Bloedarmoede, geassocieerd met foliumzuur deficiëntie

Wat de reden foliumzuur bloedarmoede wordt gekenmerkt door het verschijnen in het beenmerg megaloblasten, intramedullaire vernietiging erythrokaryocytes, patsitopeniey, macrocytose en hyperchromia rode bloedcellen en soms - geestesziekten.

Folievaya (pteroilglutaminovaya) zuur (vitamine B₉) Het bestaat uit drie componenten:

• pteridinering;
• P-aminobenzoëzuur (pteroievuyu zuur vormen samen);
• glutaminezuur.

Het molecuulgewicht van foliumzuur - 441. Foliumzuur is actief in de vorm van tetrahydrofoliumzuur zuurderivaten. Foliumzuur inhoud in verschillende vormen in het menselijk lichaam is ongeveer 5-10 mg. Voorraden in strijd zijn toelating in het lichaam kan worden uitgeput boven 4 van de maand.

De dagelijkse behoefte aan foliumzuur is 100-200 microgram, Zwangerschap, hemolytische anemie, verhoogt vaak.

Het totale bedrag van foliumzuur in het dieet met de volledige kracht van 500-600 microgram per dag. Foliumzuur - folaten in aanzienlijke hoeveelheden in de lever, gist, spinazie, vlees. Meer 50 % foliumzuur, in voedsel, Het kan worden vernietigd wanneer gekookt.

Foliumzuur wordt geabsorbeerd in de bovenste dunne darm. Het vermogen van de darmen foliumzuur absorberen veel hoger dan de dagelijkse behoefte.

Foliumzuur participeert in de synthese van pyrimidine en purinebasen, samen met methylcobalamine - de synthese van uridinmonofosfata timidinm nofosfata. Folaat co-enzymen Meer betrokken bij een aantal reacties. In het bijzonder, tetrahydrofolaat participeert in de synthese van glutaminezuur histidine.

Etiologie en pathogenese van bloedarmoede tijdens foliumzuurdeficiëntie

Foliumzuurdeficiëntie, alsmede tekort van cobalamine, Het leidt tot de ontwikkeling van megaloblastische anemie.

Malabsorptie van foliumzuur waargenomen bij individuen, resectie van de dunne darm, vooral jejunum, alsook in de lange termijn te nemen anti-epileptica zoals difenylhydantoïne (difenina) en fenobarbital (luminale). Inname van foliumzuur wordt verbroken wanneer de spruw en coeliakie. Foliumzuurdeficiëntie, alsmede tekort van cobalamine, waargenomen blind loop syndrome. Beschreven zeldzame gevallen van erfelijke aandoeningen van foliumzuur transport over de darmwand en in de cerebrospinale vloeistof. De absorptie van andere stoffen zonder te lijden.

Foliumzuur deficiëntie bij pasgeborenen waargenomen bij prematuriteit, schending van intestinale absorptie, gevoed geitenmelk, met een kleine hoeveelheid foliumzuur.

Een belangrijk malabsorptie foliumzuur kan voorkomen bij patiënten, alcoholisten.

Toegenomen consumptie van foliumzuur tijdens de zwangerschap Het kan leiden tot een tekort aan foliumzuur, In ontwikkelde landen vandaag is zeldzaam. Foliumzuur tekort bij zwangere vrouwen wordt gevonden in een laag vermogen, de aanwezigheid van hemolytische anemie, Gebruik voor de zwangerschap een groot aantal alcoholische dranken.

Klinische verschijnselen van folaatdeficiëntie

Foliumzuur deficiëntie bij kinderen en jonge vrouwen. Tegelijkertijd, patiënten klagen algemene zwakte, duizeligheid. In tegenstelling tot cobalaminedeficiëntie pijnlijke tong zelden waargenomen. Paresthesieën, en andere tekenen van kabelbaan myelosis ontbrekende. Sclera vaak ikterichnost.

