ההגדרה של מאפיינים כמותי ואיכותיים של זרע

קביעה של תנועתיות הזרע

קביעה של תנועתיות הזרע הוא פרמטר חיוני, אפיון איכות לפלוט. זרע, מסוגל הפריה, יש ניידות — לבצע תנועה מרובע עם מהירות 50 מיקרומטר/s. ניתן למצוא השפיכה זרע ניידות-לקויי-diskinospermiej בצורה של נדנוד, יציאה וסוגים אחרים של התנועה, שבדרך כלל לא.

תנועתיות הזרע מוצר מקורי של נוזל שפיכה עם שדה ראייה מוגבל (שימוש בחלון Fonio), באמצעות עינית ו עדשה 7 x 40 x, כאשר poluopuŝennom מעבה. סופר 100 תא, הערה מספר ביניהם של זחיח, זרע בישיבה ולא נייח. זרע באופן פעיל-המעבר בסדר לפצות 80-90 %, בישיבה הוא 10-12, עדיין – 6 — 10 %. רק לוקח בחשבון את הזרע באופן פעיל-המעבר, בישיבה, מי ביצע תנועה translational.

באפשרותך להשתמש מפורט יותר נקודות דירוג סולם הערכה:

• «4» הוא ניידות מעולה (כל spermatozoa יש ניידות ישר קדימה עם מהירות משמעותי);
• «3» הוא ניידות טובה (מספר מופחת);
• "2" הוא ניידות למקודשת (עדיין הרבה זרע, אבל עם זנבות רוטטת);
• "1"-ניידות רע (העדר תנע, הניידות של זרע זנבות בלבד);
• "0" הוא שתנועה של הזרע חסר.

פוריות לפלוט תלוי המשך של תנועתיות הזרע, לכן יש צורך לקבוע תנועתיות זרע בדינמיקה (kinezisgramma דינמי).

טיפת הזרע מוחלת על מכסה הזכוכית, תהפכו את זה ושים על שקופית עם lunočkoj לתליית טיפות כל כך, את המסירה היה במרכז של העמקה. קצה כיסוי זכוכית מרוח עם שמן פראפין, תחת המיקרוסקופ לקבוע את אחוזי באופן פעיל-המעבר, spermatozoa בישיבה ולא נייח דרך 1, 3, 6, 12 ו 24 שעות לאחר שפיכה. מחקר שנערך בטמפרטורת חדר. בדרך כלל, מספר תאי הזרע פעיל-ניע יורד כל שעות 2-3 20 % ,

• הערה. בבדיקה מיקרוסקופית של השפיכה צריכה להתבצע בתוך מעבדה על ידי אדם אחד, מי היה מספיק ניסיון בתחום של בדיקות מעבדה, כתוצאות של הנחישות של תנועתיות זרע בחוקרים שונים בטווח של עד 40 ± % ותלוי במידה רבה על הניסיון עם השפיכה.

המשפט על "התחייה" של זרע

המשפט על "התחייה" של זרע זה מבוסס על השחזור של ניידות הרגילה של קבוע, אבל לחיות זרע באמצעות פתרונות גירוי:

1) פתרון בקר (גלוקוז - 3 ז, ב₂HPO₄ - 0,6 ז, NaCl - 0,2 ז, KH₂לאחר₄ -0.01 G, distillirovannaya למים 100 מיליליטר; pH - 7,8);

2) 0,1 % פתרון קפאין (לא רק בampules!) - 10 % היקף הפליטה;

3) 0,1 פתרון ארגינין M.

שיטה. pipetter ממדי 1 מיליליטר nasasyvayut 0,1 מיליליטר של השפיכה (גם מעורב) וצוברת אותו פיפטה 0,9 מגרה פתרון מיליליטר. התוכן של פיפטה הוא התפוצץ על זכוכית שעון, מערבב היטב על ידי יניקה חוזרת ונשנית ונושב הנוזל על watchglass, ולאחר מכן את המוצר המוגמר תלוי ירידה. עד 5 10 קבוע דקות, אבל זרע חי מתחיל לנוע.

אחוז תאי זרע ניעתי נקבע מייד בעת שחזור ניידות ואחרי 3, 6, 12 ו 24 לא. לקבלת תוצאות אמינות יותר, מתבצע במקביל למדגם עם שני פתרונות מאתגרים. רק אם זה בלתי אפשרי "להחיות" את הזרע יכול עדיין לדבר על nekrospermii.

