A sperma mennyiségi és minőségi jellemzőinek meghatározása

A spermiumok mozgékonyságának meghatározása

A spermiumok mozgékonyságának meghatározása a legfontosabb paraméter, az ejakulátum minőségét jellemezve. Spermium, termékeny, mobilitással rendelkezik - végezzen egyenes vonalú transzlációs mozgást sebességgel 50 μm / s. Az ejakulátum tartalmaz spermiumok motilitási rendellenességekkel - dyscinospermia rezgés formájában, aréna és egyéb mozgástípusok, amelyek általában nincsenek.

A spermium motilitását az ejakulátum natív előkészítésében értékelik korlátozott látómezővel (a Fonio ablak segítségével), 7X-es okulár és 40X-es objektív használatával, félig zárt kondenzátorral. Számolás 100 sejt, vegye figyelembe a mobil számát, ülő és mozdulatlan sperma. Normálisan az aktívan mozgó spermiumok 80-90 %, ülő - 10-12, mozdulatlan - 6 - 10 %. Csak azokat az aktívan mozgó és ülő spermákat veszik figyelembe, amelyek előre haladnak.

Használhat részletesebb ötpontos minősítési skálát.:

• "4" - kiváló mozgékonyság (az összes spermium jelentős lineáris transzlációs mobilitással rendelkezik);
• "3" - jó mobilitás (kissé csökkent);
• "2" - közepes mobilitás (sok mozdulatlan sperma, de rezgő farokkal);
• "1" - gyenge mobilitás (az előre mozgás hiánya, csak a spermiumfarkak mozgékonysága);
• "0" - a spermium nem mozog.

Ejakulálja a termékenységet a spermiumok mozgékonyságának időtartamától függ, ezért meg kell határozni a spermiumok mozgékonyságának dinamikáját (dinamikus kinézisgram).

Egy csepp ejakulátumot egy fedőüvegre visznek, fordítsa meg, és tegye egy üveglemezre egy kúttal, amellyel a cseppek ilyen módon felakaszthatók, hogy a csepp a mélyedés közepén legyen. A fedőüveg széleit folyékony paraffinnal kenjük meg, és az aktív-mobil százalékos arányát mikroszkóp alatt határozzuk meg., ülő és mozdulatlan sperma keresztül 1, 3, 6, 12 és 24 óra után ejakuláció. A vizsgálatot szobahőmérsékleten végezzük. Normálisan az aktívan mozgó spermiumok száma 2-3 óránként csökken 20 % ,

• Jegyzet. Az ejakulátum mikroszkópos vizsgálatát a laboratóriumban egy személynek kell elvégeznie, megfelelő tapasztalattal rendelkezik a laboratóriumi diagnosztika ezen területén, mivel a spermiumok mozgékonyságának meghatározásának eredményei különböző kutatóktól ± 40-ig változnak % és nagyrészt a magömléssel kapcsolatos tapasztalatoktól függ.

Teszt a spermiumok "revitalizációjára"

Teszt a spermiumok "revitalizációjára" mozdulatlanok normál mobilitásának helyreállításán alapul, de élő sperma stimuláló megoldásokkal:

1) Becker megoldása (glükóz - 3 g, Tovább₂HPO₄ - 0,6 g, NaCl - 0,2 g, KH₂UTÁN₄ -0,01 g, desztillált vizet 100 ml; pH - 7,8);

2) 0,1 % koffein oldat (csak nem ampullákban!) - 10 % az ejakulátum térfogatából;

3) 0,1 M arginin oldat.

Módszer. Térfogatú pipetta kapacitás 1 ml szívás 0,1 ml ejakulátum (jól elkeverve) és ugyanazzal a pipettás tárcsával 0,9 ml stimuláló oldat. A pipetta tartalmát egy üvegüvegre fújják, alaposan keverje össze úgy, hogy többször szívja és fújja a folyadékot az óraüvegre, majd előkészíti a függő csepp készítményeket. 5- 10 min mozdulatlanul, de az élő spermiumok mozogni kezdenek.

A mozgékony spermiumok százaléka azonnal meghatározzák a mobilitás helyreállítása után és utána 3, 6, 12 és 24 nem. A megbízhatóbb eredmények elérése érdekében végezzen párhuzamos tesztet két stimuláló oldattal. Csak akkor beszélhetünk nekropermiáról, ha a mozgásképtelen spermiumok "újjáélesztése" lehetetlen.

