Nasledstvennaya gemoliticheskaya anemi, nedeniyle, kırmızı kan hücreleri, piruvat kinaz eksikliği aktivitesine

Nasledstvennaya gemoliticheskaya anemi, İlgili eritrosit piruvat kinaz eksikliği - hemolitik anemi nispeten nadir görülen bir formudur, otozomal resesif bir şekilde kalıtsal olan, O verir homozigotlarda klinik belirtiler, Hücre içi hemoliz bulguları olan gelirleri, Eritrositlerin Makrositoz, potasyum, düşük içeriği. Daha vardır 200 açığı piruvatkinaznoy aktivitesi homozigot taşıyıcı vakaları.

Patogenez

Piruvat kinaz enzimlerinin biridir, sonuç glikoliz. Bu bağlantı glikoliz ve ATP nikotinamiddinukleotid kurdu. piruvat kinaz aktivitesi eksikliği olan hastaların büyük çoğunluğunda, bu iki metabolitlerinin kırmızı kan hücrelerinin içeriğine indirgenir, Bazı durumlarda, ATP içeriği normal, ama inkübasyon sırasında ATP istikrarı rahatsız. Önemli retikülositoz bulunan ATP normal seviyeleri. Bu retikülosit varlığı ve sadece glikoliz yoluyla ATP mitokondriyal olasılığı nedeniyle, aynı zamanda, oksidatif fosforilasyon nedeniyle.

piruvat kinaz eksikliğinin sonucu Aynı zamanda, glikoliz ürünlerin birikmesi, önceki aşamalarında oluşmuş - fosfofenolpiruvata, 3-fosfogliserat, ve özellikle de 2,3-difosfogliserat. İçerik piruvatanlaktata kırmızı kan hücreleri azalır.

eritrositler piruvat kinaz eksikliğinde ATP eksikliği Bu ATP-aznogo pompası, kırmızı kan hücrelerinin fonksiyon bozukluğu ve potasyum iyonlarının kaybına yol açar, sodyum konsantrasyonu, eritrositlerdeki iyonları olup, burada non-artırılması. Bu eritrositlerde tek değerli iyonlarının miktarı bir azalmaya neden olur, Hücre ve çekme dehidrasyon. Bu olgu olarak adlandırılır dessikotsitoz. Suyun kırmızı kan hücrelerinde azalma hemoglobin tarafından oksijenasyon ve oksijen salınımı sürecini zorlaştırıyor. Bu bağlamda, bazı telafi rolü 2,3-asit difosfoglitserinovoy eritrositlerinde önemli bir birikimi tarafından oynanan.

Oksijen için hemoglobin afinite 2,3-difosfogliserat ile etkileşim azalır. Bundan dolayı, 2,3-difosfogliserat için daha yüksek konsantrasyonlarda dokulara oksijen kolaylaştırılmıştır döndürür.

Piruvat kinaz eksikliği aktivitesi klinik belirtileri

Eksikliği piruvat kinaz aktivitesinin klinik belirtileri hemoliz derecesine bağlıdır. Bazı durumlarda, yüksek hemoliz doğumda ortaya ve ciddi hemolitik kriz meydana eşlik, kan transfüzyonu alt normal seviyelerde hemoglobin korumak için ihtiyaç neden. Diğer durumlarda, hastalık artmış hemoliz ilk işaretleri ile neredeyse asemptomatik ortaya çıkabilir (subikterichnost sklera ve cilt) yaşlı 17-30.

Genellikle; microspherocytosis ile karşılaştırıldığında, piruvat kinaz eksikliği daha ciddi vardır.

Palpe dalak ile hemen hemen tüm hastalar. onun açıklanan bazı anomaliler heterozigot taşıyıcılar içinde hafif bir artış, onlar anemi olmasına rağmen, genellikle, eksik. Hastaların olası splenomegali bir dizi. Karaciğerde önemli bir artış nadiren bulundu. İzole hastalarda bacak ülserleri tespit ile.

