Kemisk undersökning av cerebrospinalvätska

Stora skillnader i sammansättningen av cerebrospinalvätska och blodplasma är att, av att vätskan är omkring 300 gånger mindre protein, betydligt mindre kolesterol, Glukos och fler klorider.

Kemisk sammansättningen av cerebrospinalvätska Det återspeglar stora förändringar, förekommer i det centrala nervsystemet.

Proteinet i cerebrospinalvätskan

Normalt, i vätska från ventriklarna i hjärnan innehåller 0,12-0,2 g / L-protein, av cerebellär hjärna tsisterny- 0,1-0,2, från subaraknoidalrummet av ryggmärgen - en 0,22 0,33 g / I.

Minskning eller ökning av ryggmärgsvätska protein Den indikerar en patologisk process. Genomsnittlig proteinhalt ger inte anledning att förneka förekomsten av en organisk skada i det centrala nervsystemet, på grund av möjliga brott mot förhållandet av proteinfraktioner av cerebrospinalvätska. Vid normal proteinsammansättning skiljer sig från cerebrospinalvätskan serum euglobulin frånvaro och närvaro av ytterligare fraktioner.

Studiet av ursprunget för de cerebrospinalvätskan proteinerna funna, nästan 10 % de har ingen immunologisk likhet med serumproteiner och klassificeras som specifika proteiner CNS.

Ökning av proteinhalten i CSF Det beror på att hemodynamiska störningar i hjärnan och stagnation av blod i kärlen i det centrala nervsystemet.

Prealbuminovaya fraktion i vätska från ventriklarna i hjärnan är 13-20%, av cerebellär hjärnTank - 7-13, en fluid, erhållen genom lumbalpunktion,- 4-7 % total proteinhalt. Denna fraktion av proteinet är frånvarande i blockad av cerebrospinalvätskan utrymmen, det kan maskeras albumin inte alltid fördelas på högsta nivå av protein i cerebrospinalvätska.

I hjärntumörer, och inflammatoriska sjukdomar i det centrala nervsystemet i cerebrospinalvätska minskar halten av finfraktioner (Albumin, A'1- и a2-глобулинов) och ökad halt av grova (b- и c-глобулинов).

För att identifiera hög halt i ryggmärgsvätskan kan användas globuliner reaktion Pandey, baserad på grumligheten hos vätskan på grund av proteinkoagulering påverkade fenol. Att genomföra denna reaktion släpp-metoden möjliggör betydande besparingar testvätska, ofta levereras till laboratoriet i en mycket liten mängd.

Globulin svar trots att de används i laboratoriediagnos, men ger endast en ungefärlig uppfattning om innehållet av protein.

Mängden protein i cerebrospinalvätska bestämdes liksom, i urin, Förfarande Brandberg-Roberts-STOLNIK eller kolorimetrisk metod med användning av sulfosalicylsyra och natriumsulfat.

Intensiteten hos den grumlighet, bildad genom att man till cerebrospinalvätskan sulfosalicylsyra, proportionell mot proteinkoncentrationen.

I hemorragisk cerebrospinalvätska proteinhalt kan förbättras genom plasmaprotein. Vid mottagande av cerebrospinalvätska, färgad blod, patienten måste ta blod från fingret till ett rör och isotonisk natriumkloridlösning för erhållande av, målat något mer intensivt, än vätskan. Rör med cerebrospinalvätska och blod bör vara samma tjocklek och färg glas. Färgen av vätskenivåerna i komparatorn, försiktig tillsats till utspätt blod isoton natriumkloridlösning, varefter den centrifugerades och mängden av protein i en färglös transparent över- sedimentära vätske. Sann protein i cerebrospinalvätska erhålles genom att subtrahera mängden av protein i det utspädda blodet från mängden av protein i vätske hemorragisk. Metodik Detta är inte särskilt exakt, Det används i fall, När hemorragisk cerebrospinalvätska blir färglös efter centrifugering.

Proteininnehållet i cerebrospinalvätskan ökningar i strid med hemodynamik, inflammatoriska, efter operationer på det centrala nervsystemet, såväl som i tumörer i hjärnan och ryggmärgen. Den kraftiga ökningen av mängden protein observeras i venstas i samband med brott mot spridningen av cerebrospinalvätska. I sådana fall cytosis proteinrik normal - proteincell dissociation. I samband med att hon xanthosis karakteristiska syndrom Froana, som observeras i tumörer i hjärnan och ryggmärgen. Att minska mängden protein i ryggmärgsvätskan är markerad på dess hyper och hydrocefalus.

Nonne-Apelt reaktion dlya specifikt globulin. Dess princip består i utfällning av globuliner i närvaro av mättad ammoniumsulfatlösning. Reaktionen anses positivt när innehållet i cerebrospinalvätska 0,05 % globuliner och mer. Det ger en indikation på hur innehållet i globuliner i ryggmärgsvätskan.

