אנמיה, הקשורים לחוסר בחומצה פולית

לא משנה מה אנמיה מחוסר חומצה פולית הסיבה מאופיין על ידי ההופעה בmegaloblasts מח העצם, הרס intramedullary erythrokaryocytes, patsitopeniey, macrocytosis וhyperchromia תאי דם אדומים ולפעמים - הפרעות נפשיות.

פולית (pteroilglutaminovaya) חומצה (ויטמין B₉) הוא מורכב משלושה רכיבים:

• טבעת pteridine;
• חומצת P-aminobenzoic (יחד מהווה חומצת pteroievuyu);
• חומצה גלוטמית.

המשקל המולקולרי של חומצה פולית - 441. חומצה פולית היא פעילה בצורה של נגזרי חומצת tetrahydrofolic. תוכן חומצה פולית בצורות שונות בגוף האדם הוא כ 5-10 מ"ג. מניות בניגוד להכנסותיה בגוף יכולות להיות מדולדלת מעל 4 בחודש.

הדרישה היומית של חומצה פולית היא 100-200 מיקרוגרם, הריון, אנמיה המוליטית, זה מגביר פעמים רבות.

הסכום הכולל של חומצה פולית בתזונה עם את מלוא העצמה של 500-600 מיקרוגרם ליום. חומצה פולית - folates כלול בכמויות ניכרות בכבד, שמרים, ספינל, בשר. יותר 50 % חומצת פולית, במזון, זה יכול לשבור כאשר מבושל.

חומצה פולית נספגת במעי העליון הקטן. היכולת של המעיים לספוג חומצה פולית היא גבוהה בהרבה מדרישה היומית.

חומצה פולית משתתפת בסינתזה של בסיסי פירימידין ופורין,, יחד עם Methylcobalamin - הסינתזה של timidinm nofosfata uridinmonofosfata. coenzymes חומצה פולית מעורב יותר במספר התגובות. באופן מיוחד, tetrahydrofolate משתתף בסינתזה של חומצה גלוטמית היסטידין.

אטיולוגיה ופתוגנזה של אנמיה בחוסר בחומצה פולית

מחסור בחומצה פולית, כמו גם גירעון של cobalamin, זה מוביל להתפתחות של אנמיה מגלובלסטית.

תת ספיג של חומצה פולית נצפה באנשים, כריתה של המעי דק, המעי הריק במיוחד, כמו גם בטווח ארוך לוקחים נוגדי פרכוסים כגון diphenylhydantoin (difenina) וphenobarbital (luminal). הקליטה של ​​חומצה פולית היא שבורה כאשר המחלה sprue וצליאק. מחסור בחומצה פולית, כמו גם גירעון של cobalamin, נצפה ב תסמונת לולאה עיוורת. תאר מקרים נדירים של הפרעות תורשתיות של תחבורת חומצה פולית על פני קיר הבטן ולתוך הנוזל השדרתי. קליטה של ​​חומרים אחרים ללא סבל.

מחסור בחומצה פולית בתינוקות נצפה בפגות, הפרה של ספיגה במעיים, חלב העז של הפד, המכיל כמות קטנה של חומצה פולית.

תת ספיג משמעותיות של חומצה פולית עלולים להתרחש בחולים, אלכוהוליסטים.

צריכה מוגבר של חומצה פולית במהלך הריון יכול להוביל למחסור בחומצה פולית, עם זאת, במדינות מפותחות היום זה נדיר. מחסור בחומצה פולית אצל נשים בהריון מתרחשת כאשר תזונה לקויה, הנוכחות של אנמיה המוליטית, להשתמש בכמות גדולה של אלכוהול לפני ההריון.

ביטויים קליניים של מחסור בחומצה פולית

מחסור בחומצה פולית בילדים ונשים צעירות. באותו הזמן, חולים מתלוננים על חולשה כללית, סחרחורת. שלא כמו מחסור cobalamin לשון כואבת נצפתה לעתים רחוקות. נימול, וסימנים אחרים של myelosis הרכבל חסר. לובן העין לעתים קרובות ikterichnost.

בניגוד לגירעון של מחסור cobalamin של חומצה פולית הוא gistaminoupornaya לעתים רחוקות נצפה Akhil, gastratrophia, למרות ירידה בשיעור של הפרשת קיבה הוא לעתים קרובות.

