Anemi, glukoz-6-fosfat dehidrogenaz aktivitesinin azalması nedeniyle

Aktivite eksikliği glukozo-6-fosfatdegidrogenaza (G-6-PD) kırmızı kan hücrelerinin en yaygın kalıtsal anormallik, hemolitik krizam neden, tıbbi bir dizi satın alma ile ilişkili araç. Çoğu hasta krizler dışarı orada bir durumdur toplam tazminat, Bireyler tutan her ne kadar sürekli hemolitik anemi (kansızlık).

Aktivite eksikliği, -6 ilk açıklaması-FD yapıldı 1956 g. kişilerde, profilaktik antimalarial uyuşturucu primaquine alarak. Bu çalışmalar ne olursa olsun 1957 g. Bay eksikliği bulunan 6-FD hasta eritrositler içinde yapıldı., hangi düzenli olarak herhangi bir ilaç almadan hemolitik krizler gözlemledim.

Şimdi daha fazla bilgi için açıklanan 250 g-6-PD çeşitli mutant formları. Onlar enzim elektroforetik hareketliliğini farklı, onun benzeşme yüzeyler için glikoz-6-fosfat ve nikotinamidadenindinukleotidfosfatu olduğunu (NADP) Şartları enzim aktivite eksikliği düşük benzeşme sonucudur, Ne zaman yüzeylerde konsantrasyonu kesinlikle önceki eğitim tepkilerini hız yanında sınırlıdır. Aktivite eksikliği gözlenen orada, ancak çoğu durumlarda saç kaybı gibi enzim anlamına gelmez ve. Çoğu zaman, yokluğu veya azaltılmış enzim aktivitesinin onun hasta patolojik alt düzey formunda sonucudur.

Yapısal gene ve gene kontrol, 6-FD Bay sentez yapmak, X kromozom üzerinde bulunan, Bu nedenle, eritrositler Bu enzim aktivite eksikliği devralınması her zaman oluşturuyoruz X'e ile.

Mutant iki ana yöntem vardır, hangi amino asit ikame değil başvurmak için etkin merkezleri, ve bu nedenle her iki yaygın bu mutasyonlar normaldir. Elektroforetik hareketlilik birbirinden farklıdırlar, Ancak, onlar aynı derecede belgili tanımlık substrate için ilgi vardır. Modern adlandırma, Bu formlardan birini, Avrupa'nın ortak, denilen formu BB, ve diğeri, bir form a eğilimdir Afrika. Şu anda açıklanan ve diğer mutasyona uğramış formlar, Bu da olmayan farklı kinematik göstergeler, Ama farklı elektroforetik hareketlilik var..

Sceplennost′ enzim Paul ile erkekler kişiler arasında önemli bir ağırlığı patolojinin klinik bulgular ile verir. O homozigoz erkeklerde gözlenen, Annesi onu X kromozomu ile patolojinin miras, homozigoz kadın olması (hastalık her iki ailesinden miras) ve heterozigoz kadınlar bir parçası, mutant bir fenotip ile bir üst nesneden nasledovavših hastalığı.

En sık aktivite eksikliği, -6-FD Avrupa ülkelerinde bulundu, Akdeniz kıyısında yer alan, Yunanistan, İtalya, Latin Amerika'da bazı ülkelerde olarak yanı sıra, Afrika, vb.

Belki, son derece yüksek bir yerde anormal bir gen birikimi kolaylaştırır evlilikler özel korunmuş, nüfus homozigoz dişilerde birikimine yol açar, bir ağır klinik belirtileri hastalığın vererek daha yüksektir, geterozigotnye medya, ve homozigoz erkek doğum olasılığı artan, geçmişte yaygın de, bu yerlerde tropikal sıtma.

Varolan hipotez göre, kişi, Bay açığı 6-FD sahip, tropikal sıtma tahammül ve nadiren bu hastalıktan ölmek. Bu hipotez lehine aslında parazit eritrositler heterozigoz kadınlar arasında dengesiz yayılması diyor. Bulundu, normal hücrelerde çok sayıda parazit içeren, daha da kıt. Bu aslında iki örnek açıklama vardır. Bunlardan birincisi: G-6-PD eritrosit açığı parazit etkilerini dayanabilecek değildir ve hemen fagositik makrofajlar böler, O Plasmodium öldürdü nerede. Başka bir görünüm parazit indirgenmiş glutatyon gelişimi için neobhodmost önerir, miktarı eksikliği, G-6-PD eritrositlerde azalır.

