腦脊髓液的顯微鏡檢查
細胞增多症的定義
健康人的腦脊液中含有很少的細胞。. 白細胞具有臨床重要性。 (淋巴細胞). 不干擾白細胞計數 紅細胞, 它們通過添加到未稀釋的腦脊液中而被破壞 1/10 醋酸品紅部分. 品紅將有核細胞染成紅色. Samson 試劑用於對白細胞進行染色。 (雜 30 毫升冰醋酸, 2 毫升液體苯酚, 2 毫升品紅酒精溶液 1 : 10 並加滿 100 毫升蒸餾水). 耐試劑, 很好地染色細胞並使它們在數小時內不被細胞溶解.
解決方案也被使用, 包括: 5 毫升 10 % 乙酸溶液和 0,1 克甲基紫. 他不那麼耐用, 將細胞染成藍色.
由於腦脊液的溶細胞特性,服用後應立即計數細胞數。. 將液體按比例量入帶滴液的試管或微量移液器中 10 部分腦脊液和 1 部分染色液並靜置 10-25 分鐘以對細胞進行染色. 對於稀釋,您可以使用白細胞混合器. 腦脊液細胞非常快速地粘附在試管壁上。, 如此流動, 在試管中, 研究之前,有必要充分混合手掌之間的旋轉運動.
用於計數細胞分裂。 福克斯-羅森塔爾相機. 通過在整個網格中進行計數 5 腔室填充後分鐘. 中的細胞數 1 µl 由公式確定
X=(A*11)/(3.2*10)
其中 X 是單元格的數量 1 升; A是細胞數, 算在網格面上; 3,2 - 室容積; 11/10 - 稀釋度.
允許以分數形式顯示計算結果, 例如: 14/3, 在哪裡 14 是腔室中計數的細胞數, 3 — 室容積的圓形圖. 對於大量單元格,只需在網格的一半中對它們進行計數並將結果數加倍. 伴有嚴重的細胞增多症 (細胞數量顯著增加) 允許對細胞計數 16 小方塊並將所得數字乘以 16.
在沒有 Fuchs-Rosenthal 室的情況下,可以使用 計票室戈里亞耶夫 容量小得多, 因此,至少三個方格中的單元格被計算在內, 計算算術平均值並乘以 1,2. 因素 1,2 從公式中得到
X=(A*11)/(0.9*10)
其中 0.9 是腔室的容量, 11/10 - 稀釋度.
在對未稀釋的腦脊液進行細胞計數時,第一滴, 從穿刺針流出, 放置在 Fuchs-Rosenthal 室中並確定細胞數量, 如上所述.
正常細胞數 (淋巴細胞) 在 1 微升腦脊液 從大腦的腦室和小腦池是 0-1, 在液體中, 通過腰椎穿刺獲得 - 2-4.
三個月以下的兒童 1 微升腦脊液可檢測多達 20-23 個細胞, 最多一年 - 14-15, 最多兩年 - 11-14, 兩到五年 - 10-12, 五到七年——8——10, 從七到十年 - 6-8, 十歲以上 - 4-5.
在腦膜, 膿腫和腦腫瘤,腦脊液中的細胞數量增加.
在出血性腦脊液的研究中,在某些情況下有必要確定其真正的細胞增多. 為此,它被用於 弗里德曼方法: 收集出血液用Samson氏試劑測定細胞增多,用等滲氯化鈉溶液計數紅細胞數 1 微升腦脊液.
例如, 中的細胞數 1 μl— 20, 紅細胞數量 - 3600. 從一般分析中找出患者血液中紅細胞和白細胞的數量, 在腰椎穿刺之前進行. 例如, 在 1 l 血 4 200 000 紅血球, 7000 白細胞. 因此,每個白細胞有 4200000/7000=600 個紅細胞.
為了獲得真正的細胞分裂值,建立了一個方程:
上 600 紅細胞 - 1 白細胞;
上 3600 紅細胞 - X 白細胞, 所以,
X=3600/600=6個白細胞.
腦脊液真細胞增多 20-6=14 個細胞/ 1 升.
這種方法的應用是有限的, 因為含有大量血液的腦脊液不適合這樣的研究.
腦脊液中紅細胞數的測定 對於確定顱內出血患者病情的嚴重程度很重要.