למחסור בחומצה פולית, כמו גם למחסור cobalamin, מאופיין על ידי ההופעה בmacrocytosis הדם ההיקפי, megalocytes וmegaloblasts, הנוכחות של אנמיה hyperchromic, צמצום מספר reticulocytes, טסיות דם ולויקופניה עם שינוי neutrophilic לימין ועל השמאל. במח העצם - megaloblasts.

השינויים במערכת העצבים שונים מהגילויים בB₁₂-אנמיה מחוסר.

הוכיח, כי אנשים עם אפילפסיה, מחסור בחומצה פולית גורמת להתקפות תכופות, לחומרה הגדולה יותר שלהם. הדבר חשוב במיוחד בשל העובדה, כי נטילת נוגדי פרכוסים יכולה לגרום לספיגה לקויה של חומצה פולית. על פי הספרות, באנשים עם חוסר בחומצה פולית גורמת לסכיזופרניה החמרות, תסמינים חמורים יותר וטיפול פחות יעיל.

אבחנה מבדלת של מחסור cobalamin וחומצה פולית

לאבחנה המבדלת של מחסור cobalamin וחומצה פולית משמש שיטת radioimmunoassay לנחישות של חומצה פולית בסרום ובמיוחד באריתרוציטים. התוכן של cobalamin נקבע על ידי שיטת מיקרוביולוגית. כאורגניזם בדיקה המשמש כStreptococcus faecalis וLactobacillis casei. בדרך כלל, התוכן של חומצה פולית בטווחי סרום הדם, לדברי המחברים, תוך שימוש בשיטות מחקר שונות, מ 3 ל 25 ng / ml, וכדורי אדום - מ 100 ל 425 ng / ml.

בחוסר בחומצה פולית יורד ככל שהרמה של סרום, ובאריתרוציטים. תוכן החומצה פולית בkolabaminov המחסור בסרום הדם לעתים קרובות עולה, ולפעמים יכולים להיות מופחתים אריתרוציטים, למרות הירידה, בדרך כלל, קטן.

לאבחנה של חוסר בחומצה פולית משמש גם היסטידין שיטת עומס (15 ז), לאחר מכן להגדיר את התוכן של חומצה בשתן formiminglutaminovoy. בדרך כלל, את חלק הארי של הצורות של היסטידין חומצה גלוטמית. עם חומצת formiminglutaminovoy 1-18 מ"ג תפוקת שתן. בחוסר של חומצה פולית ל 8 שעות לאחר השקתו לתוך הגוף משתחררת מהשתן 20 ל 1500 חומצת formiminglutaminovoy מ"ג. מספר משמעותי של חומצת formiminglutaminovoy המופרש בשתן לאחר מתן היסטידין באנשים, טופל במטוטרקסט. במחסור של cobalamin, שחמת כבד הפרשת השתן של חומצה מגבירה formiminglutaminovoy, ובמידה פחותה, מאשר עם גירעון של חומצה פולית. רמות נורמליות של עליות תוכן חומצת שתן methylmalonic formiminglutaminovoy היסטידין חומצה לאחר קבלת ראיות של מחסור של חומצה פולית, במקום cobalamin.

זה עוזר להבחין שתי מדינות אלה ומחקר רדיונוקלידים. במחסור של cobalamin, הקשורים להפרה של הפרשת גורם מהותי, קליטה מופרעת של cyanocobalamin הכותרת, מחסור בחומצה פולית, הוא נספג כראוי.

בחוסר של חומצה פולית, החדרתו לגוף מובילה לתוכן גבוה יותר של reticulocytes, ואילו הזרקה של cyanocobalamin (נגזרים) לא יעיל. Methylcobalamin חוסר בחומצה פולית מעלה את רמת reticulocytes.

הגדרת נויטרופילים פילוח מדד

לספור את מספר הנויטרופילים, עם 4 מגזר ויותר (סה"כ 200 תא). לקבוע את אחוז התאים, עם 5 מגזרים ויותר ביחס לכמות של תאים, עם 4 קטע. המדד נקבע על ידי הנוסחה:

IS =(KS (5 ועוד))/KS(4);

בי IC - פילוח מדד;

KS (5 ועוד) - מספר הנויטרופילים מפולחים (ב 200 תא), שבו מספר הקטעים שווה 5 או יותר;

KS (4) - מספר הנויטרופילים מפולחים, שבו מספר הקטעים שווה 4.