Az élő spermiumok azonosítása mozgásképtelenek között

A módszer elve a tényen alapszik, hogy az élő spermiumok enzimjei elszínezik az eozint. Reagensként használják 5 % vizes eozin-kálium-oldat és 10 % nigrosin vizes oldata.

Módszer. Egy kis ejakulátumcsepp kerül egy üveglemezre, tegyen mellé egy dupla nagy cseppet 5 % eozin-kálium-oldat és egy csepp 10 % nigrosin oldat, amely szintén kétszer akkora, mint egy eozin-kálium csepp. Először az ejakulátumot összekeverjük eozin-káliummal, várjon néhány másodpercet, majd összekeverjük egy csepp nigrosinnal, ismét várjon néhány másodpercet, és vékony keneteket készítsen őrölt üvegcsúszdával.

Merülő mikroszkóp rendszer használata, kenetben számítanak legalább 200 sperma, élőben kiemelve (Színtelen) és a halottak (eozin vörösre festett). Az élő és elhalt spermiumok számát százalékban fejezzük ki. Nigrosin hiányában az ejakulátum egy cseppjét összekeverjük egy cseppel 5 % eozin-kálium-oldatot, és készítsen vékony keneteket a mikroszkópiához. A nigroszin csak a gyógyszer hátterét festi, amelyiken a spermiumok kontrasztosabbak. Normális esetben az élő spermiumok száma 80-90 % összesükből.

A spermiumok száma 1 ml és az ejakulátum teljes térfogatában

A spermiumok száma 1 ml és a teljes ejakulátumot megszámoljuk a Gorjajev számláló kamrájában.

A spermiumok számát a teljes ejakulátumban úgy határozzuk meg, hogy megszorozzuk a spermiumok számát 1 ml ejakulátummennyiségenként (milliliterben).

• Jegyzet. A számláló kamra meghatározhatja a mozgékony spermiumok számát is, amelynél az ejakulátumot meleg izotóniás nátrium-klorid-oldattal kell hígítani, és meg kell számolni az immotilis spermiumok számát, majd vonja le őket a teljes összegből.

Normális esetben, a 1 ml ejakulátum 60-120 milliót tartalmaz. sperma, hiperpermiával - több 120 millió, oligospermiánál - tól 30 hogy 60 millió, mi, általában, lehetetlenné teszi a megtermékenyítést. Az eseteket azonban leírják, amikor a megtermékenyítés bekövetkezik és amikor bent tartják 1 ml ejakulátum 5 hogy 30 millió. sperma.

Akárhogyan is amikor oligospermiát észlelnek A spermiumszám 2-3 kontrollszámra van szükség 3-4 hetes időközönként a maximális számuk megállapításához. Ugyanannak a férfinak a spermiumszáma jelentős fiziológiai ingadozásoknak van kitéve.

Normális esetben az egész ejakulátum többet tartalmaz 150 millió. sperma.

Spermatogramszám

A spermatogram a spermiumok és a spermatogenezis sejtek különböző morfológiai formáinak százalékos aránya.

Kenetben, hematoxilineozinnal vagy Pappenheimmel festve, legalább megszámlálta 200 sperma, míg a normális és kóros formák száma, valamint a spermatogenezis sejteket százalékban kifejezve. A számlálást a mikroszkóp merülő rendszerével és egy leukogram számláló géppel végezzük, korábban megváltoztatott kulcsnevekkel.

Normális ejakulátum esetén a normális spermiumformák 80-85 %, néha 100 %, ezek magukban foglalják a fiziológiai lehetőségeket, amelyekre jellemző vagy szokatlanul szűkült, vagy csökkentik, vagy megnagyobbodott fej.

Fiatal, vagy éretlen, A spermiumok formáinál a fej és a nyak körül citoplazma maradványa van ("gallér"), gyakori szexuális kapcsolat során figyelhetők meg, és nem képesek megtermékenyíteni.

A spermiumok régi formái (hiperkrómia, achromia, a fej vakuolizációja) hosszan tartó szexuális absztinencia után jelennek meg az ejakulátumban, és nem alkalmasak megtermékenyítésre.

A kóros formák közé tartoznak a fej deformációival járó spermiumok: megalospermatozoa (gigantospermatozoa), makró, mikrospermatozoák, kúpos, kétfejű spermiumok egy nyakkal és egy farokkal, nyakatlan egy vagy több farokkal, farok nélkül, fej nélküli farokkal stb..

