Studija o zgrušavanju krvi

Metode istraživanja u zgrušavanja krvi sustava uključuju sljedeće skupine:

1. indikativan (zajednička), daje ideju o stanju cijelog koagulacijske kaskade kao cjeline i njegovih pojedinih faza (registracija može se vizualno ili pojedinih uređaja - koagulografa, Thromboelastography et al.);
2. razlikovanje deficit pojedinih čimbenika - ispravak Testovi koagulacije, Ispitivanja miješanja krvi sa studija u krvnoj plazmi plazmi u bolesnika s poznatom poznatom nedostatkom određenih čimbenika;
3. Kvantifikacija pojedinih komponenti na njihova funkcionalna aktivnost sustava (testovi koagulacije, studije i druge kromogena supstrata) i (ili) na imunološke markere;
4. detektiranje aktiviranje intravaskularne koagulacije krvi i fibrinolize na funkcionalnih razloga i molekularnih markera kao aktivacijskih - detektirati u cirkulaciji aktivirane faktore zgrušavanja, Trombocita degranulacije proizvodi, cijepanje komponente sistema za koagulaciju krvi ili njihove metabolite, pojava novih antigena markere aktiviranih faktora i njihovih kompleksa, Ubrzani metabolizma obilježenog komponente sistema za koagulaciju krvi (smanje vrijeme poluraspada u opticaju).

Tako, u procjeni zgrušavanja krvi se koristi ispravno postupci koagulacije (laboratorij i instrumentalni), formiranje osnovu dijagnostičkog postupka, i imunološka, radionuklid i drugi oblici studija. U mnogim slučajevima, komponente sustava može se definirati kao funkcionalna aktivnost, i imunološki - sadržaj relevantnih antigena u krvi. Istodobna primjena tih tehnika omogućuje razlikovati oblike patologije, povezana s odsutnosti sinteze faktora zgrušavanja u odgovarajuće (u ovom slučaju ista kao i njoj se spušta funkcionalnu aktivnost, i količina antigena), i oblici, gdje je faktor molekula sintetizira, ali to je nenormalno i funkcionalno u kvaru.

Za označavanje obrise prvi faktor koji odgovara broju dodan u znaku „-” (npr, VIII, IX- i t. d.), au drugom - „+” znak (npr, VIII +, IX +).

procijenjena (zajednička) testovi koagulacije

Određivanje vremena zgrušavanja krvi

Određivanje vremena zgrušavanja krvi (poželjan postupak Lee-bijela) - odavno koristi bystrovypolnimy (pored postelje) indikativno Test, Pusti se utvrditi značajne poremećaje krvarenja, povezana s nedostatkom faktora zgrušavanja krvi (osim faktora VII) ili djelovanje zgrušavanja i fibrinoliticima. Ona se koristi kao vodič za ispitivanje i kontrolu heparin terapija, Uklanjanje heparinom protamin-sulfata. Test je relativno niska osjetljivost, njegovi parametri su slomljena samo kada je značajno smanjenje u plazmi faktora zgrušavanja (ispod 4-5 %), u vezi s onim što je prikladna za detekciju blage hemofilije A i B, kao i na poremećaje koagulacije angiohemophilia, Manjak faktora XI, prekalikrein i velike težine kininogena molekularne. Iz tih razloga, test se ne može koristiti za preoperativnoj procjeni bolesnika: pod normalnim uratka (5-10 min) može se pojaviti rasipan postoperativnih krvarenja.

Plazma rekalcifikaciju

Plazma vrijeme rekalcifikaciju - non-standardizirani niske test osjetljivosti, manje pouzdana za otkrivanje antikoagulantne, nego cijelo vrijeme zgrušavanja krvi. To se ne može preporučiti za dijagnozu poremećaja hemostaze.

Aktivirano parcijalno tromboplastinsko vrijeme, plazma

Aktivirano parcijalno tromboplastinsko vrijeme, plazma (APTT, kaolin-kefalinovыy ispitivanje) - vrlo osjetljiv postupak, otkrivanje povrede zgrušavanja kod pokretanja unutarnji mehanizam procesa. Selektivno osjetljivi na nedostatak plazme faktora koagulacije (kao nedostatak trombocita i faktora 3 trombocita kompenzirati izvana unesene cefalini ili eritrofosfatidom).

To se koristi za praćenje heparin, preoperativna bolesnici, itd. d. Standardni pokazatelji ovise o uzorcima koji se koriste kephaline, u većini slučajeva do 37-50 (optimalno - 37-45 s).

