Metode za detekciju Leishmania u razmazu koštane srži
Reagensi za detekciju Leishmania
- Metil alkohol, ili apsolutna etilni alkohol, ili smjesa Nikiforov (Smjesu jednake količine etera i apsolutnom etanolu).
- Фосфатный буфер pH 6,9-7,1, za pripremu, od kojih je mješoviti 40 mL KH2RO4 (9,078 g suhe tvari KH2RO4 u 1 litra otopine) i 60 Na ml2PHO4 (11,876 g suhe tvari 1 litra otopine).
- Azureozin Romanovsky.
Metode otkrivanja Leishmania u razmazu koštane srži
Od točkaste koštane srži odmah nakon brigu, ne bi slomili ili deformirati stanice,priprema tanke mrlje. Ako gustom točkaste, napraviti otisak. Kada značajni krv u točkaste od njega izolirani na staklo a malo bjelkaste gruda masti, ako su razlikovati, i pripremiti ih razmaze.
Pripremljeni test je sušen na zraku, onda fiksna, kao krvnim razmazima. Suhi fiksiranog razmaza može biti pohranjen za nekoliko dana.
U razmazu izli razrijeđena u puferu bojanje Romanovsky (oko 3-5 ml) i otišao u 30 50 m. Nakon bojanja ispere s destiliranom vodom, suši i ispituje pod mikroskopom s uranjanje sustav.
Vrednovanje rezultata otkrivanja Leishmania u razmazu koštane srži
Usred Leishmania bolesti obično se nalaze u točkaste koštane srži u značajnom iznosu i, dakle, oni su vrlo lako za pronaći. Međutim, u ranoj fazi bolesti te u bolesnika liječi, identificirati uzročnik, To zahtijeva dugo pogled na sve razmazu (ne manje 40 m).
Leishmania pronađena u makrofagima ili ekstracelularno kao zaobljenim ili risovidnyh stanica 3-5 mikrona. Citoplazmi se boje sivo-plave boje, a jezgra - u crvenkasto-ljubičasta. U citoplazmi, smješteni kinetoplasts - šipkasti ili zaobljena obrazovanje, intenzivno obojena jezgra.
Za Leishmania ponekad uzeti pločice ili "krhotine" stanica (komočki citoplazmy, sadrži nuklearni materijal), naći u razmazima koštane srži, stranih mikroorganizama (npr, jednostaničnih algi), zarobljen u razmazu vrijeme slikanja. Obojeni razmaz su teže, nego Leishmania (tamno plava citoplazma i jezgra svijetle grimiz), kinetoplasts nedostaju.