Etyoloji ve patogenez

ilaca maruz kalma ilk aşaması - Vücutta kendi dönüşüm, aktif forma geçiş, eritrosit membran yapısında değişikliklere neden olabilir. İlaçların etkin form 550 nm ile etkileşim vardır. Ne zaman bir miktar hidrojen peroksit.

Geri dönüşümlü glutatyon peroksidaz sistemini kullanarak bazı peroksit detoxifies, tepki işlem geri dönüşümlü glutatyon okside.

Sağlıklı insanlar, tıbbi ürün büyük miktarlarda giriş ile gelişen akut hemolitik kriz (toksik doz). Kriz ortaya çıkabilecek, Sistem geri yükleme zaman glutatyon ile baş edemiyoruz aşırı kompleksleri oluşmuş ve okside glutatyon. Glukoz-6-fosfat dehidrogenaz ve geri yükleme rahatsız NADP aktivite eksikliği ile, Glutatyon redüktaz normal aktiviteye rağmen, Restorasyon ihlal, Çünkü normal hidrojen kaynağı yok. Geri dönüşümlü glutatyon oksidatif konvansiyonel tedavi edici dozlarda ilaçların etkileri koyamıyorum. Bu hemoglobin oksidasyon açar, hem hemoglobin molekülleri üzerinden kaybı, globin gen devreleri kaybına. Dalak Toros Gejnca kandan bültenleri. Bunu yaparken, yüzeyi kırmızı kan hücrelerinin bir kısmını kaybettim, Bu ölüme yol açıyor.

Hemolitik anemi patogenezinde, Fava fasulye yenmesi ile ilişkili, Bilinmeyen hala bir sürü. FAVISM (favizm) Sadece bazı bireylerde faaliyet g-6-PD eksikliği ile geliştirir. Muhtemelen, Bu anemi göstermek için iki enzimatik kusurları bir arada gerektirir. Belki, Toksik maddelerin bazı bireylerde izni eksikliği hakkında konuşuyoruz, at fasulye içinde yer alan, veya bir metaboliti oluşumu, eritrositler sulfhydryl grupları arama ihlalleri. Sağlıklı bireylerde at fasulye az miktarda alan belirgin hemolitik anemi neden olmaz, indirgenmiş glutatyon metaboliti toksik etkileri karşı koymak mümkün kırmızı kan hücrelerinde varlığı çünkü. Bu açığı devralınması, görünüşe göre, autosomnoe baskın. Toksik maddelerin vücuttaki olağanüstü dönüşümleri bir kombinasyonu ile, at fasulye içinde yer alan, Bay etkinlik 6-FD bir açığı ile klinik primahinovoj anemi belirtileri ortaya.

Klinik bulgular

Bay 6-FD homozigoz hastaların klinik bulgular doğrultusunda var seçenekler alt bölümlere uzmanlar ve eritrositler dört sınıf içinde faaliyet düzeyine.

Birinci sınıf -Seçenekler, Kronik hemolitik anemi tarafından eşlik.

İkinci sınıf -seçenekleri etkinlik, -6-0 FD eritrositler içinde olduğunu 10 % norm, hemolitik anemi kriza dışarı eksikliği yol açan taşıyıcı, ve krizler, uyuşturucu almaya veya at fasulye içme ile ilişkili.

Üçüncü sınıf -seçenekleri eritrositler 10-60 etkinliğinde % norm, ışık klinik belirtileri gözlenen, ilaç alımı ile ilişkili.

Dördüncü sınıfı — değişik normal veya normal faaliyet düzeylerindeki yakın, Klinik patoloji tarafından eşlik değil.

Bir çocuk doğduğunda hemolitik anemi var., Her iki ilk ile ilgili, ve ikinci sınıf Bay açığı 6-FD.

Bay 6-FD eritrositler içinde etkinlik düzeyini değil her zaman aralarındaki ilişkileri belirlemektir klinik bulgular şiddeti ile. Birinci sınıf birçok sürümleri 20-30 tarafından tanımlanır % bir enzim aktivite düzeyi. Diğer yandan, bazı hastalarda aktivitesinin sıfır düzeyinde bu herhangi bir klinik belirtiler görülmektedir değil. Bu kaynaklanmaktadır, Başta, lutantnyh enzimler özellikleri ile, Ikinci olarak, büyük ihtimalle, hız uyuşturucu citohromnym aparatı karaciğer hasta izni ile.