Kaolin vrijeme plazma

Kaolin vrijeme plazma - Test, slična prethodna, no bez dodavanja u plazmi kephaline (eritrofosfatida), s rezultatom da je osjetljiv, ne samo da nedostatak plazme faktora koagulacije, ali i nedostatka trombocita i faktora 3 Trombocita. Procijenjena procjena aktivnost ovog faktora može se provesti usporedbom vremena kaolin plazmu istraga s visokim i niskim sadržajem trombocita (norma - 57 - 70 s).

Ne preporučamo korištenje fosfolipida komponente, davanje u razli puta zgrušavanja jednaka 55 a i više, jer to dramatično smanjuje točnosti i ponovljivosti testa, uključujući kvantitativno određivanje faktora VIII i IX.

Vrijeme Silikonski plazma

Vrijeme Silikon plazma - vrijeme plazma kalcifikaciju, dobiven u uvjetima igle silikonirovaniya, cijevi, pipetok, t. je. uz minimum aktivacije kontakt. Test je osjetljiv na hiperkoagulabilna stanje-of intravaskularne aktivacije kontakt fazi pokretanja (faktora XI XII i), Međutim, ova povreda se jasnije otkriva definiranjem vremena silikon zgrušavanja pune krvi (temelji se na metodi Lee-bijelo ili tromboelastograficheskoy proces registracije na silikonsku kiveti).

Standardni pokazatelji ovise o silikona i određuje se ispitivanjem krvi zdravih ljudi za svaku it uzorak odvojeno. Prilikom odabira silikon je najbolje, koji je najviše produljuje vrijeme zgrušavanja (plazma).

protrombinsko (tromboplastinsko) vrijeme plazma

protrombinsko (tromboplastinsko) vrijeme plazma (Brzo vrijeme, protrombina indeksa) Što karakterizira brzinu plazma recalcified zgrušavanja kada počinje vanjski mehanizam procesa, t. je. dodavanje tromboplastinsko ljudskog mozga (ili zec).

tromboplastinsko aktivnost standardizirana na mješovitim normalnim uzorcima (test) plazma. Najčešće korišteni tromboplastinsko aktivnost s 12-18 (u klasičnom tehnikom s Kvika- 12-13). Slabije tromboplastinsko, više metoda greška.

U normalnoj plazmi Vrijeme protrombina ispitivanje otkrije izolirani ili kombiniranu nedostatak faktora protrombina kompleksa - VII, x, V i II, od kojih su tri faktora ((VII), X i II) K-vitaminozavisimy i njihova aktivnost se smanjuje pod utjecajem neizravnih antikoagulansa. U tom smislu, protrombinsko test je temeljno u kontroli kumarini doziranje (neodikumarin, ili pelentan, sinkumar i dr.) i drugi lijekovi iz ove skupine (fenilin).

Protrombinsko vrijeme je normalno s deficitom faktora unutarnje mehanizam aktivacije protrombinaze - Faktor XII, XI, IX, VIII (t. je. za sve vrste hemofilije i mana HAGEMAN), kao i nedostatak prekalikrein i kininogena visoke molekularne težine (VM kininogena)

U literaturi različitim Oznaka rezultata protrombin ispitivanja. Najbrži navesti protrombinskog vremena test i kontrolu krvne plazme u sekundi (koji daje informacije o aktivnosti i koristi tromboplastina). Ponekad je upotreba omjer tih dviju vrijednosti, t. je. indeks (PV studija plazma, iz ,)/(kontrolna plazma MF, iz), (stopa 0,9-1,1).

Drugi oblik procjene ovog pokazatelja, To se najčešće koristi u laboratorijima, To je za računanje indeksa protrombinsko postotak prikupljanjem povratnih aritmetičke razmjere (norma - 90-110%), Međutim, ovaj izračun je pogrešno, budući da nema aritmetička između koncentracije faktora zgrušavanja i vrijeme zgrušavanja, logaritamska odnos. Osim, protrombin Test osjetljiva samo na smanjenje faktora zgrušavanja ispod 50 % njihove normalne vrijednosti. Iz tog razloga, to je korisno koristiti definiciju protrombinskog indeksa Postotak krivulje razrjeđivanje (1:2, 1:4, 1:8 i t. d.) miješani uzorak normalnoj plazmi. Takva krivulja je konstruirana jednom PV različite početne aktivnosti (iz 12 za 18 iz) a indeks protrombin određuje ga u proučavanih pacijenata. Prednost ove tehnike se sastoji u tome, da su rezultati svih studija, uključujući one izvode u dinamici na različite dane, ne odgovaraju različitim uzorcima slučajnim krvi normalne plazme, te da u prosjeku iste standardne parametre, pri čemu je pogreška postupka znatno je smanjena. indeksi, dobiven omjeru i razrjeđivanja krivulje normalnoj plazmi, ne odgovaraju jedni drugima. To treba uzeti u obzir pri praćenju učinka neizravnih antikoagulansa, Za smanjenje konvencionalne indeksa na 50 % približno odgovara 25-30% krivulje indeksa smanjenje razrjeđivanje • U tom smislu, analiza uvijek treba navesti, Kako je indeks protrombinsko, Koji su standardi performansi za danom tromboplastinsko aktivnosti.

