Definície kvantitatívnych a kvalitatívnych charakteristík spermií

Stanovenie pohyblivosti spermií

Stanovenie pohyblivosti spermií je dôležitý parameter, kvality ejakulátu. Spermie, schopné oplodnenia, majú mobilitu - Urovnajte pohyb vpred rýchlosťou 50 slečna. Možno nájsť v ejakuláte spermie s obmedzenou pohyblivosťou - diskinospermiey vo forme vibračné, Manéž a iné činnosti, ktoré normálne nie sú prítomné.

Pohyblivosť spermií bola hodnotená v natívnom príprave ejakulátu s obmedzeným zorným poľom (pomocou okna foni), Použitie okuláru šošovku 7X a 40X, keď s kapucňou kondenzátor. Počítacie 100 bunka, na vedomie, že mnohé z nich v pohybe, sedavý a pevné spermie. Za normálnych okolností, aktívne-pohyblivých spermií 80-90 %, sedavý - 10-12, pevná - 6 10 %. Ak vezmeme do úvahy iba tie, ktoré aktívne sa pohybujúce a pomalé spermie, kto robiť stály pokrok.

Môžete tiež použiť podrobnejšie päťbodovej stupnice:

• "4" - skvelé mobility (všetci majú priamočiary translačný pohyblivosť spermií na značnú mieru);
• "3" - dobrá mobilita (pár kvapiek);
• "2" - priemerný mobility (Stále veľa spermií, ale s vibračným chvostom);
• "1" - chudobní mobility (nedostatok pohybu vpred, Iba chvost spermií);
• "0" - pohyb spermií chýba.

Plodnosť ejakulát Záleží na dĺžke spermií, preto je nutné určiť, pohyblivosť spermií dynamiky (Dynamic kinezisgramma).

Kvapka spermií sa aplikuje na krycie sklo, otočte ho hore nohami a dať na sklíčko s polmesiacom na visiace kvapku tak, že pokles bol v stredu vybrania. Hrany krycieho sklíčka mazané kvapalnom parafínu a mikroskopicky sa stanoví percento aktívne motile-, sedavý a pevné spermie prostredníctvom 1, 3, 6, 12 a 24 hodiny po ejakulácii. Výskum sa vykonáva pri teplote miestnosti. Za normálnych okolností, počet aktívnych-pohyblivých spermií sa znižuje po 2-3 h 20 % ,

• Poznámka. Mikroskopické vyšetrenie spermií sa musí vykonávať v laboratóriu jednej osoby, majú dostatočné skúsenosti v oblasti laboratórnej diagnostiky, ako výsledky stanovenia pohyblivosti spermií v rôznych výskumných rozsah až do ± 40 % a do značnej miery závisí na skúsenostiach s ejakulátu.

Skúšobné na "oživenie" spermií

Skúšobné na "oživenie" spermií Je to založené na obnovenie normálneho pohybu pevných, ale s pomocou živých spermií stimulačných roztokov:

1) Becker riešenie (Glukóza - 3 g, Už₂HPO₄ - 0,6 g, NaCl - 0,2 g, KH₂PO₄ -0,01 G, distillirovannaya do vody 100 ml; pH - 7,8);

2) 0,1 % kofeín riešenie (a to nielen v ampulkách!) - 10 % objem ejakulátu;

3) 0,1 M arginín riešenie.

Metóda. Dimensional pipetou 1 ml nasasyvayut 0,1 ml ejakulátu (dobre premieša) a rovnaký pipety získanie 0,9 ml roztoku stimulujúce. Obsah pipety sa fúka na hodinové sklíčko, dobre premiešajte opakovaným nasávaním a fúkanie tekutiny na hodinovým sklom, a potom hotový výrobok visiace kvapku. Cez 5 10 min pevná, ale živé spermie začínajú pohybovať.

Percento pohyblivých spermií stanoví bezprostredne pri obnove mobilitu a po 3, 6, 12 a 24 žiadna. Pre viac spoľahlivé výsledky, sa vykonáva paralelne k vzorke s dvoma náročnými riešeniami. Len ak to nie je možné "oživiť" spermia môže ešte hovoriť o nekrospermii.

