De definitie van kwantitatieve en kwalitatieve kenmerken van sperma

Bepaling van de beweeglijkheid van de zaadcellen

Bepaling van de beweeglijkheid van de zaadcellen is een belangrijke parameter, karakterisering van de kwaliteit van ejaculaat. Sperma, geschikt voor bevruchting, mobiliteit - maak een rechte voorwaartse beweging met snelheden 50 m / s. Het ejaculaat kan worden gevonden zaadcellen met een verminderde mobiliteit - diskinospermiey in de vorm van vibratie, Manege en andere vormen van beweging, die normaal afwezig.

Beweeglijkheid van de zaadcellen werd geëvalueerd in de moedertaal van de voorbereiding van het ejaculaat met een beperkt gezichtsveld (met behulp van venster Fonio), Met behulp van de oculair 7X en 40X, met hangende condensor. telling 100 cel, noteer het nummer van ze te verplaatsen, immobiel en onroerende spermatozoa. Normaal gesproken, actief beweeglijke spermatozoa zijn 80-90 %, sedentaire - 10-12, vast - 6- 10 %. Rekening houdend met alleen de actieve-bewegende en langzaam bewegende zaadcellen, die maken gestage vooruitgang.

U kunt ook gebruik maken van een meer gedetailleerde vijf-puntsschaal:

• "4" - een uitstekende mobiliteit (Alle spermatozoa beschikken over een rechtlijnige translationeel mobiliteit met aanzienlijke snelheden);
• "3" - een goede mobiliteit (een paar druppels);
• "2" - middelmatige mobiliteit (Nog steeds veel sperma, maar met trillende staart);
• "1" - slechte mobiliteit (gebrek aan voorwaartse beweging, Alleen beweeglijkheid van sperma staarten);
• "0" - de beweging van het sperma vermist.

vruchtbaarheid ejaculaat Het hangt af van de duur van de beweeglijkheid van de zaadcellen, dus je moet de beweeglijkheid van sperma in de dynamiek bepalen (dynamische kinezisgramma).

Een druppel sperma wordt aangebracht op het dekglas, zet hem ondersteboven en op een glasplaatje met een halve maan voor de hangende druppel zo, dalen was in het midden van de uitsparing. De randen van het dekglaasje gesmeerd met vloeibare paraffine en onder de microscoop, het percentage actief bewegende, immobiel en onroerende spermatozoa door middel van 1, 3, 6, 12 en 24 uur na de zaadlozing. Onderzoek uitgevoerd bij kamertemperatuur. Gewoonlijk is de hoeveelheid werkzame-beweeglijke spermatozoa verminderd om de 2-3 h 20 % ,

• Aantekening. Microscopisch onderzoek van ejaculaat dient in het laboratorium van één persoon worden uitgevoerd, met voldoende ervaring op dit gebied van laboratoriumdiagnostiek, de resultaten van de bepaling van spermamotiliteit door verschillende onderzoekers bereik tot ± 40 % en grotendeels afhangen van de ervaring met het ejaculaat.

Het monster van de "revival" van het sperma

Het monster van de "revival" van het sperma Het gebaseerd op het herstel van de normale mobiliteit van de vaste, maar leven sperma door middel van het stimuleren van oplossingen:

1) oplossing Becker (glucose - 3 g, Op₂HPO₄ - 0,6 g, NaCl - 0,2 g, KH₂NA₄ -0,01 g, Gedestilleerd water 100 ml; pH - 7,8);

2) 0,1 % caffeine-oplossing (niet alleen in ampullen!) - 10 % het volume ejaculaat;

3) 0,1 M arginine-oplossing.

Methode. Dimensional pipetter 1 ml nasasyvayut 0,1 ml ejaculaat (goed gemengd) en dezelfde pipet wint 0,9 stimuleren ml oplossing. De inhoud van de pipet wordt geblazen op een horlogeglas, goed gemengd door herhaalde zuigen en blazen fluïdum op een horlogeglas, en vervolgens het eindproduct opknoping druppel. tot 5- 10 min gefixeerd, maar levend sperma beginnen te bewegen.

Het percentage van de beweeglijke spermatozoa bepalen onmiddellijk nadat mobiliteit te herstellen en later 3, 6, 12 en 24 Nee. Voor betrouwbaardere resultaten wordt uitgevoerd parallel aan het monster met twee uitdagende oplossingen. Alleen onder de voorwaarde is het onmogelijk om "te doen herleven" de immobiele sperma kunnen praten over nekrospermii.