在......的存在下 1 µl 2000-5000 紅細胞 腦脊液變成粉紅色, 900-1000 個紅細胞 - 僅有輕微的乳白色. 無色液體可能顯示較低的紅細胞計數. 的臨床意義是增加的紅細胞水平的動態.
細胞分化腦脊液 在計數室中的天然形式持有和染色.
在高放大倍率 (окуляр10Xили15Х, 40X鏡頭) 在計數室關注細胞的量, 形式, 細胞核的位置和大小, 夾雜物中的細胞質中存在. 這是很容易區分淋巴細胞, 嗜中性粒細胞, 巨噬細胞. 通常情況下,在腦脊液僅含有淋巴細胞.
對於腦脊液的細胞組成的完整的特徵研究染色準備. 細胞染色流體更糟, 比血細胞. 有著色的幾種方法: 通過羅西娜, 歡蹦亂跳, 巴氏, 阿列克謝耶夫, 可能Gryunvalydu, Pappengeymw.
確定的熒光顯微鏡細胞增多的方法的性質
脫脂塗覆的玻璃載玻片和一滴腦脊液用熒光染料混合它 (吖啶橙和羅丹明在養殖鹽水溶液的混合物 1:20000). 混合藥物是在可見光譜中的熒光顯微鏡ML-2中的藍紫光下檢查, 使用的激發濾光片組合: FS 1-4, FBS 14-4, BS 8-2和鎖定濾波器的LS-1浸沒透鏡. 至於用於研究二neflyuorestsiruyuschego浸油 (鄰苯二甲酸二甲酯).
在視和淋巴細胞polynuclears由細胞質的綠光容易識別字段的黑暗的背景. 數列 100 細胞, 定淋巴細胞和嗜中性粒細胞的數量.
淋巴細胞 從核嗜中性粒細胞的性質不同 (glybchatoy結構與橙色夾雜物) 明亮的綠色熒光.
嗜中性粒細胞 有一個清晰的結構, 他們的核染色質瀰漫點燃, 均勻光亮- 綠. 細胞質黃色- 綠, 它散磚紅色顆粒.
在細胞增多不明顯的情況下,將天然腦脊液離心並檢查沉澱物。.
腦脊液的發光顯微鏡檢查很容易得出關於中性粒細胞的結論, 細胞增多的淋巴細胞或多形細胞性質.
腦脊液細胞的形態學特徵
淋巴細胞
健康人的腦脊液中含有 中小淋巴細胞 (1-2 英寸 1 升) 尺寸 4-6 微米. 這些是圓形細胞,具有大塊狀細胞核和非常窄的細胞質。.
淋巴細胞增多 (結核性腦膜炎, 囊蟲病) 隨著小和中大淋巴細胞出現 (8-9 M的), 偶爾你會發現直接分裂細胞核的淋巴細胞.
淋巴細胞數 (與其他細胞一起) 腦腫瘤中腦脊液增加, 慢性腦膜炎病程. 在神經外科疾病中,術後淋巴細胞數量的增加發生在嗜中性粒細胞數量增加之後,表明預後良好。.
漿細胞
只有在腦組織和腦膜的長期炎症過程中,才能在腦脊液中發現漿細胞. 漿細胞形態相同, 如血液或骨髓抽吸.
這些是圓形細胞,細胞核位置偏心,染色強烈, bazofylnoy細胞質. 在某些情況下,他們的人數可以達到 26%. 在術後和腦損傷修復過程的緩慢過程中也發現了漿細胞。.
Gistiocitы
在正常腦脊液中有時以單拷貝形式存在.
在染色標本中,組織細胞具有較大的細胞核和相對較窄的細胞質。. 單元格大小從 7 至 10 米, 形狀是圓形或不規則的. 仁豆形或不規則裂, 正色的. 使用相差顯微鏡在天然製劑中可以看到核仁。.
在結核性腦膜炎中,在腦脊液中發現大量組織細胞。, 分別位於集群中, 它們的細胞質是嗜鹼性的, 顏色更深.
根據現有數據, 某些類型的神經膠質細胞可以變成組織細胞. 患者腦脊液中發現大量組織細胞, 接受過大腦或脊髓手術的人 (這表明活躍的組織反應和正常的傷口癒合), 而在個人, 患有結核性腦膜炎和囊尾蚴病,炎症過程緩慢. 在侵入蛛網膜下腔或腦室壁的腦腫瘤中,組織細胞可能與巨噬細胞和變異細胞一起出現在腦脊液中。, 腫瘤周圍出現反應區的典型特徵是什麼.
