Nasledstvennaya gemoliticheskaya anemije, zbog aktivnosti piruvat kinaze nedostatka crvenih krvnih stanica

Nasledstvennaya gemoliticheskaya anemije, Povezano nedostatak eritrocita piruvat kinaza - relativno rijedak oblik hemolitičke anemije, koji je naslijedio u autosomno recesivno način, To daje kliničke manifestacije u homozigoti, nastavlja sa znakovima unutarstanični hemolize, macrocytosis eritrocita, nizak sadržaj kalija. Postoji više od 200 slučajevi homozigotnim nositelja manjak piruvatkinaznoy aktivnosti.

Patogeneza

Piruvat kinaza je jedan od enzima, zaključivši glikoliza. Ovaj link glikoliza i ATP formirana nikotinamiddinukleotid. Većina bolesnika s manjkom piruvat kinaze smanjena u sadržaju od crvenih krvnih stanica ovih dvaju metabolita, U nekim slučajevima, sadržaj ATP je normalno, ali poremećena stabilnost ATP vrijeme inkubacije. Normalne razine ATP naći na značajnom retikulocitoza. To je zbog prisutnosti retikulocita i mogućnost mitohondrijskog ATP, ne samo kroz glikolizu, ali i zbog oksidativne fosforilacije.

Posljedica piruvat kinaze nedostatka To je ujedno i nakupljanje produkata glikolizu, formirana u prethodnim fazama - fosfofenolpiruvata, 3-fosfoglicerata, i naročito 2,3-diphosphoglycerate. Sadržaj piruvatanlaktata smanjuje u crvenim krvnim stanicama.

Nedostatak ATP u eritrocitima piruvat kinaze nedostatak To dovodi do prekida funkcije ATP-aznogo pumpi crvenih krvnih stanica i gubitak kalijum iona, pri čemu je koncentracija natrij iona u eritrocitima non-povećanja. To uzrokuje smanjenje sadržaja jednovalentnih iona u eritrocitima, dehidracija stanice i njegove skupljanja. Ta se pojava naziva dessikotsitoz. Smanjenje crvenih krvnih stanica vode komplicira proces oksigenacija i kisika oslobađanje po hemoglobina. U tom smislu, neki kompenzacijski uloga značajnog nakupljanja u eritrocitima u 2,3-kiseline difosfoglitserinovoy.

Afinitet za hemoglobina kisikom smanjena interakcijom s 2,3-diphosphoglycerate. Stoga, pri višim koncentracijama za 2,3-diphosphoglycerate vraća kisika do tkiva olakšana.

Kliničke manifestacije aktivnost piruvat kinaze nedostatka

Kliničke manifestacije nedostatak piruvat kinaze ovise o stupnju hemolize. U nekim slučajevima, povećane hemoliza manifestira pri rođenju te je u pratnji nastanka teške hemolitičke krize, uzrokuje potrebu za transfuzija krvi za održavanje hemoglobina u sub-normalne razine. U drugim slučajevima, bolest se može pojaviti gotovo asimptomatski s prvim znakovima povećane hemolize (subikterichnost bjeloočnice i koža) u dobi 17 - 30 godina.

Obično; u usporedbi s microspherocytosis, piruvat kinaze Nedostatak je teža.

Gotovo svi pacijenti s opipljivom slezene. Blagi porast svojim objavljenim nekim anomalijama heterozigotni nosače, iako imaju anemiju, obično, nedostaje. Broj pacijenata moguće splenomegalija. Značajno povećanje jetre rijetko nalazi. U bolesnika s izoliranim čireva na nogama identificirati.

Laboratorijski pokazatelji aktivnosti piruvat kinaze nedostatka

Većina bolesnika s nedostatkom piruvat kinaze promatrati umjerena anemija (4,34- 6,21 mmol / l, ili 70-100 g / l), Međutim, tijekom krize hemoglobina može biti smanjen na 3,1 3,72 mmol / l (50-60 G / l). Sadržaj eritrotsitov- 2,5-3,0 T 1 l. Hemolitička kriza može biti uzrokovana infekcijom. Postoje slučajevi hemolizirajućeg dobiti za vrijeme menstruacije.

Crvene krvne stanice pacijenata s nedostatkom piruvat kinaze karakterizira macrocytosis s normohromiey, blagi anisocytosis i poikilocytosis. Tu je fer polychromatophilia. Ponekad pronašao mishenevidnye crvenih krvnih stanica i crvenih krvnih stanica s scalloped rubova ili u obliku duda, često se poistovjećuje bazofilna eritrocita punktatsiya, Jolly tjelešca. Neki pacijenti u perifernoj krvi pokazuju značajan broj erythrokaryocytes, tijekom krize, to se može povećati do 60-70 %. ESR, Broj bijelih krvnih stanica, leukogram, broja trombocita unutar normalnog raspona. Kao i kod drugih oblika hemolitičke anemije, u koštanoj srži otkriva oštar iritacije hematopoetska matičnih crvena.

Razina bilirubina, obično, povećan zbog neizravna.

Količina slobodnog hemoglobina u plazmi normalan, ali on može biti smanjena razina haptoglobina. Hemosiderin u mokraći je odsutan. Fetalni sadržaj hemoglobina i hemoglobina₂ u granicama normale.

