Das Studium des vaskulären Thrombozyten Hämostase

Verletzungen auf dieser Ebene der Blutstillung kann mit einer Neigung zu Blutungen oder Thrombosen auftreten, je nachdem, welche ausgewählt Forschungsmethoden. Außerdem, Alle Forschungsmethoden Thrombozyten Blutstillung in primäre und sekundäre unterteilt, Tests oder zweiten Reihe, die nur in dem Fall anwendbar, bei Verwendung von Tests deckten Verstöße. Der Haupt (bazïsnım) Die folgenden sind Tests.

Die Proben für die Widerstands (Sprödigkeit) Kapillaren - Manschette, Glas, angiorezistometriya

Aus diesen Tests, die am leichtesten zugängliche und dennoch ausreichend informativ Probieren Konchalovsky-Tiller-LEED.

Die Schätzung basiert auf der Anzahl und Größe der Blutung gemacht, auf der Handfläche des Unterarms ausgebildet (in einem Kreis mit einem Durchmesser 5 cm) Nach 5-minütiger Kompression bei einem Druck Stulpe Schulter 12-13,3 kPa (90-100 Mm Hg. Art.). Die Ergebnisse werden in Betracht genommen durch 5 min nach der Entfernung der Manschette. Anzahl Petechien mehr 10 weist auf die erhöhte Anfälligkeit der Mikrogefäße, denen es oft mit Thrombozytopenie oder Thrombozytenfunktion Verletzung angiotroficheskoy zugeordnet. Berücksichtigt auch das Auftreten von Blutungen und rechts unter dem Kragen.

Banochnaya Probe aus - wird in der gleichen Hautbereich an der Unterdruckaufbau in Stufen durchgeführt 20 kPa (150 mm Hg. Art.) und unteren. Bei der Beurteilung der Ergebnisse gezählt Petechien, bei Banken erschienen.

Die Proben von der Dauer und der Größe der Kapillarblutungen

Im klassischen Duke-Studie Unterwalze Ohrläppchen nach einer leichten Erwärmung ihr durchbohrt zu einer Tiefe von 3,5 bis 4 mm. Die Blutung in dieser Studie in der Regel nicht überschreiten 4 m, ein Tropfen Blut auf Filterpapier sind relativ niedrig und beginnen, da ca. 1-1,5 Minuten nach der Punktion schnell ab. Bei Thrombozytopenie ausgedrückt (Weniger 20 Zinn 1 l) Plättchenfunktionsstörung und schwere Blutungen Zeit erhöhte sich auf 20-40 Minuten, Blutflecken sind viel größer und die langfristige Abnahme oder vermindern die Wellen, dann wieder zu erhöhen. Duke Probe sind nicht empfindlich genug,, in 2/3 Patienten mit thrombocytopathies es gibt normale Ergebnisse.

Empfindlicher Tests, bei denen die Blutungszeit wird auf dem Hintergrund einer künstlich geschaffenen Venostase suchten, für die Schulter an der Manschette eine Vorrichtung zur Messung des Blutdrucks übereinandergelegt und für die Studie unterstützt die Druck, gleich 5,3 kPa (40 mm Hg. Art.). Vor dem Hintergrund einer solchen Stauung in Borchgrevink Probe-Vaaler auf der palmaren Fläche der oberen Drittel des Vorderarms Lanzette angewendet Quer Inzisionstiefe 1 mm und einer Länge von 8-10 mm (die Rate der Blutungszeit - bis 10 m), und probieren Ivey et al. das gleiche auf den Unterarm Lanzette angewendet, um Blut aus einer Fingerpunktion drei Quer Tiefe zu ziehen 3 Millimeter (die Rate der Blutungszeit - bis 7 m).

Vor dem Hintergrund der gleichen venöse Stase geführt Eine Studie über. FROM. Shitikova, wobei in Endphalangen angewandt stechen Tiefe 3 Millimeter, dann wird die Spitze des Fingers eingetaucht in eine Tasse 5 ml isotonischer Natriumchloridlösung und gezählt Blutungszeit im Durchlicht (Wenn die Lösung intensiv mit Blut befleckt, die Folge zum Finger auf einen anderen Becher verschoben). Die Menge des Blutverlustes wird durch die Zunahme des Volumens der Flüssigkeit in den Becher fest (die Rate der Blutungszeit - bis 4 m, das Volumen an Blut verloren - aus 0,01 bis 0,4 ml).

