Das Studium der Blutgerinnung

Blut-Gerinnung-Forschungs-Methoden gehören die folgenden Gruppen:

  1. Indikativ (Allgemeine), einen Einblick in den Status von allen Gerinnung Kaskade als Ganzes und seiner separaten Phasen (Anmeldung kann sein fertig optisch oder über separate Geräte-koagulografa, Tromboèlastografa usw..);
  2. ausschlaggebenden Faktoren Defizit-Korrektur der Gerinnung tests, Mischen von Prüfungen bekannt untersuchten Blutplasma Blutplasma der Patienten mit notorisch Defizit dieser oder anderer Faktoren;
  3. Quantifizierung der einzelnen Systemkomponenten zu ihrer funktionalen Aktivität (Koagulation-Beispiele, Studie über chromogene und andere Substrate) und (oder) auf immunologische Marker;
  4. Erkennung der intravaskuläre Koagulation-Process-Aktivierung und Fibrinolyse durch funktionellen Eigenschaften oder molekulare Marker für diese Aktivierung ist die Identifikation in der Zirkulation der aktivierten Gerinnungsfaktoren, Thrombozyten Degranulation Produkte, Aufteilung der Komponenten der Blutgerinnung oder deren Metaboliten, die Entstehung neuer Antigen Marker der aktivierten Faktor und ihre komplexen, beschleunigte Metabolization beschriftet Komponenten der Blutgerinnung (verkürzen ihre Halbwertszeit im Umlauf).

So, bei der Beurteilung des Zustand der Blut Koagulation dient sowohl Koagulation-Methoden (Labor- und instrumental), bilden die Grundlage für den Diagnoseprozess, und immunologische, Radionuklid und andere Arten von Forschung. In vielen Fällen können die Systemkomponenten wie auf die funktionelle Aktivität definiert werden, und immunologisch auf den Inhalt des entsprechenden Antigens im Blut. Gleichzeitige Verwendung solcher Techniken ermöglicht, Pathologien zu unterscheiden, die mangelnde Synthese an den jeweiligen Gerinnungsfaktor zugeordnet (in diesem Fall ebenso reduziert als funktionelle Aktivität, und die Anzahl der Antigen), und Formen, in denen das Molekül synthetisierten Faktor ist, aber es ist eine Anomalie und funktionelle nepolnocenna.

Zum Verweisen auf die frühesten Formen der Anzahl des entsprechenden Faktors werden hinzugefügt "—" (zB, VIII-, IX- und T. d.), und das zweite ist ein "+"-Zeichen (zB, VIII +, IX +).

Indikativ (Allgemeine) Gerinnungstests

Definition der Blutgerinnung Zeit

Definition der Blutgerinnung Zeit (vorzugsweise Technik Lee-weiß) — Bystrovypolnimyj seit langem (direkt am Krankenbett) unverbindlichen test, bedeutende Blutgerinnung Probleme identifizieren, Zusammenhang mit Mangel an Gerinnungsfaktoren (mit Ausnahme von Faktor VII) oder mit der Wirkung von Antikoagulantien und Fibrinolitikov. Dient als unverbindlichen Test und Geparinoterapiej überwachen, Wirkung von Heparin-Protaminsul′fatom entfernen. Testen Sie vergleichsweise nizkočuvstvitel′nyj, seine nur verletzt, wenn Inhalt Reduktion der Plasma Koagulation Faktoren ausgedrückt (unter 4-5 %), Daher eignet sich nicht zum Erkennen von milden Formen der Hämophilie A und B, sowie Verletzungen der Gerinnbarkeit des Blutes bei Angiogemofilii, Faktor XI-Mangel, Prekallikreina und hohe kininogena. Aus diesen Gründen kann nicht der Test für die präoperative Patienten verwendet werden: unter normalen Test Indikatoren (5-10 min) Sie können eine oder mehrere der Profuzhnykh postoperative Blutungen auftreten..

Zeit Rekal′cifikacii plasma

Zeit Rekal′cifikacii Nizkočuvstvitel′nyj Plasma-nicht-standardisierte test, weniger zuverlässig zur Identifizierung von gipokoagulyatsii, als Ganzes Blutgerinnung Zeit. Kann nicht für die Diagnose von hämostatische Störungen empfohlen werden.

Aktivierte partielle Thromboplastin-Zeit-plasma

Aktivierte partielle Thromboplastin-Zeit-plasma (APTT, Kaolin-Kefalinovyj-test) — hohe Empfindlichkeit-Methode, erkennt der Blutgerinnung, die Probleme beim Starten von einem Workflow, interner Mechanismus. Ein Mangel an Gerinnungsfaktoren Plasma selektiv empfindlich (wegen des Mangels an Blutplättchen und Faktoren 3 Thrombozyten kompensiert Input von außen Kefalinom oder èritrofosfatidom).

Zur Überwachung der geparinoterapiej, Präoperative Untersuchung des Patienten und t. d. Normative Indikatoren hängen von der verwendeten Kefalina Proben, umfassen Sie in den meisten Fällen 37-50 c (optimal-37-45 mit).

Kaolinovoe Zeit plasma

Kaolinovoe Plasma Zeit-test, ähnlich wie die vorherige, aber ohne Zusatz von Plasma-Kefalina (èritrofosfatida), aufgrund derer reagiert er nicht nur auf einen Mangel an Gerinnungsfaktoren plasma, aber auch Thrombozyten Mangel an und Faktoren 3 Plättchen. Ungefähre Abschätzung der Aktivität dieses Faktors kann erfolgen, indem die Uhrzeit der untersuchten Plasma Kaolin mit hohen und niedrigen Thrombozyten (Norm-57-70 mit).

Wir empfehlen die Verwendung von Phospholipid-Komponenten nicht, die APTT-Gerinnungszeit gleich nachgeben 55 mit wiki, aufgrund der drastisch reduzierte Genauigkeit und Reproduzierbarkeit von tests, einschließlich Quantifizierung der Faktoren VIII und IX.

