Nasledstvennaya gemoliticheskaya vérszegénység, a hiány a vörösvértest piruvát tevékenység által okozott

Nasledstvennaya gemoliticheskaya vérszegénység, az eritrocita piruvát kináz hiányával jár - a hemolitikus vérszegénység viszonylag ritka formája, amely autoszomális recesszív módon öröklődik, ad klinikai megnyilvánulások homozigóta hordozókban, intracelluláris hemolízis jeleivel jár, az eritrociták makrocitózisa, alacsony káliumtartalom bennük. Jelenleg több mint 200 a piruvát-kináz aktivitás hiányának homozigóta hordozása.

Patogenezis

A piruvát-kináz az egyik enzim, befejező glikolízis. A glikolízis ezen összefüggésében ATP és nikotinamid-dinukleotid képződik. A piruvát-kináz aktivitás hiányában szenvedő betegek többségében e két metabolit tartalma csökken az eritrocitákban., egyes esetekben az ATP-tartalom normális, de az ATP stabilitása zavart az inkubálás során. Jelentős retikulocitózis esetén normális ATP-szinteket találunk. Ennek oka a mitokondriumok jelenléte a retikulocitákban és az ATP megszerzésének lehetősége nemcsak glikolízissel, hanem az oxidatív foszforilezés miatt is.

A piruvát-kináz-hiány következménye a glikolízistermékek felhalmozódása is, képződött az előző szakaszokban - foszfofenolpiruvát, 3-foszfoglicerát, és különösen a 2,3-difoszfoglicerát. Az eritrocitákban csökken a piruvát-laktát tartalma.

ATP hiánya vörösvértestekben piruvát kináz hiányban az eritrociták ATPáz-pumpájának diszfunkciójához és a káliumionok elvesztéséhez vezet, míg a nátriumionok koncentrációja az eritrocitákban nem növekszik. Ez az eritrociták monovalens ionjainak csökkenését okozza, sejtek kiszáradása és zsugorodása. Ezt a jelenséget ún dessicocytosis. Az eritrociták vízmennyiségének csökkenése megnehezíti az oxigenizáció folyamatát és az oxigén hemoglobin általi felszabadulását. Ebben a tekintetben a 2,3-difoszfoglicerinsav eritrocitákban történő jelentős felhalmozódása bizonyos kompenzációs szerepet játszik..

A hemoglobin oxigén iránti affinitása csökken, ha kölcsönhatásba lép a 2,3-difoszfoszliceráttal. Ezért, a testben a 2,3-difoszfoglicerát-tartalom növekedésével megkönnyíti az oxigén felszabadulását a szövetekbe.

A piruvát kináz aktivitás hiányának klinikai megnyilvánulásai

A piruvát-kináz aktivitás hiányának klinikai megnyilvánulása a hemolízis mértékétől függ. Bizonyos esetekben a fokozott hemolízis születésétől kezdve nyilvánul meg, és gyakori súlyos hemolitikus válságok kísérik, vérátömlesztés szükségességét okozva, hogy a hemoglobin szintje normális szinten maradjon. Más esetekben a betegség szinte tünetmentes lehet a fokozott hemolízis első jeleivel. (subictericus sclera és a bőr) 17-30 évesen.

Általában; összehasonlítva a mikroszferocitózissal, a piruvát-kináz-hiányt súlyosabb lefolyás jellemzi.

A lép szinte minden betegnél tapintható.. Az anomália néhány heterozigóta hordozójában enyhe növekedést írnak le, bár vérszegénységük van, általában, hiányzó. Néhány betegnek splenomegalia lehet.. A máj jelentős megnagyobbodása ritka. Elszigetelt betegeknél lábfekélyeket észlelnek..

A piruvát-kináz aktivitás hiányának laboratóriumi mutatói

A piruvát-kináz aktivitás hiányában szenvedő betegek többségének mérsékelt vérszegénysége van. (4,34- 6,21 mmol / l, vagy 70-100 g / l), válság idején azonban a hemoglobin-tartalom 3,1— 3,72 mmol / l (50-60 g / l). Az eritrociták tartalma 2,5-3,0 T in 1 l. A hemolitikus kríziseket fertőzés okozhatja. A menstruáció alatt fokozott hemolízis eseteit írták le.

Piruvát kinázhiányos betegek vörösvértestjei normochromiával járó macrocytosis jellemzi, enyhe anisocytosis és poikilocytosis. Mérsékelt polikromatofília. Néha megcélzott vörösvértesteket és kagylós élekkel vagy eperfajtájú vörösvértesteket találnak, az eritrociták bazofil szúrását gyakran észlelik, Jolly részecskéken. Néhány betegnél jelentős mennyiségű erythrokaryocyta található a perifériás vérben., válság idején 60-70-re emelkedhet %. ESR, leukocita szám, leukogram, a vérlemezkeszám normál határokon belül. Hasonlóan a hemolitikus vérszegénység más formáihoz, a csontvelőben a hematopoiesis vörös hajtásának éles irritációját észlelik.

Bilirubin szint, általában, közvetett miatt nőtt.

Plazma nélküli hemoglobin tartalom Normál, de a haptoglobin szintje csökkenhet. A vizeletben nincs hemosiderin. Magzati hemoglobin és hemoglobin A tartalom₂ normál határok között.

