Microscopisch onderzoek van de cerebrospinale vloeistof

Citoza definitie

Bevat een zeer kleine hoeveelheid cellen in het ruggenmerg vloeistof van gezonde mensen. Klinische betekenis hebben over het algemeen leukocyten (lymfocyten). Als u wilt tellen van belette leukocyten niet dat erytrocyten, zij vernietigen niet opgeloste door toevoeging van de cerebrospinale vloeistof 1/10 onderdeel van azijnzuur met fuksinom. Fuchsine vlek âdrosoderžaŝie cellen in het rood. Voor de kleuring van leukocyten waarbij reagens gebruikt Samson (gemengd 30 ml ijsazijn, 2 ml vloeibare fenol, 2 ml alcohol oplossing fuchsine 1 : 10 en toevoegen 100 ml gedestilleerd water). Reagens resistente, goed de kleuren van de cellen en houdt ze binnen een paar uur van cytolysis.

Toegepaste oplossing, bestaande uit 5 ml 10 % azijnzuur en 0,1 g metilvioleta. Het is minder resistent, cellen van de kleur blauw.

Als gevolg van de eigenschappen van de cytolytische cerebrospinale vloeistof, het aantal cellen tellen onmiddellijk na de overname van. Maatregel van de vloeistof in de buis druppels of micropipet in verhouding 10 delen van de cerebrospinale vloeistof en 1 deel van de oplossing van de kleuren en verlof voor 10-25 m voor de cel schilderij. Voor de fokkerij, die u kunt gebruiken de mixer voor leukocyten. Cerebrospinale vloeistof cellen vasthouden zeer snel aan de muren van buizen, Daarom, vloeibare, gelegen in vitro, vóór het onderzoek er moet grondig roer roterende bewegingen tussen de palmen.

Voor het berekenen van de citoza gebruikt camera Fuchs-Rosenthal. Berekening van het product gedurende het raster via 5 minuten na het vullen van de kamers. Het aantal cellen in de 1 l wordt bepaald door de formule

X =((A) * 11)/(3.2*10)

waarbij X staat voor het aantal cellen in de 1 l; Is het aantal cellen, beschouwd op de oppervlakte Maas; 3,2 is het volume van de ruimte; 11/10 -de mate van verdunning.

Making toegestaan graven als een breuk, bv 14/3, waar 14 telt het aantal cellen in de zaal, 3 is een afgeronde figuur volume Chambers. Wanneer een groot aantal cellen is voldoende te beschouwen hen in dezelfde helft van het raster en aan het dubbele van het aantal. Met scherp geformuleerde pleocitoze (een aanzienlijke toename van het aantal cellen) Het is toegestaan om te tellen van de cellen 16 kleine vierkantjes en vermenigvuldig het resulterende getal op 16.

Bij gebrek aan een camera — u kunt de Rosenthal Fuchs de Accounting-kamer Gorâeva met een aanzienlijk kleinere capaciteit, Zo telt het cellen in ten minste drie vierkanten, Bepaal het rekenkundig gemiddelde en vermenigvuldig het 1,2. Multiplier 1,2 wordt verkregen uit de formule

X =((A) * 11)/(0.9*10)

waar is de camera capaciteit 0.9, 11/10 -de mate van verdunning.

Wanneer cellen in cerebrospinaal vocht tellen niet ontbonden een van de eerste druppels, die voortvloeien uit de naald, Geplaatst in de camera — en definiëren van Rosenthal Fuchs cel nummers, zoals gezegd.

Normaal, het aantal cellen (lymfocyten) in 1 MCL cerebrospinale vloeistof van de ventrikels van de hersenen en de hersenen mozžečkovo tank is 0-1, en in vloeistof, een Lumbaalpunctie verkregen — 2-4.

Kinderen onder de leeftijd van drie maanden in 1 MCL cerebrospinaalvocht komt omhoog tot 20-23 cellen, tot is één jaar 14-15, maximaal twee jaar, 11-14, van twee tot vijf jaar — 10-12, van vijf tot zeven jaar-8-10, zeven tot tien jaar — 6-8, meer dan tien jaar-4-5.

