Werkwijzen voor de detectie van Leishmania in het schrapen van de aangetaste weefsels door isolatie van zuivere kweek

Bij het zaaien schrapen het aangetaste weefsel van de patiënt naar een specifieke voedingsbodem Leishmania vermenigvuldigen en kunnen ze worden gedetecteerd door microscopie.

Reagens

Среда W.W.W. voor de teelt van Leishmania (14 g agar, 6 g natriumchloride, over 150 ml gedefibrineerd konijn bloed, rechtstreeks uit het hart voor de voorbereiding van medium, 900 ml gedestilleerd water). In gedestilleerd water werd natriumchloride en agar toegevoegd. De kolf met het medium werd verhit tot volledig smelten van de agar en 20-30 min gesteriliseerd in een stoomsterilisator bij 147,1 kPa (15 een T).

Afgekoeld tot 56 ° C agar steriele gedefibrineerd konijn bloed toegevoegd, aangewakkerd door omzwenken en afgevuld in steriele pipet 4 ml buisjes. Flask agar tijdens afgifte is een waterbad bij een temperatuur 58 ° C. De buizen met medium tips.

Na stollen van de agar, worden ze in een incubator geplaatst voor een dag bij 37 ° C voor steriliteit controle en het ontvangen van de vloeibare condensaat. Indien wordt geproduceerd onvoldoende, voor het zaaien in steriele flesjes, kunt u over toevoegen 1 Eén ml van de volgende oplossingen: 0,85 % sodium chloride, 1 % pepton oplossing, Hanks oplossing, lactalbuminehydrolysaat of ander nutriënt media in isotone concentraties.

Methoden voor het opsporen van Leishmania in schraapsel van aangetaste weefsels door isolatie van zuivere cultuur

Wanneer u een cultuur selecteert zorgvuldig volgen de regels van de steriliteit. De test gebied van de huid wordt afgeveegd met een wattenstaafje, bevochtigd 70 % alcohol.

Na verdamping van de alcohol de punt van een steriele ofthalmische scalpel insnijding tuberculum lengte van 2-3 mm. Van de bodem van de snede met steriele Pasteur pipet kan schrapen tissue. De resulterende druppel sereuze-bloederige vloeistof werd overgebracht in een testbuis met de omgeving. Manipulatie wordt meerdere malen uitgevoerd, zaaien materiaal elke keer een nieuwe buis. Oordopjes ingebed in paraffine of zet ze rubberen doppen en geplaatst in een incubator bij 22-24 ° C.

Evaluatie van de resultaten

Gewassen worden onderzocht onder een microscoop op een dagelijkse basis om de verwekker identificeren. Ontdek inheemse drugs, bereid volgens de werkwijze vermalen druppels, de lens 40×40. De resultaten worden beschouwd als negatief zaaien, indien in 40 dagen pathogeen werd niet gevonden. Culturen zijn langwerpig Leishmania (10-12 Microns met bedrading).

Toepassing van de kweekmethode is het meest nuttig wanneer tuberculoïde vorm van leishmaniasis, diagnostica die andere methoden minder effectief kunnen zijn.