Mikroskopsko ispitivanje cerebrospinalne tekućine
Određivanje cytosis
U likvoru zdravih osoba sadrži vrlo mali broj stanica. Klinički značaj imaju uglavnom leukocite (Limfociti). Računati bijelih krvnih stanica se ne miješaju eritrociti, Oni uništiti ih dodavanjem nerazrijeđeno cerebrospinalne tekućine 1/10 dijelova octene kiseline fuksina. Magenta boje jezgrom stanice u crvenom. Za slikanje leukocita pomoću reagensa Samson (mješovit 30 mL ledene octene kiseline, 2 ml ukapljenog fenola, 2 ml spirtovogo otopine fuksin 1 : 10 i dolivayut 100 ml destilirane vode). Reagens otporni, dobri mrlja stanice i nekoliko sati ih čuva od citolizom.
Oni također mogu biti otopina, koji sadrži 5 ml 10 % octena kiselina 0,1 Gospodin metilvioleta. To je manje stabilna, Stanice obojiti plavom bojom.
Zbog citotoksičnih svojstava likvoru brojati broj stanica treba biti odmah nakon uzimanja. Tekuća se dozira u epruvetu ili mikropipeta kapi proporcionalno 10 dijelovi likvoru i 1 bojanje rješenja i ostavite 10-25 minuta za bojanje stanica. Za rasplod se mogu koristiti mikser leukocite. Stanice cerebrospinalna tekućina vrlo brzo staviti na zidove cijevi, pa tekućina, okvir in vitro, Prije studija mora biti temeljito miješati rotacijskih pokreta između dlanova.
Da biste izračunali broj stanica se koristi Fuchs kamera-Rozentalya. Brojanje proizvode cijeloj mreži putem 5 min nakon punjenja komore. Broj stanica 1 l daje:
X =(A * 11)/(3.2*10)
pri čemu je X - broj stanica u 1 l; A - broj stanica, broje na površini ekrana; 3,2 - Volumen komore; 11/10 - Razrjeđivanje.
Dopušteno registracija rezultata računati kao razlomak, npr 14/3, gdje 14 - Broj stanica broje u komori, 3 - Zaokruživanje volumen komore. Uz veliki broj stanica je dovoljna da im strani u jednoj polovici rešetke, a dobiveni broj udvostručavanja. S izrazitim pleocytosis (značajan porast broja stanica) dopušteno računati stanice 16 Mali trgovi i množite taj broj po 16.
U nedostatku Fuchs-Rosenthal komore može se koristiti Brojanje komora Goryaeva sa značajno nižim kapacitetom, stoga ne broj stanica je manje od tri kvadrata, izračunati aritmetičku sredinu i umnožiti ga na 1,2. Modifikacijska 1,2 dobivenog iz formule
X =(A * 11)/(0.9*10)
gdje je 0,9 kapaciteta kamera, 11/10 - Razrjeđivanje.
Kada brojanje stanica u likvoru nerazrijeđenom jedan od prvih kapi, proizlaze iz iglu, stavi se u radu Fuchs-Rosenthal i odredio broj stanica, kao što je gore navedeno.
Inače, a broj stanica koje (Limfociti) u 1 l likvor iz komore mozga i cerebralna spremnika mozga je 0-1, i tekući, dobiva lumbalna punkcija - 2-4.
Djeca mlađa od tri mjeseca 1 l likvor se utvrdi da je 20-23 stanice, do godinu dana - 14-15, do dvije godine - 11-14, od dvije do pet godina - 10-12, od pet do sedam godina-8-10, sedam do deset godina - 6-8, više od deset godina - 4-5.
Kad meningitis, tumore mozga apscesa i broja stanica u cerebrospinalnu tekućinu povećava.
U istraživanju hemoragijske likvora u nekim slučajevima potrebno je uspostaviti svoju pravu cytosis. Za ovu svrhu Friedman metoda: hemoragijskog tekućina dobitak reagens Samson odrediti broj stanica i izotonična otopina natrijevog klorida za brojanje broja crvenih krvnih stanica 1 l likvor.