Bij meningitis, abscesse en hersenen tumoren aantal cellen in de cerebrospinale vloeistof stijgt.

In de studie van hemorragische cerebrale spinale vloeistof in sommige gevallen is het nodig om haar ware citoz. Voor dit doel gebruik Friedman methode: hemorragische vloeistof winst met reagens Sampson om citoza en izotoniceski oplossing voor natriumchloride te tellen van het aantal rode bloedcellen 1 MCL cerebrospinale vloeistof.

Bijvoorbeeld, het aantal cellen in de 1 MCL is 20, het aantal rode bloedcellen — 3600. Het aantal erytrocyten en leukocyten in het bloed van de patiënt leert uit de algemene analyse, uitgevoerd vóór de Lumbaalpunctie. Bijvoorbeeld, in 1 l bloed 4 200 000 erytrocyten, 7000 leukocyten. Vanaf hier moet een leukocyte 4200000/7000 = 600 RBC.

Om te verkrijgen van de echte waarden citoza make-up de vergelijking:

op 600 rode bloedcellen- 1 Leukocyten;

op 3600 erytrocyten leukocyten-X, Bijgevolg,

X = 3600/600 = 6 leikocitov.

De ware citoz voor cerebrospinaal vocht 20-6 = 14 cellen in 1 l.

Toepassing van deze methode is beperkt, omdat de cerebrospinale vloeistof met vermenging van bloed is niet geschikt voor dergelijk onderzoek.

Bepaling van het aantal rode bloedcellen in het hersenvocht is ingesteld om de ernst van de aandoening van de patiënt met intracraniële krovoislianiah.

In de aanwezigheid van 1 2000-5000 µl erytrocyten cerebrospinale vloeistof gekleurde roze, 900— 1000 erytrocyten is alleen iets opalesciruet. In kleurloze vloeistoffen kunnen worden gedetecteerd door een lager gehalte aan erytrocyten. Klinische significantie van erytrocyt niveaus stijgen in Dynamics.

Differentiatie van cellen van de cerebrospinale vloeistof plaatsvindt in de tellende vergaderzaal in native en gekleurde formulier.

Bij een hoge vergrotingsfactor (oculair 10 x of 15 x, 40 x lens) aftelbare kamer aandacht te besteden aan de hoeveelheid cellen, vorm, de locatie en grootte van de kernels, de aanwezigheid van insluitsels in het cytoplasma. Gemakkelijk onderscheiden van lymfocyten, neutrofiele granulocyten, macrofagen. OK bevatte in de cerebrospinale vloeistof alleen lymfocyten.

Voor de volledige specificaties van de cellulaire samenstelling van cerebrospinaal vocht is onderzochte gebeitst preparaten. Vloeibare cellen geschilderd erger, dan bloedcellen. Er zijn verschillende manieren van kleuren: door Rosina, Voznoj, Papanicolaou, Aleksejev, Mei-Grunwald, Pappengejmu.

Definitie van pleocitoza methode van verlichte microscopie

Doornemen van de dia. zet een schar van cerebrospinaal vocht en mengen met de kleurstof flûorohromov (het mengsel van water-zout-oplossingen akridinovogo oranje en rhodamine in het fokken 1:20000). De drug onderzocht onder een fluorescente microscoop ML-2 in de blauw-violet stralen van het zichtbare spectrum gekookt, met behulp van een combinatie van excitatie filters: FS 1-4, ESS 14-4, BS 8-2 en vergrendeling filter JS-1 met immersionnym lens. Als neflûoresciruûŝego onderdompeling oliën voor onderzoek gebruikt dimethyl ftalaat (ortoftalevoj zuur dimethyl ester).

Op een donkere achtergrond gezichtsveld van polinukleary en lymfocyten zijn gemakkelijk geïdentificeerd door de groene gloed van cytoplasma. Aantal rijen 100 cel, gezien het aantal lymfocyten en neutrofiele granulocyten.

