Диагностика на имунологично причинени безплодие

По време на един дълъг брачен живот, без използването на контрацептиви, и в присъствието на микро-област на лигавицата на половите органи може да се получи постепенно място имунизация антигени на сперматозоидите. При оглед на съпрузите, състояща се от една безплодна брак, не може да се определи причината за безплодие при 10-15 % случаи. Именно в тази група от безплодните съпрузи при прилагането на специални методи на разследване тайна цервикалния канал, често се откриват в плазмата и серум сперма сперматозоиди антитела (ASAT), Използва качествени и количествени тестове на имунологичен изследвания.

Postkoytalnыy тест (FCT)

Postkoytalnыy тест (FCT) Тя се отнася до качествен имунологичен тест. Отрицателният резултат тест означава липса на сперматозоиди в канала на шийката на матката тайна, но не можете да определите причината за тяхното отсъствие.

Метод. По броя на подвижни сперматозоиди в канала на шийката на матката тайна, получен след полов акт, се установи степента на нарушаване на тяхната проникваща способност с безплодието или имунитет към тях слуз на цервикалния канал.

FCT е необходимо да се извърши при следните условия: Изследването трябва да се проведе в периода на овулация, която разкри colpocytologic или друг метод, след предварителни съпрузи въздържание в рамките на 2-3 дни.

Методологията на. След обичайната половия акт за една жена 30 та трябва да лежат на гърба си, огъване коленете си. Промивка и почистване на забранени, трябва само дамска превръзка, който се отстранява по време на улавяне за изследване на слуз на цервикалния канал. След 2-4 часа, допустима и след 6-10 часа (време, изтекъл преди изследването, посочено в анализа) след сношение шийката изложен с помощта на огледало Куско и ендоцервикален слуз пълнене или туберкулин спринцовка (без игла), пипета с гумена крушка, или полиетиленов катетър.

Когато се измива инструментът не трябва да се използва дезинфектанти, те засягат подвижността на сперматозоидите. Една капка от получената слуз на цервикалния канал се прехвърля в затопля стъкло, покривно покритие, Територия смазват с течен парафин да протекат. Формулиране веднага mikroskopiruyut (окуляр 7X, 40X обективна), определяне на броя и естеството на подвижността на сперматозоидите. Лекарството може да бъде открит с активен сперма подвижността, вибриращо движение (феномена на люлка) и фиксирани.

Приемани предостави пет вида заключения FCT.

• Отличен (съответните норми): в пет области на оглед до 15-20 с активен сперматозоиди прогресивна мобилност и по-. Сперматозоидите с феномена на колебание е по-малко от 25 %.
• Задоволяващ: в пет области на оглед нагоре 10 активното сперматозоиди прогресивна мобилност и по-малко 25 % сперматозоиди с феномена на люлка.
• Беден: по-малко 5 сперматозоиди в пет области гледни.
• Минус: отсъствие на сперматозоиди.
• Съмнителен: в пет области оглед на повече 5 активно подвижни сперматозоиди и по- 25 % феномена на люлка.

Когато петата вида на FCT често се наблюдава имунната несъвместимост между съпрузите, Ето защо е необходимо да се определи АСАТ. За идентифициране АСАТ тайна ендоцервикален, плазма, сперма или кръвен серум и ги покажете (аглутинация или обездвижен) Тя изисква назначаването на количествени имунологични изследвания.

Отрицателният PBC проучвания започват с определение на проникване (проникване) способността на сперматозоидите чрез проникване тест (Пт) и податливост на сперма секреция на цервикалния канал с помощта на тест контакт на сперматозоидите и цервикалния мукус (TKSTSS).

Penetracionnyj тест (TP)

Тънка дължина на капилярната 10 Вижте въведен по време на овулацията слуз на цервикалния канал. Един отворен край на капилярната затваря глина, а вторият се поставя в епруветка с тест прясна еякулат (няма повече 3 часа след еякулация). С глина в капилярата е прикрепен към тръбата изправено. Пробата се инкубира в термостат при температура 37 С. 1 не. В качеството на еякулата се прецени от дълбочината на проникване на сперматозоиди в слуз на цервикалния канал. Има три вида на ПГ.