Plazma vrijeme trombina

Plazma vrijeme trombina, t. je. Zgrušavanje vrijeme citriranoj plazmi dodavanjem to standardnu ​​aktivnost trombina, To je veliki test za procjenu u završnu fazu zgrušavanja krvi. Uključivanje ovog pokazatelja je važna za ispravno tumačenje svih ostalih zgrušavanja krvi, Za kršenje završnoj fazi zgrušavanja krvi moraju neizbježno dovesti do produljenja vremena zgrušavanja u svim od navedenih metoda.

U većini slučajeva, tijekom ispitivanja, trombin koristi ovaj koncentraciju otopine trombina, koja, kada se miješa s istim volumenom koagulacije krvi plazme za davanje 12- 18 iz, ali u prepoznavanju disfibrinogenemy koristiti i slabije koncentracije (dovodi do smanjenja od 30-35 s).

Trombin vrijeme - Važan dijagnostički pokazatelj, povrede njihovih primijetio i kod rođenja, a zajedničko stečena (sporedan) gipoprotrombinemii, najviše disfibrinogenemy, kao i pod utjecajem heparin, proizvodi fibrinolize (PDF) i antithrombins i niz drugih sebi sklop inhibitori monomeri fibrina. Zbog toga, vrijeme trombina na prvom mjestu i više uznemireni akutni i subakutni DIC, koji igra važnu ulogu u brzom dijagnosticiranju ove patologije.

Autokoagulâcionnyj test

Autokoagulâcionnyj test (dopuštenje) - vrlo osjetljiv dva koraka, Ona opisuje proces zgrušavanja krvi na početku svog unutarnjeg mehanizma. Poput APTV, Test nije osjetljiv na nedostatak faktora VII, ali u isto vrijeme njegovo svjedočenje ne ovisi o sadržaju fibrinogena (faktora I) u proučavanju krvne plazme, kako se razlikuje od svih ostalih uzoraka indikativnim zgrušavanja.

Još jedna prednost je da je AKP, da istražuju razrijedi krv, čime se značajno povećava osjetljivost na nedostatak faktora koagulacije i, Osim, Provedba ACP ne zahtijeva korištenje kaolina i kephaline, jer standardizaciju kontakta i aktivirati fosfolipid hemolisate vlastite crvenih krvnih stanica postiže se istražuju.

Suština ovog Zakona je, koji se 2 ml hipotoničnoj otopini (0,222 %) doda se kalcijev klorid 0,1 ispitana je ml krvi.

U ovom hemolysate-kalcija Mješavina je oblikovana i protrombinaze trombin, Aktivnost je određena pomoću sekvencijalno dodavanje 0,2 ml ove smjese za 0,2 ml ispitivanog plazme (svaki 2 min tijekom prvih 10 m, a onda - svaka 10 min 1 ne).

Plazma je izvor fibrinogena istražena, na kojoj aktivnost testirana u trombina nastale smjese. Kao što je prikazano od strane brojnih studija, to može biti zamijenjen krvnoj plazmi zdravih osoba ili otopini fibrinogena. U tom slučaju, protok krvi pacijenta smanjena za 0.1-0,2 ml (To se može uzeti iz prsta!), što pretvara autokoagulyatsionny testnu mikrokoagulyatsionny (MKT) i to ga čini vrlo pogodan za pedijatrijsku upotrebu, uključujući proučavanje hemostaze u novorođenčadi.

Koagulacija aktivnost u ACP i MKT u početku povećava kod zdravih ljudi obično doseže maksimalno 10 minuta,, Inkubacijska smjesa krvi kalcij (KKS), Kada dođe do zgrušavanja supstrata plazme za 10 ± 1 sek. Zatim CCF koagulacije aktivnost počinje opadati, ukazuje da inaktivacije trombina nastalog u njemu. u hemofilije, djelovanje heparina i drugih poremećaja zgrušavanja koagulirajuće smanjuje oštro CCF, a maksimalni kreće od 10. minute na neki kasniji datum. Ako postoji Hiperkoagulabilno ranije i značajno povećanje aktivnosti trombina u HKD.