Silikon-Zeit-plasma

Silikon-Zeit, Plasma ist eine Plasma-Rekal′cifikacii-Zeit, unter den Bedingungen der Silikonirovaniâ Nadeln empfangen, Rohre, Pipetten, t. es ist. zumindest die Kontakt-Aktivierung. Der Test ist empfindlich auf Koagulation aktivierte Trigger Kontakt intravaskuläre phase (Faktor XII und XI), Jedoch ist diese Verletzung deutlicher offenbart durch die Definition der gesamten Blutgerinnung Zeit aus Silikon (auf der Grundlage, ob die Methode weiß oder Tromboèlastografičeskoj Registrierungsprozess OS ist Graben).

Normative Indikatoren abhängen, Silikon und werden separat durch eine Studie über das Blut von gesunden Menschen für jede Probe bestimmt. Bei der Auswahl, dass Silikon die beste ist, am besten erweitert Gerinnungszeit (Plasma).

Erworbener (Thromboplastin) Zeit-plasma

Erworbener (Thromboplastin) Zeit-plasma (Pol-Quick-time, Prothrombin-Index) charakterisiert die Geschwindigkeit der Blutgerinnung Plasma recalcifiziert Startvorgang zu externem Gerät, t. es ist. Hinzufügen einer menschlichen Gehirn-Thromboplastin (oder Kaninchen).

Aktive Thromboplastinzeit auf Mischproben von normalen standardisiert (Test) Plasma. Das am häufigsten verwendete Thromboplastinaktivität mit 12-18 (in der klassischen Technik mit Kvika- 12-13). Die schwächere Thromboplastinzeit, Je größer die Abweichung von dem Verfahren.

Zur normalen Zeit Protrombinovom Plasma Test ermöglicht die Identifizierung von isolierten oder kumulierte Defizit Faktoren Protrombinovogo komplexe — VII, X, (V) und (II), welche drei Faktoren (VII, X und (II)) K-Vitaminozavisimy und ihre Aktivität verringert sich unter dem Einfluss anti-indirekten. In diesem Zusammenhang ist der Prothrombin-Test wesentlich, wenn die Dosierung der Cumarine Überwachung (neodikumarin, oder pelentan, Sinkumar usw..) und andere Produkte dieser Gruppe (fenilin).

Prothrombinzeit bleibt in Mangel der Faktoren internen Mechanismus der Aktivierung von Faktor XII-Protrombinazy normal, XI, IX, VIII (t. es ist. für alle Arten von Hämophilie und mangels Hageman), sowie mit Prekallikreina und hohe Kininogena (VM-kininogena)

In der Literatur Misc akzeptiert Bezeichnung der Prothrombin-Testergebnisse. Es ist die zweckmäßigste die Prothrombin-Zeit-Studie und die Kontrolle des Blutplasmas in Sekunden angegeben (Das gibt Informationen über die Aktivität der die Thromboplastin verwendet). Manchmal verwenden Sie diese beiden Verhältnis-Werte, t. es ist. Index (ISL untersucht plasma, von ,)/(PV-Steuerelement plasma, von), (Norma 0.9-1.1).

Die andere Form der Bewertung dieses Indikators, die am häufigsten verwendeten in Laboratorien, Prothrombin-Index-Berechnung ist der Prozentsatz von umgekehrter arithmetische Proportionen machen (Norm ist 90-110 %), Allerdings ist diese Berechnung falsch, zwischen die Konzentration der Gerinnungsfaktoren und Koagulation ist die Zeit nicht arithmetische, eine logarithmische Abhängigkeit. Außerdem, Prothrombin-Test war nur für eine Abnahme der Gerinnungsfaktoren unten empfindlich 50 % Ihre normalen Werte. Aus diesem Grund ist es ratsam, Protrombinovogo Index Prozentsatz Verdünnung Kurve verwenden (1:2, 1:4, 1:8 und T. d.) Mixed-Beispiel von normalen plasma. Diese Kurve ist für Tromboplastinov andere Quelle Aktivität einmal gebaut. (von 12 bis 18 von) Es richtet sich nach erworbener Index der untersuchten Patienten. Der Vorteil dieser Technik ist, dass die, dass die Ergebnisse aller Studien, einschließlich und verschiedenen Dynamik an verschiedenen Tagen, beziehen sich nicht auf zufällige Auswahl an normalen Plasmaproben, aber auf die durchschnittlichen derselben Standardeinstellungen, was zu deutlich reduzierten Error-Methode. Indizes, durch Verdünnung Kurve und normalen Plasma gewonnen, absolut nicht einander entsprechen. Dies sollte berücksichtigt werden bei der Kontrolle von Aktivität Nähe Antikoagulantien, zur Reduzierung eines regulären Index zum 50 % entspricht in etwa der unteren Kurve zur Zucht Index 25-30 % • in diesem Zusammenhang die Analysen, die Sie immer angeben, sollten, Berechnungsweise Prothrombin-index, Was sind die Standards für die Thromboplastin-Aktivität.

Plasma-Thrombin-Zeit

Plasma-Thrombin-Zeit, t. es ist. Citratnoj Plasma Blutgerinnung Zeit beim Hinzufügen einer standard-Aktivität von Thrombin, ist ein wichtiger Test für die Beurteilung der abschließenden Phase der Blutgerinnung. Dieser Indikator ist wichtig für die richtige Auslegung aller anderen Koagulation-Tests, wegen Verletzung der letzten Phase des Blutes muss Koagulation unweigerlich zu einer Verlängerung der Zeit in alle oben genannten Techniken.

In den meisten Fällen beim Durchführen einer Prüfkonzentration von Thrombin-Lösung 821-828, die wenn gemischt mit einem gleichen Volumen von Blutplasma gibt Zusammenbruch für 12- 18 von, aber wenn Disfibrinogenemij verwendet und schwächeren Konzentrationen (was zu Beschneidung für 30-35 mit).

Thrombin-Zeit ist ein wichtiger diagnostischer Indikator, Verstoß gegen seine Neigung kongenitale, und beim gemeinsamen erworben (Sekundär-) gipoprotrombinemiâh, die meisten disfibrinogenemij, sowie unter dem Einfluss von Heparin, Produkte der Fibrinolyse (PDF) und eine Reihe anderer Antitrombinov und Inhibitoren der Selbstkonfektion Monomere von fibrin. Aus diesem Grund ist die Thrombin-Zeit in erster Linie und in zunehmendem Maße während der akute und subakute disseminierte intravaskuläre Gerinnung Syndrome gestört, eine wichtige Rolle für die Express-Diagnose dieser Krankheit.