Na Primjer, Broj stanica po 1 l - 20, broj crvenih krvnih stanica - 3600. Broj crvenih krvnih stanica i bijele krvne stanice prepoznaju pacijenta s općom analize, provesti prije lumbalna punkcija. Na Primjer, u 1 ml krvi 4 200 000 eritrocita, 7000 leukociti. Stoga se mora leukocita 4200000/7000 = 600 eritrocita.
Da biste dobili pravu vrijednost cytosis ravnati:
na 600 crvenih krvnih stanica - 1 leukocit;
na 3600 eritrociti - X leukociti, Stoga,
X = 3600/600 = 6 леикоцитов.
Istina likvor cytosis 20-6 = 14 stanica 1 l.
Primjena ovog postupka je ograničeno, budući cerebrospinalna tekućina sa značajnim primjesama krvi nije prikladan za takvu analizu.
Kvantifikacija eritrocita u likvoru Je postavljen da uspostavi ozbiljnost stanja pacijenta na intrakranijalnim hemoragije.
U prisutnosti 1 l 2000-5000 eritrocita likvor je obojena u ružičasto, 900-1000 Eritrociti - samo malo opalescentna. Bezbojna tekućina može detektirati niskim sadržajem crvenih stanica. Klinički značaj je povećanje dinamike razinu crvenih krvnih stanica.
Mobitel diferencijacija likvor To održava u brojanje komore u obliku native i obojeni.
U velikim povećanjem (10X ili 15X okular, 40X objektiv) u brojanje komori plaćati pozornost na količinu stanica, oblik, mjesto i veličina jezgre, Prisutnost omogućen citoplazmu. To je lako razlikovati limfocita, neutrofilnim granulocitima, makrofagi. Normalno, u cerebrospinalnoj tekućini sadrži samo limfociti.
Za potpunu karakterizaciju staničnog sastava likvora proučavali obojenih pripravaka. Stanice su bojane gore tekućine, od krvnih stanica. Postoji nekoliko načina za bojanje: od Rosina, Ludiranje, Papa, Alekseev, Može Gryunvalydu, Pappengeymw.
Određivanje prirodu metodom fluorescentne mikroskopije pleocytosis
Obrano stakalce obloženo i kap cerebrospinalne tekućine pomiješajte ga s fluorkrom bojom (mješavina vodenih otopina soli akridin narančasto i rodamin u uzgoju 1:20000). Mješoviti lijek se ispituje pod fluorescentnim mikroskopom ML-2 u svjetlu plavo-ljubičaste u vidljivom spektru, pomoću kombinacije uzbude filtera: FS 1-4, SZS 14-4, BS 8-2 i zaključavanje filter LS-1 uranjanje leće. Kao neflyuorestsiruyuschego uranjanje ulje koristiti za istraživanje dimetil (orthophthalic kiselina dimetil ester).
U tamnoj pozadini vidnom polju i limfocita polynuclears lako identificirao zelenom sjaju citoplazmi. Točka red 100 ćelija, s obzirom na broj limfocita i neutrofila.
Limfociti različit od prirode neutrofila jezgre (glybchatoy struktura s narančastim inkluzije) i svijetlo zeleni fluorescentni.
Neutrofilnim granulocitima imaju jasnu strukturu, njihova jezgre kromatina difuzno osvijetljen, jedinstvena svijetla- zelena. Citoplazmatski žuta- zelena, to raspršena crvenosmeda granule.
U slučajevima manjih cytosis nativni likvor centrifugira i talog studija.
Fluorescentno mikroskopski pregled likvora olakšava zaključiti da neutrofila, limfocitna ili stanica priroda polimorfonuklearnih pleocytosis.
Morfološke karakteristike stanica likvora
Limfociti
U likvoru zdravih pronađeno mala i srednja limfociti (1-2 1 l) Veličina 4-6 mikrona. Ovaj okrugli obliku stanice s velikom jezgrom i glybchatym vrlo uzak citoplazmu.
Kad limfnog Pleocytosis (tuberkulozan meningitisa, cisticerkoze) uz pojavljuju male i srednje velike limfociti (8-9 M), ponekad je moguće otkriti izravnim dioba stanice s.