U provođenja testa u jednoj epruveti (definicija samo 10 minuta inkubacije KKS) može se koristiti za praćenje terapije heparin. Prednost ove metode preko aktivirano parcijalno tromboplastinsko vrijeme je, da niveliraju diferencijalni utjecaj na različite cefalini vrijeme zgrušavanja heparin.

Na temelju ACP (MKT) Razvio je jednostavan i precizan način diferencijalna dijagnoza hemophilias.

Uz pomoć dane u referentnim knjigama tablica prevođenja ACT čitanja (MKT) može se izraziti kao postotak i grafom - autokoagulogrammy.

Za procjenu broja općih parametara zgrušavanja krvi te se naširoko koristi instrumentalne metode ispitivanja, Povoljno pomoću različitih koagulografov i thromboelastography.

thromboelastography To daje ideju ne samo vremenskih parametara zgrušavanja krvi ili plazme, ali i na strukturu i mehanička svojstva ugrušaka formirana. U posljednjih nekoliko godina, i hardverskih metode registracije uveo standardizaciju i fosfolipida kontakt aktivaciju procesa zgrušavanja. Koagulacija također su stvorene za masovno izvršenje općih testova zgrušavanja - APTT, protrombinsko, trombina, a drugi s automatsko snimanje rezultata.

Metode za razlikovanje različitih nedostatak čimbenika koagulacije i njihove kvantifikacije

Tabličnim podacima ispod prikazuju, Procjenjuje se da je proučavanje zgrušavanja krvi pomoću tri osnovna ispitivanja omogućuje skupina razgraničenjem deficita različitih faktora zgrušavanja u plazmi. Tako, usporavanje zgrušavanja samo u testu protrombina (Tip I povrede) pod normalnim očitanja svih ostalih karakterističan nedostatak nasljedne faktor VII ili za smanjenje razine ovog faktora u ranim stadijima razvoja opstruktivne žutice, ili u prvih 1-2 dana liječenja s antikoagulansima neizravnog djelovanja, kada sinteza faktor VII Inhibicija napredak u razvoju svih ostalih reducirajućih faktora zgrušavanja K-vitaminozavisimyh.

Povreda jedini mehanizam unutarnje zgrušavanja, t. je. aktivirano parcijalno tromboplastinsko vrijeme i ACP (II tip), promatrati u nedostatku faktor XII, XI, IX, VIII, Willebrandov (ne u svim oblicima), prekallikreina i VM kininogena. Od onih s nasljednim grešaka koagulacijski faktor nedostatak XII, prekalikrein i raskinuti kininogcn VM je izuzetno rijetka i ne prati bilo krvarenja, dok faktora VIII nedostatak (hemofilija A), IX (hemofilija B) i von Willebrandov faktor je vrlo čest (je više 96 % sve nasljedne coagulopathies) te je praćena jakom krvarenja. Između njih na prvom mjestu i da provede dodatno diferencijalna dijagnoza.

Manjak faktora XI relativno rijetke (oko 0,5-1,0 % sve hemophilias), nastavlja s vrlo blagom hemofilijom (uglavnom nakon ozljeda i operacija) i zauzima položaj između prvog podskupini asimptomatskih poremećaja i hemofilija i von Willebrandove bolesti.

Druga vrsta povrede karakteriziran kao produžetak parcijalnog tromboplastinskog vremena i ACP, i protrombinsko vrijeme. To je karakteristika V nedostatka faktora, X ili II ili složene nedostatkom faktora K-vitaminozavisimyh ((VII), x, IX, II), ono u opstruktivne žutice i druge oblike nedostatka vitamina K-, kao i na standard primanje antykoahulyantov neizravne akcije.

I na kraju, kao što se može vidjeti iz ove tablice, moguće povrede svjedočenja sva tri testa (tipa IV), koji se obilježava u nasljedni i stečeni hypo- i disfibrinogenemiyah (ne svi), kada uzimaju antikoagulanse izravne akcije (geparina, gyeparinoidov, Hirudin i drugi.), Liječenje aktivatora fibrinolize i defibriniruyuschimi lijekova (streptokinaze, urokinaza i sur.), pojavljuje u krvi i patoloških antithrombins tvarima, sprečavanje veze (zbor) Fibrinomonomeri - paraprotein, cryoglobulins, imunološki kompleksi, kao i složene poremećaje koagulacije, izazvao DIC. U isto vrijeme trombina često je poremećen u većoj mjeri i više ranije, od drugih testova.

Kad se uzme u obzir ograničenja bolesti i mogućnost nasljedne porijekla ili sekundarnih veza s drugim bolestima i lijekovima ili drugi učinci, prisutnost ili odsutnost krvarenja i tipa ne može točno utvrditi postanak tih dubokih poremećaja zgrušavanja krvi.

