מחקר כימי של נוזל השדרתי
הבדלים עיקריים בהרכב של הנוזל השדרתי והפלזמה דם הם ש, שבנוזל הוא על 300 פעמים פחות חלבון, באופן משמעותי פחות כולסטרול, גלוקוז ועוד כלורידים.
כימיה הרכב של נוזל השדרתי היא משקפת שינויים משמעותיים, המתרחש במערכת העצבים המרכזית.
החלבון בנוזל השדרתי
בדרך כלל, בנוזל מחדרי הלב של המוח מכיל חלבון L / g 0,12-0,2, מוח המוח הקטן של tsisterny- 0.1-0.2, מהחלל תת-העכבישים של חוט השדרה - 0.22 0,33 גר '/ ליטר.
ירידה או עלייה בחלבון נוזל השדרה זה מצביע על תהליך הפתולוגי. תכולת החלבון ממוצעת לא נותנת סיבה להכחיש את הנוכחות של נגע אורגני של מערכת העצבים המרכזית, בגלל הפרות אפשריות של היחס של שברים חלבון של נוזל השדרתי. בהרכב חלבון נורמלי שונה מהעדר השדרתי נוזל euglobulin הסרום והנוכחות של סיעות נוספות.
המחקר של מוצא חלבוני נוזל השדרתי מצא, כמעט 10 % אין להם שום דמיון חיסוני עם חלבונים בסרום והן מסווגים כחלבונים ספציפיים במערכת העצבים המרכזית.
הגדלת תכולת החלבון בCSF זה בגלל הפרעות המודינמית של המוח והקיפאון של דם בכלי של מערכת העצבים המרכזית.
חלק Prealbuminovaya בנוזל מחדרי הלב של המוח הוא 13-20%, מיכל מוח המוח הקטן - 7-13, נוזל, מתקבל על ידי ניקור מותני,- 4-7 % סך תכולת חלבון. חלק זה של החלבון חסר במצור של חללי נוזל השדרתי, זה עשוי להיות רעול פנים אלבומין לא תמיד הוקצה ברמה הגבוהה ביותר של חלבון בנוזל השדרתי.
בגידולים במוח, ומחלות דלקתיות של מערכת העצבים המרכזית בנוזל השדרתי מקטין את התוכן של שברים בסדר (אלבומין, A'1- A2-глобулинов и) והגדיל את התוכן של גס (ב- и ג-глобулинов).
כדי לזהות תוכן גבוה בנוזל השדרה יכול לשמש globulins התגובה פנדיי, המבוסס על העכירות של הנוזל בשל פנול קרישה מושפעת חלבון. ביצוע שיטת טיפת תגובה זו מאפשרת נוזל בדיקת חיסכון משמעותי, לעתים קרובות מועבר למעבדה בכמות קטנה מאוד.
תגובת גלובולין למרות שהם נמצאים בשימוש באבחון במעבדה, אבל לתת מושג משוער בלבד של התוכן של חלבון.
כמות החלבון בנוזל השדרתי נקבעה גם, בשתן, שיטת Brandberg-רוברטס-STOLNIK או שיטת colorimetric באמצעות חומצת sulfosalicylic ונתרן גופרתי.
עוצמת העכירות, נוצר על ידי הוספה לחומצת sulfosalicylic נוזל השדרתי, פרופורציונאלי לריכוז חלבון.
בהמורגי תכולת חלבון נוזל השדרתי ניתן לשפר על ידי חלבון פלזמה. עם קבלת הנוזל השדרתי, דם בצבע, המטופל חייב לקחת הדם מהאצבע לפתרון כלוריד צינור ונתרן איזוטוני להשיג, מוכתם מעט יותר אינטנסיבי, מהנוזל. צינורות עם נוזל השדרתי ודם צריכים להיות זהה זכוכית העובי וצבע. הצבע של הנוזל ברמות המשווה, זהירות הוספה לפתרון נתרן כלורי איזוטוני דם מדולל, אז זה היה centrifuged ואת כמות החלבון בחסר צבע שקוף מעל- נוזל משקע. חלבון אמיתי בנוזל השדרתי מתקבל על ידי הפחתת הכמות של חלבון בדם המדולל מכמות החלבון בנוזל haemorrhagic. מתודולוגיה זו אינה מדויקת מאוד, הוא משמש במקרים, כאשר נוזל השדרתי המורגי הופך חסר צבע לאחר צנטריפוגה.