巨噬細胞
巨噬細胞是由一個- 和多核蛛網膜內皮細胞和單核細胞. 蛛網膜內皮的成分與合胞體分離並變成圓形細胞。, 具有變形蟲運動並穿透腦脊液.
巨噬細胞積極吞噬和消化細胞和其他元素, 在病理過程中進入腦脊液, 幫助清潔. 巨噬細胞細胞質中的內含物很容易在腔室和染色製劑中區分。.
巨噬細胞吞噬紅細胞, 破壞或未改變的中性粒細胞, 脂肪滴, 血紅素結晶等. 巨噬細胞的細胞質中常有大小不一的空泡或一個大的空泡, 幾乎佔據了整個細胞質, 核心被轉移到外圍. 在這種情況下,細胞看起來像一個環 - 環形巨噬細胞.
正常情況下,腦脊液中沒有巨噬細胞。. 它們在正常細胞分裂過程中的出現表明中樞神經系統出血或炎症過程。. 術後腦脊液中有大量巨噬細胞,提示清創活躍。 (積極的展望). 少數巨噬細胞或在嚴重的細胞增多症中不存在巨噬細胞是不利的預後標誌。.
粒狀球 – 泡沫細胞
粒狀球 (泡沫細胞) 是大的巨噬細胞,細胞質中含有多個脂肪滴.
這些通常是圓形電池。, 洋紅色染成深棕色. 當用 Sudan III 處理腦脊液時,顆粒球變成橙紅色。.
當來自各種病因的囊腫的液體進入腦脊髓液時,就會發現它們。, 在腦組織的分解中 (連同脂肪滴), 有時在術後, 有一些腦瘤 (顱咽管瘤, 室管膜瘤等). 如果腫瘤位於腦室附近, 然後最常在腦室的腦脊液中檢測到顆粒球. 顆粒球的來源是小膠質細胞, 以及少突膠質細胞, 血管和蛛網膜外層的細胞.
嗜中性粒細胞
腦脊液中性粒細胞 類似於中性粒細胞, 它們的細胞質 (在計數室和本地準備工作中) 經常伸展或突出 (偽足). 在取腦脊液後的最初 10-15 分鐘內觀察到這種不同的細胞形式,表明中性粒細胞的保存- mi 粒細胞移動的能力. 分節核是特徵, 段數,其中範圍從 2 到 5; 刺中性粒細胞相當罕見.
腦脊液儲存過程中,中性粒細胞變化較早, 比其他細胞. 中性粒細胞核 可以溶解或部分四捨五入, 與清晰的輪廓, 由薄橋連接; 後來,他們採取單個顆粒的形式. 噬, 這是只存儲一個核心段圓潤的造型, 在外觀上酷似Loevit細胞. 那裡 腫中性粒細胞與段輪廓模糊不清, 幾乎佔據了整個細胞質. 在染色製劑可以觀察到嗜中性粒細胞的崩潰的各個階段 - 核心腫脹的細胞結構被完全摧毀, 當細胞質的輪廓不可見時, 並且核的片段變得不成形, 由精細的染色質網狀結構組成. 這些細胞屬於嗜中性粒細胞只能通過對過氧化物酶的反應來確定。: 被破壞的細胞質中存在黃綠色或棕色顆粒.
有時在腦脊液中有嗜中性粒細胞,核固縮,呈不規則形狀的深色團塊。.
腦脊液中出現中性粒細胞 蛛網膜下腔出血, 神經系統炎症性疾病, 神經外科手術後. 腦脊液中有血液存在中性粒細胞表明腦膜有炎症.
不變的中性粒細胞佔優勢 表示急性炎症過程.
突然的 中性粒細胞增多的表現 當腦內膜下膿腫破裂時觀察到.
有膿腫, 深入腦組織, 通常看到 輕度明顯的細胞增多,淋巴細胞佔優勢.
隨著腦脊液中炎症過程的減弱, 中性粒細胞的退化形式.
改變和未改變的嗜中性粒細胞的存在是正在進行的炎症過程的特徵。. 應當考慮, 腦脊液中出現未改變的中性粒細胞並混有新鮮血液, 在這種情況下,有必要對細胞增多症進行校正測定.