Identifikácii živých spermií u fixnej

Princíp metódy je založený na, enzýmy, ktoré žijú spermií odfarbenie eosínu. Ako sa používajú činidlá 5 % vodného roztoku chloridu draselného a eosínu 10 % vodný Nigrozín.

Metóda. Na snímke spôsobujú malá kvapka spermií, umiestnený v blízkosti dvojnásobok poklesu 5 % eozín riešenie a kvapka draslíka 10 % Nigrozín riešenie, Je tiež dvakrát tak veľké kvapky Eozín draslík. Po prvé, ejakulátu sa zmieša s eosínu draselným, čaká niekoľko sekúnd, a potom sa zmieša s kvapkou Nigrozín, opäť čaká niekoľko sekúnd a urobiť tenkým náteroch leštené sklo sklíčko.

Použitie ponorenie systému mikroskopu, v náteroch sa počítajú aspoň 200 spermie, zvýraznenie bývanie (Bezfarebný) a mŕtvi (eozín sfarbený na červeno). Počet živých a mŕtvych spermií vyjadrená ako percento. V neprítomnosti kvapiek spermií Nigrozín zmieša s slamy 5 % eozín riešenie draslíka a pripraviť tenké šmuhy pre mikroskopiu. Nigrozín farbivá iba pozadie lieku, kde spermie sú prideľované viac kontrastu. Normálne žijú spermie 80-90 % z celkového počtu.

Počítanie spermie v 1 ml, a v celom objeme ejakulátu

Počet spermií v 1 ml celej ejakulátu sa počítajú v počítacie komore Goryaeva.

Počet spermií v celom ejakuláte sa určí vynásobením počtu spermií v 1 ml objem ejakulátu (mililitrov).

• Poznámka. Počítanie Komora môže tiež určiť počet pohyblivých spermií, Prečo ejakulát sa riedi teplou izotonickým hloridz sodného a spočítať počet pevných spermií, a potom ju odpočítať od celkového.

Za normálnych okolností, v 1 ml spermií obsahuje 60 - 120 miliónov. spermie, keď giperspermii - viac 120 miliónov., v oligo - od 30 na 60 miliónov., čo, zvyčajne, takže je nemožné, aby hnojenie. Avšak, popísané prípady, Keď dôjde k oplodneniu a Content 1 ml эyakulyata 5 na 30 milión. spermie.

Tak ako tak pri identifikácii oligospermia 2-3 potrebné kontroly počítanie počtu spermií v intervaloch 3-4 týždňov, či je ich maximálne množstvo. V rovnakej mužovej počtu spermií je podliehajú značným výkyvom vo fyziologickom.

Normálne okolo ejakulátu obsahuje viac ako 150 milión. spermie.

Počítanie spermiogram

Spermiogram - je percento rôznych morfologických foriem spermií a spermatogenézy.

Vo steru, zafarbené hematoxylínom a eosínu alebo Pappenheim, vypočíta minimálna 200 spermie, kde počet normálnych a patologických foriem, a spermatogenézy buniek vyjadrené v percentách. Výpočet sa vykonáva pomocou ponorenia mikroskopické systémy a stroje na počítanie leukogram pro zmenil názvy tlačidiel.

V normálnej ejakulát spermií normálnych foriem je 80-85 %, niekedy 100 %, medzi ne patrí fyziologické varianty, charakterizované nezvyčajné alebo krku, alebo zníženú, alebo zväčšená hlava.

Mladý, alebo nezrelé, v tvare spermie majú okolo hlavy a krku zvyšku cytoplazmy ("Golier"), pozorovala s častým pohlavnom styku, a nie sú schopné oplodnenia.

Starej formy spermií (hyperchromia, axromija, vakuolizácia hlava) sa objaví v ejakuláte po predĺžená abstinencie a nie sú vhodné pre oplodnenie.

Patologické formy zahŕňajú spermie s deformitami hlavy: megalospermatozoidы (gigantospermatozoidы), makro-, mikrospermatozoidy, Kužeľovitý, dvojhlavý spermie s hrdlom a chvost, bez krku, s jedným alebo viacerými chvosty, bez chvosta, bez chvosta hlavy, atď..