Broj limfocita (zajedno s drugim stanicama) povećava u likvoru u tumora mozga, Tijekom kronične meningitisa. Kada neurokirurški bolesti povećanje broja limfocita u postoperativnom periodu pojavljuje nakon povećanja broja neutrofila i ukazuje na povoljan rezultat.
Plazmaticheskie stanice
Plazma stanice mogu se otkriti u cerebrospinalnoj tekućini tek kada tekući dugo upala u mozgu i meningama. Morfologija stanice plazme kao, u krvi ili koštane srži točkaste.
Ovaj okrugli obliku stanice s ekscentrično nalazi jezgre i intenzivno boji, bazofylnoy citoplazmi. U nekim slučajevima broj njih može doći 26%. Postoji plazma stanica u postoperativnom razdoblju i na trom tijeku reparativnim procesa u ozljede mozga.
Gistiocitы
U normalnim likvoru ponekad nalaze u obliku pojedinačnih kopija.
Obojeni preparati histocita imaju veliku jezgru i relativno uzak citoplazmu. Količina stanice 7 za 10 m, okrugli ili nepravilnog oblika. Jezgra grah ili neobičnog oblika oštrice, normohromnaja. Jezgrama su vidljivi u prirodnim pripravcima iz faze kontrasta mikroskopije.
Kada tuberkulozan meningitis u cerebrospinalnoj tekućini otkriva veliki broj histocita, razmaknuti i klastera, a citoplazma bazofylnaya, intenzivnije obojana.
Prema dostupnim podacima, neke vrste glija stanica može transformirati u histocita. Veliki broj histocita detektiran u likvoru bolesnika, operiran na mozgu ili kralježnici (što ukazuje na reakciju aktivan tkiva i normalno zacjeljivanje rana), i pojedinaca, pate od tuberkulozan meningitis i cisticerkoza u trom trenutne upale. Kada su tumori mozga s invazijom u subarahnoidni prostor ili klijetke može pojaviti histocita u likvoru zajedno s izmijenjenom stanica i makrofaga, što je tipično za nastanak oko tumora jalove zone.
Makrofagi
Makrofagi su načinjeni od jednog- endotelne stanice i multi-obliku paukove mreže mater i monociti. Elementi endotela arahnoidne mater se odvoji od sincicija i postaju zaobljeni stanice, posjeduje amoeboid kretanje i prodiru u likvoru.
Makrofagi aktivno gutati i probaviti stanica i drugih elemenata, pada u likvoru u patoloških procesa, pridonosi njegovoj čišćenja. Inkluzije u citoplazmi makrofaga razlikuju lako u komori i obojeni.
Makrofagi fagocitozu eritrociti, uništeni ili nemodificirani neutrofilnim granulociti, masnih kapi, gematoidina kristali itd. Često u citoplazmi makrofaga vakuola različitih veličina su dostupni, ili jedan veliki vacuole, koji zauzima najviše citoplazmi, a jezgra je pomaknut na periferiji. U takvim slučajevima, stanica ima oblik prstena - krikoidna makrofage.
Normalno makrofaga u spinalnoj tekućini odsutan. Njihov nastup u normalnom broja stanica indikativno krvarenja ili upale u središnjem živčanom sustavu. Veliki broj makrofaga u likvoru u postoperativnom periodu označava aktivni sanacije (pozitivnim izgledima). Mali broj makrofaga ili njihov izostanak, kada je izrazio Pleocytosis - nepovoljan prognostički znak.
Zrnati lopte – pjena stanice
Zrnati lopte (pjena stanice) Makrofagi su velike s više inkluzija masti kapljica u citoplazmi.
To je najčešće stanice zaobljen oblik, magenta boje u tamno smeđe boje. U liječenju spinalne tekućine Sudan III zrnatih loptice obojana u narančasto-crvena.
Otkriven u likvoru kada ulazi u tekućinu iz ciste različitih etiologija, propadanje moždanog tkiva (s kapi masti), ponekad u postoperativnom razdoblju, u nekim tumorima mozga (kraniofaringiome, ependimom, i drugi.). Ako se tumor nalazi u blizini komore, granulata kugle često otkriven u cerebrospinalnoj tekućini iz ventrikula. Izvor zrnatih loptice su mikroglijama, i oligodendrociti, stanice vanjske ljuske plovila i obliku paukove mreže.