בדרך כלל, טווחי מדד זה 2,5 ל 25 %. איפה, כשזה עולה 30 % (רטט 120%), אתה יכול לדבר על נויטרופילים hypersegmentation. זה נצפה מחסור של חומצה פולית, metilkoʙalamina, וuremia.

נחישות של חומצת methylmalonic בשתן על ידי Giordio וPlaud

ריאגנטים.

1. שרף חילוף היונים Dowex-Zx4 (טופס כלוריד, 200-400 קווי). השרף נשטף עם חמישה כרכים של מים מזוקקים 3 פעמים, הושעה בשני כרכים של מים מזוקקים ומאוחסן בצלחת כהה על 4 מעלות צלזיוס.

2. פתרון של פרא-nitroaniline 0,075 % שהוכן על ידי ההמסה 37,5 מגיב מ"ג 500 מיליליטר 0,2 פתרון M של חומצה הידרוכלורית. חנות בסיר כהה, זה נותר יציב במשך כמה חודשים בטמפרטורת חדר.

3.מאגר אצטט (pH 4,3) עשוי מ 1 ויצטט נתרן M 1 פתרון M של חומצה אצטית.

4.Diazoreaktiv: 4 מיליליטר 0,5 % פתרון נתרן חנקה היה מעורב עם 15 פרא-nitroaniline מיליליטר. התערובת הושמה במקרר ב 4 מעלות צלזיוס והפתרון המקוררים נוסף 4 מיליליטר 0,2 נתרן אצטט M. יציב מגיב בטמפרטורות 4 ° C ליום.

5.סטנדרטי 0,05 פתרון M של חומצת methylmalonic: 295 חומצת methylmalonic מ"ג הם מומסים ב 50 מיליליטר של מים.

שיטה

תן נאסף לתוך בקבוק זכוכית וקפוא עד המחקר. כדי לחקור את החלק האחראי על שתן (20- 25 מיליליטר), מופשר, centrifuged, וsupernatant נאסף באמצעות פתרון חלש של נתרן הידרוקסידי או חומצה הידרוכלורית להתאים pH 6,5.

גובה עמודת chromatographic 20 סנטימטר וקוטר 1 סנטימטר היה מלא בשרף Dowex-Zx4. שכבת השרף צריכה להיות בתוך 3 סנטימטר. עובר דרך השרף 5 מיליליטר של שתן, לשטוף במים מזוקקים (2 × 50 מיליליטר בשיעור של לא יותר מ 15 מיליליטר 1 מ). חומצת methylmalonic ניתן eluted מהשרף 20 מיליליטר 0,1 פתרון M של חומצה הידרוכלורית. נוסף 2 מיליליטר של eluate היו מעורב עם 3 מיליליטר 1 pH החיץ אצטט M 4,3 במבחנה עם פקק זכוכית (15×2סנטימטר). לתערובת מתווספת 3 diazoreaktiva קר מיליליטר, בי pH עולה ל 4,0. התערובת הייתה מחוממת באמבט מים בטמפרטורה 94 ° C. 3 דקות ו 2 מיליליטר 3 פתרון נתרן הידרוקסידי M. הצינור היה אז הוסר מאמבט המים, פקוק והתוכן עורר. התערובת הייתה מקוררת בטמפרטורת חדר ל 10 דקות ובphotometric 620 ננומטר בקובט עם pathlength 1 סנטימטר.

כביקורת, תערובת של, בהיקף של 2 מיליליטר 0,1 פתרון M של חומצה הידרוכלורית, 3 מיליליטר וdiazoreaktiva 3 אצטט חיץ מיליליטר. פתרון סטנדרטי חומצת methylmalonic מורכב מאותם רכיבים ו 0,02 מיליליטר 0,05 פתרון M של חומצת methylmalonic. הספיגה של פתרונות אלה נמדדו באותם תנאים.

תוכן חומצת methylmalonic (מ"ג) ליחידת נפח של שתן (1 l) שהוגדר על ידי הנוסחה:

(הוא_לדוגמא-הוא_שליטה)/(הוא_{סטנדרטי}-הוא_שליטה)**((1000*ט)/M)

שם E - ספיגה של דגימות שונות;

- כמות חומצת methylmalonic במבחנה סטנדרטית, מיליליטר;

1000 - כמות השתן, נלקח למחקר, מיליליטר;

T - כמות החומצה הידרוכלורית, נלקח לelution, מיליליטר;

M - מספר eluate, נלקח למחקר, מיליליטר.