Az eritrociták ozmotikus rezisztenciája piruvát-kinázhiánnyal a legtöbb esetben normális, néha egy éjszakai inkubáció után csökken. Autohemolízis, általában, változó mértékben nőtt. Normál autohemolízissel rendelkező piruvát-kináz-hiány eseteit írták le. A piruvát-kináz-hiány első ismertetett eseteiben II-es típusú autohemolízist regisztráltunk, korrigálták ATP hozzáadásával és nem korrigálták vagy rosszul korrigálták glükóz hozzáadásával. Később számos esetben leírtak enzimhiányt I. típusú autohemolízissel vagy anélkül.. Ezért nem ajánlott az autohemolízis módszerét alkalmazni a hemolitikus vérszegények differenciáldiagnózisához.. A piruvát-kináz aktivitás hiányában szenvedő vörösvértestek élettartama mindig rövidül.

A piruvát-kináz aktivitásának öröklődési mintázata autoszomális recesszív. A heterozigóták gyakorlatilag egészségesek, különféle kutatók szerint, a bennük lévő hiány súlyossága a következőktől mozog 50 hogy 70 % normák.

Diagnózis hiány aktivitások piruvatkinazы

Az eritrocita piruvát kináz hiány diagnosztizálása feltehetően hemolitikus anaemia esetén is elvégezhető, sok éven át megnagyobbodott lép, a perifériás vérkenetekben a mikroszferocitózis jeleinek hiánya, elliptocytosis és stomatocytosis.

Kvalitatív tesztek a piruvát-kináz aktivitásának meghatározására. Erre a célra széles körben alkalmazzák a fluoreszkáló foltok módszerét., alapján, hogy a reakció során, piruvát-kináz katalizálva, a nikotinamid-dinukleotid oxidálódik és a fluoreszcencia eltűnik.

Egészséges emberekben a piruvát-kináz aktivitása a 4,0 hogy 7,7 mmol (perc / 1010 eritrocita) vagy innen 4,0 hogy 7,7 Hatalom. A patológia legtöbb homozigóta hordozójában az enzimaktivitás kisebb, mint 1 Hatalom. Előfordulhat azonban az enzimaktivitás enyhe csökkenése.. A hemolitikus vérszegénység ilyen ritka formáinak diagnosztizálása nagyon nehéz., és a diagnózist csak az enzim kinetikájának tanulmányozásával lehet felállítani.

A hemolitikus anaemia differenciáldiagnosztikája, piruvát-kináz-hiányhoz társul

A hemolitikus anaemia differenciáldiagnosztikája, piruvát-kináz-hiányhoz társul, örökletes hemolitikus vérszegénység egyéb formáival kell elvégezni.

Mivel a legtöbb beteg esetében a piruvát-kináz aktivitás hiánya, ellentétben az egyénekkel, mikroszferocitózisban szenved, elliptocytosis, sztomatocitózis, hemolitikus anémia, instabil hemoglobin hordozása miatt, és thalassemia esetén a betegség autoszomális recesszív módon öröklődik, akkor ez a patológia csak ugyanabban a generációban fordul elő, és szinte soha nem figyelhető meg a szülők körében.

Örökletes vérszegénységgel, instabil hemoglobin hordozása miatt, különösen súlyos betegség esetén, néha a proband a mutáció első hordozója, majd a betegség átterjed a következő generációkra. Ezért a differenciáldiagnózist hemoglobinopátiákkal kell elvégezni, instabil hemoglobin hordozása miatt, valamint recesszíven öröklődő hemolitikus vérszegénységekkel, más enzimek aktivitásának hiánya miatt.

A hemoglobin stabilitás meghatározása kisegítő szerepet játszik, elektroforézise. Az egyéb fermentopátiák kizárása érdekében az eritrociták más enzimjeinek aktivitását vizsgálják, és az autoimmun hemolitikus vérszegénység kizárására Coombs-teszteket végeznek, összesített hemagglutináció.

Fluoreszcens módszer a piruvát láz aktivitásának meghatározására a módszerrel Beutler

Reagensek.

1. Foszfoenolpirohav (triciklohexilammóniumsó) 0,15 M oldat, pH = 7,0-8,0 értékre semlegesítjük 0,2 M-oldat MaOH (0,03 ml).
2. ADF 0,03 M oldat, semlegesítették (0,1 ml).
3. OVER-N 0,015 M oldat, semlegesítették (0,1 ml).
4. Magnézium szulfát 0,08 M oldat (0,1 ml).
5. Kálium-sók foszfátpufferoldata 0,25 M, pH 11 7,4 (0,05 ml).
6. Desztillált víz (0,62 ml). A keverék hőmérsékleten tárolható - 20 ° С legfeljebb egy hét.

Módszer.

A vért felhasználják a kutatáshoz, heparinnal vagy nátrium-citrát oldattal. Centrifugáljuk, szívja be a plazmát és készítse elő 20 % vörösvértestek szuszpenziója négy térfogat izotóniás nátrium-klorid-oldat hozzáadásával.

Az eritrociták mennyiségi szuszpenziója 0,02 ml keverve 0,2 ml reagenskeveréket és inkubáljuk 30 perc hőmérsékleten 37 ° C. A cseppet szűrőpapírra helyezzük és fluoroszkóp segítségével nézzük. A kezdeti fluoreszcenciát azonnal kimutatjuk, miután az eritrocitákat az inkubálás előtt hozzáadtuk a keverékhez. Normális esetben 30 perces inkubálás után eltűnik, és piruvát-kináz-aktivitás hiányával,. Ez, hogy a NAD-H ultraibolya sugárzás hatására fluoreszkál a területen, közel a láthatóhoz, mivel a NAD nem fluoreszkál. Annak a ténynek köszönhetően, hogy a NAD megoldás instabil és könnyen megsemmisül, szükséges, hogy figyelemmel kell kísérni. A leukociták rétegét gondosan el kell választani, mivel vörösvértest-piruvát-kináz aktivitás hiánya esetén az enzim aktivitása a leukocitákban normális lehet.