Autokoagulâcionnyj test

Autokoagulâcionnyj test (ACT) -hohe-Empfindlichkeit zweistufig, Beschreibt den Prozess der Blutgerinnung bei der Ausführung seiner internen Mechanismus. Als APTT, der Test ist nicht empfindlich auf Faktor VII-Mangel, aber seine Aussage nicht abhängen, den Inhalt von Fibrinogen (Ich-Faktor) im untersuchten plasma, Wie ist es anders als alle anderen unverbindlichen Probe-Koagulation.

Ein weiterer würde ACT ist, untersucht, die geschiedene Blut, stark verbessert die Empfindlichkeit Test, Mangel an Gerinnungsfaktoren und, Außerdem, die Ausführung des Gesetzes erfordert nicht die Verwendung von Kaolin und kefalina, Da die Standardisierung von Kontakt- und Fosfolipidnoj-Aktivierung-Gemolizatom in eigenen erreicht wird sondiert Erythrozyten.

Das Wesen des Gesetzes ist, die zu 2 ml Gipotoničeskogo-Lösung (0,222 %) Calciumchlorid wird hinzugefügt 0,1 ml Blut untersucht.

In dieser Gemolizat-Kalkstein-Mischungen von Protrombinazy und die Bildung von Thrombin, dessen Tätigkeit bestimmt sich durch konsequente Ergänzung des 0,2 ml Mischung zu 0,2 ml Plasma untersucht (jeder 2 m während der ersten 10 m, und dann jeden 10 Minuten für 1 Nein).

Plasma wird untersucht die Quelle von Fibrinogen, wo ist die Aktivität aus einer Mischung von Thrombin getestet.. Zahlreiche Studien haben gezeigt, Es könnte durch Blutplasma von gesunden Menschen oder Fibrinogen-Lösung ersetzt werden. In diesem Fall der behandelnde Blutfluss reduziert sich auf 0,1 — 0, 2 ml (können von dem Finger genommen werden!), was Wandelt den Autokoagulâcionnyj-Test in mikrokoagulâcionnyj (MKT) und macht es sehr bequem für den Einsatz in der Kinderheilkunde, einschließlich der Untersuchung der Blutstillung bei Neugeborenen.

Koagulâcionnaâ Aktivität in den AKP-Staaten und MKT Erstens ist wachsende und gesunde Menschen in der Regel erreicht sein Maximum 10-ten Minute, Inkubation von Blut-Kalzium-Mischungen (KKS), Beim Zusammenbruch geschieht hinter Plasma Substrat 10 ± 1 mit. Dann Koagulâcionnaâ KKS Aktivität beginnt zu sinken, Nachdenken über die Inaktivierung von Thrombin in sie bildete. Bei gemofiliâh, Wirkung von Heparin und andere Verletzungen der Koagulation Gerinnung Aktivität CCS drastisch reduziert, und das Maximum von 10 Minuten bewegt sich auf einen späteren Zeitpunkt. Wenn es einer früheren Hypercoagulation und deutlicher Anstieg der Trombinovoj Aktivität in CCS.

In einem Reagenzglas (Definition nur auf 10 Minuten Inkubation KKS) Es kann verwendet werden, um Geparinoterapiej zu überwachen. Der Vorteil dieser Technik vor dem Test aktivierte partielle Thromboplastin-Zeit ist, Es zerstört die Auswirkungen der verschiedenen Kefalinov zu Geparinovoe Gerinnungszeit.

Auf der Grundlage von ACT (MKT) entwickelt eine einfache und exakte Technik für die Differentialdiagnose der gemofilij.

Die Zahlenangaben in der Verweise-Tabelle Rechnungen ACT Zeugnis verwenden (MKT) als Prozentsatz ausgedrückt werden kann und werden dargestellt in Form von Grafiken-Autokoagulogrammy.

Аутокоагулограмма - Микрокоагулограмма

Zur Beurteilung sind einige allgemeine Parameter der Gerinnbarkeit des Blutes verbreiteten und instrumental Forschungsmethoden, hauptsächlich mithilfe von verschiedenen Koagulografov und tromboèlastografov.

Thromboelastography Gibt einen Eindruck, nicht nur hinsichtlich des Zeitpunkts der Blutgerinnung oder plasma, sondern auch über die Struktur und die mechanischen Eigenschaften des resultierenden Blutgerinnsel. In den letzten Jahren und Hardwareregistrierung eingeführt Methoden Standardisierung Kontakt- und Fosfolipidnoj Aktivierung der Gerinnung-Prozess. Darüber hinaus erstellt das Gerinnung-Diagramm für Masse allgemeine Koagulation Tests, APTT, Erworbener, Thrombin und andere mit automatische Aufzeichnung der Ergebnisse.

Methoden der Differenzierung der verschiedenen Defizit Gerinnungsfaktoren und deren Quantifizierung

Die folgende Tabelle zeigt, dass eine vorläufige Studie über die Gerinnbarkeit des Blutes mit den drei grundlegenden Tests Ihnen die Gruppe verschiedene Plasma-Faktor-Mangel Differenzierung Hemocoagulation ermöglicht. Also, die Verlangsamung nur Gerinnbarkeit Protrombinovom test ((I) die Art der Verletzung) unter normalen Zeugnis anderes Merkmal der erbliche Faktor VII-Mangel oder dies zu reduzieren Faktor in den frühen Phasen der Entwicklung von obstruktiver Gelbsucht oder den ersten 1-2 Tagen der Behandlung Antikoagulyantami indirekten, Wenn die Hemmung von Faktor VII-Synthese Fortschritte in seiner Entwicklung von einer Absenkung der Gerinnungsfaktoren andere k-vitaminozavisimyh.

