metylmalonsyre delene 294 mg. Normalt mottakelse 10 g valin ikke øke clearance av metylmalonsyre, cobalamin-mangel øker utskillelsen av metylmalonsyre.

Fastsettelse av metylmalonsyre i urin ved Grønn

Reagenser.

1. Eter.
2. Etanol.
3. En oppløsning av saltsyre 0,1 M.
4. Ammoniumsulfat.
5. Sterk base harpiks deatsidit FF (200 mesh, kloridform).
6. En løsning av natriumnitrat 0,5 % (vekt / volum).
7. En oppløsning av para-nitroanilin (750 mg oppløst i 1 l 0,2 M løsning av saltsyre).
8. Natriumacetat 0,2 M.
9. Acetatbuffer 1 M, pH 4,3: mixed 1 M natriumacetat-løsning og 1 M løsning av eddiksyre i forholdet 16,35:33,9.
10. En vandig løsning av natriumhydroksid 3 M.

A. Standard løsning metylmalonsyre: 100 mg oppløst i 100 ml vann, oppbevares i kjøleskapet.

B. Arbeide standard metylmalonsyre: standardløsning fortynnet i 20 tid 0,1 M saltsyreløsning (1 ml av standard og 19 ml saltsyre). Denne mengden metylmalonsyre ekvivalent 100 mg metylmalonsyre 1 l urin testforhold.

For utarbeidelse av blandet diazoreaktiva 4 ml 0,5 % natriumnitrat løsning og 15 ml para-nitroaniline. Blandingen ble plassert i et isbad og tilsett 4 ml 0,2 M natriumacetat.

Metode.

Urin ble oppsamlet i en dag, målt volum og 10 ml podkislyayut 1 M svovelsyreoppløsning til pH 2,0 eller litt under. Ammoniumsulfat ble tilsatt til metning. Blandingen ble plassert i en skilletrakt og ekstrahert tre ganger med eter og etanol i et forhold på 3:1. For å hindre dannelse av emulsjoner ekstraksjonsmiddel blanding anvendt i overskudd.

Ekstrakten ble ført gjennom en liten kolonne-kromatografi (1 – 1,5 cm diameter), fullført 5 ml resin. Kolonnen ble vasket 50 ml destillert vann. Metylmalonsyre elueres 0,1 M saltsyreløsning. Etter eluering valgt 2 ml eluat, W tilsettes ml acetatbuffer, og 3 ml diazoreaktiva.

Etter blanding, ble røret plassert i et vannbad ved en temperatur på 95 ° C 3 m. Deretter tilsettes 2 ml 3 M natriumhydroksid, og når lukket rør propp for å minimere kontakt med luft. Etter avkjøling ble absorbansen målt ved bølgelengden 620 dem. For den tomme stedet for å bruke eluatet 2 ml 0,1 M løsning av saltsyre, og for standardløsning - 2 ml jobbe standard.