Egészséges férfiaknál a spermiumok rendellenes formái általában nem találhatók meg a normál ejakulátumban., de néha számuk normális megtermékenyítő képességgel az ejakulátum elérheti 20 %, ebből kb 15 % fejpatológiát jelent, 3-5 % - test, 2-5 % - farok.

Patológiás spermatogenezisben, A meddőség szekréciós formája, a fej és a nyak patológiájával járó spermiumok kimutathatók. farok patológiája általában kiválasztó eredetű, akkor fordul elő, amikor egy hímivarsejt áthalad a vas deferensen.

A festett készítményekben jól láthatóak a különállóan elhelyezkedő csírasejtek is, amelyek a differenciálódás és érés különböző szakaszaiban vannak., mi fontos az aspermia és azoospermia megkülönböztetéséhez.

spermatogónia van egy lekerekített, néha ovális, átmérőjük 5-12 mikron. A sejtmag a sejt körülbelül egyharmadát foglalja el, sötét- vagy világos színű, 1-2-3 maggal- lámák, gyakran a karyolemma közelében található (sejtmag), finomszemcsés kromatin szerkezet. A citoplazmában uzkaya, bazofil, Homogén. A spermagónia mitotikusan többször osztódik. Vannak olyan sejtek, amelyekben a mitózis jól meghatározott stádiumai vannak.

A sejtek egy része, mitózis eredményeként alakult ki, spermatocitákká differenciálódnak I, majd másodrendű. I. rendű spermasejtek - kerek vagy sokszögű, 17-19 mikron átmérőjű sejtek, nagy kerek sejtmaggal és könnyű finomszemcsés citoplazmával. A festett készítményekben tiszta perinukleáris zóna látható..

Spermatociták II. rend meiózis eredményeként alakult ki. Kisebbek, mint az elsőrendű spermatociták (átmérő 15 m), de morfológiailag majdnem azonos. Gyakoribb az ejakulátumban, mint az elsőrendű spermatociták, de sokkal ritkábban, mint a spermatidák.

Spermatydы - kicsi, kerek vagy megnyúlt, 12-15 mikron átmérőjű sejtek kerek hiperkróm magokkal, központilag vagy excentrikusan helyezkedik el. Esetleg többmagvú spermatidák. Pale citoplazmában, bazofil, Gyakran vacuoláris.

A spermatidák spermiumokká alakulnak.

A spermatogenezis sejtek egy normál spermatogramban nem több, mint 2 %. Számos közülük megfigyelhető szekréciós jellegű meddőségben..

Fáziskontraszt mikroszkópiához Az ejakulátumot kis mennyiség hozzáadásával izotóniás nátrium-klorid oldattal hígítjuk 1 % rivanol vagy karbolsav vizes oldata a spermiumok mozgékonyságának csökkentésére.

Fluoreszcens mikroszkóppal egy csepp ejakulátumot és egy csepp hígított akridinnarancsot egy tárgylemezre 1:20000. A cseppeket összekeverjük és fedőlemezzel lefedjük.. A mikroszkópiához 7X okulárt és 40X objektívet használnak.. Az élő spermiumok zöldre váltanak, a halottak narancssárgában vannak. A spermiumok normál és kóros formái morfológiai jellemzőik miatt könnyen megkülönböztethetők..

A fáziskontrasztos és lumineszcens mikroszkópokkal való munkavégzés szabályait ezeknek az eszközöknek az utasításai ismertetik.. Fáziskontraszt és lumineszcencia mikroszkópia esetén a spermatogram számlálása az általános szabályok szerint történik..

Az ejakulátum mikroszkópos vizsgálata alapján különféle kóros állapotok mutathatók ki..

• Aspermia - spermiumok és spermatogenezis sejtek hiánya az ejakulátumban.
• Azoospermia - spermiumok hiánya spermatogenezis sejtek jelenlétében.
• Aszthenospermia - a mozgékony sejtek számának csökkenése és a normál spermiumszámmal rendelkező kóros formák számának növekedése.
• Oligoasthenospermia - a spermiumok és mozgékony formái számának csökkenése, valamint a kóros formák számának növekedése.
• Necrospermia – a készítményben lévő összes spermium mozdulatlansága az „újraéledés” után is.
• Akinospermia - feltétel, amelyben a necrospermiától eltérően a korábban mozdulatlan spermiumok az „ébredés” után aktívan mozogni kezdenek.