Kemijska proučavanje likvoru
Glavne razlike u sastavu likvoru i krvnoj plazmi koje su, time, da je tekućina oko 300 puta manje proteina, znatno manje kolesterola, Glukoza i više kloridi.
Kemijski Sastav likvora To je odraz velike promjene, javljaju u središnjem živčanom sustavu.
Protein u likvoru
Normalno, u tekućini klijetki sadržavao 0,12-0,2 g / L proteina, od malog mozga tsisterny- 0.1-0.2, subarahnoidni prostor kralježnične moždine - 0,22 0,33 g / l.
Smanjenje ili povećanje spinalne tekućine proteina To ukazuje na patološki proces. Prosječan sadržaj bjelančevina ne daje razlog da se uskratiti prisutnost organskog lezije središnjeg živčanog sustava, zbog mogućih povreda omjera proteinskih frakcija likvoru. U skladu sa sastavom proteina normalnog likvora razlikuje od odsutnosti seruma i dodatne frakcije euglobulina.
Studija o podrijetlu proteina pokazala cerebrospinalne tekućine, skoro 10 % oni nemaju imunološki sličnost sa serumskih proteina i razvrstavaju se kao specifični proteini CNS.
Povećava sadržaj proteina u CSF To je zbog hemodinamskih poremećaja mozga i stagnacije krvi u žilama središnjeg živčanog sustava.
Prealbuminovaya dio u tekućini iz klijetki u mozgu je 13-20%, od cerebralna spremnika mozga - 7-13, tekućina, dobiva lumbalna punkcija,- 4-7 % Ukupni sadržaj proteina. Ova frakcija proteina nema blokada cerebrospinalne tekućine prostora, može se maskirati albumina nije uvijek dodjeljuju na najvišoj razini proteina u likvoru.
U tumorima mozga, i upalnih bolesti središnjeg živčanog sustava u likvoru smanjuje sadržaj finih frakcija (Albumin, a1- i α2-globulina) i povećana sadržaj grube (b- и c-глобулинов).
Identificirati visok sadržaj globulin u likvoru mogu koristiti Reakcija Pandey, temelju zamućenosti tekućine zbog proteina koagulacije utječu fenola. Provođenje ove metode drop reakcije omogućuje značajno uštedjeti test tekućinu, Često dostaviti u laboratorij u vrlo maloj količini.
Globulinovыe reakcije iako se koristi u laboratorijske dijagnostike, ali dajte samo približnu ideju o sadržaju proteina.
Količina proteina u likvoru određena je kao, u mokraći, metodom Brandberg-Robertsa-Stolnik ili Kolorimetrijska metoda pomoću sulfosalicilna kiselina i natrijev sulfat.
Intenzitet pomutnenyya, formirati dodavanjem u likvoru sulfosalicilna kiselina, razmjerna koncentraciji proteina.
U hemoragijski likvor sadržaj proteina može se povećati zbog proteine plazme. Po primitku likvora, Krv boje, pacijent treba uzeti krv iz prsta na cijevi i izotonična otopina natrij klorida da se dobije, bojen nešto intenzivnije, od tekućine. Cijevi sa likvoru i krvi treba biti iste debljine, a boje stakla. Boja razine tekućine u komparator, Oprezno se razrijedi dodatkom krvi izotonična otopina natrij klorida, zatim se centrifugira, a količina proteina u bezbojne preko prozirna- sedimentna tekućina. Vrijedi proteina u cerebrospinalnoj tekućini se dobiva oduzimanjem količine proteina u krvi razrijeđene s količinom proteina u tekućem hemoragični. Metodologija Ovo nije vrlo precizan, To se koristi u slučajevima, kada je promijenila boju hemoragijski cerebrospinalne tekućine nakon centrifugiranja.
Sadržaj proteina iz cerebrospinalne tekućine povećava kršenje hemodinamike, upalni, Nakon operacije na središnjem živčanom sustavu, kao i tumori mozga i leđne moždine. Značajna povećanja u iznosu od proteina se promatra u venske staze u vezi s povredom cirkulacije likvora. U takvim slučajevima, high-protein cytosis normalno - protein-stanica disocijacija. U suradnji s ona xanthosis karakteristika Sindrom Froana, koja je promatrana u tumorima mozga i leđne moždine. Smanjivanje količine proteina u likvoru je označen na njegovoj hipersekrecije i hidrocefalusa.
Reakcija Nonne-Apelt dlya specifična globulin. Sjedište sastoji u taloženju u prisutnosti globulina zasićene otopine amonij-sulfata. Reakcija se smatra pozitivnim ako je sadržaj u likvoru 0,05 % globulina i bolesti. To daje naznaku sadržaja globulina u spinalnoj tekućini.
Broj globulin značajno povećana u kroničnih upalnih procesa i degenerativnih u središnjem živčanom sustavu (meningitis, meningoэncefalit, opće paralize, Multipla skleroza). Povećanjem razine albumina, globulina slomljena odnos globulina u likvoru. Obično to varira između 0,2-0,3. Za točniju sliku udjelom proteina cerebrospinalne tekućine treba ih odrediti elektroforezom ili drugih kvantitativnih metoda.