Verstöße gegen die Grundtypen der Gerinnung Tests auf das Defizit von bestimmten Gerinnungsfaktoren plasma

Art der Verletzung

Knappe Faktoren untersucht plasma

Koagulation-Prüfungen

APTT, ACT

PV

TV

ICHVII+
ICH ICHXII+
 XI+
 IX+
 VIII+
 Von-Willebrand-Faktor+
 Plasmapräkallikrein+
 VM-kininogen+
IIIICH ICH++
 v++
 X++
 VII+
 IX+
 ICH+++
 XIII
IVDirektwirkende Antikoagulantien (Heparin, Geparinoidy usw..)+++
 Kombinierte indirekte Wirkung (kumarinы)++
Notiz. (+) -verlangsamt die Inanspruchnahme; (-) -kein Verstoß gegen die Blutgerinnung.

Verletzung nur interne Mechanismus der Gerinnung, t. es ist. aktivierte partielle Thromboplastin-Zeit und ACT (Typ II), Wenn der Mangel Faktor XII, XI, IX, VIII, Von-Willebrand (nicht in allen Formen), Präkallikrein und Kininogen VM. Mängel der erbliche Mangel an Gerinnungsfaktor XII, Prekallikreina und VM Kininogena es ist extrem selten und wird nicht von Blutung begleitet, Während Mangel Faktor VIII (Hämophilie A), IX (Hämophilie im) von-Willebrand-Faktor ist sehr oft (ist mehr 96 % alle geerbten coagulopathies) und begleitet von einer ausgeprägten Hämophilie. Zwischen weitere Ihnen in erster Linie, durchgeführte Differentialdiagnose.

Faktor XI-Mangel tritt relativ selten (ca. 0.5-1.0 % Alle Hämophilien), fährt mit einem sehr milden Blutungs (meist nach Verletzungen und Operationen) und eine Zwischenstellung zwischen der ersten Untergruppe von asymptomatischen Erkrankungen und Hämophilie und des von-Willebrand-Krankheit einnimmt.

Eine andere Art von Störungen, die durch die Dehnung als partielle Thromboplastinzeit und den AKP-, Prothrombinzeit. Es ist charakteristisch für Mangel der Faktoren V, X oder II oder der Komplex-Mangel von K-Faktoren vitaminozavisimyh (VII, X, IX, ICH ICH), Was ist wann beobachtet mechanische Gelbsucht und andere Arten von Vitamin k-Mangel, ebenso wie bei der Einnahme von anti-indirekten.

Und schließlich, wie aus der gleichen Tabelle ersichtlich, Vielleicht das Zeugnis von allen drei tests (IV-Typ), Das ist in erbliche und erworbene Hypo beobachtet.- und disfibrinogenemiâh (nicht alle), Bei der Einnahme von Antikoagulantien direkte Aktion (geparina, geparinoidov, Girudina usw..), Behandlung der Fibrinolyse und Aktivatoren Defibriniruûŝimi Drogen (Streptokinase, Urokinaza usw..), Blut scheint, pathologische und Antitrombinov Stoffe, Verbindung zu verhindern (Montage) Fibrin-Monomere-para-, krioglobulinov, Immunkomplexe, als auch in komplexen Verletzungen des Gerinnbarkeit, verursacht durch disseminierte intravaskuläre Gerinnung-Syndrom. Wann wird die Thrombin-Zeit oft in stärker und früher verletzt, als andere tests.

Bei der Einnahme von Konto Einschränkungen der Krankheit und ihrer möglichen Polypen oder sekundäre Verbindung mit anderen Arten der Pathologie und medizinische oder andere Einflüsse, das Vorhandensein oder Fehlen von Blutungen und ihren Typ richtig identifizieren den Ursprung dieser tiefgreifenden Verletzungen der Blutgerinnung.

Alles differenzierte Tests basieren auf dem Prinzip der Korrektur, t. es ist. über die Definition des, inwieweit die offenbart eine hämorrhagischen Krankheit beseitigt oder, umgekehrt, nicht ausgeschiedene Blutproben oder künstlich abgeleiteten Blut Zubereitungen mit notorisch bekannten Mangel Blutgerinnung Faktor.

Spezialisierte Labors für diesen Zweck erstellen für sich eine Sammlung von Faktorodeficitnyh Plasma des Blutes, bekommen sie von Patienten mit tiefen wissentlich installierten (Weniger 1 %) ein Mangel an jeder der Faktoren und halten sie in einem kleinen Paket (auf 0,5 ml) Wenn Temperatur liegt 30 ° C. Falls erforderlich, diese Beispiele sind wiedergefrorenem und Diagnosetests verwendet.

Plasma, einer zufälligen Fixierung aufheben oder ungenutzt unterzogen, Erneute Vereisung werden nicht. Die korrigierende Tests sollte nicht mit Plasma-immun-Inhibitoren ein Faktor verwendet werden. Eine Reihe von Unternehmen im Diagnostik-Kits Lyophilisiert enthält getrocknete Blutproben mit Mangel der Koagulation Faktoren definiert (Plasma-Substrat). Jedoch, viele Gerinnbarkeit nur selten in der klinischen Praxis, in diesem Zusammenhang verwendet künstlich mit normalen Blutbestandteile mit Mangel an bestimmte Gerinnungsfaktoren vorbereitet, sowie heterogene plasma (Küken, Enten, usw.).

Die Tabelle enthält Informationen über den Inhalt der Gerinnungsfaktoren im Blut-Komponenten, verwendet für die Korrektur der Gerinnung Tests abhängig von der Zeitpunkt der Speicherung. Mit Hilfe dieser Tabelle, einfach das Zeugnis von einem der drei primären Blutgerinnung Tests zu entschlüsseln. In Justizvollzugsanstalten Techniken werden diese Arten von Tests verwendet., Kontakt-standardisiert und Aktivierung Fosfolipidnoj, t. es ist. Kaolin-Kefalinovye oder gemolizata (in einem Akt der).