Lymfocyten Neutrofiele granulocyten verschillen van de kernel in de natuur (glybčatoj structuur met een oranje ondertoon) en helder groene fluorescentie.

Neutrofiele granulocyten hebben een duidelijke structuur, chromatine hun kernen verlicht diffuus, uniform helder- Groen. Cytoplasma geel- Groen, het verspreid baksteen-rode korrels.

In geval van lichte citoza native spinnomozgovu vloeistof en slib centrifuge.

Luminescentie-microscopisch onderzoek van de cerebrospinale vloeistof maakt het gemakkelijk om een conclusie over nejtrofil′nom te maken, Aard van lymfatische of polymorphically-mobiele pleocitoza.

Morfologische kenmerken van cerebrospinaal vocht cellen

Lymfocyten

In het ruggenmerg vloeistof van gezonde mensen gevonden kleine en middelgrote lymfocyten (1-2 in 1 l) maat 4-6 µm. Dit is een rond-gevormde cellen met de kern van een grote glybčatym en een zeer smalle cytoplasma.

Op limfoidnom pleocitoze (tuberculeuze meningitis, cysticercosis) samen met kleine en middelgrote verschijnen grote lymfocyten (8-9 M), Af en toe vind je lymfocyten met directe scheidslijn kernen.

Het aantal lymfocyten (samen met andere cellen) stijgingen in de cerebrospinale vloeistof in hersentumoren, chronische cursus van meningitis. In neurochirurgische aandoeningen verhoogd aantal lymfocyten gedurende de nazorg treedt op na de stijging van het aantal neutrofiele granulocyten en indicatief voor een gunstige uitkomst.

Plasmacellen

Plasmacellen in de cerebrospinale vloeistof kan worden ontdekt slechts wanneer de lange lopende inflammatoire processen in het hersenweefsel en de hersenen omhulsels. Plasma cel-morfologie is hetzelfde, net als in het bloed of beenmerg punctate.

Deze afgeronde cellen met èkscentričeski gelegen nucleus en intens gekleurde, basofiel cytoplasma. In sommige gevallen oplopen tot hun nummer 26%. Plasmacellen zijn gevonden ook de postoperatieve periode en wanneer de trage stroming van herstellend processen van het hersenletsel.

Gistiocitы

In normale cerebrospinale vloeistof die soms worden herkend als losse exemplaren.

In gebeitst voorbereidingen hebben histiocytes een grote kern en relatief smalle cytoplasma. De hoeveelheid cellen uit 7 naar 10 m, formulier afgeronde of onregelmatig. Kernel bobovidnoj of onregelmatig Gelobde vorm, normohromnoe. Nucleolus zichtbaar in natuurlijke producten met fazovokontrastnoj microscopie.

Wanneer tuberculose meningitis in spinale vloeistof ontdekt een groot aantal histiocytes, afzonderlijk gelegen en accumulatie, hun basofiel cytoplasma, meer intens geschilderd.

Volgens de beschikbare gegevens, Sommige soorten cellen kunnen worden nejroglii histiocytes. Een groot aantal histiocytes in de spinale vloeistof gedetecteerd bij patiënten, een operatie ondergaan op de hersenen of het ruggenmerg (dat geeft een actieve weefselreactie en een normale wondgenezing), evenals personen, lijden aan meningitis en cisticerkozom bij Lome tijdens het inflammatoire proces. Wanneer hersentumoren met kiemkracht in de podpautinnoe ruimte of ventriculaire muur weergegeven histiocytes in de cerebrospinale vloeistof in combinatie met de macrofagen en de gewijzigde cellen, Wat is kenmerkend voor het ontstaan rond de tumor reactieve zone.

Macrofagen

Macrofagen zijn gevormd uit een- en multicore endotheel cellen van de arachnoideavilli mater en monocyten. Elementen van het endotheel van de arachnoideavilli mater wordt van sincitiâ gescheiden en worden afgeronde cellen, nucleaire amebovidnym-beweging en indringend in de cerebrospinale vloeistof.