תכולת החלבון של עליות נוזל השדרתי בניגוד לפרמטרים המודינמיים, דלקתי, לאחר פעולות על מערכת העצבים המרכזית, כמו גם בגידולים במוח ובחוט השדרה. הגידול הניכר בכמות החלבון הוא ציין בקיפאון ורידים בשיתוף עם הפגיעה בזרימת נוזל השדרתי. במקרים כאלה, חלבון גבוה cytosis רגיל - ניתוק חלבון-תא. בשיתוף עימה כַּתמֶמֶת מאפיין תסמונת Froana, אשר נצפה בגידולים של המוח וחוט השדרה. הפחתת כמות החלבון בנוזל השדרתי מסומנת בהפרשה המוגברת והידרוצפלוס.
תגובת הנזירה הצעירה-Apelt גלובולין הספציפי dlya. העיקרון שלה מורכב במשקעים של globulins בנוכחות פתרון אמוניום סולפט הרווי. התגובה נחשבת חיובית כאשר התוכן בנוזל השדרתי 0,05 % globulins ועוד. זה נותן אינדיקציה לתוכן של globulins בנוזל השדרה.
גלובולין המספר גדל באופן משמעותי בתהליכים דלקתיים וניווניות כרוניים במערכת העצבים המרכזית (דלקת קרום מוח, meningoэncefalit, שיתוק כללי, טרשת נפוצה). על ידי הגדלת רמת אלבומין, גלובולין globulins יחס שבור של נוזל השדרתי. בדרך כלל זה נע בין 0.2-0.3. לתמונה מדויקת יותר של חלק החלבון של נוזל השדרתי צריכים להגדיר אותם על ידי אלקטרופורזה או שיטות כמותיות אחרות.
מחקר של הרכב חלבון של נוזל השדרתי על ידי אלקטרופורזה - זמן רב בתהליך, מהמחקר של הרכב בסרום דם. בנוזל השדרה של פחות חלבון 200-400 פעמים, לכן מראש תרכיז (מרוכז) על ידי אולטרה סינון אור בריק, דיאליזה נגד dextran או גומי ערבי, ואידוי בריק. עם זאת, העיבוי של הנוזל השדרתי עלול לאבד שברים חלבון או לזהות חפצים. בקשר עם קביעה זו יש נוזל ללא ספק proteinogram יתרון השדרה על ידי אלקטרופורזה בג'ל אגר או של polyacrylamide.
אלקטרופורזה בג'ל אגר בγ הבריא האדם השדרתי הנוזל המבודד2– и ג3-hlobulynы.
שיטה רגישה יותר של חלוקה חלבון של נוזל השדרתי, היא אינה דורשת עיבוי, זה эlektroforez של poliakrilamidnom Gele, המאפשר לזהות את השברים חלבון 30-40, בעיקר בγ-גלובולין.
השיטה של immunoelectrophoresis זוהתה באימונוגלובולינים הנוזל השדרתי, M, G, התוכן הוא 3-4 פעמים נמוכה יותר, מ סרום: 2,65 мг / л IgG, 2,05 ומ"ג / ליטר IgA 0,24 мг / л IgM.
הרכב חלקי של חלבוני נוזל השדרתי גיל עובר שינויים גדולים. לילדים מאופיין ברמות נמוכות של אלבומין, למרות שהרמה מראש- חלק אלבומין הוא גבוה יחסית. העלייה שנצפתה הקשישים בIgA וIgG, המתייחס לγ-globulins.
יש המחקר של הרכב החלקי של חלבון נוזל השדרתי ערך אבחון חשוב, מאז מספר המחלות של מערכת העצבים המרכזית (גידולים, טרשת rasseânnom) הסכום הכולל שלו לא ניתן לשנות. רוב diagnostically היקר היא הקביעה הזמנית של שברים חלבון, שאיבת שומן- וגליקופרוטאינים.
הוקם, כי במחלות דלקתיות חריפות של מערכת העצבים מאופיין ביותר על ידי גידול בתוכן של α-globulins הנוזל השדרתי, לתהליכים דלקתיים כרוניים - אימונוגלובולינים, ומחל ממאירות - β-ליפופרוטאין.