Sve razlikovanje testovi temelje na načelu korekcije, t. je. o definiciji, u kojoj mjeri pokazala poremećaja krvarenja ili otkloniti, obrnuto, To potraje uzorke plazme krvi ili krvnih produkata dobivenih umjetnim jasno poznat nedostatak faktora koagulacije.

U tu svrhu, specijalizirane laboratorije stvoriti zbirku krvne plazme faktorodefitsitnyh, ih prima od pacijenata jasno utvrđeno duboko (manje 1 %) nedostatak svakog od faktora, te ih pohraniti u malim pakiranjima (po 0,5 ml) na temperaturi od - 30 ° C. Ako je potrebno, ovi uzorci se odmrznu i koristi se u dijagnostičkim testovima.

Plazma, su slučajno ili odmrzavanje preostali neiskorišteni, ponovno zamrzavanje ne podliježe. U odgojnoj ispitivanja ne smije se koristiti s imunološkim inhibitora u plazmi određenog faktora. Dijagnostički kitovi niza tvrtke sadrži uzorci plazme zamrzavanjem sušena određene čimbenike nedostatkom zgrušavanja (plazma supstrata). Međutim, mnogi poremećaji krvarenja rijetko vidjeti u kliničkoj praksi, u vezi s tim umjetno pripravlja koristeći uobičajene komponente krvi s nedostatkom određenih faktora zgrušavanja, kao i heterogenom plazmi (kokoši, pačići et al.).

Sljedeća tablica sadrži informacije o sadržaju faktora zgrušavanja u krvnim komponentama, koristi se za korekciju testova zgrušavanja, ovisno o uvjetima skladištenja. Koristeći ovu tablicu, lako dešifrirati čitanja bilo koje od tri glavna zgrušavanja krvi. Korektivne tehnike ove vrste koriste testovi, standardizirani kontakt i aktiviranje fosfolipida, t. je. kaolin ili kefalinovye koristeći hemolysate (na djelu).

plazmi miješanje testovi s krvnoj plazmi pacijenata, imaju jasno poznat nedostatak pojedinog faktora

Određivanje aktiviranog parcijalnog tromboplastinskog vremena u istraživanju krvne plazme, normalni plazma (kontrola) au plazmi jasno poznati faktor VIII nedostatak (pacijenata s hemofilije A), IX (od hemofilije B), И XI XII. Zatim, smjesa citratnih uzoraka plazme istražena (7/10 volumen) i u slijedu sa svakom od plazme deficijentna (3/10 volumen), počevši od faktora IX i VIII deficijencije (najčešći oblik bolesti!).

U smjesu se doda i kaolin Cephalin, i 2 min podvrgne rekalcifikaciju (na temperaturi od 37 ° C). Kao što je mješavina, gdje je aktivirano parcijalno tromboplastinsko vrijeme nije normaliziran, Ona ima isti nedostatak u zgrušavanju.

Tako, Ako je subjekt pacijent aktivirano parcijalno tromboplastinsko vrijeme nisu normalizirane dodatkom pacijenta krvnu plazmu jasno poznati faktor VIII deficijencije, ali ispravljen pacijenta u krvnoj plazmi s nedostatkom faktora IX, ima hemofilija A.

slično, ali na temelju testa protrombinskog razlikovati deficit protrombinsko kompleksa (x, V., VII i II).

Test tromboplastinsko generacije

Za prekršaje iz unutarnje diferencijacije mehanizma zgrušavanja krvi najčešće se koristi klasični Test tromboplastinsko generacije uz zamjenu trombocita komponente, Priprema što zahtijeva znatna ulaganja vremena i krvi, cefalini tromboplastinsko generacije ispitni nedostaci su njena obimnost, Hrana je potrebno veliki broj reagensa, vremena za njegovu provedbu.

ispravak testa, temelji se na osnovi ispitnog autokoagulyatsionnogo.

Brza dijagnoza problema u potpunosti zadovoljava još jedan ispravak testa, baziran na drugom korekcije, iste komponente normalnog krvnog testa na bazi autokoagulyatsionnogo.

Ovaj test je vrlo pouzdan, Brzina i jednostavnost implementacije i zahtijeva malo (ne više 0,5 ml) Količina krvi, on se može koristiti u pedijatrijskim bolesnicima.