Im Test T. N. Shushkevich verlorene Blutvolumen wird durch die Farbe von Ammoniak bestimmt (0,04 %) , die eingetaucht Papier mit Blutflecken sind, kolorimetrisch auf der medizinischen Kolorimeter.

Indikationen Tests für die Dauer der Blutung, Abnormal, Hinweise auf Missbrauch ausgedrückt plättchen vaskuläre Hämostase, Doch unter normalen Ergebnisse dieser Proben nicht mild ausgedrückt Thrombozytopathie ausschließen.

Zählen der Anzahl der Blutplättchen

Zählen der Anzahl der Blutplättchen (in einer Zählkammer unter Goryaeva Phasenkontrast oder Farbton, oder mit Hilfe von Partikelzähler) - Der wichtigste Weg, Thrombozytopenie und Thrombozytopathie diagnostizieren, fortfahren mit kontinuierlichen oder intermittierenden Verringerung der Menge dieser Zellen (Anomalie Bernard-Soulier, Meia Hegglina und andere.).

Zählen der Anzahl von Blutplättchen schlägt auch vor,, ob es möglich ist, für die Durchführung ihrer weiteren funktionellen Forschung und in welcher Weise es getan werden sollte (mit Anreicherung Blutplättchen oder ohne, photometrisch oder mikroskopisch usw.. d.).

Die Untersuchung der Grße von Blutplättchen in den Blutabstrichen – trombotsitometriya

Die Untersuchung der Grße von Blutplättchen in den Blutabstrichen (trombotsitometriya) Es erlaubt Ihnen, eine vorläufige Entscheidung über die verschiedenen Populationen von Zellen im Blut der Test machen und Informationen über eine Reihe von Anomalien, sowie die Sättigung des Plättchenkörnchen.

In einigen Thrombozytopathie (Wiskott-Aldrich-Syndrom) Blutplättchen werden durch sehr kleine dominiert (bis 2 Mikrometer im Durchmesser), während andere - Riesenformen (Anomalie Bernard-Soulier, Meia Hegglina) - Um 8 m oder mehr,. In einer Anzahl von diesen Zellen schlecht Thrombozytopathie Granulaten (cm. unten), während andere - verletzt die Zentralisierung der Granulate in Thrombozyten Verbreitung auf dem Glas, , dass eine Verletzung der Reaktion und der Veröffentlichung von Granulat sie Stoffe enthalten, für die Durchführung der Blutstillung notwendigen. Alle diese Eigenschaften, und die Fähigkeit der Blutplättchen zur Verbreitung und Bildungsprozesse, Bewertung der Struktur dieser Zellen können unter Verwendung herkömmlicher und Rasterelektronenmikroskopie untersucht werden, und durch die Interferenz der Nomarski-Optik.

Das Zurückziehen eines Blutgerinnsels regelmäßig mit schwerer Thrombozytopenie verletzt (T in weniger als 30-40 1 l) und in einigen Formen der Qualitätsunterlegenheit von Blutplättchen, oft - mit Glanzmann trombotsitoastenii, urämisches Thrombozytopathie usw..

Forschungs adhäsiv Aggregation von Blutplättchen (AAFT)

Forschungs adhäsiv Aggregation von Blutplättchen (AAFT) - Das wichtigste Element der Labordiagnose der meisten Thrombozytopathie. Derzeit ist eine Reihe von leicht implementierbare und öffentlich zugänglichen Forschungsmethoden, einschließlich visueller, mikroskopische und Hardware (Aggregometrie, Mikrofiltern und anderen.) Registrierung, um diese Funktion annähern können den folgenden Vorgang zugeordnet werden.

Methoden der Retention von Thrombozyten auf dem Glas (oder Filter)

Thrombozytenzahlen wurden im venösen Blut vor und nach der Übergabe an den Standard der Geschwindigkeit durch die Säule mit Glasperlen oder Glasfasern Zopf durchgeführt; Verlust von Blutplättchen aus dem Blut werden nach Grad der Haftfähigkeit beurteilt.