Piruvat kinaz eksikliği aktivitesinin laboratuar göstergeleri

piruvat kinaz aktivitesinin eksikliği olan hastaların çoğu orta anemisi görülmektedir (4,34- 6,21 mmol / L, ya da, 70-100 g / l), Ancak, krizler hemoglobin sırasında 3.1 azalabilir 3,72 mmol / L (50-60 G / L). İçerik eritrotsitov- 2.5-3.0 T 1 l. Hemolitik krizi enfeksiyonunun neden olabilir. Hemoliz kazanç vakaları menstruasyon sırasında vardır.

Piruvat kinaz eksikliği olan hastalarda Kırmızı kan hücreleri normohromiey ile makrositozis ile karakterize, hafif anizositoz ve poikilocytosis. Adil polychromatophilia oldu. Bazen taraklı kenarlı veya dut şeklinde mishenevidnye kırmızı kan hücreleri ve alyuvar hücreleri bulunan, genellikle belirlenen bazofilik eritrosit punktatsiya, Jolly cisimcikleri. Periferik kanda Bazı hastalar erythrokaryocytes önemli sayıda ortaya, kriz sırasında, o 60-70 kadar artırılabilir %. ESR, beyaz kan hücresi sayımı, leukogram, normal sınırlar içinde trombosit sayısı. Hemolitik anemi diğer formları gibi, kemik iliği keskin bir tahriş kırmızı mikrop hematopoez ortaya.

bilirubin düzeyi, genellikle, Dolaylı nedeniyle artan.

serbest plazma hemoglobin normal, ancak haptoglobin seviyelerinin azalabilir. Idrarda Hemosiderin yoktur. Fetal hemoglobin ve hemoglobin A İçeriği₂ normal aralıkta.

Çoğu durumda, normal eritrosit piruvat kinaz eksikliği ozmotik direnci, bazen günlük bir inkübasyon sonrası, indirgenmiş. Autogemoliz, genellikle, değişen derecelerde yükseltilmiş. Normal autogemolizom ile piruvat kinaz eksikliği durumlar vardır. İlk olarak piruvat kinaz eksikliği vakaları tip II autogemoliza tescil edilmiştir bildirildi, ATP eklenmesini düzeltir ve düzeltme ya da biraz glikoz ilave düzeltme değil. Daha sonra, birçok durumda enzim eksikliği tip tarif edilmiştir I autogemoliza veya. Bu nedenle, hemolitik anemi ayırıcı tanısında yöntem autogemoliza uygulanması tavsiye edilmez. piruvat kinaz aktivitesinin eksikliği olan kırmızı kan hücrelerinin ömrü zaman kısaltılır.

Tip miras piruvat kinaz aktivitesi otozomal resesif. Pratik, sağlıklı heterozigot, Çeşitli araştırmacılara göre, açığın şiddeti arasında değişiyordu var 50 için 70 % normlar.

Piruvat kinaz eksikliği Tanı etkinliği

Kırmızı kan hücreleri, piruvat kinaz eksikliği tanısı hemolitik anemi durumunda teslim beklenebilir, dalakta artış yılda akan, periferik yayma işaretler microspherocytosis eksikliği, elliptotsitoza ve stomatotsitoza.

Piruvat kinaz aktivitesinin belirlenmesi için kalitatif testler. Bu amaçla yöntem, yaygın olarak floresan boya kullanılır, göre, Bu reaksiyon sırasında, kataliziruemoy piruvatkinazoy, nikotinamiddinukleotid oksitlenmiş ve floresan kaybolur.

Sağlıklı bireylerde, piruvat kinaz aktivitesi arasında değişmektedir 4,0 için 7,7 mmol (dak / 1010 eritrosit) veya 4,0 için 7,7 Güç. homozigot hastalığı enzim aktivitesinin çoğunluğu az 1 Güç. Ancak, kılıfları enzim aktivitesindeki hafif bir düşüş olabilir. Hemolitik anemi nadir bir formu tanısı çok zor, ve tanı enzim kinetiği çalışmasında tek yapılabilir.