U njemu, kao u tromboplastinsko generacije testa, se koristi za ispravljanje adsorbiranog plazmu i serum stari, koji se ponovo centrifugira prije studije. U tri bočice ulije 2 ml 0,222 % Doda se otopina kalcij klorida, a dvije od njih 0,1 adsorbirani ml normalnoj plazmi (1-ja bočici) i 0,1 stari ml normalne serumske (2-ja bočici). U tri epruvete pipeta 0,2 citriranoj ml normalnoj plazmi. Zatim u sve epruvete s otopinom kalcijevog klorida doda se 0,1 ml citra-krv testa.

točno jedan 4 min inkubacije, smjesa njegovog djelovanja zgrušavanja je ispitan u normalnoj plazmi.

Oštar pad zgrušavanja aktivnost samo u prvom cijevi (normalno BaSO₄-plazma) To ukazuje na prisutnost faktora nedostatka IX pacijenta (hemofilija B), Tek u drugoj cijevi (sa starim serumu) - deficit faktora VIII (hemofilija A); ako je korekcija odvija u dva epruvetama (jednako jaka), onda, očito, postoji nedostatak faktora XI ili XII (cm. Stol. 14).

Ovaj test je vrlo osjetljiv, Budući da je istraživanje provedeno na razrijeđenu 20 Vrijeme kada se naknada faktor u krvi 3 hemolysate trombocita. Jedini reagens korišten - Hipotonična otopina kalcij klorida, To je stvaranje javnoj raspravi.

Jednako jednostavna je metoda uzoraka korekcije, izvodi na temelju protrombinskog test za faktor diferencijacije II deficiency, VII + V и, x (u tablici).

Kako bi se razlikovali manjka faktora VII i X, dodatni koagulacijski test se izvodi uz dodatak ispitivanje plazme otopinu zmijskog otrova zmije - pripremu lebetoks (Koncentracija otrov se odabire tako, kephaline koji u prisutnosti kalcijevog klorida uzrokuje koagulaciju 20-25 s; svi sastojci su uzeti u količini 0,1 ml i mješavina) (tablica u nastavku).

S istim ciljem otrov priprema Russell Viper, stan u Indiji (priprema stipven).

Diferencijalna dijagnoza je završena, ako je potrebno kvantificiranja oskudnih faktora ili specifičnih inhibitora imunološke, Zašto su posebni vrlo osjetljive, standardizirane metode. Ove tehnike gradnje korišteni razrjeđenja krivulje mješovitih uzorcima normalnog krvnoj plazmi s nedostatkom faktora korekcije, Osim ispitivanja. Iz tih krivulja određena je aktivnost faktora za ispitivanje u plazmi pacijenata.

Pogotovo važan kvantitativno određivanje koncentracije faktora VIII i IX, kao i njihovim inhibitora u pacijenata s hemofilijom A i B (posebno prije i za vrijeme operacije i za vrijeme intenzivnog nadomjesne terapije), kao i odgođeni rasipan postpartum krvarenje, kada je potrebno razlikovati DIC ili rjeđe patologija - pojava inhibitor faktora VIII imuni (još uvijek znatno manje - Faktor V).

S dubokim nedostatak faktora XIII (vrlo rijetka nasljedna patologija) svi testovi zgrušavanja su normalni, ali otapanje ugrušaka u 5 M i 7 M urea.

Ona pomaže razlikovati različite nedostatak čimbenika koagulacije i također prema stupnju i, posebno, Uvjeti normalizacije dokaza testova nakon intravenske primjene na bolesnika krvnih produkata, t. je. prilagođen uživo Postupak u skladu s. 3. Barkagana.

Ova tehnika je posebno učinkovit kad je velika razlika u dugovječnosti u opticaju faktora diferencijabilan. Tako, pola očekivano trajanje života faktora protrombina varira od nekoliko sati (faktor VII) na nekoliko dana (faktor II). Međupoložaj između njih zauzimati X Factor (2-2.5 dana) i (V) (12-18 h).

Stoga, nakon masivne transfuzije jet indeks plazma protrombinsko povećava s faktor VII nedostatak vrlo kratko, Manjak faktora V - nešto dugo (oko 4-6 puta), a kad nedostatak X i faktor, posebno, II na duži period (tijekom 1-2 dana). Indikativno u tom pogledu, a učinak na indeks protrombinsko PPSB pripremi (faktor VII koncentrat, IX, X i II). Također se ukratko normalizirati protrombinsko vrijeme Manjak faktora VII i trajnije (mnogo puta!) Manjak faktora X i II. Budući da je ova droga nije Faktor V, deficit nije ih ispraviti.

Slična razlika detektira tijekom transfuzije i nadomjesne terapije faktora koagulacije unutarnji mehanizam (XII, XI, VIII IX и), koji je registriran aktivirano tromboplastinsko testa.