Macrofagen actief absorberen en verteren van cellen en andere elementen, vallen in de cerebrospinale vloeistof in ziekteprocessen, bij te dragen aan de zuivering. Opname in het cytoplasma van macrofagen gemakkelijk gesplitste cel en in gekleurd preparaten.

Macrofagen phagocytize erytrocyten, vernietigd of ongewijzigde Neutrofiele granulocyt, vetdruppeltjes, kristallen van gematoidina, enz. Vaak het cytoplasma van de macrofagen zijn van verschillende grootte of één grote vacuolen een vacuole, die beslaat bijna het hele cytoplasma, Deze kernel wordt verplaatst naar de periferie. In dergelijke gevallen heeft de cel een soort ring-cricoid macrofaag.

Normaal, zijn macrofagen in de cerebrospinale vloeistof afwezig. Verschijning op normale citoze getuigt van bloeding of inflammatoire proces in het centrale zenuwstelsel. Een groot aantal macrofagen in de cerebrospinale vloeistof in de postoperatieve periode geeft een actieve redding (positieve vooruitzichten). Een klein aantal van macrofagen of hun afwezigheid bij expressie pleiocytose - een ongunstig prognostisch teken.

Granular ballen – schuimcellen

Granular ballen (schuimcellen) Macrofagen zijn groot met meerdere insluitsels van vetdruppels in het cytoplasma.

Dit is meestal de cellen afgeronde vorm, magenta gekleurde in donkere bruine kleur. Bij de behandeling van spinale vloeistof Sudan III korrelvormige ballen geschilderd in oranjerode.

Ontdekt in de cerebrospinale vloeistof bij aan raking met haar vloeistof uit de cyste van verschillende etiologie, afbraak van hersenweefsel (samen met dikke druppels), soms in de postoperatieve periode, in sommige hersentumoren (kraniofaringiome, èpendimome, enz.). Als de tumor in de buurt van de ventrikels van de hersenen bevindt zich, de granulaire ballen worden meestal aangetroffen in de cerebrospinale vloeistof uit de ventrikels. De bron van de korrelige ballen zijn mikrogliocity, evenals oligodendrocyten, de cellen van de buitenste omhulsels van vaartuigen en arachnoid.

Neutrofiele granulocyten

Neutrofiele granulocyt in cerebrospinaal vocht vergelijkbaar met nejtrofil′nymi bloed granulopitami, hun cytoplasma (in de zaal Accounting en de inheemse producten) vaak uitgestrekt of heeft een uitsteeksel (psevdopodii). Deze diversiteit van cellen treedt op in de eerste 10-15 minuten na de inbeslagname van cerebrospinaal vocht en geeft het behoud nejtrofil′ny- MI granulozitami mogelijkheid om te verplaatsen. Gekenmerkt door een gesegmenteerde kern, het aantal emmers in die varieert van twee tot vijf; Gestreepte neutrofiele granulocyten zijn vrij zeldzaam.

Bij het opslaan van de wijziging van de Neutrofiele granulocyt CSF vóór, dan andere cellen. Kernel neutrofiele granulocyten Lysis of segmenten kunnen worden afgerond, met duidelijke contouren, de Verenigde fijne jumper; ze worden een soort van aparte korrels. Neitrofilny granulocite, waaruit bestaat slechts één segment van een afgeronde kernel, lijkt uiterlijk op een erytroblast. Voldoen aan gezwollen Neutrofiele granulocyt met contouren van segmenten, bezetten van bijna het hele cytoplasma. In gebeitst preparaten, is het mogelijk om te observeren van alle fasen van het uiteenvallen van neutrofiele granulocyten — van zwelling tot de volledige vernietiging van cel structuren, Wanneer de contouren van het cytoplasma is niet zichtbaar, en kern segmenten worden vormloze, bestaande uit zachte raspen chromatine. Eigendom van de cellen te nejtrofil′nym granulocitam kan alleen worden geïnstalleerd op de reactie op de peroxydase: de aanwezigheid van groen-geel of bruine pellets verbrijzelde het cytoplasma.