• Утвърдителен - Дълбочината на проникване (най-голямо разстояние в сантиметри, пътували най-малко един сперматозоид) горе 5 см; броя на сперматозоидите при точката на максимално проникване по- 5 да се прояви, и броят на подвижни сперматозоиди в горната третина на капилярата е по-голяма от 50 %.
• Съмнителен - A дълбочина на проникване до 5 Вижте по-малко броя на сперматозоидите 5, мобилността им в горната третина на капилярните течение 50%.
• Минус - Дълбочината на проникване на сперматозоидите достигне 1 см.

Способността на сперма на проникване Това зависи от фазата на менструалния цикъл. Тя започва да излиза от 9-ия ден от менструалния цикъл,, постепенно активиране, достига своя максимум експресия в периода на овулация, проведена на това ниво в продължение на два дни, и след това постепенно намалява.

Контактни Test сперма и цервикалната слуз (TKSTSS)

На пързалката е поставена малка капка слуз от цервикалния канал, взети от жени по време на овулация, и редица същия размер на капката еякулат. И двете капки са покрити с капак, стъклена, които леко се притиска надолу за, присъедини до спад. Лекарството се поставят във влажна камера (Петриева паничка с навлажнен памучен тампон) и се инкубира в термостат при температура 37 С. 1 не.

При тези условия, нормално сперматозоиди проникне в тайната на нормалната цервикалния канал, както може да се види под микроскоп при увеличение 200Х. За отчитане на реакцията в близост до границата между две среди брои броя на проникване в тайната на канала на шийката на матката сперматозоидите в две съседни области оглед на.

С отлична TKSTSS в две области на гледка се разкрива по- 25 активно подвижни сперматозоиди в явлението люлка малко 25 %. Ако задоволително TKSTSS в две области гледни разкри повече 15 активно подвижни сперматозоиди, TKSTSS в ниска - по-малко от 15. Отрицателният отсъства проникване TKSTSS, ако съмнителна - явление на колебание надвишава 25 %.

В този тест, като в РСТ, феномена на люлка, превишаващо 25 %, вероятно, Това показва наличието на АСАТ и изисква назначаването на количествени имунологични изследвания.

Използването на сперма и на шийката на матката секрети канал безплодни и плодородни мъже в различни количества към използване TKSTSS какви безплодни съпруг.

• Пример 1. Взети таен канал на шийката на матката в женски безплодни двойки и контрол на еякулацията здрави мъже. Отлично TKSTSS показва слаба проникване способността на сперматозоидите на мъжа си, и податливостта на нормалната секреция на цервикалния канал.
• Пример 2. Взети пълна тайна на цервикалния канал здрави жената и й съпруг еякулата на безплодни двойки. Bad TKSTSS показва слаба проникването на сперматозоидите.
• Пример 3. Отнети тайни ендоцервикалните жените безплодни двойки и контрол на еякулацията здрави мъже. Bad TKSTSS показва малоценност тайна цервикалния канал, което очевидно не проникне нормално сперматозоиди.

Количествените имунологични тестове

Mikroagglyutinatsionny тест Friberg

Mikroagglyutinatsionny тест Friberg (TF) достатъчно чувствителни и е на разположение за клинични лаборатории за диагностика. Използването TF може да се определи наличието на АСАТ и аглутинация титър в различни материали (плазмен еякулат, екстракти от слуз на цервикалния канал и в серума на двамата съпрузи).

Реактиви:

1. Фосфатно буфериран физиологичен разтвор (FSB) 0,01 М рН 7,2-7,4.

2. Вазелиново масло.

Оборудване: микроскоп, туберкулин спринцовка, mikroagglyutinatsionnye пипета 1 мл, микропипетно ​​капацитет 0,1 мл.

Метод. Кръвен тест серум се инактивира чрез инкубиране в инкубатор при 56 С. 30 м. Възклицавам, получен чрез мастурбация, веднага разрежда, така че ФСБ, концентрацията на сперматозоидите е 40 милион. аз н 1 мл.