嗜酸性粒細胞
天然腦脊液製劑中的嗜酸性粒細胞通過特徵性閃亮粗顆粒的存在與其他細胞區分開來。, 填充細胞質. 具有雙葉核的細胞很少見。, 最常觀察到的單核形式. 染色標本中,嗜酸性粒細胞形態相同, 像血. 在腦脊液中,最常發現被破壞的嗜酸性粒細胞。.
囊尾蚴病腦脊液中嗜酸性粒細胞的含量範圍為 1 至 46%.
作為囊尾蚴病蛛網膜炎並發症的腦膜炎的發生伴隨著中性粒細胞增多和嗜酸性粒細胞數量的減少。. 對於腦內包蟲囊腫的膿腫,其內容物中存在中性粒細胞和嗜酸性粒細胞是特徵性的。, 什麼是與膿腫相鑑別的輔助標誌. 有時在腦和脊髓腫瘤的囊內容物中可發現大量嗜酸性粒細胞。 (緊張的, 顱咽管瘤, 室管膜瘤, 癌症轉移到大腦). 腦室水池鏡檢查後可觀察到腦脊液中嗜酸性粒細胞數量明顯增加。.
切除腦腫瘤後,術後傷口積極癒合,嗜酸性粒細胞數量增加, 什麼可以被視為腦膜對創傷和組織腐爛產物吸收的局部過敏反應.
改變的細胞和細胞陰影
由於腦脊液的細胞溶解特性,細胞, 長期呆在裡面, 僅保留細胞質的輪廓和細胞核的殘餘. 無法確定它們的形態隸屬關係。. 大多數情況下,嗜中性粒細胞會發生這種變化。, 有時它們是惡性腫瘤細胞. 蛛網膜和腦室室管膜的細胞很容易被細胞溶解。.
神經外科干預後,在腦脊液中發現組織嗜鹼性粒細胞。.
腦脊液中的蛛網膜細胞
蛛網膜細胞 (蛛網膜內皮) 是單層上皮細胞, 它們可以區分為計數腔室中的細胞分裂, 以及有色製劑, 由腦脊液沉澱物製備. 這些是相當大的、不規則的或圓形的細胞,具有相對較小的圓形或橢圓形細胞核。, 位於中央的.
細胞核被低色染色, 細胞質呈蒼白色- 或灰藍色, 然而,它具有不均勻的輪廓並且通常包含吞噬顆粒的內含物 (脂肪滴, 蜂窩元素, 空泡). 蛛網膜細胞的細胞質經常被破壞, 在這種情況下,會發現特徵性細胞核和細胞質碎片. 核染色質具有細環狀或顆粒狀結構, 有時一個藍色的核仁很明顯. 核的大小來自 5 至 19 米.
蛛網膜單細胞在腦脊液中的存在尚不表明病理, 因為這些細胞排列在蛛網膜下腔和, 剝離, 進入腦脊液. 蛛網膜炎觀察到蛛網膜細胞數量增加, 腦囊蟲病. 在蛛網膜囊腫的內容物中,以不同大小和顏色強度的核群的形式發現了蛛網膜膜的不同位置的細胞及其共質體。, 被蒼白的細胞質包圍,細胞之間沒有清晰的界限.
脈絡叢細胞
從腦室脈絡叢進入腦脊液,呈多邊形, 圓角, 有時圓柱形大 (15-19 微米) 細胞. 小 (4-5 微米) 核位於中心或偏心, 深染, 細胞質嗜酸性, 強烈著色. 脈絡叢細胞胞漿內有顆粒狀, 有時以團塊和夾雜物的形式存在, 1–3 微米, 圓形或不規則, 綠色或藍色. 在某些細胞中可能會發現液泡或被困的紅細胞.
脈絡叢細胞最常見於腦室的液體中。.
腦脊液中腦室室管膜細胞
腦脊液中腦室室管膜細胞, 通過腰椎穿刺獲得, 在藥物的製備和著色過程中很容易被破壞. 在染色塗片中,它們看起來像編隊, 由具有精細結構的橢圓形核組成. 在一些細胞中,保留的細胞質以窄邊界的形式圍繞著細胞核。.
在來自腦室的液體中,最常發現具有保存結構的室管膜細胞。, 形態上類似於蛛網膜細胞, 但它們的細胞核顏色較淺,並且具有更細膩的, 染色質均勻分佈. 橢圓形室管膜細胞的兩極通常是尖的, 細胞質呈淡灰色. 有孤立的細胞和大的簇, 其中單個單元格的邊界可能無法確定.