Soms in cerebrospinale vloeistof gevonden met Neutrofiele granulocyt piknotičnym kernel als een onregelmatig gevormde brokken van giperhromnyh.

Neutrofiele granulocyten verschijnen in de cerebrospinale vloeistof hemorrhage in de podpautinnoe ruimte, ontstekingsziekten van het zenuwstelsel, Na neurochirurgische behandelingen. De aanwezigheid van Neutrofiele granulocyt met onzuiverheden van het bloed in de cerebrospinale vloeistof geeft aan ontsteking van de hersenvliezen.

Het overwicht van de ongewijzigde neutrofiele granulocyten geeft een acute inflammatoire proces.

De plotselinge de opkomst van nejtrofil′nogo pleocitoza Wanneer het abces breuken onder de schil van de hersenen.

Op abscesse, gelegen diep in het hersenweefsel, vaak waargenomen onscherp uitgesproken pleocitoz met een overwicht van lymfocyten.

Wanneer het verlies van de macht van het inflammatoire proces in de cerebrospinale vloeistof verschijnen degenerirovannye vormen van neutrofiele granulocyten.

De aanwezigheid van gemodificeerd en ongewijzigde neutrofiele granulocyten is kenmerkend voor het lopende inflammatoire proces. Er moet rekening worden gehouden, dat de ongewijzigde Neutrofiele granulocyt in de cerebrospinale vloeistof met verontreinigingen vers bloed verschijnen, in dergelijke gevallen moet u een corrigerende citoza definiëren.

Eosinofiele granulocyten

Eosinofiele granulocyt in cerebrospinaal vocht exemplaren voor native onderscheid met andere cellen door de aanwezigheid van een karakteristieke glanzende grote spikkels, vult het cytoplasma. Cellen met twee-blade kern zijn zeldzaam, Er zijn vaker wel dan niet mononucleaire vormen. In gekleurde specimen morfologie van èozinofil′nyh is granulozitov hetzelfde, zoals in het bloed. In de spinale vloeistof ontdekt meestal vernietigd eosinofiele granulocyten.

De inhoud van èozinofil′nyh granulocyt in cerebrospinaal vocht in cisticerkoze varieert van 1 naar 46%.

De opkomst van meningitis als complicaties cisticerkoznogo arachnoiditis begeleid door de opkomst van nejtrofil′nogo pleocitoza en vermindering van de èozinofil′nyh granulozitov. Voor abscedirovaniâ èhinokokkovogo wordt zeepbel in de hersenen gekenmerkt door de aanwezigheid in de inhoud en èozinofil′nyh neutrofiele granulocyten, dat dient als een ondersteunende teken in het onderscheiden van het uit door. Soms kan een groot aantal èozinofil′nyh granulozitov worden gevonden in de inhoud van de cysten tumoren van de hersenen en het ruggenmerg (nevrinome, kraniofaringiome, èpendimome, Kanker uitzaaiing naar de hersenen). Uitgedrukt door een toename van het aantal èozinofil′nyh granulocyt in cerebrospinale vloeistof kan worden waargenomen na ventriculaire cisternoskopii.

Na het verwijderen van hersentumoren met de actieve genezende wond verhoogt het aantal èozinofil′nyh granulozitov, Wat kan worden beschouwd als een plaatselijke allergische reactie op trauma en hersenvliezen inductie verval van weefsel producten.

De gewijzigde cellen en de schaduw cellen

Dankzij de citolitičeskim eigenschappen van cerebrospinaal vocht cellen, in het lang, Houd alleen de contouren van het cytoplasma en de overblijfselen van de kernen. Bepalen van hun morfologische accessoire niet mogelijk. In de meeste gevallen zijn deze wijzigingen onderworpen aan Neutrofiele granulocyt, Soms is de cellen van kwaadaardige tumoren. Gemakkelijk onderworpen aan zitolizu cellen en arachnoideavilli èpendimy ventrikels van de hersenen.