In tegenstelling tot het tekort van cobalamine tekort aan foliumzuur is zelden waargenomen gistaminoupornaya Akhil, gastratrophia, Hoewel de afname van maagzuurafscheiding vaak.

Voor folaatdeficiëntie, en voor tekort aan cobalamine, gekenmerkt door het verschijnen in het perifere bloed macrocytose, megalocitov en megaloblasten, de aanwezigheid van hyperchromic anemie, vermindering van het aantal reticulocyten, bloedplaatjes en leukopenie met neutrofiele verschuiving naar links en rechts. In het beenmerg - megaloblasten.

De veranderingen in het zenuwstelsel verschillen van de manifestaties in B₁₂-deficiëntie anemie.

Bewezen, dat personen met epilepsie, Foliumzuur deficiëntie leidt tot frequente aanvallen, hun ernstiger. Dit is bijzonder belangrijk omdat, dat het nemen van anti-epileptica kan malabsorptie van foliumzuur veroorzaken. Volgens de literatuur, bij patiënten met schizofrenie foliumzuur deficiëntie leidt tot verslechtering van de ziekte, meer ernstige symptomen en minder effectieve behandeling.

Differentiële diagnose van cobalaminedeficiëntie en foliumzuur

Voor de differentiële diagnose van cobalamine deficiëntie en foliumzuur wordt gebruikt radioimmunoassay methode voor de bepaling van foliumzuur in het serum en in het bijzonder in erytrocyten. De inhoud van cobalamine bepaald door microbiologische methode. Als een test organisme gebruikt als Streptococcus faecalis en Lactobacillis casei. Normaliter het gehalte aan foliumzuur in het bloedserum ranges, Volgens de auteurs, met behulp van verschillende onderzoeksmethoden, van 3 naar 25 ng / ml, en erytrocyt - van 100 naar 425 ng / ml.

In foliumzuurdeficiëntie daalt het niveau van serum, en in erytrocyten. Bij gebrek kolabaminov foliumzuur gehalte in het bloedserum vaak stijgt, en erytrocyten kan soms worden verminderd, hoewel de daling, doorgaans, een kleine.

Voor de diagnose van foliumzuur deficiëntie ook Load methode histidine (15 g), dan is het gehalte aan zuur in de urine formiminglutaminovoy definiëren. Normaal is het grootste deel van de vormen van glutaminezuur histidine. Met urineproductie 1-18 mg formiminglutaminovoy zuur. Bij gebrek aan foliumzuur 8 uur na introductie in het lichaam wordt vrijgemaakt uit de urine 20 naar 1500 mg formiminglutaminovoy zuur. Een aanzienlijk aantal formiminglutaminovoy zuur uitgescheiden in de urine na toediening van histidine bij personen, behandeld met methotrexaat. Bij tekort aan cobalamine, levercirrose de urinaire uitscheiding van zuur verhoogt formiminglutaminovoy, mindere mate, dan met een tekort aan foliumzuur. Normale niveaus van urine methylmalonzuur gehalte stijgt formiminglutaminovoy zuur histidine na ontvangst van het bewijs van een tekort aan foliumzuur, in plaats van cobalamine.

Het helpt om deze twee staten en radionucliden studie differentiëren. Bij tekort aan cobalamine, in verband met de schending van de secretie van de intrinsieke factor, verminderde opname van gelabelde cyanocobalamine, een tekort aan foliumzuur, is het goed geabsorbeerd.

Bij gebrek aan foliumzuur, het inbrengen ervan in het lichaam leidt tot een hoger gehalte aan reticulocyten, terwijl injectie van cyanocobalamine (derivaten) ineffectief. Foliumzuurdeficiëntie methylcobalamin verhoogt het niveau van reticulocyten.

Definiëren index segmentatie neutrofielen

Tel het aantal neutrofielen, met 4 segment en (Totaal 200 cel). Bepaal het percentage cellen, met 5 segmenten en ten opzichte van de hoeveelheid cellen, met 4 segment. Het is bepaald door de formule:

IS =(KS (5 en meer))/KS(4);

waar de IC - index segmentatie;

KS (5 en meer) - Het aantal gesegmenteerde neutrofielen (op 200 cel), waarbij het aantal segmenten gelijk is aan 5 of meer;

KS (4) - Het aantal gesegmenteerde neutrofielen, waarbij het aantal segmenten gelijk is aan 4.