נחישות חלבון תגובת קולואיד
התגובה לנגה זה מבוסס על, קשר שנוזל השדרתי פתולוגית שינה עם פתרון דק colloidal של כלוריד זהב בנוכחות אלקטרוליטים קידום קרישה וצבע של הפתרון השתנה.
בדרך כלל, הנוזל השדרתי אינו משנה את הצבע של פתרון colloidal של זהב, הוא נשאר אדום. לשנות את הצבע של הפתרון שאומץ בפתולוגיה להעריך דמויות:
- אדום - 0;
- אדום וסגול - 1;
- ויולט - 2;
- אדום וכחול או אדום ובוהק עם תצהיר של חלקיקים קטן - 3;
- כחלחל - 4;
- צבע ורוד קלוש עם גוון כחלחל, ומשקעים - 5;
- חסר צבע עם משקעים - 6.
להבדיל ארבעה סוגים של התגובה לנגה:
- נורמלי, בי שינוי הצבע אינו מתרחש בכל, או 3-5 צינורות הצבע הוא מעט שונה מהצבעים בצינור השליטה (אדום עם גוון סגול קלוש);
- ניוונית, מאופיין בשינוי של צבע במחצית השמאלית של מספר הצינורות (מסגול להלבנה) ואת המראה של המשקעים; נצפה בעגבת של המוח, טרשת rasseânnom, גידולים במוח ובחוט השדרה, ריכוך של המוח, ואחרים.;
- דלקתי, אשר נוטה לשנות את הצבע בצד ימין או באמצע השורה של צינורות; דלקת קרום המוח שנצפה באתנולוגיה שונה;
- מעורב, בי שינוי הצבע מתרחש בשמאל, ובצד ימין של השורה של צינורות; נגעים מעורבים נצפו בקרומים ורקמת המוח.
תגובת טקאטה-ערה משלים או מאשר את לנגה התגובה. בהתבסס על נוזל השדרתי חלבוני קרישה תחת השפעת dichloride הכספית והפתרון משנה את הצבע בנוכחות פתרון תערובת של fuchsin.
ישנם ארבעה סוגים של תגובות:
- שלילי (נורמלי) - צבע סגול של שינויי התערובת, נוזל שקוף;
- ניוונית - הפסד של משקע כחול-סגול, על שיש נוזל שקוף;
- דלקתי - תערובת של צבע ורוד ללא משקעים, זמן decolorized;
- מעורב - נוזל שקוף מעל משקע ורוד.
תגובת טקאטה-ערה היא רגישה יותר, מהתגובה לנגה.
לאבחון של תהליכים ניווניים ודלקתיים במערכת העצבים המרכזית בשימוש תגובת מסטיק.
תגובת טריפטופן ולוינסון התגובה משמשים לאבחנה של שחפת.
פרידמן תגובה המשמש לאבחון מוקדם של דלקת קרום המוח. העיקרון הוא, שתחת ההשפעה של permanganate אשלגן להתרחש תהליכי חיזור ושינויים בצבע של נוזל השדרתי, ותחת ההשפעה של חומצת trichloroacetic זרז חלבון כלול בי. לפציעות, גידולים, עגבת של המוח, צבע הנוזל MS לא משנה.
הנוזל השדרתי הוא זוהה על ידי 20 ל 25 חומצות אמינו חופשיות. כדי לחקור את הרכב חומצות האמינו של כרומטוגרפיה נוזל השדרתי בשיטות מודרניות, fluorometry חילוף היונים.
התוכן של חומצות אמינו חופשיות וחנקן אמינו בנוזל השדרתי ממוצע 0.6- 1,4 mmol / L, להלן, מאשר בפלזמה - 1.9-2.8 mmol / L.
תפקיד חשוב באבחון של מחלות של מערכת העצבים מחקרים תוכן בגלוקוז נוזל השדרתי, אנזימים, xloridov, אוֹדֶם הַמָרָה, כולסטרול וחנקן שיורית.
גלוקוז בנוזל השדרתי
בדרך כלל, בנוזל השדרה מכיל 2,5- 3,33 mmol / L גלוקוז. כדי לקבוע את סכומו בנוזל השדרה באמצעות כל אחת מהשיטות, משמש כדי לקבוע את רמת הגלוקוז בדם. הנוזל נחקר מייד לאחר נטילה, כי זה מגיע במהירות הגליקוליזה. בדלקת חריפה וsubacute של קרומי המוח גלוקוז רמות בירידות נוזל השדרתי, לפעמים (וזה מאוד נדיר) הוא נעלם לחלוטין. לרוב, ברמת הסוכר בנוזל השדרתי נעדר בדלקת קרום המוח וקרום המוח סטרפטוקוקלי.