Weefsel basofielen zijn te vinden in de cerebrospinale vloeistof na neurochirurgische ingrepen.

Cellen van de arachnoideavilli mater in de spinale vloeistof

Cellen van de arachnoideavilli mater (arahnoèndoteliâ) is een enkellaags van epitheliale cellen, ze kunnen zowel onderscheiden bij de berekening van de citoza in de camera, en in gekleurd preparaten, gemaakt van slib van cerebrospinaal vocht. Dit is een vrij grote cellen onregelmatig gevormde of afgerond, met relatief kleine ronde of ovale kern, een centraal gelegen.

De kernen zijn geschilderd gipohromno, en het cytoplasma is bleek- of grijsachtig-blauw kleur, Het heeft gekartelde randen en bevat vaak insluitsels phagocytized deeltjes (Dikke druppels, cellulaire elementen, Vacuolen). Het cytoplasma van de cellen van de arachnoideavilli mater is vaak vernietigd, in dergelijke gevallen ontdekt de karakteristieke kern en het cytoplasma kladjes. Chromatine van kernels is melkopetlistuû of korrelige structuur, soms merkbaar een blauwe nucleus. Het bedrag van de kernen van 5 naar 19 m.

Aanwezigheid van afzonderlijke cellen in de cerebrospinale vloeistof nog arachnoideavilli is een indicatie van de pathologie, omdat deze cellen lijn de podpautinnoe ruimte en, sluŝivaâs′, krijgen in de cerebrospinale vloeistof. De toename van het aantal cellen van de arachnoideavilli is waargenomen bij arahnoidite, brein cisticerkoze. In de inhoud van arahnoidal′noj cysten ontdekt apart gelegen arachnoideavilli cellen en hun simplasty in de vorm van de groepen van kernen van uiteenlopende omvang en intensiteit van kleuren, omringd door bleke cytoplasma zonder duidelijke grenzen tussen cellen.

Cellen Plexus choroideus

Van de ventriculaire Plexus choroideus in de cerebrospinale vloeistof kunt veelhoekige invoeren, afgeronde, soms grote cilindrische (15— 19 µm) cel. Klein (4— 5 μm) gelegen in het centrum van de kern of èkscentričeski, hyperchromatische, Eosinofiel cytoplasma, intens gekleurde. In het cytoplasma van de cellen van de Plexus choroideus heeft een korrelgrootte, soms in de vorm van glybok en inclusions, grootte van 1-3 micron, afgeronde of onregelmatig in vorm, groenige of blauwige kleur. Sommige cellen kunnen gedetecteerde vacuolen of gevangen erytrocyten.

Plexus choroideus meestal gevonden in vloeistof uit de ventrikels van de hersenen cellen.

Èpendimy cellen van de ventrikels van de hersenen in de cerebrospinale vloeistof

Èpendimy cellen van de ventrikels van de hersenen in de cerebrospinale vloeistof, een Lumbaalpunctie verkregen, gemakkelijk vernietigd tijdens het koken en schilderen van voorbereiding. In een gekleurde uitstrijkjes hebben ze soort entiteiten, bestaande uit een ovaal-vormige kernen met zachte structuur. In sommige cellen behouden cytoplasma omringt de kern als een smalle rand.

In de vloeistof uit de ventrikels van de hersenen zijn meest voorkomende cellen èpendimy met bewaarde structuur, morfologisch lijken op cellen van de arachnoideavilli mater, maar de kern van hun geschilderde paler en hebben een meer zachte, homogene verdeling van de chromatine. Ovaal cellen vaak èpendimy Polen wees, het cytoplasma is een grijsachtig tint. Afzonderlijk gelegen kooien en grote opeenhopingen van ontmoeten, die kan niet worden bepaald door de grenzen van de afzonderlijke cellen.