Mehr Verfügung, wenn auch etwas weniger genaue, Verfahren zur Bestimmung der Anzahl der Thrombozyten im Blut vor und nach dem Kontakt mit dieser innerhalb einer bestimmten Zeit mit der Innenfläche des Kolbens, bei einer bestimmten Geschwindigkeit rotierenden. Ein genaueres Verfahren zur Bestimmung der Verzögerung Thrombozyten Millipore Filter (Porendurchmesser - 15-20 Mikrometer). Bei diesen Tests können Auswertung aus der Erhöhung des Druckgradienten stromaufwärts geleitet und stromabwärts des Filters werden (verstopfte Poren und Plättchenaggregaten führt zu einem Anstieg in diesem Index).

Verfahren zur Untersuchung der Aggregation von Blutplättchen

Hämolysat-Aggregationstest basierend auf der Fähigkeit Hämolysat gewaschenen Erythrozyten, im Brutsuchten 10^-2 und 10^-6, Rühren, um eine Aggregation in seinem Plasma erzeugt, hat eine große Anzahl von Blutplättchen (Volumenverhältnis von Citratplasma und Hämolysat - 1,0:0,2). Unter Berücksichtigung der Zeit des Auftretens der Aggregation (die Geschwindigkeit, mit hoher Konzentration mit Hämolysat-11-17, low - 40-54 mit) und ihrer Schwere. Die Dynamik des Prozesses und seine Intensität kann als photometrische abschätzen (Medical Colorimeter, Grünfilter, Rühren) und jedes Design agregografe.

Wenn der grafische Anmeldeverfahren unter Verwendung einer hohen Verdünnung Hämolysat (10^-6) Es bietet eine Zwei-Wellen-agregatogrammu, in welcher die zweite Welle mit der Freisetzung von endogenen Blutplättchenaggregation assoziiert Stimulanzien - ADP, Katecholamin, Thromboxan usw.. Diese zweite Welle wird durch die Reaktion der Freisetzung gekennzeichnet, es ist nicht in der Abwesenheit von Blutplättchen dichten Granula beobachtet (Speicherpool Krankheit) oder unter Verletzung der Reaktionen freigeben (Aspirin-ähnliche Syndrom und andere.).

Hämolysat-Aggregationstest zur Verfügung steht, um in jedem Labor durchführen, Es erfordert keine speziellen Reagenzien.

Visuelle Mikromethode Bestimmung der Thrombozytenaggregation

Sein Wesen besteht darin,, dass unter silikonirovaniya Venenblut erhaltenen stabilisierten doppelte Kapazität 3,8 % Natriumcitrat (Verhältnis 2,4:0,6 ml), es wird zentrifugiert 6 Minuten bei 100 v / / min, und das erhaltene plättchenreiche Plasma wird durch angewendet 0,02 ml auf Glasobjektträgern und mit dem gleichen Volumen aggregierende Mittel behandelte - ADP, Thrombin, Collagen, Noradrenalin oder ristomycin. Endkonzentrationen von Aggregationsmittel in der Studie sollte Plasma sein:

• ADF 0,5*10^-4 mmol / l;
• Noradrenalin - 0,015%;
• Thrombin - 0,125 U / ml (die Konzentration von Kollagen wird empirisch ausgewählt).

Vielleicht ist der Test als Unter, und höhere Konzentrationen an Aggregationsmittel. Wahl der Konzentration kann in Abhängigkeit von der Aktivität des ungleichen Herstellung verschiedener Präparate und verschiedene Aktivitäten der Proben, in Verbindung mit dem vor, passen die Konzentration eines jeden Mittels auf normale Plasma.

Eine Mischung von plättchenreichem Plasma Aggregationsmittel wird durch Verschieben der Schieber vermischt, auf einem dunklen Hintergrund mit einer Lupe erfasst die Zeit des Auftretens der Einheiten als "Schneesturm". Bei der Beurteilung der Ergebnisse gezählten Anzahl von Thrombozyten in Plasma. Also, ADP-Zeit-Aggregation, erhöht 27-37 Sekunden bei 400 Zinn 1 l Blutplättchen an 62-75 Sekunden bei 50 Zinn 1 l, und Thrombin-Aggregation - jeweils 40-52 bis 79- 106 von.

Graphic Registrierung Aggregation

Graphic Registrierung der Aggregation unter dem Einfluss von den gleichen Aggregationsmittel - sehr informativ Methode der funktionalen Thrombozytenstudien. Auf oder agregografah geführt.