Antal globulin ökat markant i kroniska inflammatoriska och degenerativa processer i centrala nervsystemet (meningit, meningoэncefalit, allmän förlamning, multipel skleros). Genom att öka nivån av albumin, globulin bruten globulin förhållandet mellan cerebrospinalvätska. Normalt varierar mellan 0,2-0,3. För en mer rättvisande bild av proteinfraktionen av cerebrospinalvätska bör definiera dem genom elektrofores eller andra kvantitativa metoder.

Studie av proteinkomposition av cerebrospinalvätska genom elektrofores - En tidskrävande process, än den undersökning av sammansättningen av blodserum. I cerebrospinalvätska av 200-400 gånger mindre protein, därför förkoncentratet (koncentrerades) genom ultrafiltrering i vakuum, dialys mot dextran eller gummi arabicum, och indunstning i vakuum. Emellertid kan den förtjockning av cerebrospinalvätskan att förlora proteinfraktioner eller identifiera artefakter. I samband med denna bestämning har utan tvivel fördel proteinogram cerebrospinalvätska genom elektrofores på agargel eller polyakrylamid.

Elektrofores i agargel i frisk människa cerebrospinalvätska isolerade γ₂– и c₃-hlobulynы.

En känsligare metod för proteinfraktionering av cerebrospinalvätska, Det kräver inte förtjockning, Det är эlektroforez av poliakrilamidnom Gelè, gör det möjligt att identifiera proteinfraktionerna 30-40, främst i γ-globulin.

Förfarandet enligt immunoelektrofores detekteras i cerebrospinalvätska immunoglobulin A, M, G, halten är 3-4 gånger lägre, än serum: 2,65 мг / л IgG, 2,05 mg / l IgA och 0,24 мг / л IgM.

Fractional sammansättning cerebrospinalvätskan proteiner ålder genomgår stora förändringar. För barn kännetecknas av låga nivåer av albumin, även om nivån av pre- albuminfraktionen är relativt hög. Den äldre observerade ökningen i IgA och IgG, som hänvisar till γ-globuliner.

Studien av fraktionerad sammansättning cerebrospinalvätska protein har viktig diagnostisk värde, Eftersom ett antal sjukdomar i CNS (tumörer, rasseânnom skleros) den totala mängden av det kan inte ändras. Den mest diagnostiskt värdefulla är samtidig bestämning av proteinfraktioner, Lipo- och glykoproteiner.

Etablerad, som i akuta inflammatoriska sjukdomar i nervsystemet är mest kännetecknas av en ökning av innehållet i cerebrospinalvätska α-globuliner, för kroniska inflammatoriska processer - immunglobulin, och maligna tumörer - β-lipoprotein.

Kolloidalt reaktionsproteinbestämning

Reaktion Lange Det grundar sig på, att kontakt patologiskt förändrad cerebrospinalvätska med fint kolloidal lösning av guldklorid i närvaro av elektrolyter som främjar koagulation och lösningens färg förändrades.

Normalt betyder cerebrospinalvätskan inte ändra färgen på den kolloidala lösningen av guld, Han förblir rött. Ändra färg på den lösning som valdes i patologin att bedöma siffror:

• Röd - 0;
• rött och lila - 1;
• Violet - 2;
• rött och blått eller rött och opalescent med en liten avsättning av partiklar - 3;
• blåaktig - 4;
• svagt rosa färg med en blåaktig ton, och sediment - 5;
• färglös med sediment - 6.

Skilj fyra typer av reaktioner Lange:

• normala, varvid färgförändringen inte förekomma alls, eller 3-5 rör färg skiljer sig något från färgerna i styrröret (röd med en svag lila nyans);
• degenerativ, kännetecknad av en förändring av färg i den vänstra halvan av antalet rör (från lila till blekning) och utseendet av sedimentet; observerats i syfilis i hjärnan, rasseânnom skleros, tumörer i hjärnan och ryggmärgen, uppmjukning av hjärnan, och andra.;
• inflammatoriska, vilka tenderar att ändra färg på den högra sidan eller i mitten av raden av rör; hjärnhinneinflammation observeras vid olika etnologi;
• blandad, varvid färgförändringen uppträder i den vänstra, och på den högra sidan av raden av rör; Blandade lesioner observerades i membran och hjärnvävnad.

Reaktion Takata-Ara kompletterar eller bekräftar reaktions Lange. Baserat på koagulationsproteiner cerebrospinalvätska under påverkan av kvicksilver-diklorid och lösningen ändrar färg i närvaro av en blandningslösning av fuksin.

Det finns Fyra typer av reaktioner:

• negativ (normala) - Lila färg blandningen ändrar färg, flytande klar;
• degenerativ - Förlust av blå-lila fällning, över vilken det finns en klar vätska;
• inflammatoriska - En blandning av rosa färg utan sediment, tid avfärgades;
• blandad - Klar vätska över en rosa fällning.

Reaktion Takata-Ara är känsligare, än reaktionen Lange.

För diagnos av degenerativa och inflammatoriska processer i CNS används mastix reaktion.

Tryptofan reaktion och reaktions Levinson används för diagnos av tuberkulos.