רמת סוכר מוגברת נצפתה בדלקת קרום המוח והנוזל השדרתי אפילפסיה. כאשר גידולים של הגלוקוז במוח יכולים גם לגדול, ושחרר.
החומצה לקטית בנוזל השדרתי
בנוזל השדרה של בני אדם בריאים שיטות האנזימטית נקבעו ממוצעת 1,54 (0,89-2.8) חומצה לקטית / L mmol.
רוב מגביר באופן משמעותי את התוכן של חומצה לקטית בנוזל השדרתי תחת תהליכי חוסר חמצן והרסניים ברקמת המוח, כי הוא לא רק אבחון, וערך פרוגנוסטיים. אנזימים, מעורב בחילוף החומרים של מערכת העצבים המרכזי, נמצא בנוזל השדרתי במספרים קטנים בהרבה, מאשר בדם, ונקבעים על ידי אותן השיטות, וכי בדם.
בגלל אנזימי glycolytic aldolase לעתים קרובות מוגדר ולקטט דהידרוגנאז וisoenzymes.
כלורידים בנוזל השדרתי
תוכן כלוריד בנוזל השדרתי 197-242 mmol / L בוגר נורמלי, בילדים - 195-204 mmol / L. כדי לקבוע את רמת כלורידים בנוזל השדרה יכולה להיות בשימוש על ידי כל טכניקה, שימוש ללמוד כלורידים הדם, אלא היישום של השיטה של קביעת נפח על ידי טיטרציה עם נוזל הכסף חנקה.
להקטין את כמות הכלורידים נצפה בדלקת קרום מוח שחפת, לפעמים - עם דלקת קרום המוח, povyshenie- בuremia.
בילירובין בנוזל השדרתי
בילירובין בנוזל השדרה והנוזל מציסטות במוח הוא מקור hematogenous וגורם כַּתמֶמֶת. לקביעה האיכותית וכמותית של בילירובין משתמש באותו המדגם, וכי להגדרה של בילירובין בדם. בדרך כלל בילירובין בנוזל השדרתי אינם מזוהים.
כולסטרול בנוזל השדרתי
בכולסטרול בריא בנוזל השדרה או נעדר, או התוכן שלה נע בין עקבות ל0.003-.005 מ"ג / ד"ל. רמות כולסטרול מוגברים שנצפו בדלקת קרום מוח וגידולים במוח, ממאיר במיוחד.
כדי לקבוע כולסטרול בנוזל השדרתי ניתן להשתמש שיטת Engelhardt-סמירנוב או שיטה של אילקה.
בדרך כלל, תוכן חנקן השייר בנוזל השדרתי ממוצע 8,6-14,3 mmol / L, לא. זה. ב 50 % להלן, מאשר בדם.
רמת חנקן השייר בCSF נחקרה על ידי אותן השיטות, ושהתוכן של חנקן שייר בדם.
גליקופרוטאינים וליפופרוטאין בנוזל השדרתי
המחקר של גליקופרוטאינים ויפופרוטאינים שנערך על ידי אלקטרופורזה על נייר באגר ג'ל מראש מעובה או נוזל השדרתי ילידים או polyacrylamide. מחקרים אלה משמשים לאבחון מחלות וגידולים דלקתיים.
בנוזל השדרתי חשף חומרים פעילים הביולוגית של טבע כימי שונה:
- מתווכים (אצטילכולין, נוראדרנלין, dofamin, סרוטונין, חומצת גמא-aminobutyric);
- הורמוני בלוטת יותרת המוח, בלוטת האצטרובל ובלוטות אנדוקריניות אחרות;
- נוירו (endorfiny, האנקפלינים);
- נוקלאוטידים מחזוריים (adenozincnklofosfat, חומצת guanylic);
- פרוסטגלנדינים;
- kinins.
רוב התרכובות ביולוגיות אקטיביות אלה נקבעים על ידי radioimmunoassay, שיותר בשימוש באבחון במעבדה קלינית.