Gewoonlijk varieert deze index 2,5 naar 25 %. Waarin, wanneer het hoger is dan 30 % (oscillaties 120%), U kunt praten over hypersegmentation neutrofielen. Het waargenomen tekort aan foliumzuur, metilkoʙalamina, en uremie.

Bepaling van methylmalonzuur in de urine door Giordio en Plaud

Reagentia.

1. De ionenwisselaar Dowex-ZX4 (chloridevorm, 200-400 Mesh). De hars werd gewassen met vijf volumina gedestilleerd water 3 tijden, werd in twee volumina gedestilleerd water en bewaard in een donkere schotel bij 4 ° C.

2. Een oplossing van para-nitroaniline 0,075 % bereid door 37,5 mg reagens 500 ml 0,2 M zoutzuuroplossing. Bewaren in een donkere pot, Het bleef stabiel gedurende enkele maanden bij kamertemperatuur.

3.Acetaatbuffer (pH 4,3) gemaakt van 1 M natriumacetaat en 1 M azijnzuuroplossing.

4.Diazoreaktiv: 4 ml 0,5 % natriumnitraat oplossing werd gemengd met 15 ml para-nitroaniline. Het mengsel werd in een koelkast geplaatst bij 4 ° C en de gekoelde oplossing werd toegevoegd 4 ml 0,2 M natriumacetaat. Reagens stabiel bij temperaturen 4 ° C voor een dag.

5.Normaal 0,05 M oplossing van methylmalonzuur: 295 mg methylmalonzuur opgelost in 50 ml water.

Methode

Urine werd in een glazen fles verzameld en tot het onderzoek bevroren. Om de kosten deel van de urine te bestuderen (20- 25 ml), ontdooid, tsentrifugiruyut, en het supernatant werd verzameld met een zwakke oplossing van natriumhydroxide of zoutzuur om de pH 6,5.

Chromatografiekolom hoogte 20 cm en een diameter 1 cm werd gevuld met hars Dowex-ZX4. De harslaag dient bij te 3 cm. Wordt door de hars 5 ml urine, gewassen met gedestilleerd water (2 × 50 ml bij een snelheid van maximaal 15 ml 1 van). Methylmalonic zuur worden geëlueerd uit de hars 20 ml 0,1 M zoutzuuroplossing. Verder 2 ml eluaat gemengd met 3 ml 1 M acetaatbuffer pH 4,3 in een reageerbuis met slijpstuk (15×2cm). Aan het mengsel wordt toegevoegd 3 ml koud diazoreaktiva, waarbij de pH wordt verhoogd tot 4,0. Het mengsel werd in een waterbad verwarmd tot een temperatuur 94 ° C. 3 min en 2 ml 3 M natriumhydroxideoplossing. De buis werd vervolgens uit het waterbad, afgesloten en de inhoud geroerd. Het mengsel werd op kamertemperatuur gekoeld 10 min en fotometriruyut 620 nm in een cuvette met een weglengte 1 cm.

Als controle werd een mengsel van, bestaande uit 2 ml 0,1 M zoutzuuroplossing, 3 ml en diazoreaktiva 3 ml acetaatbuffer. Methylmalonzuur standaardoplossing bestaat uit dezelfde componenten en 0,02 ml 0,05 M oplossing van methylmalonzuur. De absorptie van deze oplossingen gemeten onder dezelfde voorwaarden.

Inhoud methylmalonzuur (mg) per eenheid volume urine (1 l) gedefinieerd door de formule:

(IS_Monster-IS_controle)/(IS_standaard-IS_controle)*EEN*((1000*T)/M)

waarbij E - absorptie van verschillende monsters;

A - de hoeveelheid methylmalonzuur in een standaard reageerbuis, ml;

1000 - De hoeveelheid urine, genomen voor onderzoek, ml;

T - de hoeveelheid zoutzuur, genomen elutie, ml;

M - het nummer van het eluaat, genomen voor onderzoek, ml.