 

Der Inhalt der Gerinnungsfaktoren und Plasma mit verschiedenen Aufbewahrungsfristen, verwendet, um die rehabilitative Tests durchführen

Blutplasma

Blutgerinnung Faktor

interner Mechanismus

externen Mechanismus

VIII-IX-XI-XII precallycreine

(VII) X V ICH ICH

Native (mit Regal 18 Nein)++++++++
DNA, die adsorbierten *+-++–+-
Mit mehr Regal 24 Nein-+++++–
Mit der Haltbarkeit von 2-4 Tage (bei einer Temperatur von + 4 ° c)Nicht verwendet++-+
Profil′trovannaâ **Nicht verwendet–++
Native Plasma Küken oder Entenküken (bis zum Alter von 3 bis 4 Tage)+++-Nicht verwendet
Notiz. (+) — Verfügbarkeitsfaktor; (-) -mangelnde.
* Adsorption von Bariumsulfat erfolgt entweder von Plasma-oksadatkoj (Baso4-Plasma). oder Allûminnâ-Hydroxid-Gel von Plasma-citratnoj (Zum(OH)3-Plasma).
** Filtern erfolgt durch zwei Asbest filter (Zejca Filter) — mit 20 % (oberen filter) und 30 % (untere filter) Asbest entweder durch doppelte oder dreifache bzw. 30 und 20 % Filter.

 

Prüfungen des Patienten Blutplasma mit Plasma zu mischen, ein Mangel an diesem oder diesem Faktor hat bekanntlich bekannt werden.

Aktivierte partielle Thromboplastin-Zeit im untersuchten Plasma definieren, normalen plasma (Kontrolle) und im Plasma mit notorisch bekannten Faktoren VIII-Mangel (von der Hämophilie a patient), IX (von Hämophilie-Patienten in), XI und XII. Bereiten Sie eine Mischung aus Proben untersucht Plasma citratnoj (7/10 Band) und im Einklang mit jeweils knapp Plasmen (3/10 Band), Seit dem Defizit Faktor VIII und IX (die häufigsten Formen der Pathologie!).

Die Mischung fügen Sie hinzu, Kaolin und kefalin, und 2 Minuten machen ihre rekal′cifikacii (bei 37 ° C). In der Mischung, wo die aktivierte partielle Thromboplastin-Zeit nicht normalisiert, Es ist ein und dasselbe Blutgerinnungsstörung.

Also, Wenn der Patient Thema partielle Thromboplastin-Zeit, die nicht zum normalen Blutplasma Patienten mit notorisch bekannten Mangel an Faktor VIII hinzufügen aktiviert, aber Korrigiruetsâ blood Plasma von Patienten mit Mangel an Faktor IX, Es hat eine Hämophilie A.

Ähnlich, aber basierend auf erworbener Test unterscheidet Defizit Faktoren Protrombinovogo komplexe (X, v, (VII) und (II)).

Thromboplastin Generierungstest

Zur Unterscheidung zwischen Verletzungen des inneren Mechanismus des Blutes ist Blutgerinnung am häufigsten gebrauchte Klassiker Thromboplastin Generierungstest mit der Ersetzung der Thrombozyten-Komponente, Herstellung erfordert viel Zeit und Blut, Kefalinom Thromboplastin Testgenerierung, die Mängel seiner Schwerfälligkeit sind, die Notwendigkeit zum Kochen große Anzahl von Reagenzien, einen erheblichen Zeitaufwand bei der Ausführung.

Korrektur-test, basierend auf der Grundlage der Test autokoagulâcionnogo.

Aufgaben des Express-Diagnose erfüllt einen weiteren Korrektur-test, eine Korrektur der gleichen Komponenten von der normalen Bluttest Autokoagulâcionnogo basierend auf der Grundlage.

Dieser Test ist sehr zuverlässig, schnellere und einfachere Implementierung und erfordert eine kleine (nicht mehr 0,5 ml) Menge an Blut von den untersuchten, Es kann verwendet werden, in der pädiatrischen Praxis.

Es, Testen Sie wie Thromboplastin-generation, zur Korrektur von Adsorbirovannuû Serum und plasma, die erneut zentrifugiert, bevor Untersuchungen. Drei Fläschchen gegossen werden 2 ml 0,222 % Calciumchlorid-Lösung und in zwei von ihnen hinzufügen 0,1 ml adsorbiert normale Blutplasma (1-Ich Rohr) und 0,1 ml alte normale serum (2-Ich Rohr). In die anderen drei Rohren gemacht, indem 0,2 ml Normalplasma citratnoj. Dann werden auf alle Rohre mit einer Lösung aus Kalzium-Chlorid hinzugefügt 0,1 ml Citratnoj Blut untersucht.

Genau eine 4 min Inkubation des Gemisches aus seiner Svertyvaûŝuû Aktivität testen auf Normalplasma.

Der starke Rückgang von gerinnen eine Tätigkeit nur im ersten Reagenzglas (mit normalen BaSO4-Plasma) krank Defizit Faktor IX zertifizieren (Hämophilie im), nur im zweiten Reagenzglas (mit dem alten serum) geht es um den Mangel an Faktor VIII (Hämophilie A); Wenn Korrektur in beide Reagenzgläser geschieht (gleich stark), dann, offensichtlich, Es gibt ein Mangel an Faktor XI oder XII (cm. Tabelle. 14).

Koagulation-Prüfungen, Differenzierung der inneren menschlichen Blutgerinnung Mechanismus (in der normalen Protrombinovom und trombinovom)

Knappe Faktoren untersucht plasma

Normalen Blutbestandteile, Hinzu kommt die untersuchten plasma

DNA-adsorbiert plasma (ohne den Faktor IX)

Alten serum (ohne Faktor VIII)

Mischung aus gebundenen Plasma und Serum von alten

Faktor VIII++
Faktor IX++
Faktoren XI und XII+++
Notiz. (+) -Normalisierung der Blutgerinnung; (-) -Mangel an Normalisierung der Blutgerinnung.

 

Dieser Test ist sehr empfindlich, Da geforscht wird auf verdünnt 20 Einmal Blut Entschädigung Faktor 3 Thrombozyten gemolizatom. Nur Nutzung Reagenz ist eine Hypotonische Lösung von Kalzium-Chlorid, Was macht eine öffentliche Gerichtsverhandlung.

Ebenso ist einfach eine Technik, rehabilitative Proben, durchgeführt auf der Grundlage von Protrombinovogo Test zur Differenzierung von Faktor II-Mangel, V und VII +, X (in der Tabelle).