Wenn die Grafik-Register bestimmen, nicht nur das Auftreten von Aggregation, aber ihre Intensität (größte Abweichung Kurve und Fläche agregatogrammy), die erste und zweite Welle der Aggregation - bei Verwendung von niedrigen Konzentrationen von Adrenalin und ADP (Es beschreibt die Umsetzung von der zweiten Welle der Befreiung), und pathologischen Disaggregation.

Die visuellen und grafischen Studie Thrombozytenaggregation unter dem Einfluss ristomycin

Sehr wichtig ist die visuelle oder grafische Studie Thrombozytenaggregation unter dem Einfluss ristomycin. Gegen diese Art von Aggregation (ristomycin Endkonzentration von 0,8-1,0 mg / ml) an einer der häufigsten hämorrhagische Diathese - Angiohämophilie (Willebrand-Krankheit), sowie Anomalien der Blutplättchen Bernard-Soulier und bestimmte Arten von Synthesehemmung der von Willebrand Faktor erworben (Urämie, Immunhemmung, und so. d.).

Die quantitative Bestimmung des von-Willebrand-Faktor im Blutplasma

Die quantitative Bestimmung des von-Willebrand-Faktor im Blutplasma auf ristomycin Agglutination formalinisierten Suspension normale Blutplättchen in verschiedenen Verdünnungen des Testplasma bestrombotsitarnoy durch.

Das Verfahren ist sowohl für die Diagnose und Sekundär angiogemofnlii Synthesehemmung dieses Faktors, und für die Bewertung der Schwere der endothelialen (Vaskulitis, Atherosklerose und andere.) und Tendenzen zur Thrombose, in denen der Gehalt an von Willebrand Faktor im Blut erhöht oft erheblich.

Die Höhe der von-Willebrand-Faktor Es gibt die Möglichkeit des Endothels, um es zu synthetisieren (reduziert, wenn aigiogemofilii) und das Ausmaß der Niederlage des Endothels Vaskulitis, Arteriosklerose und anderen Krankheiten, mit der Niederlage der inneren Auskleidung der Blutgefäße fortfahren.

Für feste normale Blutplättchen in plättchenreichem Plasma gesunder Personen sequentiell hinzugefügt 0,2 % EDTA (0,5 ml 5 ml Plasma) und 2 min - Fixierlösung (20 ml 40 % Formalin 1000 ml Phosphatpuffer 0,2 g EDTA, pH 6,4).

Die Mischung wurde bei 4 ° C für mindestens gehalten 1 Nein, danach wurde es zentrifugiert, der Überstand entfernt wurde, und Thrombozytenpellet wurde zweimal gewaschen Suspendieren (Ein Volumen 3,8 % Natriumcitrat und fünf Volumen isotonischer Natriumchloridlösung; pH wird 7,4). Die hergestellte Suspension von normalen Blutplättchen bei formalinisierten verpackt 1 ml suspendiert und bei -20ºC gelagert,. Die Kalibrierungskurve wird unter Verwendung von Verdünnungen von normalem Plasma bestrombotsitarnoy konstruiert, Proben, die gemischte formalinisierten Plättchen. Ferner wird die Mischung ristomycin Agglutination bestimmt. Eichkurve wird durch die Menge des von Willebrand-Faktor in dem Testplasma bestimmt. Feste Plättchen besser erhalten, wenn sie in einer kleinen Menge an Konservierungslösung Natriumazid.

Tests, Reflektieren der spontanen Aggregation von Blutplättchen

In einer Studie an Patienten mit venösen Thromboembolien oder erhöhte Neigung zu Thrombose und Ischämie der Kerntechniken umfassen Tests, Reflektieren der spontanen Aggregation von Blutplättchen, t. es ist. in Vollblut oder Plasma vorkommende ohne Zusatz von Aggregationsmittel.

Um dieses Phänomen mit der Blutspur zu identifizieren lenkt die Aufmerksamkeit auf das Verhältnis der Anzahl der Blutplättchen getrennt liegen und deren Aggregate, 3-5 von Thrombozyten und mehr zusammen. Dieses Phänomen lässt sich am besten bei Betrachtung offenbart Schlamm, durch umfangreiche tseitrifu- Dotieren plättchenreiches Plasma (20Minuten bei -30 6000 / Min), von Citrat oder EDTA Zitrat Lösung stabilisiert. Stabilere Ergebnisse liefern jedoch die folgenden Methoden zur Bestimmung der spontanen Aggregation.

