Tijekom dugog bračnog života bez uporabe kontracepcije, te u prisustvu mikro-regije sluznice u genitalnih organa može odvijati postupno uočiti imunizacije antigeni spermija. Fizikalni pregled supružnika, sastoji se u pustom braka, ne mogu utvrditi uzrok neplodnosti u 10-15 % slučajevi. To je u ovoj skupini neplodnih bračnih drugova prilikom primjene posebne metode istrage tajne cervikalnom kanalu, sjemena plazma i serum spermija protutijela često otkrije (ASAT), Koristi kvalitativne i kvantitativne ispitivanja imunoloških istraživanja.
Postkoytalnыy testa (FCT) To se odnosi na kvalitativnom imunoispitivanjem. Negativan rezultat testa ukazuje na nedostatak spermija u kanalu vrata maternice tajna, ali ne možete utvrditi uzrok njihove odsutnosti.
Način. Po broju pokretnih spermija u kanalu vrata maternice tajna, dobiven nakon koitusa, utvrditi razmjere kršenja njihove prodorne sposobnosti s neplodnošću ili imunitet im sluzi u cervikalnom kanalu.
FCT potrebno je provesti sljedeće uvjete: Studija treba provoditi u razdoblju ovulacije, koji je otkrio colpocytologic ili drugi način, nakon prethodnog Apstinencija supružnika u roku 2-3 dana.
Metodologija. Nakon uobičajenog koitusa za žene 30 Zapisnik treba ležati na leđima, savijanje koljena. Ispiranje i čišćenje zabranjeno, potrebna samo sanitarnog ubrus, koja je uklonjena tijekom snimanja za proučavanje sluzi u cervikalnom kanalu. Nakon 2-4 sata, dopušteno i nakon 6-10 sati (vrijeme, proteklo prije studija, navedeno u analizi) nakon spolnog odnosa cerviks izložena pomoću zrcala Cuzco i endocervikalnog sluz aspirira ili injekcije tuberkulina (bez igle), jednu pipetu s gumenim balonom, ili polietilen kateter.
Prilikom pranja instrument ne smiju se koristiti sredstva za dezinfekciju, kao i oni utječu na pokretljivost spermija. Jedna kap dobivenog sluzi u cervikalni kanal se prenese u zagrijanu stakalce, obložene pokrovni, Teritorij namazane tekući parafin curiti. Formulacija odmah mikroskopiruyut (Okular 7X, 40X cilj), utvrđivanja broja i pokretljivosti spermija prirodu. Lijek se može detektirati s aktivnim spermija progresivnom pokretljivosti, oscilirajući pokret (fenomen jeku) i fiksna.
Prihvaćeno dati pet vrsta zaključaka FCT.
Kad peti tip FCT često promatraju imunološki nekompatibilnost između supružnika, Stoga je potrebno odrediti ACAT. Da biste identificirali ACAT tajni endocervikalnog, plazme, sjemena ili krvni serum i prikazati ih (aglutinacije ili imobilizirane) To zahtijeva imenovanje kvantitativnih imuno.
Negativna PBC Studije početi s definicijom prodoran (penetracija) sposobnost sperme putem penetrativno testu (Petka) i podložnost sperme lučenja cervikalni kanal pomoću test kontakt sperme i cervikalne sluzi (TKSTSS).
Tanka duljina kapilarne 10 Vidi upisali tijekom ovulacije sluz u cervikalnom kanalu. Jedan otvoren kraj kapilare zatvara gline, a drugi se nalazi u epruvetu s test svježim ejakulata (ne više 3 sati nakon ejakulacije). S glina u kapilari je pričvršćen na uspravni cijev. Uzorak se inkubira u termostatu na temperaturi 37 ° C 1 ne. Na kvaliteta ejakulata je suditi po dubini penetracije spermija u sluzi u cervikalnom kanalu. Postoje tri vrste stakleničkih plinova.
Sposobnost spermija penetracije To ovisi o fazi menstrualnog ciklusa. Ona počinje izlaziti iz 9. dan menstrualnog ciklusa,, postupno aktiviranje, dostiže svoju maksimalnu izraz u razdoblju ovulacije, održati na ovoj razini za dva dana, a zatim postupno smanjuje.
Na slajdu je staviti malu kap sluzi iz grlića maternice kanala, uzeti od žene tijekom ovulacije, i broj istog kap veličine ejakulata. Oba kapi su prekrivene pokrovnim staklom, koji je blago pritisnutim, pridružio se pada. Lijek se stavi u vlažnoj komori (Petri dish vlažnim pamuk obrisak) i inkubirane u termostatu na temperaturi 37 ° C 1 ne.
Pod tim uvjetima, normalni spermiji prodrijeti u tajnu normalan cervikalnom kanalu, kao što se može vidjeti pod mikroskopom pod povećanjem 200x. Za račun za reakciju u blizini granice između dva medija broji broj prodire tajnu kanala sperme vrata maternice u dva susjedna područja pogledom.
Uz izvrsnu TKSTSS u dva područja pogled otkriva više 25 aktivno pokretne sperme u fenomenu jeku manje 25 %. Ako zadovoljavajuće TKSTSS u dva područja pogledom otkrila više 15 aktivno pokretne sperme, TKSTSS u niski - manje od 15. Negativna odsutan penetracije TKSTSS, Ako upitna - fenomen oscilacija prelazi 25 %.