זיהוי של זרע חי בקרב קבוע

עיקרון השיטה מבוסס על, אנזימים שחיים eosin זרע decolorized. כריאגנטים משמשים 5 % תמיסה מימית של אשלגן וeosin 10 % המימי Nigrosine.

שיטה. בשקופית לגרום לירידה קטנה של זרע, ממוקם בסמוך לירידה גדולה במחצית 5 % פתרון eosin וירידה של אשלגן 10 % פתרון Nigrosine, שהוא גם פעמיים אשלגן eosin הירידה. ראשית, השפיכה מעורבבת עם eosin אשלגן, מחכה כמה שניות, ולאחר מכן מעורבב עם ירידה של Nigrosine, מחכה שוב כמה שניות ולעשות דקות מריחות שקופיות זכוכית מלוטשות.

באמצעות מיקרוסקופ מערכת טבילה, במריחות נספרים לפחות 200 זרע, הדגשת חיים (חסר צבע) והמת (Eosin אדום מוכתמת). מספר תאי זרע חיים והמתים מבוטא באחוזים. בהעדר ירידת Nigrosine של זרע מעורבב עם קש 5 % Eosin פתרון של אשלגן ולהכין מריחות דקות למיקרוסקופיה. צבעי Nigrosine רק הרקע של הסמים, שבו זרע מוקצה יותר לעומת. בדרך כלל זרע חי הם 80-90 % המספר הכולל של.

ספירת הזרע ב 1 מיליליטר, ובכל הנפח של זרע

מספר תאי הזרע ב 1 מיליליטר בכל השפיכה נספרו בתא ספירת Goryaeva.

מספר תאי הזרע בכל הפליטה נקבע על ידי הכפלת מספר תאי הזרע ב 1 כמות מיליליטר של השפיכה (מיליליטר).

• הערה. חדר הספירה יכול גם לקבוע את מספר תאי זרע ניעתי, למה השפיכה צריכה להיות מדוללת בhloridz נתרן איזוטוני חם ולספור את מספר תאי הזרע ללא תנועה, וכך להפחית אותו מכלל.

בדרך כלל, ב 1 מיליליטר של נוזל זרע מכיל 60-120,000,000. זרע, כאשר giperspermii - יותר 120 מיליון., באוליגו - מ 30 ל 60 מיליון., מה, בדרך כלל, מה שהופך את זה אי אפשר הפריה. מקרים עם זאת, תיארו, כאשר מתרחשת הפריה ותוכן 1 מיליליטר של эyakulyata 5 ל 30 מיליון. זרע.

בכל מקרה בזיהוי oligospermia 2-3 בקרות צורך לספור את מספר תאי הזרע במרווחים של 3-4 שבועות כדי לקבוע הסכום המקסימאלי שלהם. בספירה הזרע באותו אדם הנתונה לתנודות ניכרות בפיסיולוגי.

בדרך כלל סביב הזרע מכיל יותר מ 150 מיליון. זרע.

spermiogram ספירה

Spermiogram - הוא אחוז צורות מורפולוגיות השונות של תאי זרע ותאי זרע.

למרוח, מוכתם hematoxylin-eosin או פפנהיים, מינימום מחושב 200 זרע, בי הסכום של צורות רגילות ונורמליות של, ותאי זרע ראשוניים באו לידי ביטוי באחוז. חישוב נעשה באמצעות מערכות מיקרוסקופ הטבילה ומכונות לספירה מראש leukogram שינה את השמות של מקשים.

בצורות נורמליות זרע זרע נורמלי הוא 80-85 %, לפעמים 100 %, אלה כוללים וריאציות פיסיולוגיות, מאופיין יוצא דופן או צוואר, או מופחת, או ראש מוגדל.

צעיר, או לא בוגר, יש זרע בצורה סביב הראש והצוואר של שאר ציטופלסמה ("צווארון"), נצפה עם קיום יחסי מין תכוף ואינם מסוגלים הפריה.

צורות הישנות של זרע (hyperchromia, axromija, ראש vacuolation) מופיע בשפיכה לאחר הוארך התנזרות ואינו מתאים להפריה.

צורות פתולוגיות כוללות זרע עם עיוותים של הראש: megalospermatozoidy (gigantospermatozoidy), גָדוֹל, mikrospermatozoidy, חרוטי, שני זרע ראשים עם צוואר וזנב, ללא צוואר עם זנבות אחד או יותר, ללא זנב, זנב ללא ראשים, וכו '.