Метод Wu-Hoak

Wu-Hoak Methode, die auf die, das Blut aus einer Vene in zwei Reagenzgläser eingegeben, in einer Lösung, die EDTA, und in der anderen - eine Mischung aus der gleichen Lösung mit EDTA 4 % Formalin-Lösung. Nach dem Mischen der Inhalte der Fläschchen absetzt 30 Minuten bei Raumtemperatur.

Während Beilegung Aggregate absetzen, und die einzelnen Plättchen in dem Überstand verbleiben. Nach Stehen zählt die Anzahl der Blutplättchen in dem Überstand in jedem der Rohre. Normalerweise ist der Unterschied in der Menge von Blutplättchen in den Inhalt der beiden Ampullen nicht überschreiten 10-15 %, bei erhöhten spontanen Aggregation erhöht es.

Verfahren H. UND. Tarasovoj

Nach der Methode von H. UND. Tarasovoj (1984) Abnahme der Blutplättchen aus Vollblut in den Citrat-Aggregate nach 3 Minuten der Agitation auf Schüttler seine AVC-1 mit einer Geschwindigkeit von 90 bis 100-mal gezählt 1 m.

Das Röhrchen, das die 0,5 ml Blut, geschüttelt worden, eingeführt 1 ml 1 % Formalin-Lösung in isotonischer Kochsalzlösung. Die zweite Röhre ist nicht auf die Steuer geschüttelt, und das Blut darin enthalten der gleichen Prüfung 3 Ming führte auch Formalin-Lösung.

Blood in beiden Rohren befürwortet 30 m, der Überstand wird in der Anzahl der Blutplättchen gezählt. Normalerweise zählt der Unterschied in der plättchen von nicht mehr als 20 %, bei einer erhöhten Neigung zur Aggregation, erhöht es.

Bei Verstößen bei der Anwendung der grundlegenden Tests, Charakterisierung von Blutplättchen Hämostase, betreiben, soweit erforderlich, zusätzliche Studien durchzuführen. Von diesen sind die wichtigsten sind die folgenden.

Weitere Studien zur Blutstillung zu bestimmen Thrombozyten

Studieren Sie die Anzahl der Megakaryozyten im Knochenmark und Myelogramm trepanate mit der Untersuchung der Morphologie dieser Zellen

Eine signifikante Zunahme in der Anzahl der Megakaryozyten im Knochenmark Abschnitte, üblicherweise mit einer mehr oder weniger ausgeprägten Anstieg in der Anzahl der Blutplättchen im Blut kombiniert, bei eritremii beobachtet, hämorrhagische und wesentliche Thrombozytose und anderen myeloproliferativen Erkrankungen. Moderate megakariotsitoz, kombiniert mit Thrombozytopenie, Charakteristik thrombozytopenische Purpura (idiopathische thrombozytopenische Purpura).

Wenn Aplasie oder Hypoplasie des Knochenmarks beliebigen Ursprungs verringert, wenn der Gehalt von Megakaryozyten im Knochenmark Abschnitte, und Plättchenzahl im peripheren Blut.

Teil amegakariotsitoz beobachteten Mangel trombotsitopoetina (eine seltene Form von angeborenen Thrombozytopenie), das Auftreten von Antikörpern im Blut antimegakariotsitarnyh, wesentliche Teil Aplasie Megakaryozyten (kann die Entwicklung von Leukämie voran).

In vielen Megakaryozyten beobachtet morphologischen und zytochemischen Änderungen Thrombozytopathie.

Elektronenmikroskopische Untersuchung der Ultrastruktur der Blutplättchen

Elektronenmikroskopische Untersuchung der Ultrastruktur der Blutplättchen ist wichtig für die Diagnose von verschiedenen Thrombozytopathie, in denen fehlende oder stark verminderte Menge an nicht-protein Granulate hoher optischer Dichte (enthält ADP, Serotonin, Katecholamine, Calcium und andere.), oder Protein-α-Granula, was typisch für eine Anzahl von Thrombozytopathie ist, in einer Gruppe von Erkrankungen des Speicherpool vereint, das Fehlen von Krankheit oder Granulat.

Können auch Defekte in der kontraktilen Apparates erkennen (Mikrotubulussystems) Lysosomen und Thrombozyten.