Studija sastav proteina cerebrospinalne tekućine elektroforezom - Dugotrajan proces, od proučavanja sastava serumu. U likvoru 200-400 puta manje proteina, Stoga prekoncentrata (koncentriran) ultrafiltracijom u vakuumu, dializom protiv gummiarabika ili dextran, i uparavanje u vakuumu. Međutim, zadebljanje likvoru mogu izgubiti proteinske frakcije ili identificirati predmete. U vezi s ovim određivanje ima sumnje prednost proteinogram likvora elektroforezom na agar gelu ili poliakrilamida.
Elektroforeza u agar gelu u zdravom ljudskom cerebrospinalne tekućine izolirane y2– и c3-globulinы.
Osjetljivija metoda za frakcioniranje proteina likvora, ne zahtijeva zadebljanje, Je эlektroforez od poliakrilamidnom Gele, čime identificirati frakcije proteina 30-40, uglavnom u y-globulina.
Postupak prema immunoelectrophoresis otkrivenih u likvoru imunoglobulina, M, G, Sadržaj je 3-4 puta manja, serum: 2,65 мг / л IgG, 2,05 mg / l IgA i 0,24 мг / л IgM.
Britanski sastav cerebrospinalne tekućine proteina dobi prolazi velike promjene. Za djecu je karakterizirana niskom razinom albumina, iako je razina unaprijed- albumina udio je relativno visoka. Starije osobe uočeno povećanje IgA i IgG, koji se odnose na y-globulina.
Studij frakcijskog sastava cerebrospinalne tekućine proteina ima važnu dijagnostičku vrijednost, Budući brojnih bolesti CNS (Tumori, rasseânnom skleroze) ukupan iznos ne može mijenjati. Najviše dijagnostički vrijedno je simultano određivanje proteinskih frakcija, lipo- i glikoproteidov.
Osnovan, da akutnih upalnih bolesti živčanog sustava karakteriziran povećanim sadržajem najviše u spinalnoj tekućini a-globulina, za kroničnih upalnih procesa - imunoglobulin, i maligne neoplazme - β-lipoproteina.
Određivanje proteina Koloidni reakcija
Reakciite Lange na temelju, taj kontakt patološki promijenjena cerebrospinalna tekućina, sa fino podijeljenim koloidne otopine zlata kloridom u prisustvu elektrolita napredovanje koagulaciju i boja otopine promijenila.
Normalno, cerebrospinalna tekućina ne mijenja boju koloidne otopine zlata, On je i dalje crveno. Promijenite boju rješenja usvojena u patologiji procjene brojeve:
- Crvena - 0;
- crvena i ljubičasta - 1;
- Ljubičasta - 2;
- crvene i plave ili crvene i opal s malim taloženjem čestica - 3;
- plavkasto - 4;
- blago ružičaste boje s modrim primjesa i sedimentu - 5;
- bezbojan sedimentom - 6.
Razlikovati četiri vrste reakcije Lange:
- normalan, pri čemu je promjena boje ne pojavljuju na sve, ili tri - pet cijevi boja malo drugačiji od boja u upravljačkom cijevi (crvena sa slabim ljubičasta primjesa);
- degenerativnыy, karakteriziran promjenom boje u lijevoj polovini broja cijevi (od ljubičaste do izbjeljivanje) i izgled sedimenta; promatra u sifilis mozga, rasseânnom skleroze, tumori mozga i leđne moždine, omekšavanje mozga, i drugi.;
- upalni, koji nastoje promijeniti boju na desnoj strani, ili u srednjem redu cijevi; Meningitis promatrati na različitim etnologije;
- mješovito, naznačen time, da promjena boje u pojavljuje lijevo, i na desnoj strani reda cijevi; Mješoviti lezije uočene u membranama i moždanog tkiva.
Reakcija Takata-Ara dovršava ili potvrđuje reakcije Lange. Temeljeno na koagulacije proteina likvoru pod utjecajem žive diklorida i otopina mijenja boju u prisutnosti smjese otopine fuksina.
Tamo su Četiri vrste reakcija:
- negativan (normalan) - Ljubičasta boja mješavine promjena, Tekućina jasno;
- degenerativnыy - Gubitak plavo-ljubičaste taloga, u kojem je bistra tekućina;
- upalni - Mješavina ružičaste boje, bez nanosa, Vrijeme obezbojena;
- mješovito - Prozirna tekućina preko ružičaste taloga.
Reakcija Takata-Ara je osjetljiviji, od reakcije Lange.
Za dijagnosticiranje degenerativnih i upalnih procesa u CNS upotrijebiti mastiku reakcije.
Triptofanovaя reakcije i Levinson se koriste za dijagnosticiranje tuberkuloze.