U zdravých mužov v normálnom ejakuláte abnormálne formy spermie sú zvyčajne nebol nájdený, ale niekedy ich počet počas normálneho plodnosti môže dosiahnuť ejakulát 20 %, niektorí z nich 15 % vedúci patológie, 3-5 % - Telo, 2-5 % - Tail.

V patologických spermatogenézy, sekrečnú forma neplodnosti identifikovaného spermií s abnormálnym hlavy a krku. Patológia chvost zvyčajne vylučovacia pôvod, To nastane pri priechode spermií vas spôsoby.

V farebného prípravách sú tiež jasne viditeľné oddelene umiestnené zárodočné bunky v rôznych fázach diferenciácie a zrenia, Je dôležité rozlišovať aspermie a azoospermii.

Spermatogónií sú zaokrúhlené, niekedy oválny, priemer 5 až 12 mikrónov. Jadro zaberá asi tretina buniek, tmavý- alebo svetlé, 1-2-3 Nucleo- Lama, Často sa nachádza v blízkosti karyotheca (nukleárnej obálka), chromatínu štruktúra melkozernystaya. Cytoplazma je úzka, bazofilné, Homogénna. Spermatogónie rozdeliť mitoticky niekoľkokrát. K dispozícii sú bunky s dobre definovanými fázou mitózy.

Niektoré bunky, tvoril cez mitosis, diferencovať na spermatocyty I, a potom II objednávka. Spermatocytov Nariaďujem - Kruhový alebo polygonálne bunky o priemere 17 až 19 milimetrov s veľkým kruhovým jadru a cytoplazme svetlo Dobré. V farebného prípravkoch je jasný perinuclear zóna.

Spermatocytmi II objednávky vytvorený ako výsledok meiózy. Sú menšie, než spermatocytmi Nariaďujem (priemer 15 m), ale v morfológii takmer totožné. V ejakuláte bežnejšie, než spermatocytmi Nariaďujem, ale oveľa menej často, než spermatidmi.

Spermatydы - Malé, guľaté alebo pretiahnuté bunky o priemere 12 až 15 milimetrov s guľatými hyperchromatická jadrami, sa nachádza v centre alebo excentricky. Tam môže byť viacjadrové spermatidmi. Pale cytoplazmy, bazafilnaya, často vakuolizované.

Spermií sú transformované do spermií.

Bunky spermatogenézy u normálneho spermiogramu nie je väčšia ako 2 %. Veľký počet neplodnosti pozorovaný v sekrečnú prírode.

Pre fázový kontrast mikroskopiu ejakulátu sa zriedi fyziologickým roztokom s prídavkom malého množstva 1 % vodný roztok Rivanol alebo kyselina karbolová znížiť pohyblivosť spermií.

S fluorescenčné mikroskopia Nanáša sa na podložné sklíčko a kvapkou ejakulátu kvapka akridínové Orange na v chove 1:20000. Kvapky sa zmieša a pokryté krycím sklíčkom. Mikroskop okulár použitý cieľ 7X a 40X. Živá spermie sú zafarbené zelene, mŕtvych - oranžová. Normálne a abnormálne formy spermií možno ľahko rozlíšiť, pretože ich morfologických rysov.

Rabotы pravidlá fáza-kontrastnom a lyuminestsentnom mikroskopom opisanы v instruktsiyah k эtim Instruments. Pri použití fázového kontrastu a fluorescenčné mikroskopia spermiogram vypočítané podľa všeobecných pravidiel.

Na základe mikroskopického vyšetrenia ejakulátu môže identifikovať rôzne patologické stavy.

• Spermatoschesis - Absencia spermií v ejakuláte, a bunky spermatogenézy.
• Azoospermia - Absencia spermií v prítomnosti spermatogenézy.
• Astenospermia - Zníženie počtu pohyblivých buniek a zvýšenie počtu patologických foriem za normálneho celkového počtu spermií.
• Oligoastenospermiya - Zníženie počtu spermií a ich mobilných foriem a zvýšenie počtu patologických foriem.
• Nekrospermiya - Opravená všetky spermie do prípravy aj po "oživenie".
• Akinospermiya - Štátne, v ktorých, na rozdiel od predchádzajúcej stanovenej nekrospermii spermií po "oživenie" sa začínajú pohybovať.