 

Koagulation-Prüfungen, Differenzierung von Faktor II-Mangel, V und VII +, +X, auf der Grundlage der Protrombinovogo-Test durchgeführt (unter normalen Trombinovom Zeit)

Knappe Faktoren untersucht plasma

Normalen Blutbestandteile, Hinzu kommt die untersuchten plasma

DNA-adsorbiert plasma (ohne Faktoren II, VII, X)

Alten plasma (ohne Faktor V)

Profil′trovannaâ plasma (ohne die Faktoren VII und X)

Alten serum (ohne die Faktoren (II) und (V))

Faktoren VII oder X++
Faktor V++
Faktor II++
Notiz. (+) -Normalisierung der Blutgerinnung; (-) -Mangel an Normalisierung der Blutgerinnung.

 

Um das Defizit zu umreißen Faktoren VII und X, Test läuft zusätzliche Koagulation mit dem Zusatz von den untersuchten Plasma Mörtel vergiften Schlangen Gurzy — Medikament lebetoks (Diese Konzentration des Giftes ausgewählt, reduzieren, die in Anwesenheit von Kefalina und Calciumchlorid Ursachen für 20-25 mit; alle Zutaten sind die Anzahl 0,1 ML und mix) (die folgende Tabelle).

Mit diesem gleichen Zweck verwendet die Droge Venom Viper Russell, Leben in Indien (Zubereitung stipven).

Koagulation-Prüfungen, ausschlaggebenden Faktoren VII und X des Defizits mit poison gurzy (lebetoks)

Knappe Faktoren untersucht plasma

Tests

mit poison Gurzy + Kefalin + Kalzium-Chlorid

mit poison Gurzy, Kefalin, Kalzium-Chlorid + Profil′trovannaâ Blutplasma (Quelle der Faktoren V und VIII)

Prothrombin

Der X-Faktor
Faktor VII++
Notiz. (+) -Normalisierung der Blutgerinnung; (-) -Mangel an Normalisierung der Blutgerinnung.

 

Komplette Differentialdiagnose, falls erforderlich, die Quantifizierung der knappe Faktoren oder ihre spezifische immun-Hemmer, Was sind sehr spezielle standardisierte Methoden. Diese Techniken verwendet, um Kurven Zucht Mischproben von normalen Blutplasma mit Korrektur des Defizits bauen alle Faktoren, Zusätzlich zu den untersuchten. Auf diese Kurven richtet sich nach der Aktivität des untersuchten Faktors im Plasma von Patienten mit.

Besonders Es ist wichtig, die Konzentration der Faktoren VIII und IX zu quantifizieren, sowie die Verfügbarkeit von ihren Inhibitoren bei Patienten mit Hämophilie ein und b (vor allem vor und während der chirurgischen Eingriffen und Intensivtherapie), sowie im latenten Profuzhnykh postpartale Blutungen, Wann ist es notwendig, DVS-Sindrom und weitere seltene Pathologie zu unterscheiden – die Entstehung von immun-Faktor-VIII-Inhibitor (noch viel seltener – Faktor V).

Ein tiefes Defizit von Faktor XIII (eine sehr seltene erbliche Pathologie) alle Koagulation normalen Proben, aber die Klumpen auflösen in 5 m oder 7 m Harnstoff.

Hilft zu unterscheiden verschiedene Koagulation Faktoren Defizit auch rechnerischen Grad und, insbesondere, Das Timing der Normalisierung Lesungen Tests nach der Injektion von Patienten mit Blutprodukten, t. es ist. die Buchhaltung-Korrektur live auf der Methodik der l. 3. Barkahan.

Diese Technik ist besonders effektiv, wenn die große Unterschiede in der Lebenserwartung differenzierbare im Umlauf Faktoren. Also, Dauer der Halbwertszeit Faktoren Protrombinovogo komplexe variiert von mehreren Stunden (Faktor VII) bis zu ein paar Tagen (Faktor II). Eine Zwischenposition zwischen ihnen besetzen Faktoren X (2-2,50 Tage) und V (12-18).

Daher, nachdem eine massive Explosion der Transfusion von Plasma-Prothrombin-Index im steigt Faktor VII-Mangel sehr kurz, bei Mangel an Faktor ist V eher langfristig (ca. 4 - 6 Mal), aber mit einem Defizit von Faktor X und, insbesondere, (II) über einen längeren Zeitraum (mehr als 1-2 Tage). Es ist bezeichnend in diesem Zusammenhang und die Auswirkungen auf den Index der Protrombin Vorbereitung PPSB (ein Konzentrat von Faktor VII, IX, X und (II)). Er normalisiert auch kurz Prothrombin-Zeit am Mangel von Faktor VII und langfristiger (viele Male!) bei Mangel von Faktor X und (II). Da dieses Medikament ist kein Faktor V, Dieses Defizit sie nicht Korrigiruetsâ.

Ein ähnlicher Unterschied offenbart Transfusion und Substitution Therapie interner Mechanismus der Gerinnungsfaktoren (XII, XI, IX und VIII), Das ist registriert, aktivierte partielle Tromboplastinovym test.

Von besonderem Interesse ist die Dynamik der Anpassung der Höhe der Faktor VIII und Zeugnis in APTT Transfusionstherapie von Hämophilie ein und von-Willebrand-Krankheit. Die erste dieser Krankheiten identifiziert sofortige maximale Verbesserung der Blutgerinnung nach transfusion (Spray, schnell!) Antigemofil′noj Plasma oder Kryopräzipitat, und dann ziemlich schnell (für 10-18 Uhr) der stetige Rückgang der, Beim von-Willebrand-Krankheit zugenommen hat einige der Koagulation Aktivität innerhalb von wenigen Stunden nach transfusion, und dann ihren Niedergang ist viel langsamer, als. In diesem Zusammenhang Griff bei die Behandlung von von Willebrand Disease mehr selten zu Zamestitel′nym transfuziâm, als Hämophilie ein.

Studie über die funktionelle Aktivität der Koagulation Faktoren und Komponenten Kallickrein-Kininova und fibrinolytische Systeme mit chromogenen Substraten

Methoden basieren auf Forschungstätigkeit von proteolytischen Enzymen und ihren Inhibitoren, Teilnahme an Blut, Fibrinolize und Bildung von kinins, die Intensität und Geschwindigkeit der dieser sensiblen speziell proteinspaltenden Enzymen von Peptiden, Wenn die Verschlechterung der Farbstoff befreit (Β-nitroanilin).