Reakcija Friedman koristi za rano otkrivanje meningitisa. Princip je, da pod utjecajem kalijeva permanganata javljaju redoks procese i promjene boje likvoru, i pod utjecajem trikloroctene kiseline Istaloženi protein njemu sadržani. Za ozljede, Tumori, sifilis mozga, MS boja tekućine ne mijenja.
Likvoru se detektira 20 za 25 slobodne aminokiseline. Za istraživanje sastav aminokiselina iz cerebrospinalne tekućine kromatografije uporabom suvremenih metoda, ïonoobmennoy flyuorometrïï.
Sadržaj slobodnih aminokiselina i amino dušik u cerebrospinalnoj tekućini u prosjeku 0.6- 1,4 mmol / l, ispod, nego u plazmi - 9/01-8/2 mmol / l.
Važnu ulogu u dijagnostici bolesti živčanog sustava su studije sadržaj u cerebrospinalnoj glukoze tekućine, Enzimi, kloridi, bilirubin, kolesterol i zaostala dušika.
Glukoza u likvoru
Normalno, u cerebrospinalnoj tekućini sadržavao 2,5 3,33 mmol / L glukoze. Da bi se odredila količina istih u cerebrospinalnoj tekućini pomoću bilo koje od metoda, koristi se za određivanje razine glukoze u krvi. Tekućina istražuje odmah nakon zarobljavanja, jer dolazi brzo glikoliza. Akutne i subakutne u upale moždanih ovojnica glukoze u cerebrospinalnoj smanji tekućina, ponekad (što je vrlo rijetka) potpuno nestaje. Najčešće, u cerebrospinalnoj glukoze tekućine je odsutna u streptokokne i meningokokne meningitisa.
Povećana razina glukoze zabilježen je u likvoru i epileptičkog encefalitis. Kad tumori mozga glukoze može ni rasti, i ispustite.
Mliječna kiselina u likvoru
U likvoru zdravih enzimskim postupcima određuje prosječni 1,54 (0,89-2,8) mmol / L mliječna kiselina.
Većina znatno povećava sadržaj mliječne kiseline u likvoru pod hipoksije i destruktivnih procesa u tkivu mozga, to nije samo dijagnostički, i prognostički vrijednost. Enzimi, sudjeluje u metabolizmu CNS, naći u likvoru u mnogo manjem broju, nego u krvi, i određuju se istim postupcima, i da je u krvi.
Budući da većina glikolitičkih enzima aldolaze i laktat dehidrogenaze su određene i njene izoenzima.
Kloridi u likvoru
Sadržaj klorida u likvoru normalno odraslih 197-242 mmol / l, u djece - 195-204 mmol / l. Za određivanje razine klorida u likvoru mogu koristiti bilo koje tehnike, koristi za proučavanje krvnih klorida, Međutim, preferirani način primjene određuje volumen tekućine titracijom sa srebrnim nitratom.
Smanjenje klorida promatrati u tuberkulozan meningitisa, ponekad - s encefalitis, povyshenie- u uremije.
Bilirubin u likvoru
Bilirubin u likvoru i tekućine iz ciste na mozgu hematogenozni podrijetlo i uzrokuje xanthosis. Za kvalitativno i kvantitativno određivanje bilirubin koristi isti uzorak, i da je za određivanje bilirubina u krvi. Normalno bilirubina u likvoru nisu otkrivene.
Kolesterol u likvoru
Kod zdravih ljudi, kolesterol u likvoru ili odsutan, ili njegov sadržaj iznosi od tragova 0,003-0,005 mg / dL. Povećana razina kolesterola uočene u meningitisa i tumora mozga, osobito malignog.
Da biste utvrdili kolesterola u likvoru mogu koristiti Engelhardt-Smirnov metoda ili Metoda Ilka.
Normalno, zaostali sadržaj dušika u cerebrospinalnoj tekućini u prosjeku 8,6-14,3 mmol / l, t. je. na 50 % ispod, nego u krvi.
Razina dušika zaostale u CSF je istražena istim postupcima, i da je sadržaj zaostalog dušika u krvi.
Glikoproteini i lipoproteini u likvoru
Proučavanje glikoproteina i lipoproteina održan elektroforezom na papiru u prethodno obložen gelom agaru ili poliakrilamidni rodnom ili likvoru. Ove studije se koriste za dijagnosticiranje upalnih bolesti i tumora.
U likvoru pokazala biološki aktivne tvari različite kemijske prirode:
- mediatorы (acetilkolin, noradrenalina, dofamin, Serotonin, gama-aminomaslyanaya Chisloth);
- hormona hipofize, epifiza i drugih endokrinih žlijezda;
- neuropeptidi (endorfiny, enkefalina);
- cikličke nukleotide (adenozintsnklofosfat, guanylic kiseline);
- prostaglandini;
- kinini.
Većina ovih biološki aktivnih spojeva određen radioimunoanalizom, koji se sve više koristi u kliničkim laboratorijske dijagnostike.