Neutrofilnim granulocitima
Neutrofilnih granulocita u likvoru sličan krvi neutrofilnih granulopitami, a citoplazma (u brojanje komore i izvornih pripremama) često pruži ili ima izbočinu (pseudopodia). Ova raznolikost stanica promatranih u prvih 10-15 minuta nakon uzimanja likvora i ukazuje na očuvanje neutrofilnih- sposobnost granulocita premjestiti. Karakterističan je segmentirani jezgra, broj segmenata u kojima varira od dva do pet; ubodne neutrofilnih granulocita su rijetki.
Kod skladištenja cerebrospinalne tekućine prije promjene neutrofilnih granulocita, od drugih stanica. Jezgre neutrofilnih granulocita Oni mogu biti razgrađene ili segmenti su zaobljeni, s jasnim konturama, spojeni tankim most; kasnije su se u obliku pojedinačnih peleta. Microphage, koji je pohranjen samo jedna jezgra segment zaobljeni oblik, tako sliči Loevit stanicu. Tu natečene neutrofilnim granulociti sa nejasna konturama segmenata, zauzima gotovo cijelu citoplazmu. U obojenih preparata mogu promatrati sve faze raspada neutrofilnih granulocita - oticanje jezgre do potpunog uništenja stanične strukture, kada su obrisi nisu vidljive citoplazmi, i temeljne segmenti bezobličan, koja se sastoji od mekih mesh kromatina. Članstvo tih stanica neutrofilnih granulocita može se postaviti samo na reakcije na peroksidaze: prisutnost zeleno-žutim ili smeđe granula u citoplazmi uništeni.
Ponekad, u likvoru javljaju neutrofilnih granulocita s piknotičkih jezgre kao nepravilno oblikovane grude hyperchromic.
Neutrofilnih granulocita pojavljuju u likvoru s krvarenja u subarahnoidni prostor, upalne bolesti živčanog sustava, nakon neurokirurških operacija. Prisutnost neutrofilnih granulocita u krvi u likvoru pokazuje upale moždanih ovojnica.
Dominacija neutrofila nepromijenjenim dokaz o postojanju akutne upale.
Iznenadna pojava neutrofilnih pleocytosis promatrati na poluvremenu od apsces ispod sluznice mozga.
Ako apsces, Smješten duboko u tkivo mozga, obično promatraju izrazio blagu pleocytosis uz prevlast limfocita.
Kada prigušenje upale u likvoru pojavljuju degenerirani oblici neutrofilnih granulocita.
Prisutnost modificiranih i nemodificiranih neutrofila je karakteristika tekućeg upalnog procesa. Pri tome treba uzeti u obzir, da neutrofilnim granulocitima pojavljuju nepromijenjen u likvoru u smjesi svježe krvi, U takvim slučajevima, morate definirati korektivne cytosis.
Eozinofilnih granulocita
Eozinofilnih granulocita u prirodnim uzorcima likvora iz ostalih stanica razlikuju prema prisutnosti karakterističnih velikog sjajnu pijeska, zapolnyayuschey citoplazmi. Stanice s dva plošni kernel rijetko, često promatraju mononuklerna obrazac. Morfologija u obojenih eozinofilnih granulocita istih, u krvi. Likvoru se najčešće nalazi uništene eozinofilnih granulocita.
Sadržaj eozinofilnih granulocita u spinalnoj tekućini u rasponu od cisticerkoza 1 za 46%.
Pojava meningitisa kao komplikacija arahnoiditis tsistitserkoznogo popraćeno neutrofilnih pleocytosis i smanjio broj eozinofilnih granulocita. Za abstsedirovaniya Echinococcus mjehurića u mozgu karakteriziran prisustvom u sadržaju neutrofilnih granulocita i eozinofilni, koji služi kao pomoćni značajka u to razlikovanje iz apscesa. Ponekad veliki broj eozinofilnih granulocita mogu naći u sadržaju ciste tumora mozga i leđne moždine (nevrinome, kraniofaringiome, ependimom, raka metastaze u mozgu). Značajna povećanje broja eozinofilnih granulocita u cerebrospinalnoj tekućini može se primijetiti ventrikula tsisternoskopii.