Wenn Rasterelektronenmikroskopie und Untersuchung von Thrombozyten durch die Interferenz der Nomarski-Optik erfasst werden Defekte in Thrombozyten Fixierung auf Fremdoberfläche, ihre Verbreitung ihrer, sprießen, Zentralisierung und Granulat-Sekretion, Das ist typisch für viele Arten Thrombozytopathie.

Bestimmung der Thrombozytenaggregations Antikörper durch immunoflyuorestsent- tion Studien in Plättchensuspension Immunglobulin, mit diesen Zellen verbunden – Dixon-Methode

Dieses komplexe Verfahren kann Immun Thrombozytopenie und nicht-immune unterscheiden.

Allerdings sind die stärksten Formen der Krankheit mit einem scharfen Thrombozytopenie es inakzeptabel ist,, für die Definition verbundener Immunglobulin erfordert eine ausreichend große (40-50 T in 1 l) Thrombozytenzahl.

Definieren von Leben-markierten autologen Thrombozyten

Definieren von Leben-markierte autologe Blutplättchen Thrombozytopenie erlaubt es, zwischen einem normalen Lebensdauer der Thrombozyten in Zirkulation zu unterscheiden (über 9 Nächte) und Formen der Krankheit mit einer kurzen Lebensdauer dieser Zellen.

Das erste wird am häufigsten mit einer verringerten Blutplättchenproduktion im Knochenmark assoziiert, zweite - mit ihrem beschleunigten Tod, oder mit der Wirkung von Antiplättchen-Antikörpern (Autoimmunthrombozytopenie Thrombozytenlebensdauer ist auf wenige Stunden reduziert), oder intensive Verkleinerung der Zellen in Aggregaten und Thrombi bei disseminierter intravasaler Gerinnung oder Thrombose massiven (Thrombozytopenie Verbrauch).

Quantitative Bestimmung des Gehalts im Plasma vor und nach der Thrombozytenaggregationsfaktoren

Quantitative Bestimmung des Gehalts im Plasma vor und nach dem Blutplättchenaggregation Anzahl von Faktoren - die Membran Phospholipid Faktor 3, Gehalt an α-Granula (antigeparinovogo Faktor 4, b-тромбоглобулина, mitogener Faktor Thrombozyten) und Nichtprotein-Granulat mit hoher Elektronen optische Dichte (Serotonin, Katecholamin, ADF), und saure Hydrolasen.

Diese Studien eine Vorstellung von dem Inhalt in Blutplättchen von entsprechenden Strukturen und Komponenten, ihrer Freisetzung in die Plasma während Aggregation, sowie vnutriso- sudistoy Thrombozytenaktivierung, durch die Freisetzung von Blutplättchen in Blutplasma zusammen mit steigenden Konzentrationen von Komponenten in den endgültigen dichten und α-Granula (antigeparinovogo Faktor 4, b-тромбоглобулина и др.).

Verfahren der quantitativen Forschung der Thrombozyten Faktoren sind wichtig für die Identifikation einer Reihe von Thrombozytopathie (Störungen Erhaltung Granulate und deren Komponenten, Parese der Reaktion die Freisetzung dieser Komponenten, Erhöhung des Gehaltes von Blutplasma durch intensive Innen- Gefäß Adhäsion und Aggregation von Thrombozyten und anderen.). Mehrere trombotsitopaty gekennzeichnet Rückgang Thrombozytengehalt in der Membranen Faktor 3 Jeder Verstoß gegen die Verfügbarkeit, um bei der Blutgerinnung teilnehmen.

Untersuchung der biochemischen Eigenschaften der Blutplättchen und deren individuelle Strukturen

Untersuchung der biochemischen Eigenschaften der Blutplättchen und deren individuelle Strukturen - das Stroma, Granulat, Mitochondrien und t. d. erlauben die Verbindung von verschiedenen Arten von Pathologie und Dysfunktion von Blutplättchen mit bestimmten Arten von Enzymmangel dokumentieren (COX-Mangel, Thromboxan usw.), in Verletzung der Struktur der Membran-Lipoproteine, benötigt, um den Aggregationsmittel zu kommunizieren, und T. d.

Ähnliche Studien sind nur verfügbar, gut ausgestattete Forschungslabors und daher nicht allgemeine Praxis anwenden.