בתנאים לעיל, ניתן לפשט את הנוסחה כדלקמן::

(הוא_לדוגמא-הוא_שליטה)/(הוא_{סטנדרטי}-הוא_שליטה)*236

איפה, כאשר כמות חומצת methylmalonic בשתן היא גדולה יותר מ 300 מ"ג / ליטר, צריך להיות מחדש מעורבב עם eluate חיץ אצטט וdiazoreaktivom, אבל במקום 2 מיליליטר של eluate הוא מועיל לקחת 4 10 פעמים נמוכות יותר ולהביא את הנפח ל 2 מיליליטר 0,1 פתרון חומצה הידרוכלורית M. בחישוב צריך לקחת בחשבון דילול.

בדרך כלל ליום עם תפוקת שתן 0,6-4,7 מ"ג של חומצת methylmalonic. במחסור של הפרשה יומית cobalamin של דרגי חומצת methylmalonic 294 מ"ג. בדרך כלל, קבלה 10 ולין G לא להגדיל פינוי של חומצת methylmalonic, מחסור cobalamin מגביר את הפרשת חומצת methylmalonic.

נחישות של חומצת methylmalonic בשתן על ידי ירוק

ריאגנטים.

1. אֶתֶר.
2. אתנול.
3. פתרון של חומצה הידרוכלורית 0,1 M.
4. אמוניום סולפט.
5. שרף בסיס חזק deacidite FF (200 רשת, טופס כלוריד).
6. פתרון של נתרן חנקה 0,5 % (משקל / נפח).
7. פתרון של פרא-nitroaniline (750 מ"ג מומס ב 1 l 0,2 פתרון M של חומצה הידרוכלורית).
8. אצטט נתרן 0,2 M.
9. מאגר אצטט 1 M, pH 4,3: מעורב 1 ופתרון נתרן אצטט M 1 פתרון M של חומצה אצטית ביחס 16,35:33,9.
10. תמיסה מימית של נתרן הידרוקסידי 3 M.

א. חומצת methylmalonic פתרון סטנדרטי: 100 מ"ג מומס ב 100 מיליליטר של מים, לאחסן במקרר.

B. עבודה חומצת methylmalonic סטנדרטית: פתרון סטנדרטי בדילול מלא 20 זמן 0,1 פתרון חומצה הידרוכלורית M (1 מ"ל של סטנדרטי ו 19 מיליליטר של חומצה הידרוכלורית). סכום זה שווה ערך לחומצת methylmalonic 100 חומצת methylmalonic מ"ג 1 תנאי בדיקת שתן l.

להכנת המעורבת diazoreaktiva 4 מיליליטר 0,5 % ופתרון נתרן חנקה 15 פרא-nitroaniline מיליליטר. התערובת הושמה באמבט קרח ולהוסיף 4 מיליליטר 0,2 נתרן אצטט M.

שיטה.

תן נאסף ליום אחד, נמדד נפח ו 10 מיליליטר של acidified 1 פתרון חומצה גופרתית M לpH 2,0 או מעט מתחת. אמוניום סולפט התווסף לרוויה. התערובת הושמה במשפך separatory וחולצה שלוש פעמים עם אתר ואתנול ביחס 3:1. כדי למנוע ההיווצרות של תערובת extractant תחליבים המשמשת בעודף.

התמצית עברה דרך כרומטוגרפיה בעמודה קטנה (1 – 1,5 קוטר סנטימטר), הושלם 5 שרף מיליליטר. הטור נשטף 50 מים מזוקקים מיליליטר. חומצת methylmalonic eluted 0,1 פתרון חומצה הידרוכלורית M. לאחר elution הנבחר 2 eluate מיליליטר, W מתווסף מיליליטר של החיץ אצטט, ו 3 diazoreaktiva מיליליטר.

לאחר הערבוב, הצינור הונח באמבט מים בטמפרטורה 95 מעלות צלזיוס 3 מ '. לאחר מכן הוסיף 2 מיליליטר 3 נתרן הידרוקסידי M ופעם פקק צינור סגור כדי למזער מגע עם אוויר. לאחר קירור, הספיגה נמדדה באורך הגל 620 שלהם. לריק במקום להשתמש בeluate 2 מיליליטר 0,1 פתרון M של חומצה הידרוכלורית, ולפתרון הסטנדרטי - 2 מיליליטר לסטנדרטים של עבודה.