Nakon uklanjanja tumora mozga s aktivnom zacjeljivanju rana, postoperativnih povećanje broja eozinofilnih granulocita, koji se mogu smatrati kao lokalni alergijske reakcije na traumu moždanih ovojnica i apsorpcije proizvoda raspadanja tkiva.
Modificirane stanice i sjene stanice
Hvala citolitički svojstva cerebrospinalnog stanica fluida, sadržana u njemu za dugo vremena, zadržati samo konture citoplazmi i jezgri ostataka. Da biste utvrdili njihovu morfološku pripadnost nije moguće. U većini slučajeva te promjene podliježu neutrofilnih granulocita, ponekad malignih stanica tumora. Jednostavno proći citolizu obliku paukove mreže stanica i ependimalnim komore.
Tkiva bazofili se mogu naći u tekućini nakon neurokirurgije spinalnoj.
Stanice arahnoidne mater u likvoru
Stanice obliku paukove mreže Mater (arahnoэndoteliya) - Jedan sloj epitelnih stanica, mogu se razlikovati kao u brojanje brojanje komora stanica, i obojeni, pripremljen od mulja likvoru. Ova relativno velikih nepravilnog oblika stanice ili zaobljena s relativno malim kružnog ili ovalnog jezgre, centralno smješten.
Stanične jezgre su obojeni hipokromnih, a citoplazma - blijedo- ili sivo-plava boja, Tako je često nepravilne konture i sadrži inkluzije čestica fagocitoziraju (masnih kapi, stanični elementi, vakuoli). Citoplazmi stanica arahnoidne mater često uništena, u takvim slučajevima su otkrivena karakteristiku nucleus i citoplazme bilješke. Kromatina ima melkopetlistuyu kernele ili struktura zrna, ponekad čak jedna plava jezgra je. Veličina jezgre 5 za 19 m.
Prisutnost u likvoru jediničnih ćelija arahnoidne još nije dokaz patologije, kao ove stanice podstava subarahnoidni prostor i, Piling, pasti u likvoru. Povećanje broja stanica promatranih u arahnoidne arahnoiditisom, Mozak cisticerkoza. Sadržaj arahnoidne ciste nalaze se u odvojenim lokacijama obliku paukove mreže stanica i symplasts kao skupina jezgre različitih veličina i intenzitet boje, okružen blijedo citoplazmi bez jasnih granica između stanica.
Stanice koroidnom spletu
Od koroidni pleksus klijetki u spinalnoj tekućini može ući poligonalni, zaobljen, Ponekad veliki cilindrični (15-19 M) ćelija. Mali (4-5 M) jezgre nalaze se u centru ili ekscentrično, hiperkromatskim, citoplazma эozynofylnaya, intenzivno obojene. U citoplazmi stanica koroidnom spletu ima zrnatost, ponekad u obliku uključaka i razredi, Veličina 1-3 mikrona, okrugli ili nepravilnog oblika, zelenkasta ili plavkasto boje. Neke stanice mogu se otkriti ili zarobljeni od strane crvenih krvnih stanica vakuolarne.
Stanice koroidnom spletu najčešće nalazi u tekućina iz komore mozga.
Stanice ependimalnim ventrikula likvor u mozgu
Stanice ependimalnim ventrikula likvor u mozgu, dobiva lumbalna punkcija, To je jednostavno uništen u procesu kuhanja i bojanja. U obojenih mrlja imaju vrstu obrazovanja, koji se sastoji od ovalnim jezgrama s osjetljivom strukturom. U nekim stanicama sačuvani citoplazmi okružuje jezgru u obliku uske granice od.
Tekućina iz klijetki mozga su najčešći ependimalnim stanice s očuvanom strukturom, morfološki nalikuju stanice obliku paukove mreže mater, ali srž njihovog slikano svjetlije i imaju više natječaja, Homogena raspodjela kromatina. Stupovi od ovalnih ependimalnim stanica često istaknuo, Citoplazma ima sivkast ton. Tu posebno se nalaze i velike nakupine stanica, koji se ne može odrediti granicama pojedinih stanica.