Onder bovenstaande omstandigheden, kan de formule als volgt worden vereenvoudigd::

(IS_Monster-IS_controle)/(IS_standaard-IS_controle)*236

Waarin, wanneer de hoeveelheid methylmalonzuur in urine groter dan 300 mg / l, moet opnieuw worden gemengd met acetaatbuffer eluaat en diazoreaktivom, maar 2 ml eluaat wordt opportuun te nemen 4- 10 maal lager en breng het volume op 2 ml 0,1 M zoutzuuroplossing. Bij de berekening dient rekening te houden verdunning.

Normaal per dag met urineproductie 0,6-4,7 mg methylmalonzuur. Bij gebrek aan cobalamine dagelijkse uitscheiding van methylmalonzuur bereikt 294 mg. Normaliter ontvangst 10 g valine niet verhogen klaring van methylmalonzuur, cobalaminedeficiëntie verhoogt de uitscheiding van methylmalonzuur.

Bepaling van methylmalonzuur in urine door Green

Reagentia.

1. Ether.
2. Ethanol.
3. Een oplossing van chloorwaterstofzuur 0,1 M.
4. Ammoniumsulfaat.
5. Sterke basis hars deatsidit FF (200 maas, chloridevorm).
6. Een oplossing van natriumnitraat 0,5 % (gewicht / volume).
7. Een oplossing van para-nitroaniline (750 mg opgelost in 1 l 0,2 M zoutzuuroplossing).
8. Natriumacetaat 0,2 M.
9. Acetaatbuffer 1 M, pH 4,3: gemengd 1 M natriumacetaatoplossing en 1 M oplossing van azijnzuur in de verhouding 16,35:33,9.
10. Een waterige oplossing van natriumhydroxide 3 M.

EEN. Standaardoplossing methylmalonzuur: 100 mg opgelost in 100 ml water, in de koelkast bewaard.

B. Werken standaard methylmalonzuur: standaardoplossing verdund in 20 tijd 0,1 M zoutzuuroplossing (1 ml van de standaard en 19 ml zoutzuur). Deze hoeveelheid methylmalonic zuurequivalent 100 mg methylmalonzuur 1 l urinetest voorwaarden.

Voor de bereiding van gemengde diazoreaktiva 4 ml 0,5 % natriumnitraatoplossing en 15 ml para-nitroaniline. Het mengsel werd in een ijsbad geplaatst en voeg 4 ml 0,2 M natriumacetaat.

Methode.

Urine werd verzameld voor één dag, gemeten zijn volume en 10 ml podkislyayut 1 M zwavelzuur tot pH 2,0 of iets onder. Ammoniumsulfaat werd toegevoegd tot verzadiging. Het mengsel werd in een scheitrechter driemaal met ether en ethanol in een verhouding gebracht en geëxtraheerd 3:1. Om de vorming van emulsies extractiemiddel mengsel in overmaat voorkomen.

Het extract werd door een kleine kolomchromatografie (1 – 1,5 cm diameter), voltooid 5 ml hars. De kolom werd gewassen 50 ml gedestilleerd water. Methylmalonzuur geëlueerde 0,1 M zoutzuuroplossing. Na elutie geselecteerd 2 ml eluaat, W toegevoegd ml acetaatbuffer, en 3 ml diazoreaktiva.

Na mengen werd de buis in een waterbad geplaatst bij een temperatuur 95 ° C 3 m. Vervolgens toegevoegd 2 ml 3 M natriumhydroxide en eenmaal gesloten buis stop om contact met lucht te minimaliseren. Na afkoelen werd de absorptie bij golflengte 620 ze. Voor de lege plaats van het eluaat 2 ml 0,1 M zoutzuuroplossing, en de standaardoplossing - 2 ml werkstandaard.