En sık aktivite eksikliği, -6-FD özel provokasyonlar hemolitik kriz olmadan klinik bulgular sağlamaz. Çoğu durumda, hemolitik kriz sulfanamides aldıktan sonra başlar (norsulfazola, streptocida, sulfadimetoksina, sulfazil-natria, etazola, biseptola), anti-sıtma ilaçları (primahin, xinina, akrihina), nitrofuranovyh ilaçlar (furazolidona, furadonina, furagina, 5-NOC, nevigramona), uyuşturucu izonicotinova asit (tubazida, ftiwazida), PASC sodyum, Nitrogliserin yanı sıra.

Aktivite ile anti-sıtma ilaçların g-6-PD delagil atanabilir, sulfanilamidnykh-ftalazol. Uyuşturucu bir dizi, yüksek dozlarda, hemolitik krizlere neden, küçük dozlarda Bay etkinlik 6-FD bir açığı ile kullanılabilir. Bunlar, asetilsalisilik asit içerir, amidopirin, fenacitin, levomicetin, Streptomisin, antidiabetics sülfa ilaç.

Tüm ilaçlar, hemolitik krizlere neden olabilir, oksidatif denaturatia hemoglobin moleküler oksijen katalizler.

Hastalığın klinik bulgular ikinci-üçüncü gün ilaç alımı başından itibaren oluşabilir. Başlangıçta kolay görünür scleral, koyu renkli idrar. Ne zaman şiddetli hemolitik kriz bu dönemde ilaç son geliştirmek değil. Tedavi devam ederse, 4-5 gün için idrar siyah ya da bazen kahverengi hemolitik Kriz tahsisi oluşabilir, Bu damar içi kırmızı kan hücresi parçalanması ile ilişkilidir. Hemoglobin 2-3 tarafından düşüş olabilir %.

Ağır hastalığı artan vücut ısısı ne zaman, keskin baş ağrısı görünür, ekstremitelerde ağrı, kusma, Bazen ishal. Hırıltı oluşur, Kan basıncı azaltır. Dalak kez artar, Bazen karaciğer.

Nadir de olsa bazen böbrek yetmezliği gelişir, böbrek filtrasyon ve renal tübüler engelleme kan pıhtıları keskin düşüş ile ilişkili.

Laboratuar bulguları

Kan çalışmada anemi reticulocytes artan sayısı ile tanımlanır.. Mielozitov bir kayma hücrelerle sayısında bir artış olmuştur. Bazı hastalarda,, Özellikle çocuklarda, hücre sayısı bazen basamak için tasarladığın seviyeye ulaşabilir (100 T 1 l saklıdır). Trombosit sayısı değişmez. Eritrositler boyama, kristal Violet şiddetli hemolitik krizler olarak algılanır Toros Gejnca, çok sayıda.

Kırmızı kemik iliği mikrop keskin bir tahriş tespit. Artan serum serbest hemoglobin içeriği, bilirubin dolaylı nedeniyle sık sık yüksek seviyede. Benzidinovoj örnek kullanarak RBCs olmadan idrarda hemoglobin varlığı tespit, Bazen hemosiderin algılandı.

Yetmezliği glukozo-6-fosfatdegidrogenaza bazı formlarda kendini hemoliz yoktur, t. bu. hemolitik kriz biter, rağmen, hasta ilaç almaya devam ediyor, hemolitik Kriz neden. Hemoliz sınırlamak için yetenek neredeyse retikulocitah bir enzim aktivitesinin normal rakam seviyesine yükselen tarafından kaynaklanır. En formları içinde önemli ölçüde azaltılmış.

Çocuklar daha sık meydana şiddetli hemolitik krizler var, yetişkinlerde daha. Bay açığı 6-FD bazen doğumdan hemen sonra meydana ifade etkinliği. Bu yenidoğan hemolitik hastalık olduğuna, immünolojik çatışma ile ilişkili değil. Bu kadar zor olabilir, hemolitik anemi (kansızlık) olduğu gibi, Maternal ve fetal rezusnesovmestimost′û nedeniyle. Belki de kernicterus korkunç nörolojik semptomları olan varlığı.

Okudu bu krizlerin patogenezinde yeterli değil. Henüz tespit, Bu krizlerin kendiliğinden doğumda enzim glutatyon peroksidaz aktivitesi fizyolojik eksikliği ile bağlantılı olarak ortaya çıkan veya onları neden bazı antiseptik çocuğun göbek kordonu işlerken kullanılır. Belki, Bazen anne bazı ilaçların alınması ile ilgili krizler.

Bazı durumlarda hemolitik krizler açığı, Bay etkinlik 6-FD ortaya çıkan bulaşıcı hastalıklar fonunda: Grip, salmonellozis, Viral hepatit. Krizler de azidozom diabetes mellitus veya Böbrek yetersizliği tarafından tahrik.