Der Grad der Färbung reagierenden Mischungen Spektralphotometrisch bestimmt, und seine Intensität sind entsprechende Enzyme Aktivität beurteilt (Gerinnungsfaktoren, kallickreina, Plasmin, etc..), und auf die Hemmung erfolgt über die Aktivität des Enzym-Hemmer.

Also, zB, Wirkung von Heparin und Antithrombin III kann ausgewertet werden, um die chromogene Substrate Aufteilung Faktor Xa oder Trombinom zu mildern, und Aktivität von α2-Antiplazmina – die Wirkung von Plasmin entsprechende chromogenen Substrat reduzieren. Chromogene Substrate oder digital-signage (zB, s-2222), entweder namens Hromozinami mit einem abgekürzten Präfix, bezeichnet das Enzym, um die empfindlichen Untergrund (zB, Chromozym PL-Substrat plasmin, Chromozym TH-Thrombin-Substrat, Chromozym PK-Substrat Prekallikreina/Kallickreina und t. d.).

Chromogene Substrate befähigen Forschung des Systems der Blutstillung, aber sind nicht verfügbar für viele Labore. Einige der Forschung, gemacht, mit Ihnen, keine Vorteile gegenüber konventionellen Koagulâcionnymi Tests und geben Sie Ihnen passende Ergebnisse; in anderen Fällen ihre Verwendung vereinfacht und beschleunigt die Forschung, macht es genauer; Drittens, diese Methoden sind unabhängig und nicht durch Koagulâcionnymi Tests ersetzt werden (zB, Prekallikreina definition).

Immunologische Erkennung von Komponenten des hämostatischen Systems

Immunologische Erkennung von Komponenten des hämostatischen Systems führt Methoden:

  • Immunopräzipitation;
  • Immunoèlektroforeza;
  • Radioimmunologičeskimi und andere mit entsprechenden Antiseren

Wenn diese Inhalte im Plasma Antigen ein Gerinnungsfaktor gemessen wird (oder seine Fragmente), eher als funktionelle Aktivität, Das kann im normalen Inhalt des Antigens im Plasma drastisch reduziert werden. Diese Situation tritt häufig auf alle Fälle, wo im Körper sind abnorme (funktionell defekt) Faktoren, bewahren ihre Antigenität, aber beraubt die Fähigkeit zur Teilnahme an gemostaze.

Dies ermöglicht Ihnen, die vollständige Einstellung der Synthese der relevanten Faktoren und Bildung ihrer abnormen Formen unterscheiden.

Jedoch können einige Komponenten des hämostatischen Systems nur immunologisch bestimmt werden.

Zu dieser Gruppe gehören so wichtige Studien, die Definition der folgenden Komponenten:

  • b-тромбоглобулина;
  • a2-макроглобулина;
  • Protein C und S;
  • Antigene Faktor VIII:C und VIII:RSpeicher;
  • Produkte der Fibrinolyse (PDF);
  • neoantigenov kompleksov Thrombin - Antithrombin III und Plasmin - Antiplasmin;
  • eine Reihe von anderen Tests.

Daher immunologischen Studie signifikant ergänzen die funktionelle Bewertung der verschiedenen Komponenten des Systems der Hämostase.

Diagnostische Tests, basierend auf der Verwendung von Medikamenten, die als Reagenzien aus Schlangengiften

Es ist seit langem etabliert, Gifte, die so viele Schlangen hochaktive proteolytische Enzyme enthalten, zu gerinnen und Einfluss auf verschiedene Teile der Koagulation Kaskade. Infolgedessen sind Schlange-Gifte und Koagulazy von ihnen für die Anerkennung des hämostatischen Erkrankungen weit verbreitet, quantitative Bestimmung der Gerinnungsfaktoren, Identifizierung und quantitative Bestimmung von löslichen Fibrin-Monomere komplexe (RFMK) und eine Reihe anderer Studien.

Proben mit Schlange-Gifte sind oft viel einfachere und schnellere Diagnose von hämostatischen Störungen.

Diese Tabelle enthält Daten über den Wirkmechanismus von Giften auf Svertawatuyu Blut und Diagnosemöglichkeiten eines jeden von Ihnen.

Gemokoaguliruûŝie Eigenschaften der Schlange Gifte und deren Einsatz in diagnostischen Verfahren

Der Name der Schlange * und die Vorbereitungen der ihre Gifte

Der Mechanismus der Wirkung auf svertawatuyu

Unterschiede von den Eigenschaften des natürlichen Gerinnungsfaktoren

Mögliche diagnostische Anwendung

Levantine Viper Vipera lebetina); lebetoks (Viper Russell; stipven)Activator X-factor (in Anwesenheit von Kalzium, Faktor V und fosfolipida **)Im Gegensatz zu Gewebe Rinderthromboplastin enthält keine Fosfolipida und nicht seine Defizite zu kompensieren. Muss keinen Blutgerinnung Faktor VII implementierenBestimmung der Faktoren und Thrombozyten und seiner Befreiung bei der Aggregation; Unterscheidung Defizit Faktoren VII und X; Quantifizierung der Faktor X
Eva mnogočešujčataâ (ECHIS multisgumatos) und EFA sand (ECHIS carinatus); ekarin, ehitoksFaktor-Aktivator II, atypische Formen Thrombin-emIm Gegensatz zu α-Thrombin, Thrombin-It wird durch Heparin und Antitrombinom III nicht blockiert., Faktor XIII wird nicht aktiviert werden. (Klumpen werden in Harnstoff analysiert.), Koaguliruet gesamte Fibrinogen und bündeln alle löslichen Fibrin-Monomere komplexeDie Identifizierung der Koagulation, einschließlich der versteckten, bei der Behandlung von heparin; Quantifizierung von Fibrinogen und nur zum Zweck der Diagnose RFMK Thrombinemia und DIC- Syndrom
CopperHead Vulgaris (Halus Halus Aghistrodon), sowie viele Klapperschlangen tropischen Amerika und Asien; Ancistron-H1, reptilaza, botropklotaza, krotalaza, Ancrod, etc..Roll-Fibrinogen, Otŝeplââ einzige Peptide und Fibrin bilden Monomere sind unvollständig (des a fibrin)Nicht zerspaltet Peptide an, Faktor XIII und Thrombozyten wird nicht aktiviert., Deckel verursacht keine Klumpen, Heparin wird nicht blockiert, analysiert schnell gerinntDisfibrinogenemij Anerkennung; Bewertung der Rolle von Heparin in Verletzung der endgültigen Liquidierung phase (im Vergleich zu Trombinovym Zeit)
* Alle diese Schlangen leben in Zentralasien (in Klammern sind die anderen Arten mit einem ähnlichen Mechanismus der Aktion und Markenmedikamente von Ihnen; Viper Russell lebt in Indien, Viper-Daboja in Australien.
** Gleichwertige Kefalina und Trombozitarnogo Faktor 3.

