Anemija, povezana s nedostatkom folne kiseline

Bez obzira na razlog folna kiselina nedostatak anemija je karakterizirana pojavom u megaloblasts koštane srži, intramedularno uništavanje erythrokaryocytes, patsitopeniey, macrocytosis i hyperchromia crvene krvne stanice, a ponekad - mentalni poremećaji.

Folievaya (pteroilglutaminovaya) kiselina (vitamin B₉) Sastoji se od tri komponente:

• pteridin prsten;
• P-aminobenzojeva kiselina (zajedno čine pteroievuyu kiselinu);
• glutaminska kiselina.

Molekularna težina folna kiselina - 441. Folna kiselina je aktivna u obliku kiselinskih derivata tetrahydrofolic. Sadržaj Folna kiselina u različitim oblicima u ljudskom tijelu je oko 5-10 mg. Dionice protivno svojoj upis u tijelu može biti potrošen tijekom 4 u mjesecu.

Dnevna potreba folne kiseline je 100-200 mikrograma, Trudnoća, hemolitička anemija, povećava mnogo puta.

Ukupna količina folne kiseline u prehrani s punom snagom 500-600 mikrograma po danu. Folna kiselina - folatima sadržana u značajnim količinama u jetri, kvasac, špinat, meso. Više 50 % Folna kiselina, u hrani, To može biti uništen kada kuhani.

Folna kiselina apsorbira u gornjem tankom crijevu. Sposobnost crijeva da apsorbira folnu kiselinu je puno veći od njegovog dnevne potrebe.

Folna kiselina sudjeluje u sintezi purina i pirimidina bazama, uz methylcobalamin - sintezu uridinmonofosfata timidinm nofosfata. Folna kiselina koenzime Više uključeni u brojnim reakcijama. Posebno, tetrahidrofolat sudjeluje u sintezi glutaminske kiseline histidina.

Etiologija i patogeneza anemije tijekom nedostatka folne kiseline

Nedostatak folne kiseline, kao i manjka cobalamin, To dovodi do razvoja anemije megaloblastičnu.

Malapsorpcijom folata promatrati u pojedinaca, resekcija tankog crijeva, pogotovo jejunum, kao i na dugotrajno uzimanje antikonvulzivi poput diphenylhydantoin (difenina) i fenobarbital (luminalnog). Uzimanje folne kiseline je slomljena kada sprue i celijakija. Nedostatak folne kiseline, kao i manjka cobalamin, promatrati na slijepi petlje sindrom. Opisan rijetke slučajeve nasljednih poremećaja folne kiseline prometa preko stijenke crijeva te u likvoru. Apsorpcija drugih tvari bez patnje.

Nedostatak folne kiseline u novorođenčadi promatrati u mlađoj dobi, povreda apsorpcije crijevnog, Fed kozje mlijeko, koji sadrži malu količinu folna kiselina.

Značajan malapsorpcijom folne kiseline javljaju se kod pacijenata, alkoholičari.

Povećana konzumacija folne kiseline tijekom trudnoće To može dovesti do nedostatka folne kiseline, Međutim, u razvijenim zemljama danas je rijetkost. Nedostatak folne kiseline u trudnica nalazi se u male snage, prisutnost hemolitička anemija, korištenje prije trudnoće veliki broj alkoholnih pića.

Kliničke manifestacije nedostatkom folata

Nedostatak folne kiseline u djece i mladih žena. Istovremeno, pacijenti se tuže opće slabosti, vrtoglavica. Za razliku od nedostatka kobalamin bolovima jezik rijetko promatraju. Parestezija, i drugi znakovi žičare myelosis nestalih. Bjeloočnice često ikterichnost.

Za razliku od deficita nedostatka kobalamin folne kiseline se rijetko promatrana gistaminoupornaya Akhil, gastratrophia, Iako je smanjenje lučenja želučane često.

Za nedostatkom folata, kao i nedostatak kobalamin, karakterizirana pojavom u perifernoj krvi macrocytosis, megalocitov i megaloblasts, prisutnost hyperchromic anemije, smanjenje broja retikulocita, trombociti i leukopenija s neutrofilnih pomak lijevo i desno. U koštanoj srži - megaloblasts.

Promjene u živčanom sustavu razlikuju se od manifestacija u BiH₁₂-anemije.

Dokazane, da osobe s epilepsijom, Nedostatak folne kiseline dovodi do čestih napada, na veću težinu. Ovo je posebno važno zbog toga, da uzimanje antikonvulzivi mogu uzrokovati malapsorpcijom folata. Prema literaturi, kod osoba s nedostatkom šizofrenija folna kiselina dovodi do pogoršanja bolesti, više teškim simptomima i manje učinkovit tretman.

Diferencijalna dijagnoza nedostatka kobalamin i folne kiseline

Za diferencijalnu dijagnozu nedostatka kobalamin i folna kiselina se koristi Postupak za određivanje radioimunološka folne kiseline u serumu i posebno u eritrocitima. Sadržaj kobalamin određuje metodom mikrobiološka. Kao testni organizam koristi kao Streptococcus faecalis i Lactobacillis casei. Normalno, sadržaj folne kiseline u serumu varira, Prema autorima, koristeći različite metode istraživanja, iz 3 za 25 ng / ml, i eritrocita - od 100 za 425 ng / ml.