Sürekli hemolitik anemi hastaların küçük bir kısmı ile faaliyet g-6-PD eksikliği gözlenen, ilaç alımı ile ilişkili. Bu gibi durumlarda, dalak hafif bir artış olarak işaretlenmiş., Orta normochromal anemi reticulocytes artan içerikli, èritrokariocitov kemik iliği ve bilirubin düzeyleri. Hastalığın alevlenmesi ya sonra yukarıdaki ilaç alma mümkündür, Ya enfeksiyon karşısında.

Teşhis

G-6-PD probanda ve akrabaları etkinliği tanımlamak için temelidir eritrositler Bu enzim eksikliği tanısında. Kalitatif yöntemleri, Bu amaçla kullanılan, En basit yöntem tavsiye etmek.

Yöntem Bernstein Sadece aktivite eksikliği, Bay 6-FD gemizigotnyh herkes, teşhis olanağı sağlar, homozigoz kadın, Ama kabaca heterozigoz kadınlardan Bu enzim eksikliği değerlendirmek. Bu yöntem hakkında ortaya çıkarmak yönetir 50 % heterozigoz kadınlar. Bu yöntemin avantajı uygunluğu kitle nüfus Anketi seferi koşullarında kullanımda olduğunu.

Bu yöntem boya 2,6-dihlorfenolindofenol ve onun yeniden yapılanma renk değişikliği üzerinde dayanır. G-6-PD huzurunda oksidasyon glikoz 6 fosfat ve NADP NADP n oluşumu oluşur. Bu madde fenazinmetasul′fat geri yükler., hangi sırayla 2,6-dihlorfenolindofenol geri yükler. Bu tepkiden çok aktif vektör olarak elektron NADP Bay renk Fenazinmetasul′FAT faaliyet. Fenazinmetasul′fata bir kaç saat tepkidir, ve fenazinmetasul′fata huzurunda renk değişikliği sırasında 15 - oluşur 30 m.

Reaktifler.

1. NADP çözümü: 23 MG NADP içinde çözünmüş 10 ml su.
2. Glukoz-6-fosfat çözeltisi (G-6-s): 152 glukoz-6-fosfat, sodyum tuzu mg içinde çözünmüş 10 ml su. Baryum tuz glikoz-6-fosfat, sodyum tuzu aktarılması gerektiğini. Bunu yapmak için tartmak 265 glukoz-6-fosfat mg baryum tuz, içinde çözüldü 5 ml su, eklemek 0,5 ml 0,01 Hidroklorik asit M çözüm ve 1 MG kuru sodyum sülfat. Çökelti centrifuged. Nadosadočnyj katman nötralize etmek 0,01 M çözüm için distile su ve sodyum hidroksit 10 ml.
3. Çözüm fenazinmetasul′fata: 2 içinde çözünmüş fenazinmetasul′fata mg 100 ml TRIS-tampon 0,74 M; pH 8,0.
4. Boya çözüm 2,6-dihlorfenolindofenola (sodyum tuzu): 14,5 mg boya içinde çözünmüş 100 TRIS-HCL ml tampon solüsyon (0,74 M; pH 8,0). Hazırlanan tampon çözüm 1,48 TRIS-gidroksimetilaminometana M çözümü (42,27 d 250 ml su) ve 1,43 Hidroklorik asit M çözelti (2 ampul fiksanala, içeren 0,1 g-EQ, su getirmek bir 135 ml). K 230 ml TRIS-gidroksimetilaminometala eklendi 110 hidroklorik asit mi, pH getirmek 8,0 ve su ekleyin 460 ml.

Önce kullanma, reaktifler karışımı hazırlayın: 1 hayır. çözüm NADP (1), 1 hayır. Bay çözüm 6-f (2), 2 hayır. çözüm fenazinmetasul′fata (3) ve 16 hayır. Çözüm 2,6-dihlorfenolinodofenola (4).

Yöntem.

Test tüpü içinde, içeren 1 ml distile su, katkıda bulunmak 0,02 kan mi.

Hemoliz bir hafta sonra Ekle 0,5 reaktifler karışımı ml. Sonuçları dikkate almak 30 m. Reaksiyon boya tam renk değişikliği ile normal olarak kabul edilir. Nerede, Ne zaman boya renk değişimi olmuyor (kalıntılar yoğun mavi-yeşil renk ben), tepkiler keskin-pozitif olarak. Eğer yoğunluğu azalır, Ama mavi-yeşil renk kalır, reaksiyon Polo-pozitif düşünüyorum. Nerede, Açık bir renk değişikliği olduğunda, Ama ne zaman karşılaştırmak ile denetim yeşilimsi renk kalır, artı-eksi olarak tepki.