בשפיכה גברית בריאה נורמלית צורות זרע נורמלי בדרך כלל לא נמצאו, אבל לפעמים מספרם במהלך השפיכה פוריות רגילה יכול להגיע 20 %, מתוכם כ 15 % ראש פתולוגיה, 3-5 % - גוף, 2-5 % - זנב.

ביצירת תאי זרע פתולוגי, טופס הפרשה של זרע מזוהה פוריות עם ראש וצוואר לא נורמלים. זנב פתולוגיה מקור בדרך כלל הפרשה, היא מתרחשת בתקופת המעבר של זרע זרע דרכים.

בהכנות מוכתמות גם תאים נבטי ממוקמים בנפרד נראים בבירור בשלבים שונים של בידול והתבגרות, חשוב להבדיל aspermia ואזוספרמיה.

Spermatogonia מעוגלים, לפעמים סגלגל, קוטר של 5-12 מיקרון. הליבה תופסת כשליש מהתאים, אפל- או בהיר, 1-2-3 Nucleo- לָמָה, לעתים קרובות ממוקם ליד karyotheca (מעטפת גרעין), melkozernystaya מבנה הכרומטין. ציטופלסמה היא צרה, basophilic, הומוגנית. mitotically מספר פעמים פער Spermatogonia. ישנם תאים עם שלבים מוגדרים היטב של מיטוזה.

חלק מהתאים, נוצר באמצעות מיטוזה, дифференцируются в сперматоциты אני, ולאחר מכן על מנת השני. Spermatocyte אני מזמין - סיבוב או תאי מצולעים בקוטר של 17-19 מ"מ עם גרעין עגול גדול ויפה אור ציטופלסמה. בהכנות צבעוניות הוא אזור perinuclear ברור.

Spermatocytes השני של הצו נוצר כתוצאה של מיוזה. הם קטנים יותר, מ spermatocytes אני מזמין (קוטר 15 מ '), אבל במורפולוגיה כמעט זהה. בשפיכה נפוצה יותר, מ spermatocytes אני מזמין, אבל הרבה פחות, מ spermatids.

Spermatydы - קטן, עגול או מוארכים תאים בקוטר של 12-15 מ"מ עם גרעיני hyperchromatic עגולים, במיקום מרכזי או אקסצנטרי. אולי יש spermatids מרובה ליבות. ציטופלסמה החיוורת, bazafilnaya, לעתים קרובות vacuolated.

Spermatids הופך לתאי זרע.

התאים של יצירת תאי זרע בspermiogram הנורמלי הוא לא יותר מ 2 %. מספר גדול של בעיות פוריות נצפה בטבע ההפרשה.

למיקרוסקופ לעומת שלב השפיכה היא מדוללת עם פתרון נתרן כלורי איזוטוני בתוספת כמות קטנה 1 % rivanola או תמיסה מימית של חומצה קרבולית להפחית תנועתיות הזרע.

עם מיקרוסקופ פלואורסצנטי הוחלו בשקופית טיפת הזרע, וירידה של תפוז acridine ברבייה 1:20000. הטיפות מעורבבות ומכוסה בכיסוי זכוכית. עינית המיקרוסקופ משמשת מטרת 7X ו40X. זרע חי מוכתם ירוק, מת - כתום. צורות זרע נורמליות ולא נורמליות הן קלה להבחין בגלל תכונות המורפולוגיות שלהם.

כללי Rabotы של השלב-kontrastnom ומיקרוסקופ lyuminestsentnom opisanы בinstruktsiyah k эtim מכשירים. בעת השימוש בspermiogram שלב בניגוד ומיקרוסקופ פלואורסצנטי מחושב לפי הכללים הכלליים.

על בסיס בדיקה מיקרוסקופית של השפיכה יכולה לחשוף מצבים פתולוגיים שונים.

• Spermatoschesis - היעדר הזרע בשפיכה, והתאים של יצירת תאי זרע.
• אזוספרמיה - היעדרות של תאי זרע בנוכחות של תאי זרע.
• Astenospermii - ירידה במספר תאי ניעתי ועלייה במספר צורות פתולוגיות במספר הכולל של זרע נורמלי.
• Oligoastenospermiya - צמצום מספר הזרע והצורות הניידת שלהם ולהגדיל את מספר צורות פתולוגיות.
• Nekrospermiya - תוקן כל הזרע במוצר גם לאחר "התחייה".
• Akinospermiya - מדינה, שבו, בניגוד לזרע nekrospermii הקבוע בעבר לאחר "התחייה" מתחילים לזוז.