Reaktions Friedman används för tidig diagnos av meningit. Principen är, att under inverkan av kaliumpermanganat inträffar redoxprocesser och färgskiftningar i cerebrospinalvätska, och under inverkan av triklorättiksyra utfällda proteinet som finns däri. För skador, tumörer, syfilis av hjärnan, MS färg vätskan ändrar inte.

Cerebrospinalvätskan detekteras av 20 till 25 fria aminosyror. För att studera aminosyrasammansättningen av cerebrospinalvätska kromatografi med användning av moderna metoder, jonbyte fluorometri.

Innehållet av fria aminosyror och aminokvävet i cerebrospinalvätska genomsnitt 0,6- 1,4 mmol / l, nedan, än i plasma - 1,9-2,8 mmol / l.

En viktig roll vid diagnos av sjukdomar i nervsystemet är studier innehåll i cerebrospinalvätska glukos, enzymer, xloridov, bilirubin, kolesterol och kvarvarande kväveöverskott.

Glukos i cerebrospinalvätskan

Normalt ingår i cerebrospinalvätskan 2,5- 3,33 mmol / l glukos. För att bestämma mängden därav i cerebrospinalvätska med användning av någon av metoderna, används för att bestämma nivån av glukos i blodet. Vätskan undersöks omedelbart efter, eftersom det kommer snabbt glykolys. Vid akut och subakut inflammation i hjärnhinnorna glukos nivåerna i cerebrospinalvätskan minskar, ibland (vilket är mycket sällsynt) det helt försvinner. Oftast, i cerebrospinalvätskan glukos är frånvarande i streptokocker och meningokock meningit.

Ökad glukosnivån observeras i cerebrospinalvätskan och epileptiska encefalit. När tumörer i hjärnan glukos antingen kan växa, och släppa.

Mjölksyran i cerebrospinalvätskan

I cerebrospinalvätskan hos friska människor bestämdes genomsnittliga enzymatiska metoder 1,54 (0,89-2,8) mmol / l mjölksyra.

Mest signifikant ökar innehållet av mjölksyra i cerebrospinalvätskan under hypoxiska och destruktiva processer i hjärnvävnaden, det är inte bara diagnostik, och prognostiskt värde. Enzymer, involverade i metabolismen av CNS, hittades i cerebrospinalvätska i mycket mindre antal, än i blod, och bestäms med samma metoder, och att i blodet.

På grund av de glykolytiska enzymer aldolas definieras ofta och laktatdehydrogenas och dess isoenzymer.

Klorider i cerebrospinalvätskan

Kloridhalten i cerebrospinalvätska normal vuxen 197-242 mmol / l, i barn - 195-204 mmol / l. För att bestämma nivån av klorider i cerebrospinalvätskan kan användas av någon teknik, används för att studera blod klorider, utan snarare tillämpningen av metoden för volymbestämning genom titrering med silvernitrat vätska.

Minska mängden klorider observerats i tuberkulös meningit, ibland - med encefalit, povyshenie- i uremi.

Bilirubin i cerebrospinalvätska

Bilirubin i cerebrospinalvätska och vätska från cystor i hjärnan är hematogen ursprung och orsakar xanthosis. För kvalitativ och kvantitativ bestämning av bilirubin använder samma prov, och att för bestämning av bilirubin i blodet. Normalt bilirubin i cerebrospinalvätska inte upptäcks.

Kolesterol i cerebrospinalvätskan

I frisk kolesterol i cerebrospinalvätskan eller är frånvarande, eller dess innehåll varierar från spår till 0,003-0,005 mg / dL. Ökade kolesterolvärden observerats i hjärnhinneinflammation och hjärntumörer, speciellt maligna.

För att bestämma kolesterol i cerebrospinalvätska kan användas Engelhardt-Smirnov-metoden eller förfarande för Ilka.

Normalt rest kvävehalten i cerebrospinalvätskan genomsnitt 8,6-14,3 mmol / l, t. det är. på 50 % nedan, än i blod.

Nivån på kvarvarande kväveöverskott i CSF undersöks med samma metoder, och att innehållet av kvarvarande kväve i blodet.

Glykoproteiner och lipoproteiner i cerebrospinalvätskan

Studiet av glykoproteiner och lipoproteiner höll genom elektrofores på papper i en pre-förtjockad gel agar eller polyakrylamid infödda eller cerebrospinalvätska. Dessa studier används för att diagnostisera inflammatoriska sjukdomar och tumörer.

I cerebrospinalvätskan visade biologiskt aktiva substanser med olika kemiska natur:

• Medlare (acetylkolin, noradrenalin, dofamin, Serotonin, gamma-aminosmörsyra);
• hypofyshormoner, tallkottkörteln och andra endokrina körtlar;
• neuropeptider (endorfiny, enkefaliner);
• cykliska nukleotider (adenozincnklofosfat, guanylsyra);
• prostaglandiner;
• kininer.

De flesta av dessa biologiskt aktiva föreningar bestämmes genom radioimmunoanalys, som alltmer används i kliniska laboratoriediagnostik.