Rezkopoložitel′Nye ve olumlu tepkiler homozigoz kadın ve erkek gemizigotnyh gözlenen. Bazen geterozigotnye kadınlar olumlu bir tepki vermek, Ama en artı-eksi. Dışında, artı-eksi bazen bazı hastalıklar veya alarak ilaç çerçevede enzim aktivitesinin azalma ile son derece sağlıklı kişilerde gözlenen yanıt. Artı negatif reaksiyon dikkate alınması ve ne zaman sadece kadınlar hemolitik anemi şüpheli var enzim aktivitesinin kantitatif yöntemi doğrulayın, glukoz-6-fosfat dehidrogenaz aktivitesinin bir eksikliği tarafından neden. Hesap artı-donma tepki kitle anketteki içine almamalıdır.

Hatalı pozitif reaksiyon anemi nedeni olan hastalarda ifade, ne 0,02 kan mi, tüp, kırmızı kan hücreleri küçük bir miktarda içerir ve, Sonuç olarak, az miktarda enzim. Bu durumda, test tüpü distile su ile iki ya da üç damlalıkları eklemek gerekir (tarafından 0,02 ml) kan, boya eklemeden önce bu test tüpleri renklendirmek için denetimden farklı değil.

Floresan lekeleri yöntemi Beutler ve Mitchell uzun dalga ultraviyole ışık azaltılmış NADP belirli Floresans dayalı (440- 470 nm), görsel olarak sabit açısından değerlendirildi.

Reaktifler.

1. TRIS-HCl tampon 0,5 M; pH 8,0: 60,55 Teresa içinde çözünmüş 800 ml distile su, eklemek 20 HCl ml konsantre, pH getirmek 8,0 yardımı ile 2 M çözüm HCL ve su anlama 1 ml; çözüm saklamak için 36 gün 4° c sıcaklıkta.
2. Glukoz-6-fosfat çözeltisi 20 M: 6 glukoz-6-fosfat içinde çözünmüş mg disodyum tuzu 1 ml distile su; kadar saklamak 2 gün 4° c sıcaklıkta.
3. NADP çözümü 10 M: 8 MG NADP içinde çözünmüş 1 ml distile su; kadar saklamak 10 gün bir sıcaklık 4 ° C.
4. Saponin sulu çözüm 1 % kadar saklamak 20 gün bir sıcaklık 4 ° C.
5. Okside glutatyon çözümü (10 ml): 2,4 mg glutatyon içinde çözünmüş 1 ml distile su; kadar saklamak 10 gün 4° c sıcaklıkta.

Yöntem.

Cook kuluçka karışımı tanımlamadan önce, karıştırma 1 hayır. glukoz-6-fosfat çözeltisi, 1 hayır. çözüm Ph ÜZERİNDE, 2 hayır. saponin çözümü, 5 hayır. Arabellek ve 1 hayır. glutatyon çözümü. Kan (0,01 ml) test tüpleri veya hücreleri gemagglûtinacionnoj kurulları yaptı ve eklemek 0,2 Kuluçka karışımı ml. Içinden 15 Min micropipette kuluçka karışımları bir damla seçin (0,02 ml) Her örnek ve koymak onları hromatografičeskuû leke çapı şeklinde kağıt üzerinde 10-12 mm. Lekeleri oda sıcaklığında ve görüntüleme Floresans değerlendirmek için ultraviyole ışık altında açık havada kurutulmuş. Kontrol örnekleri normal kan olduğu bilinmektedir. Kalite kontrol reaktifler içeren kan yok.

Sonuçların Değerlendirilmesi.

Floresans yokluğu hiçbir etkinlik gösterir, Floresans varlığı (yoğun Mavi parlaklık) — etkinlik durumu, zayıf kızdırma olarak — orta tepki. Deneme koşullarında yöntemi yanlış negatif sonuçlar verir. Yanlış pozitif tanı kaynağıdır ankete anemi belirttiler, Ama çok daha az bir ölçüde, daha berstein yöntemi. Hatta ne zaman ifade anemi görülmektedir, ara tepki, yerine Floresans yokluğu.

G-6-PD aktivitesinin belirlenmesi nicel yönteminin kullanımı gemizigotnyh ve homozigoz hastalar sadece yavaşlama tanımlamak için fırsat verir, Ama kadın geterozigot. Çünkü, reticulocytes ve renk oranı sayısını enzim aktivite düzeyini etkiler, Bu göstergeler dikkate alarak sonuçları değiştirilmesi için tavsiye edilir.