Hemolitik anemi ayırıcı tanısı, piruvat kinaz eksikliği ile ilişkili

hemolitik anemi ayırıcı tanısı, piruvat kinaz eksikliği ile ilişkili, Kalıtsal hemolitik anemi diğer formları yürütmek için gerekli.

Bireylerin aksine, piruvat kinaz aktivitesi eksikliği birçok hasta, acı microspherocytosis, elliptotsitozom, stomatocitozom, hemolitik anemi, klimalı taşıyıcı kararsız hemoglobin, ve talasemi hastalığı resesif otozomal miras, Bu patoloji, sadece aynı kuşak bulunan ve ebeveynler arasında görülen hemen hemen hiç olduğunu.

Ne zaman kalıtsal anemi, klimalı taşıyıcı kararsız hemoglobin, Özellikle şiddetli hastalıkta, Bazen Proband mutasyonu ilk taşıyıcı, ve sonra hastalık gelecek kuşaklara aktarılır. Bu nedenle, ayırıcı tanı hemoglobinopati ile yapılmalıdır, klimalı taşıyıcı kararsız hemoglobin, yanı sıra resesif kalıtsal hemolitik anemi, diğer enzimlerin aktivitesi eksikliği nedeniyle.

Bu destekleyici bir rol hemoglobin istikrarı oynar, Yego elektroforezi. Diğer fermentopathia hariç tutmak için eritrositlerin diğer enzimlerin aktivitesi araştırılmıştır, ve Coombs taşınan otoimmün hemolitik anemi dışlamak için, agregatgemagglyutinatsionnaya.

Piruvatkiiazy ile aktivitesinin belirlenmesi için floresan yöntemi Beutler

Reaktifler.

1. Fosfoenolpirovinogradnaya asit (tritsiklogeksilammoniynaya tuzu) 0,15 M çözelti,, pH değeri 7.0-8.0 nötralize 0,2 NaOH M çözelti (0,03 ml).
2. ADF 0,03 M çözelti,, nötralize (0,1 ml).
3. NAD-N 0,015 M çözelti,, nötralize (0,1 ml).
4. Magnezyum sülfat 0,08 M çözelti, (0,1 ml).
5. Potasyum fosfat tampon çözeltisi 0,25 M, pH 11 7,4 (0,05 ml).
6. Distillirovannaya su (0,62 ml). Karışım saklanabilir - 20 C, bir haftadan daha fazla değildir,.

Yöntem.

Araştırma kullanım kan, heparin ya da sodyum sitrat ile çekilen. Bu santrifüjlenir, emişli ve hazırlamak plazma 20 % izotonik sodyum klorür çözeltisi dört hacmi eklenerek kırmızı kan hücrelerinin süspansiyonu.

Bir miktarda eritrosit süspansiyonu 0,02 mi ile karıştırılır 0,2 reaktifi ml inkübe 30 dakikalarda 37 ° C. Bir damlacık filtre kağıdı üzerine yerleştirilir ve röntgen perdesini tarama oldu. Taban floresans inkübasyondan önce karışıma eritrositlerin ilavesinden hemen sonra tespit edildi. Normalde inkübasyon 30 dakika sonra kaybolur, ve pirüvat kinaz eksikliği kalıntılarının etkinliği. Bu, Bölgede UV radyasyonunun etkisi altında fluoresces NADH, Görünür yakın, NAD floresan değil oysa. Yukarıdaki çözelti, stabil olmayan ve kolay bir şekilde bozulmuş olması nedeniyle, izlenmesini gerektirir. Dikkatle beyaz kan hücrelerinin katmanı ayrı olmalıdır, lökositlerdeki piruvat kinaz eksikliği eritrosit enzim aktivitesinin aktivitesi normal olabilir çünkü.