Saf kültür izolasyonu ile, etkilenmiş dokuların kazıma Leishmania saptanması için yöntemler

Belirli bir besin ortamı Leishmania hastanın etkilenen doku kazıma ekim zaman çarpma ve mikroskopla saptanabilir.

Reaktif

Çarşamba W.W.W. Leishmania ekimi için (14 g ağar, 6 g sodyum klorür, yaklaşık 150 defibrinleştirilmiş tavşan kanı ml, orta hazırlamadan önce kalp doğrudan alınan, 900 damıtılmış su mi). Damıtılmış suda sodyum klorür ve agar eklendi. ortamı içeren bir şişeye agar tamamen eriyene kadar ısıtıldı ve buhar sterilizatör sterilize 20-30 dk oldu 147,1 kPa (15 at).

Kadar soğutuldu 56 ° C agar steril defibrinleştirilmiş tavşan kanı eklendi, balon döndürülerek karıştırıldı ve steril bir pipet içine doldurulur 4 ml tüpler. Verilmesi sırasında Flask, kan agar bir sıcaklıkta bir su banyosudur 58 ° C. Orta ipuçları tüpler.

Agar katılaşma sonra, bir gün için bir kuluçka makinesine yerleştirilir 37 Sterilite kontrolü için, ° C ve sıvı kondensat alma. Üretildiği takdirde yeterli değildir, steril şişelerde ekim önce, hakkında ekleyebilirsiniz 1 Aşağıdaki çözümlerden biri ml: 0,85 % sodyum klorit, 1 % pepton çözümü, Hanks çözeltisi, izotonik konsantrasyonlarda laktalbümin hidrolizat veya diğer bir besin ortamı.

Saf kültür izolasyonu ile, etkilenmiş dokuların kazıntı leishmania belirleme yöntemleri

Eğer bir kültür seçtiğinizde dikkatli sterilite kurallarına uymak. Derinin deney alanı bir pamuklu çubuk ile silinir, nemlendirilmiş 70 % alkol.

Alkol buharlaştırıldıktan 2-3 mm steril oftalmik neşter insizyon tüberkül uzunluğunun sivri uç sonra. Steril Pasteur pipeti ile kesme alt doku kazıma yapmak. seröz-kanlı bir sıvının elde edilen bırakma ortamı ile, bir test tüpüne nakledildi. Manipülasyon birkaç kez gerçekleştirilir, Yeni bir tüp malzemeye her zaman ekim. Kulak tıkaçları parafine veya onları lastik kapaklar koymak ve 22-24 ° C'de bir kuluçka yerleştirilir.

Sonuçların Değerlendirilmesi

Bitkileri nedensel ajanı tanımlamak için günlük olarak bir mikroskop altında incelenir. Yerli ilaç keşfi, ezilmiş damla metodu ile hazırlandı, Lens 40×40. Sonuçlar negatif ekim kabul edilir, eğer 40 gün patojen bulunamadı. Kültürler Leishmania uzatılmış (10Kablolama ile -12 Mikron).

Kültür yönteminin uygulanması en yararlı olduğu Leishmaniasisin tüberküloid formu, diğer yöntemler daha az etkili olabilir teşhis.