Od posebnog interesa je Korekcija razina VIII dinamika faktora i čitanja na APTV transfuzijom liječenje hemofilije A i vWD. Prvi od tih uvjeta je otkrivena hitnu zgrušavanja maksimalna poboljšanje nakon transfuzije (sprej, brzo!) Antihemophilic krioprecipitatu plazme ili davanje, nakon čega slijedi brzo prilično (za 10-18 h) stalni pad u svojoj, a kad je neka djelatnost povećanje zgrušavanja vWD u roku od nekoliko sati nakon transfuzije, a onda je pad - mnogo sporije, nego kad. U tom smislu, liječenje Willebrandov bolesti rjeđe pribjegavaju supstitucije transfuzije, od hemofilije A.

Istraživanja funkcionalne aktivnosti faktora koagulacije i komponente kalikrein-kinin i fibrinolytic sustava pomoću kromogene substrate

Postupci temelje se na proučavanje aktivnosti proteolitičkih enzima i njihovih inhibitora, sudjeluje u zgrušavanju krvi, fibrinolizu i kinin formiranje, intenzitet i brzine cijepanja specifično osjetljiv na ove enzime peptida, u kojem je sredstvo za bojanje oslobađa razgradnju (b-нитроанилин).

Stupanj obojenje reakcijske smjese određen spektrofotometrijski, a njegov intenzitet je sudio na aktivnost odgovarajućih enzima (faktori koagulacije, kallickreina, plazmina i drugi.), i inhibiciju procesa - aktivnost inhibitore enzima.

Tako, npr, djelovanje antitrombina III i heparina može se procijeniti cijepanjem kromogenih supstrata slabljenje faktor Xa ili trombin, i aktivnost a₂-antiplazmin - oslabiti djelovanje plazmina na odgovarajućim kromogenim substratom. kromogena supstrata ili imaju digitalnog oglašavanja (npr, S-2222), ili navodi kao kondenzirane veznu hromozinami, što znači da se enzim, u kojem je supstrat osjetljive (npr, Chromozvm PL - plazmin supstrata, Chromozvm TH - podloga trombin, Chromozvm PK - supstrat prekallikreina / kallikreina i m. d.).

Kromogena supstrata proširiti istraživačke mogućnosti hemostatskog sustava, ali nema dovoljno na raspolaganju mnogim laboratorijima. neke studije, sklopio s njima, Oni imaju prednosti nad konvencionalnim testovima zgrušavanja te im pružiti rezultatima podudaranja; u drugim slučajevima, njihova upotreba pojednostavljuje i ubrzava istraživanja, To je što je točniji; Treće - ove tehnike imaju nezavisnu značenje i ne može se zamijeniti testove koagulacije (npr, definicija prekallikreina).

Imunološko određivanje komponenata hemostatskog sustava

Imunološko određivanje komponenti homeostatski sustav vrši postupcima:

• imunoprecipitaciju;
• immunoelectrophoresis;
• Antitijelo, a drugi s odgovarajućim antiseruma

Kada taj sadržaj je procijenjena u krvnoj plazmi antigen faktor zgrušavanja (ili njegovi fragmenti), nego funkcionalnoj aktivnosti, koji se može drastično smanjiti normalnom antigenom u plazmi. Ova situacija je tipična za sve slučajeve, Kada je sintetiziran u tijelu nenormalnim (funkcionalno neispravan) čimbenici, zadržavaju svoju antigenost, ali nema mogućnost sudjelovanja u hemostaze.

To ga čini moguće razlikovati potpunog prekida sintezu relevantnih faktora i stvaranje abnormalnih oblika.

Međutim, nekoliko komponenti hemostatskog sustava može se odrediti samo imunološki.

Ova skupina uključuje takve važna istraživanja, kao definicije slijedećih komponenti:

• β-tromboglobulina;
• α2-makrohlobulyna;
• proteina C i S;
• Antigeni faktora VIII:C i VIII:R_memorija;
• proizvodi fibrinolize (PDF);
• neoantigenov kompleksov trombin - antitrombina III i plazmina - antiplazmin;
• niz drugih testova.

Dakle, imunološka studija značajno nadopunjuje funkcionalnu procjenu različitih linkova hemostatskog sustava.

Dijagnostički testovi, temelji se na korištenju droga kao reagensi od zmijskih otrova

Odavno je uspostavljena, da otrovi mnoge zmije sadrže vrlo aktivne proteolitičke enzime, uzrokuje zgrušavanje krvi i djeluje na različitim vezama koagulacijske kaskade. Kao rezultat toga, zmijskih otrova i izolirani iz njih koagulaza naširoko koristi za otkrivanje poremećaja hemostaze, Kvantitativno određivanje faktora koagulacije, Detekcija i kvantitativno određivanje topljivih kompleksa fibrin monomernih (RFMK) i niz drugih studija.