Identificatie van levende zaadcellen bij vaste

Het principe van de werkwijze is gebaseerd op het, enzymen die sperma ontkleurd eosine leven. Worden gebruikt als reactanten 5 % waterige kaliumhydroxide en eosine 10 % waterige oplossing Nigrosine.

Methode. Op een glazen plaatje gecoat druppeltje sperma, geplaatst nabij tweemaal de daling 5 % eosine-oplossing en een druppel kalium- 10 % nigrosine oplossing, Het is ook tweemaal zo grote druppels kalium eosine. Eerst wordt het ejaculaat gemengd met kalium eosine, wacht enkele seconden, en vervolgens gemengd met een druppel Nigrosine, weer wachten een paar seconden en maken dunne uitstrijkjes gepolijst glasplaatje.

Met behulp van een onderdompeling systeem microscoop, in de uitstrijkjes worden telkens minstens 200 sperma, markeren living (Kleurloos) en de doden (eosine gekleurde rood). Het aantal levende en dode spermatozoa uitgedrukt als een percentage. Aangezien Nigrosine druppel zaad gemengd met stro 5 % eosine oplossing van kalium en voor te bereiden dunne uitstrijkjes voor microscopie. Nigrosinekleurstoffen alleen de achtergrond van de drug, waarin het sperma worden toegewezen meer tegengekleurd. Normaal levend sperma 80-90 % van het totale aantal.

Het tellen van sperma in 1 ml en het gehele volume van het ejaculaat

Het aantal zaadcellen in 1 ml en ongeveer ejaculaat geteld in een telkamer Goryaeva.

Aantal zaadcellen in het ejaculaat wordt bepaald door het aantal spermatozoa in vermenigvuldigen 1 ml hoeveelheid ejaculaat (in ml).

• Aantekening. De telkamer kan ook het aantal beweeglijke spermacellen bepalen, Wat ejaculaat warme verdunde natriumhydroxyde-oplossing en isotone hloridz tellen van het aantal vaste spermatozoa, en aftrekken van het totale aantal.

Gewoonlijk, in het 1 ml ejaculaat bevat 60-120,000,000. sperma, wanneer giperspermii - meer 120 miljoen., in oligo - van 30 naar 60 miljoen., wat, doorgaans, maakt het onmogelijk om de bevruchting. Echter gevallen beschreven, Als bevruchting plaatsvindt, en op het onderhoud in 1 ml ejaculaat 5 naar 30 miljoen. sperma.

Hoe dan ook, de detectie oligospermia 2-3 nodige controles tellen van het aantal zaadcellen met tussenpozen van 3-4 weken om hun maximale hoeveelheid te bepalen. Tegelijkertijd man zaadcellen is onderhevig aan aanzienlijke schommelingen in fysiologische.

Normaal rond het ejaculaat bevat meer dan 150 miljoen. sperma.

Tellen spermiogram

Spermiogram - is het percentage van de verschillende morfologische vormen van zaadcellen en spermatogenese.

In een uitstrijkje, gekleurd met hematoxyline-eosine of Pappenheim, berekende minimale 200 sperma, waarbij het aantal normale en pathologische vormen, en spermatogene cellen uitgedrukt in procenten. Berekening wordt gemaakt met behulp van de onderdompeling microscoop installaties en machines voor het tellen leukogram pre veranderde de namen van de toetsen.

In een normaal ejaculaat sperma normale vormen is 80-85 %, soms 100 %, deze omvatten fysiologische variaties, gekenmerkt door ongewone of nek, of verminderde, of vergrote kop.

Jong, of onvolwassen, vormt spermatozoa hebben rond het hoofd en de nek cytoplasma residu ("Collar"), waargenomen bij frequente geslachtsgemeenschap en niet kunnen bevruchten.

De oude vormen van sperma (giperhromiya, achromia, head vacuolenvorming) verschijnt in het ejaculaat na langdurig onthouding en niet geschikt voor bevruchting.

Door pathologische vormen omvatten zaadcellen met kop misvormingen: megalospermatozoidы (gigantospermatozoidy), macro-, mikrospermatozoidy, taps toelopende, tweekoppige zaadcellen met een hals en een staart, zonder hals met één of meer staarten, geen staart, tail zonder kop, etc..