 

Diese Möglichkeiten haben noch mehr erweitert, wenn Sie mehrere Gifte und einfachsten gemeinsamen Koagulation Tests verwenden. Also, zB, gleichzeitige Anwendung der Koagulation assays vergiften Gurzy und EFA können Sie leicht Mangel Faktor VII unterscheiden, X-V II (in der folgenden Tabelle), und mit einer zusätzlichen Korrektur gefiltert Normalplasma (Quelle der Faktoren V und II) — X und V Faktoren Mangel.

Koagulation Tests mit verschiedenen Giften, differenzierenden Defizit Faktoren Protrombinovogo komplexe

Knappe Faktoren untersucht plasma

Tests

mit poison Gurzy + kefalinom

mit poison EFA

Prothrombin

VII++
X + V+
ICH ICH
Notiz. (+) -Normalisierung der Blutgerinnung; (-)-Mangel an Normalisierung der Blutgerinnung.

 

Definition der grundlegenden physiologischen Antikoagulantien

Das wichtigste ist die definierende Aktivität der grundlegenden physiologischen Antikoagulans — Antitrombina III, Reduktion die genetisch bedingt sein kann (primäre Thrombophilie) oder sekundär, durch intensive Konsum (DIC, massive Thrombose) oder beschleunigten Stoffwechsel (Heparin-Behandlung, L-asparaginazoj, synthetische Empfängnisverhütung) und die Belagerung von Immunkomplexen, paraproteinami, mit Fibronektin, akute-Phase-Proteine.

In jedem Fall, die reduzierte Aktivität Antitrombina III unter 60-65 % unterstützt intravasale Gerinnung, macht weniger ausgeprägt Antikoagulans heparin. Jedoch sehr oft zwischen dem Grad der Empfindlichkeit und Senkung der Antitrombina III, Geparino kein einheitliches Muster Konformitätserklärung.

In der Regel herrscht eine Schwächung der Antikoagulântnogo Wirkung von Heparin deutlich über den Grad der Verringerung der Aktivität Antitrombina III. Bewiesen, Dieses Defizit an verschiedenen Formen der Antitrombina III seine Affinität zu Heparin kann in unterschiedlichem Maße variieren.. Außerdem, verschiedene Fraktionen von heparin, das Verhältnis welches Medikament sehr abgehackt, haben Sie auch unterschiedliche Affinität zu Antitrombino III. Daher praktisch wichtiger zu erkunden wie die tatsächliche Aktivität Antitrombina III, und seine Fähigkeit, durch Heparin in flinke Antikoagulans beeinflusst werden.

Antikoagulans Aktivität Antitrombina III

Antikoagulans Aktivität Antitrombina III richtet sich nach der Fähigkeit zur Analyse von Blutplasma (geschieden Copley ist eine Methode der Vinterštejna oder Defibrination des thermischen denaturaciei bei 56 ° С-Loligera-Methoden, Abil′dgaarda usw.) inaktivieren innerhalb kurzer Zeit den Eingang extern Thrombin. Die Restaktivität von Thrombin in solch einem Plasma kann durch seine Koagulation-Aktivität gemessen werden (auf fibrinogene, Bariumsulfat adsorbiert plasma) entweder durch die Spaltung von Hromogennogo Substrat, empfindlich gegen Trombinu oder Faktor Xa (als Antithrombin III und inaktivieren Faktor).

Heparin-Kofaktornaâ Tätigkeit

Heparin-Kofaktornaâ-Aktivität im Plasma Antithrombin III enthaltenen ein längerer Zeitraum wurde anhand der Test-Toleranz gegenüber Geparino plasma, die gelten kann als Richtwert, Da es eine sehr breite Palette von normalen Indikatoren und nicht ausreichend wiederholbare gibt.

Sehr viel genauer und unterhält eine Izvodimy testet, untersucht die Auswirkungen der verschiedenen Konzentrationen von Heparin für Thrombin Zeit erkundet plasma, die eine kleine Menge von Blutplättchen. Vergleich mit Dehnung von Thrombin Zeit Kontrolle Blut Normalplasma, hinzugefügt die gleichen Heparin-Proben.

Also, in der Thrombin-Geparinovom hinzugefügt Test untersuchten Plasma solche Mengen an heparin, Dieses Steuerelement erweitern Thrombin Zeit mit 15 bis zu 32-35 mit (geringe Konzentration) und bis zu 95-110 mit (die hohe Konzentration von heparin). Diese Zahlen sind berechneten Indizes der Aktivität Antitrombinov plasma (AARP) und reservieren Antikoagulântnogo plasma (ARP).

Ähnliche Techniken werden auch häufig verwendet, um beide der menschlichen Thrombin-Inaktivierung von Koagulation Tests bewerten, und die chromogene Substrate.

Immunologische Erkennung von Antigen Antitrombina III

Immunologische Erkennung von Antigen Antitrombina III ermöglicht es, verschiedene Arten von Thrombophilie zu unterscheiden:

  • ungenügende Synthese von Antitrombina III (gleiche Antigen Marker angemessen abgesenkt verringern Aktivität);
  • mit einer gespeicherten Synthese von abnormen und funktional minderwertige Formen (Antigen Marker ist viel höher, als die Aktivität).

Proteine C und S, Thrombomodulin und α2-Macroglobulin sind Immunoènzimatičeskimi Methoden definiert.

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