Metode za otkrivanje Leishmania u struganje pogođenim tkiva izolacijom čiste kulture

Kada sjetvu struganje zahvaćeno tkivo pacijenta da bi se određeni hranjivom mediju Leishmania množe i mogu se detektirati pomoću mikroskopije.

Reagens

Среда W.W.W. za uzgoj Leishmania (14 g agara, 6 g natrijevog klorida, o 150 ml defibriniziranom kunića krvi, uzeti izravno iz srca prije pripreme medija, 900 ml destilirane vode). U destiliranoj vodi, doda se natrij klorid i agar. Bocu koja sadrži medij se zagrijava do potpunog otapanja agara, te 20-30 minuta sterilizira u sterilizatoru na parnoj 147,1 kPa (15 at).

Ohladi se na 56 ° C agar dodao sterilnu defibriniziranom zec krv, miješa okretanjem tikvicu i puni u sterilne pipete 4 ml cijevi. Tikvica krvi agar u doziranje je u vodenoj kupelji na temperaturi 58 ° C. Cijevi sa srednjim savjete.

Nakon skrućivanja agara su smještene u inkubator na dan po 37 ° C za kontrolu sterilnosti i primanje tekućine kondenzat. Ako je proizvedena nije dovoljno, prije sjetve u sterilne staklenke, možete dodati oko 1 Jedan ml slijedećih otopina: 0,85 % natrijev klorid, 1 % pepton rješenje, Hanks otopini, laktalbumin hidrolizat ili drugih hranjivih medija u izotoničnih koncentracijama.

Metode otkrivanja Leishmania u strugotina od pogođenih tkiva izolacijom čiste kulture

Kada odaberete kulture pažljivo slijedite pravila sterilnost. Ispitivanje površina kože je obrisao s pamuk obrisak, navlaženom 70 % alkohol.

Nakon uparavanja alkohola oštar kraj sterilne očnu skalpel urezivanja dužine 2-3 mm kvrga. Od dna reza sa sterilnom Pasteurove pipete do struganja tkiva. Dobivena kap serozni-krvave tekućine se prebaci u epruvetu s okolinom. Manipulacija se provodi nekoliko puta, sjetve materijalu svaki put nova cijev. Uho utikači u parafin ili ih staviti gumene kape i smještena u inkubator na 22-24 ° C.

Procjena rezultata

Usjevi ispituju pod mikroskopom na dnevnoj bazi identificirati uzročnik. Istražite izvornih lijekova, pripravljen po metodi zdrobljenim kapi, Objektiv 40×40. Rezultati se smatraju negativnim sjetve, ako je u 40 dana patogen nije pronađen. Kulture su izdužene Leishmania (10-12 Mikrona s ožičenjem).

Primjena metode kulture je vrlo korisno kada tuberculoid oblik leishmanijazu, Dijagnostika da druge metode mogu biti manje učinkovite.