Osmotska rezistencija eritrocita nedostatak piruvat kinaze u većini slučajeva normalnih, ponekad smanjen nakon dana inkubacije. Autogemoliz, obično, nadograditi na različitim stupnjevima. Postoje slučajevi piruvat kinaze nedostatka s normalnom autogemolizom. U prvi izvijestio slučajeva nedostatak piruvat kinaze je registrirana tipa II autogemoliza, ispravlja dodavanje ATP, a ne ispravlja ili blago ispravljanje dodatak glukoze. Nakon toga, mnogi slučajevi opisani su s vrstom nedostatka enzima sam autogemoliza ili ne. Stoga se ne preporučuje primjenjivati ​​metodu autogemoliza za diferencijalnu dijagnozu hemolitičke anemije. Životni vijek crvenih krvnih stanica s nedostatkom piruvat kinaze uvijek je skraćen.

Vrsta nasljedstvo piruvat kinaze autosomno recesivno. Heterozigoti praktički zdravi, Prema različitim istraživačima, ozbiljnost deficita su u rasponu od 50 za 70 % norme.

Dijagnostički aktivnost piruvat kinaze nedostatka

Dijagnoza piruvat kinaze nedostatka crvenih krvnih stanica može se očekivati ​​da dostavi u slučaju hemolitička anemija, teče tijekom godina s povećanjem slezene, Nedostatak periferne krvi mazivi znakovi microspherocytosis, elliptotsitoza i stomatotsitoza.

Kvalitativni testovi za određivanje aktivnosti piruvat kinaze. Za ovu svrhu, postupak je naširoko koristi fluorescentnu mrlju, na temelju, da u toku reakcije, kataliziruemoy piruvatkinazoy, nikotinamiddinukleotid oksidirani, a fluorescenciju nestaje.

Aktivnost piruvat kinaze u zdravih pojedinaca u rasponu od 4,0 za 7,7 mmol (min / 1010 eritrociti) ili 4,0 za 7,7 Snaga. Većina homozigotične aktivnosti bolesti enzima manje 1 Snaga. Međutim, postoji svibanj biti slučajeva blagi pad aktivnosti enzima. Dijagnoza rijetkog oblika hemolitička anemija je vrlo teško, i dijagnoza može biti samo u studiju enzimskih kinetike.

Diferencijalna dijagnoza hemolitičke anemije, povezana s nedostatkom piruvat kinaze

Diferencijalna dijagnoza hemolitičke anemije, povezana s nedostatkom piruvat kinaze, potrebno provesti druge oblike nasljedne hemolitičke anemije.

Budući da većina bolesnika s nedostatkom u piruvat kinaze razliku pojedinaca, patnje microspherocytosis, elliptotsitozom, stomatocitozom, hemolitička anemija, uvjetovan prijevoz nestabilno hemoglobina, i talasemija bolest nasljeđuje autosomno recesivno, da je to patologija je pronađen samo u istoj generaciji i gotovo nikada nije vidio među roditeljima.

Kad nasljedne anemije, uvjetovan prijevoz nestabilno hemoglobina, posebno u teškom bolesti, Ponekad vrpca je prvi nositelj mutacije, te bolest se prenosi na sljedeću generaciju. Stoga, diferencijalna dijagnoza mora provesti s hemoglobinopatijama, uvjetovan prijevoz nestabilno hemoglobina, kao recesivno nasljedna hemolitička anemija, uzrokovana manjkavo djelovanje drugih enzima.

On igra sporednu ulogu stabilnost hemoglobina, Yego elektroforeza. Isključiti druge fermentopathia istražuju djelovanje drugih enzima u eritrocitima, i isključiti autoimuna hemolitička anemija nosio Coombs, agregatgemagglyutinatsionnaya.

Fluorescentni postupak za određivanje aktivnosti prema piruvatkiiazy Beutler

Reagensi.

1. Fosfoenolpirovinogradnaya kiseline (tritsiklogeksilammoniynaya soli) 0,15 M otopina, neutralizirana do pH 7,0-8,0 0,2 M otopina NaOH (0,03 ml).
2. ADF 0,03 M otopina, neutraliziran (0,1 ml).
3. NAD-N 0,015 M otopina, neutraliziran (0,1 ml).
4. Magnezij sulfat 0,08 M otopina (0,1 ml).
5. Fosfatni pufer otopina kalij 0,25 M, pH 11 7,4 (0,05 ml).
6. Distillirovannaya voda (0,62 ml). Smjesa se može čuvati na - 20 ° C ne više od jednog tjedna.

Način.

Za istraživanje uporabe krvi, uzet s heparinom ili natrijev citrat. To se centrifugira, aspirira i pripremiti plazmi 20 % Suspenzija crvenih krvnih stanica dodavanjem četiri volumena izotonična otopina natrij klorida.

Eritrocita suspenziju u količini 0,02 ml se pomiješa s 0,2 ml reagensa i inkubira 30 minuta na 37 ° C. Kapljica je stavljen na filter papiru i pregledavanja radioskopski. Osnovna fluorescencija se otkriti odmah nakon dodatka eritrocita u smjesi prije inkubacije. Obično nakon 30 minuta inkubacije nestaje, i aktivnost nedostatka ostataka piruvat kinaze. To je, NADH koji fluorescira pod utjecajem UV zračenja u području, u neposrednoj blizini vidljivi, dok NAD ne fluoresciraju. Budući da je otopina gore je nestabilan i lako razgrađuje, zahtijeva praćenje. Trebali biste pažljivo odvojiti sloj bijelih krvnih stanica, Budući da je djelovanje piruvat kinaze nedostatka eritrocita enzimske aktivnosti u leukocitima može biti normalno.