U nedostatka folne kiseline kao smanjuje razinu seruma, iu eritrocitima. Manjak kolabaminov folna kiselina sadržaj u serumu krvi često se diže, i eritrociti ponekad može biti smanjen, iako je pad, obično, mali.

Za dijagnosticiranje nedostatka folne kiseline također se koristi Postupak učitavanja histidin (15 g), zatim definirati sadržaj kiseline u mokraći formiminglutaminovoy. Normalno, većina oblika glutaminske kiseline histidina. S urina 1-18 mg formiminglutaminovoy kiseline. Manjak folne kiseline za 8 sati nakon njegova uvođenja u tijelo oslobađa iz urina 20 za 1500 mg formiminglutaminovoy kiseline. Značajan broj formiminglutaminovoy kiseline izlučuje u mokraći nakon primjene histidina u osoba, pomiješa se s metotreksatom. Na nedostatak cobalamin, ciroze jetre Ekskrecija kiseline povećava formiminglutaminovoy, u manjoj mjeri, nego s deficitom folne kiseline. Normalne razine mokraćnog metilmalonske sadržaja kiseline povećava formiminglutaminovoy kiseline histidin nakon primitka dokaza nedostatka folne kiseline, umjesto cobalamin.

Ona pomaže razlikovati ta dva stanja i radionuklid studiju. Na nedostatak cobalamin, povezan s povredom izlučivanja unutarnji faktor, poremećena apsorpcija oznakom cijanokobalamin, nedostatak folne kiseline, to apsorbira ispravno.

Na nedostatak folne kiseline, njegovo uvođenje u tijelu dovodi do većeg sadržaja retikulocita, dok injekcije cijanokobalamin (derivati) nedjelotvornim. Folna kiselina nedostatak methylcobalamin povećava razinu retikulocita.

Definiranje Indeks segmentacije neutrofile

Točka broj neutrofila, s 4 Segment i više (Ukupno 200 ćelija). Određivanje postotka stanica, s 5 segmenti i više u odnosu na količinu stanica, s 4 segment. Indeks je određen formulom:

IS =(KS (5 i više))/KS(4);

gdje IC - Indeks segmentacija;

KS (5 i više) - Broj segmentiranih neutrofila (na 200 ćelija), u kojima je broj segmenata jednak 5 ili više;

KS (4) - Broj segmentiranih neutrofila, u kojima je broj segmenata jednak 4.

Normalno, ovo indeks rasponi 2,5 za 25 %. Gdje, kada prelazi 30 % (oscilacije 120%), Možete razgovarati o hypersegmentation neutrofila. Primijetio je manjak folne kiseline, metilkoʙalamina, i uremija.

Određivanje metilmalonske kiseline u mokraći Giordio i Plaud

Reagensi.

1. Ionsko-izmjenjivačke smole Dowex-Zx4 (klorida obrazac, 200-400 Mreža). Smola je bila isprana s pet volumena destilirane vode 3 puta, se suspendira u dva volumena destilirane vode i pohrani na tamnom posudu na 4 ° C.

2. Otopina para-nitroanilina 0,075 % pripravljena otapanjem 37,5 mg reagensa 500 ml 0,2 M otopina klorovodične kiseline. Čuvati na tamnom lonac, Ona je ostala stabilna za nekoliko mjeseci na sobnoj temperaturi.

3.Acetata tampon (pH 4,3) izrađena od 1 M natrijevog acetata i 1 M otopine octene kiseline.

4.Diazoreaktiv: 4 ml 0,5 % natrijeva nitrata otopina miješa s 15 ml para-nitroanilin. Smjesa je stavljena u hladnjak na 4 ° C i ohlađenu otopinu se doda 4 ml 0,2 M natrijevog acetata. Reagens stabilna pri temperaturama 4 ° C za jedan dan.

5.Normalno 0,05 M otopina metilmalonske kiseline: 295 mg metilmalonske kiseline otopi se u 50 ml vode.

Način

Urin je skupljan u staklenu bocu i zamrznuti sve studije. Za proučavanje napunjenosti dio urina (20- 25 ml), odmrznuti, tsentrifugiruyut, a supernatant se sakupi pomoću slabe otopine natrijevog hidroksida ili klorovodične kiseline da se podesi pH 6,5.

Kromatografsko visina kolona 20 cm i promjer 1 cm bio ispunjen smole Dowex-Zx4. Smola sloj treba biti unutar 3 cm. Prolazi kroz smolu 5 ml urina, isprani destiliranom vodom (2 × 50 ml brzinom od najviše 15 ml 1 iz). Metilmalonske kiseline može se eluirati sa smole 20 ml 0,1 M otopina klorovodične kiseline. Dalje 2 ml eluata pomiješani su s 3 ml 1 M acetatni pufer pH 4,3 u epruveti sa čepom staklenom (15×2cm). U smjesu se doda 3 ml hladnog diazoreaktiva, pri čemu se pH povisi na 4,0. Smjesa se grije u vodenoj kupelji na temperaturi 94 ° C 3 min i 2 ml 3 M otopine natrijevog hidroksida. Epruveta se zatim ukloni iz vodene kupke, začepi i sadržaj se miješa. Smjesa se ohladi na sobnoj temperaturi 10 min i na fotometriruyut 620 nm u kiveti sa pathlength 1 cm.