Поради материала (плазмен еякулат, Екстракт от тайната на цервикалния канал или серум) подготвя серии от разреждания 1:4 към 1:128 като се използва като течност за разреждане FSB. В ямките с парафиново масло mikroagglyutinatsionnyh планшети туберкулин спринцовка с игла се вкарва (под вазелиново масло) Малки капки от всяко разреждане на изпитвания материал. След всяка проба се промива четири пъти спринцовката. В всяко разреждане се добавя към 5 пъти по-малък спад на еякулата, и 4 часа при стайна температура открити аглутенати. Последна разплод, при която под микроскоп при 100Х увеличение открито 3 слепен под контрол и по-, аглутинация титър съответства АСАТ.

Spermoimmobilizuyuschy тест Izodzhima (SIT).

Тигърът обездвижва АСАТ серум, плазма или сперма екстракт тайна цервикалния канал се определя от броя на подвижни сперматозоиди в присъствието на антигени (сперматозоиди).

Елементи.

1. Възклицавам, който се произвежда и получава по подобен начин, за използване на TF FSB; подвижността надвишава 70 %.

2. Komplementsoderzhaschaya серум на морски свинчета.

3. Имунната човешки серум (IChS), даване в присъствието на комплемента чрез 1 ч инкубация обездвижване 90 % сперматозоиди.

4. Normal човешки серум (NCHS), инактивиран чрез нагряване при температура 56 С. 30 м.

5. Test инактивиран серум, плазма и сперма извличат тайна цервикалния канал.

Метод. За да се оцени активност на комплемента имобилизиране на първата тръба се въвежда 0,5 мл изотоничен разтвор на натриев хлорид, за определяне на промени в подвижността на сперматозоидите без ASAT на втората епруветка - 0,5 мл NHS, контрол обездвижване трета тръба - 0,5 мл ICHS и за определяне на АСАТ имобилизиране на четвърто тръба - 0,5 мл серум, или плазма на еякулата, екстракт или секреция ендоцервикален.

След това всяка епруветка се въвежда от 0,1 мл комплемента. Добавя Последното нещо на всички тръби 0,05 мл суспензия на сперматозоиди в концентрация 40 милион. аз н 1 мл. Триножник тръби се поставят в инкубатор при температура 37 °С на 1 не. Тръбите са отстранени от фурната и внимателно се разклаща, за да отрази постоянната аглутинират сперматозоиди.

За да се оценят резултатите по високо увеличение микроскоп (400х) изчислява процентът на подвижни сперматозоиди в капка от епруветката, отлага върху предметно стъкло и се покрива с капак. По същия начин определя процентът на подвижни сперматозоиди в капчиците от епруветките с NHS и ICHS. В резултат на реакцията се отчита с формула

SIT = K / A

където K - броят на подвижни сперматозоиди в контролата с ICHS и НЗС;

За - броят на подвижни сперматозоиди в епруветката (серумен тест, или плазмен эякулята, или тайната на цервикалния канал).

Със средна SIT<2 тестът е отрицателен (брой подвижни сперматозоиди в контрола и в епруветките на приблизително същата), Ако индексът CTI>2 - Тестът е положителен, T. е. в материала (серум, плазма или сперма извличат тайна цервикалния канал) са имобилизирани АСАТ.

• Пример 1. Ground контрол да ICHS - 10 % подвижни сперматозоиди. Втората контрола с NHS - 80% подвижни сперматозоиди. Двете контроли заедно - 90 % подвижни сперматозоиди. В епруветката - 80 % подвижни сперматозоиди.

SIT = R / D = 90/80 = 1.1

Тестът е отрицателен, обездвижен АСАТ отсъства.

• Пример 2. В епруветката - 40 % подвижни сперматозоиди, Въпреки това, в контрола, в Пример 1.

KN = 90/40 = 2.2

Тестът положителна. Налице е имобилизирано антитяло (ASAT), чрез което значително намалена подвижност на сперматозоидите.