Bij gezonde mensen in een normale ejaculaat sperma abnormale vormen zijn niet vaak gevonden, maar soms ook hun aantal tijdens de normale bevruchtend vermogen van sperma kan bereiken 20 %, van hen over 15 % Het is een pathologie van de kop, 3-5 % - body, 2-5 % - tail.

In pathologische spermatogenese, secretoire vorm van onvruchtbaarheid worden geïdentificeerd met de spermakop en nek pathologie. staart pathologie meestal excretory oorsprong, Het ontstaat vanuit de doorgang van sperma vas paden.

In gekleurd preparaten zijn ook zichtbaar op verschillende locaties kiemcellen in verschillende stadia van differentiatie en rijping, die essentieel is voor de differentiatie en aspermie azoöspermie.

spermatogonia zijn rond, soms ovaal, diameter van 5-12 urn. De kern beslaat ongeveer eenderde van de cellen, donker- of licht gekleurde, 1-2-3 Nucleo- lama, vaak gelegen in de buurt karyotheca (nucleaire envelope), chromatinestructuur melkozernystaya. Het cytoplasma is smal, basofiele, Homogeen. Spermatogonia kloof mitotisch meerdere malen. Er zijn cellen met goed gedefinieerde stadia van mitose.

Enkele cellen, gevormd door middel van mitose, дифференцируются в сперматоциты I, en dan II orde. Spermatocyt Ik bestel - Ronde of veelhoekige cellen met een diameter van 17-19 mm met een grote ronde kern en cytoplasma light fine. In gebrandschilderd voorbereidingen is een duidelijke perinucleaire zone.

Spermatocyten II van de bestelling gevormd als gevolg van meiose. ze zijn kleiner, dan ongeveer I spermatocyte (diameter 15 m), maar bijna identiek in morfologie. Het ejaculaat vaker, dan ongeveer I spermatocyte, maar veel minder vaak, dan spermatiden.

Spermatydы - klein, ronde of langgerekte cellen 12-15 um in diameter met cirkelvormige hyperchromatische kernen, gelegen centraal of excentrisch. Er kan een multi-core spermatiden. Pale cytoplasma, bazafilnaya, vaak gevacuoliseerde.

Spermatiden worden omgezet in spermatozoa.

Cellen spermatogenese bij een normale spermiogram vormen maximaal 2 %. Een groot aantal van hen waargenomen in de secretoire aard van onvruchtbaarheid.

Voor fase contrast microscopie ejaculaat wordt verdund met fysiologische zoutoplossing met een kleine hoeveelheid 1 % waterige oplossing van Rivanol of carbol voor het verminderen spermamotiliteit.

Door fluorescentiemicroscopie Het wordt aangebracht op een glasplaatje een druppel sperma, en één druppel acridine oranje in de kweek 1:20000. Druppeltjes gemengd en bedekt met een dekglaasje. Voor microscopie met behulp van het oculair 7X en 40X. Levende zaadcellen worden gekleurd groen, verloren - oranje. Normale en abnormale zaadcellen vormen zijn gemakkelijk te onderscheiden vanwege hun morfologische kenmerken.

Regels van het werk op fase contrast en fluorescentie microscopie in de instructies beschreven voor deze apparaten. Bij gebruik van fase contrast en fluorescentie microscopie spermiogram berekend volgens algemene regels.

Op basis van het microscopisch onderzoek van het ejaculaat kan onthullen verschillende pathologische omstandigheden.

• aspermie - de afwezigheid van zaadcellen in het ejaculaat en kiemcellen.
• azoospermia - afwezigheid van sperma in de aanwezigheid van kiemcellen.
• Astenospermiya - vermindering van het aantal beweeglijke cellen en toename van het aantal pathologische vormen over het algemeen in de normale aantal zaadcellen.
• oligoasthenospermia - daling van het aantal zaadcellen en hun mobiele formulieren en de toename van het aantal pathologische vormen.
• Nekrospermiya - Fixed alle zaadcellen in het product, zelfs na de "revival".
• Akinospermiya - state, waarbij in tegenstelling tot de eerder vastgestelde nekrospermii sperma na de "herstel" van het begin te bewegen.