Kao kontrola, u smjesu, koja se sastoji od 2 ml 0,1 M otopina klorovodične kiseline, 3 ml i diazoreaktiva 3 ml pufera acetata. Metilmalonske kiseline standardna otopina sastoji se od istih komponenti, a 0,02 ml 0,05 M otopina metilmalonske kiseline. Apsorbancija ovih otopina mjereni su pod istim uvjetima.

Sadržaj metilmalonske kiseline (mg) po jedinici volumena urina (1 l) definirana formulom:

(IS_Primjer-IS_kontrola)/(IS_standard-IS_kontrola)*A *((1000*T)/M)

gdje je E - apsorpcija raznih uzoraka;

A - količina metilmalonske kiseline u standardnom epruvetu, ml;

1000 - Količina urina, uzeti za istraživanje, ml;

T - količina solne kiseline, uzeti za ispiranje,, ml;

M - broj eluata, uzeti za istraživanje, ml.

Pod navedenim uvjetima, formula može pojednostaviti na slijedeći način::

(IS_Primjer-IS_kontrola)/(IS_standard-IS_kontrola)*236

Gdje, kada je količina u urinu metilmalonske kiseline veća od 300 mg / l, treba ponovno pomiješa s acetatnim puferom i eluata diazoreaktivom, ali umjesto 2 ml eluata se korisnim da se 4- 10 puta manja i donijeti glasnoću na 2 ml 0,1 M klorovodične kiseline. Izračun treba uzeti u obzir razrjeđivanja.

Normalno po danu s urina 0,6-4,7 mg metilmalonske kiseline. Na nedostatak kobalamin dnevnog izlučivanje metilmalonske kiseline doseže 294 mg. Normalno, recepcija 10 g valin ne povećati klirens metilmalonske kiseline, Nedostatak kobalamin povećava izlučivanje metilmalonske kiseline.

Određivanje metilmalonske kiseline u urinu Green

Reagensi.

1. Eter.
2. Etanol.
3. Otopina klorovodične kiseline 0,1 M.
4. Amonijev sulfat.
5. Jaka baza smola deatsidit FF (200 mreža, klorida obrazac).
6. Otopina natrijevog nitrata 0,5 % (masa / volumen).
7. Otopina para-nitroanilina (750 mg otopi se u 1 l 0,2 M otopina klorovodične kiseline).
8. Natrijev acetat 0,2 M.
9. Acetata tampon 1 M, pH 4,3: mješovit 1 M otopine natrijevog acetata i 1 M otopine octene kiseline u omjeru 16,35:33,9.
10. Vodena otopina natrijevog hidroksida 3 M.

A. Standardna otopina metilmalonske kiseline: 100 mg otopi se u 100 ml vode, pohranjena u hladnjak.

B. Rad standardne metilmalonske kiseline: Standardna otopina razrijeđena u 20 vrijeme 0,1 M klorovodične kiseline (1 ml standardni i 19 ml klorovodične kiseline). Ovaj iznos metilmalonske kiseline ekvivalenta 100 mg metilmalonske kiseline 1 l urina uvjeti ispitivanja.

Za pripravu miješanog diazoreaktiva 4 ml 0,5 % otopinom natrijevog nitrata i 15 ml para-nitroanilin. Smjesa se stavi u ledenu kupelj i doda se 4 ml 0,2 M natrijevog acetata.

Način.

Urin je skupljan jedan dan, mjeriti obujam i 10 ml podkislyayut 1 M otopinom sumporne kiseline na pH 2,0 ili malo ispod. Amonij-sulfat do zasićenja doda. Smjesa je stavljena u lijevak za odjeljivanje i ekstrahira tri puta s eterom i etanola u omjeru 3:1. Kako bi se spriječilo nastajanje emulzije ekstrakciju smjese koriste u suvišku.

Ekstrakt je propušten kroz mali stupac kromatografije (1 – 1,5 Promjer cm), dovršen 5 ml smole. Kolona je isprana 50 ml destilirane vode. Metilmalonske kiseline eluciran 0,1 M klorovodične kiseline. Nakon ispiranja odabran 2 ml eluata, W je dodan ml acetatnim puferom, i 3 ml diazoreaktiva.

Nakon miješanja, cijev se stavi u vodenu kupelj na temperaturi 95 ° C 3 m. Zatim se doda 2 ml 3 M natrij hidroksida i nakon zatvorene cijevi čep minimizirati kontakt sa zrakom. Nakon hlađenja, izmjerena je apsorbancija pri valnoj duljini 620 ih. Za praznim umjesto korištenja eluata 2 ml 0,1 M otopina klorovodične kiseline, i za standardnu ​​otopinu - 2 ml radnog standarda.