Uzorci zmijskog otrova je često mnogo lakše i učiniti više pravovremene dijagnoze hemostatic poremećaja.

Sljedeća tablica prikazuje podatke o mehanizmu djelovanja otrova u sistem koagulacije krvi i mogućnosti za dijagnostičku uporabu svake od njih.

Ove sposobnosti su prošireni još više istovremene uporabe nekoliko otrova i jednostavnih zajednički zgrušavanja krvi. Tako, npr, istovremena primjena testova zgrušavanja s zmijskog otrova i F-rupa olakšava razlikovanje deficit faktora VII, H-V i II (u tablici u nastavku), i s dodatnim korekcije filtrira normalnoj plazmi (izvor faktora II i V) -defitsit faktora X i V.

Određivanje osnovnih fizioloških antikoagulansima

Najvažnije je određivanje aktivnosti glavni fiziološki antikoagulans - antitrombina III, koja redukcija se može odrediti genetski (primarni trombofilije) ili sekundarno zbog intenzivnog korištenja (DIC, masivne tromboze) ili ubrzava metabolizam (Liječenje s heparinom, L-asparaginaza, sintetski kontracepcijsko) i blokada imunog kompleksa, paraproteinami, fibronektinom, proteine ​​akutne faze.

U svakom slučaju, smanjenje aktivnosti antitrombina III ispod 60-65 % Ona podržava intravaskularne koagulacije, To čini manje izražen antikoagulacijski učinak heparina. Međutim, vrlo često između razine antitrombina III i smanjena osjetljivost na heparin ima sukladnosti law-.

To obično slabi antikoagulans djelovanje heparina znatno prevladava nad stupnjem redukcije aktivnosti antitrombina III. Dokazane, da se u različitim oblicima antitrombina III afinitet za heparin, može varirati u različitim stupnjevima. Osim, Različite frakcije heparina, omjer koji je jako hlapljiva u lijekovima, također imati različite afinitet za antitrombin III. Dakle, praktički je važno istražiti kako stvarna aktivnost antitrombina III, i njegova sposobnost da se pod utjecajem brzog djelovanja antikoagulantne heparina.

Antikoagulirajuća aktivnost antitrombina III

Antikoagulirajuća aktivnost antitrombina III To se određuje sposobnost studirao krvne plazme (razrijeđen - Postupak Copley Wintersteinova ili defibriniziranom toplinske denaturacije na temperaturi od 56 ° C - Metode Loligera, Dr Abildgaarda.) inaktiviranog za prethodno određen period od ulaznog izvana trombina. Zaostala aktivnost trombina u plazmi može se odrediti njegove aktivnosti zgrušavanja (od fibrinogene, barijev sulfat adsorbira plazma) ili cijepanjem kromogenog supstrata, osjetljiv na trombin ili faktor Xa (kao antitrombina III inaktivira faktor).

kofaktor aktivnost heparin

Heparin kofaktor aktivnost sadržanih u plazmi antitrombina III dugo razdoblje određeno test tolerancije plazme za heparin, što se može smatrati indikativno, jer daje vrlo veliki širenje normalne vrijednosti i da se razmnožavaju dovoljno.

Mnogo točniji i Repro izvodimy testovi, u kojoj su istražili učinak različitih koncentracija heparina na trombin plazmi studijem, koji sadrži malu količinu trombocita. Usporedba s proširenjem trombina Vrijeme kontrolnog normalnoj plazmi, na koje se dodaju iste heparina uzoraka.

Tako, trombinom heparin test proučavati krvne plazme dodano je u iznosu od heparina, koji upravljač produžen s vremena trombina 15 na 32-35 s (niska koncentracija) i do 95-110 s (Visoka koncentracija heparina). Iz tih podataka, indeksi se računaju u plazmi antithrombins (AAP) a rezerve antikoagulans plazma (CBA).

Slične tehnike su također široko koristi za procjenu stupnja inaktivacije trombina u koagulacijske, i kromogena supstrata.

Imunološko određivanje antigena antitrombina III

Imunološko određivanje antigena antitrombina III To nam omogućuje da razlikujemo različite vrste trombofilijom:

• sa neadekvatnim sintezu antitrombina III (razina antigenske markera se spušta dovoljno smanjena aktivnost);
• s očuvanom sintezu abnormalnim i funkcionalno neispravnih oblicima (razina antigenske marker je puno veći, nego).

Proteina C i S, trombomodulin i α₂-makroglobulin odrediti postupcima imunoenzimskim.