U ovom testu, kao u PCT, fenomen jeku, iznad 25 %, vjerojatno, To ukazuje na prisutnost ACAT i zahtijeva imenovanje kvantitativnih imuno.
Koristeći sjemena i cervikalne sekreta kanala neplodnim i plodne ljude u različitim količinama korištenja TKSTSS identificirati neplodno muža.
Mikroagglyutinatsionny Test Friberg (TF) dovoljno osjetljivi i dostupan je za klinička dijagnostičkim laboratorijima. Korištenje TF može utvrditi prisutnost ACAT i aglutinacije titar u različitim materijalima (plazma ejakulat, ekstrakti sluzi u cervikalni kanal i u serumu od oba supružnika).
Reagensi:
1. Fosfatni pufer otopina soli (FSB) 0,01 М pH 7,2-7,4.
2. Vazelinovoe ulja.
Oprema: mikroskop, tuberkulin injekcije, mikroagglyutinatsionnye pipeteu 1 ml, mikropipeta kapacitet 0,1 ml.
Način. Krvni test serum inaktiviran inkubacije u inkubatoru na 56 ° C 30 m. Ejakulirati, dobiva masturbacija, Odmah razrijeđena tako da je FSB, koncentracija spermija 40 milijuna. u 1 ml.
Zbog materijala (plazma ejakulat, izvući tajnu cervikalni kanal ili serumu) priprema niz razrjeđenja 1:4 za 1:128 koristeći kao tekućina za razrjeđivanje FSB. U jažice s parafinskim uljem mikroagglyutinatsionnyh metalne ploče injekcije tuberkulina s iglom uvodi (pod vazelinovoe ulja) Male kapi svakog razrjeđenja ispitivanog materijala. Nakon svakog uzorka se ispere četiri puta špricu. U svako razrjeđenje dodano je na 5 puta manji pad ejakulata, i 4 h na sobnoj temperaturi otkrivenih agglutinates. Zadnje uzgoj, pri čemu pod mikroskopom na 100x povećanja otkriven 3 slijepiti u pregledu i više, aglutinacije titar odgovara ACAT.
Titar seruma imobilizirajući ACAT, plazme ili sjemena ekstrakt tajna cervikalni kanal određuje broj pokretnih spermatozoida u prisutnosti antigena (sperma).
Dijelovi.
1. Ejakulirati, koji je proizveden i pripravljeni su na sličan, za TF pomoću FSB; motilitet prelazi 70 %.
2. Komplementsoderzhaschaya seruma zamoraca.
3. Imunološki humanog seruma (IChS), daje u prisutnosti komplementa putem 1 h inkubacije imobilizacija 90 % sperma.
4. Normalno humanog seruma (NCHS), inaktivira zagrijavanjem na temperaturi 56 ° C 30 m.
5. Test inaktiviranog seruma, plazma i sjeme izvaditi tajni cervikalni kanal.
Način. Za procjenu komplementarnu djelatnost imobilizirati 1. cijev uvodi 0,5 ml izotonične otopine natrijevog klorida, utvrditi promjene u pokretljivosti spermija bez ASAT 2. epruveta - 0,5 ml NHS, Kontrola imobilizacija treći cijev - 0,5 ml ICHS i odrediti ACAT imobiliziranjem 4. cijev - 0,5 ml seruma, ili plazmi ejakulata, ekstrakt ili izlučivanje endocervikalnog.
Zatim, svaka cijev uvodi 0,1 ml dopuna. Posljednja stvar za sve epruvete se dodaje 0,05 sperme ml suspenzije u koncentraciji 40 milijuna. u 1 ml. Stativ epruvete su stavljene u inkubator pri temperaturi 37 ° C 1 ne. Cijevi su uklonjeni iz peći i pažljivo mućka odražavaju taložne agglutinated sperme.
Za procjenu rezultata pod velikim povećanjem mikroskopa (400x) izračunati postotak pokretnih spermija u kapi epruvetu, nanese na stakalce i pokrivena poklopcem. Isto tako, postavlja postotak pokretnih spermija u kapljicama u epruvetama s NHS i ICHS. Rezultat reakcije u obzir formule
SIT = K / A
gdje je K - broj pokretnih spermija u kontroli s ICHS i NHS;
O - broja pokretnih spermija u epruveti (Ispitivanje seruma, ili plazmi ejakulata, ili tajna cervikalnog kanala).
S prosječnom SIT<2 test negativan (broj pokretnih spermija u kontroli i u epruvetama od približno iste), Ako je indeks CTI>2 - Test je pozitivan, t. je. u materijalu (serum, plazma ili sjeme izvaditi tajnu cervikalni kanal) imobilizirani ACAT.
SIT = R / D = 90/80 = 1,1
Test je negativan, ACAT imobilizirana odsutan.
SIT = 90/40 = 2,2
Test pozitivan. Postoji imobilizirani antitijelo (ASAT), kroz koje pokretljivost spermija znatno smanjen.
Ova stranica koristi kolačiće i usluge za prikupljanje tehničkih podataka od posjetitelja kako bi se osigurala učinkovitost i poboljšala kvaliteta usluge.. Daljnjim korištenjem naše stranice, automatski pristajete na korištenje ovih tehnologija.
Read More