Studiul chimic al lichidului cefalorahidian
Diferențe majore în compoziția lichidul cefalorahidian și plasma de sange sunt ca, în care lichidul este de aproximativ 300 ori mai puțin de proteine, semnificativ mai puțin colesterol, Glucoză și mai multe cloruri.
Chimic Compoziția lichidului cefalorahidian Ea reflectă schimbări majore, apar în sistemul nervos central.
Proteina din lichidul cefalorahidian
În mod normal, în lichidul de ventriculelor conținute 0,12-0,2 g / L de proteină, a creierului cerebeloasa tsisterny- .1-.2, spațiul subarahnoidian al măduvei spinării - un 0.22 0,33 g / l.
Scăderea sau creșterea proteine lichidul cefalorahidian Acesta indică un proces patologic. Conținutul mediu de proteine nu da motiv pentru a refuza prezența unei leziuni organice a sistemului nervos central, din cauza unor posibile încălcări ale raportului de fracțiuni proteice ale lichidul cefalorahidian. Conform compoziția proteinei de lichid cefalorahidian normale este diferită de lipsa de euglobulin ser și fracțiunile suplimentare.
Studiul de origine a proteinelor a arătat lichidul cefalorahidian, aproape 10 % ele nu au nici o asemănare imunologică cu proteine serice și sunt clasificate ca proteine specifice CNS.
Creșterea conținutul de proteine din LCR Este din cauza unor dereglări hemodinamice ale creierului și stagnarea sângelui în vasele sistemului nervos central.
Fracțiune Prealbuminovaya în lichid din ventriculi ale creierului este de 13-20%, rezervor creier cerebeloasa - 7-13, un fluid, obținut prin puncție lombară,- 4-7 % conținutul total de proteine. Această fracțiune de proteină nu este blocarea spațiilor lichidul cefalorahidian, acesta poate fi mascat albumina nu este alocat întotdeauna la cel mai înalt nivel de proteină în lichidul cefalorahidian.
În tumorile cerebrale, și boli inflamatorii ale sistemului nervos central în lichidul cefalorahidian scade conținutul de fracțiilor fine (Albumină, A1- și α2-globulina) și conținutul crescut grosier (b- и c-глобулинов).
Pentru a identifica conținut ridicat de globulina în lichidul cefalorahidian poate fi utilizat reacție Pandey, bazat pe turbiditatea lichidului din cauza proteinei de coagulare influențat fenol. Realizarea această metodă scădere reacție face posibilă pentru a salva în mod semnificativ lichidul de încercare, de multe ori livrate la laborator într-o cantitate foarte mică.
Reacții Globulinovыe deși acestea sunt utilizate în diagnosticul de laborator, dar da numai o idee aproximativă a conținutului de proteine.
Cantitatea de proteină în lichidul cefalorahidian a fost de asemenea determinată, în urină, Metoda Brandberg-Roberts-STOLNIK sau metoda colorimetrică folosind acid sulfosalicilic și sulfat de sodiu.
Pomutnenyya intensitate, formată prin adăugarea la cefalorahidian acidul sulfosalicilic fluid, proporțională cu concentrația de proteină.
In hemoragic conținut de proteine lichidul cefalorahidian poate fi crescută datorită proteinele plasmatice. La primirea lichidul cefalorahidian, sânge de culoare, pacientul trebuie să ia sângele din deget la o soluție de clorură de sodiu izotonică tub și să obțină, colorate ceva mai intens, decât lichidul. Tuburi cu lichidul cefalorahidian și sânge ar trebui să fie de aceeași grosime și culoarea sticlei. Culoarea nivelurile lichide în comparator, precauție adăugarea la sânge diluat soluție izotonică de clorură de sodiu, apoi a fost centrifugat și cantitatea de proteină într-o culoare, transparentă peste- lichid sedimentare. Adevărat proteine în lichidul cefalorahidian este obținut prin scăderea cantității de proteine în sânge diluat din cantitatea de proteine din hemoragică lichid. Metodologia Acest lucru nu este foarte precisă, Acesta este utilizat în cazurile, când decolorate lichid cefalorahidian hemoragic după centrifugare.
Conținutul de proteine crește în lichidul cerebrospinal prin încălcarea hemodinamica, inflamator, după operații asupra sistemului nervos central, precum și în tumori ale creierului și măduvei spinării. Creșterea semnificativă a cantității de proteine se observă în stază venoasă în legătură cu încălcarea circulației lichidului cefalorahidian. În astfel de cazuri, ridicat de proteine cytosis normal - disociere de proteine de celule. În combinație cu She xanthosis caracteristică Sindromul Froana, care se observă în tumori ale creierului si a maduvei spinarii. Reducerea cantității de proteină în lichidul cefalorahidian este marcată la hipersecretie si hidrocefalie sale.
Reacție Nonne-Apelt dlya globulina specifică. Principiul său constă în precipitarea globulinelor în prezența soluției de sulfat de amoniu saturată. Reacția este considerată pozitivă atunci când conținutul în lichidul cefalorahidian 0,05 % globulina si boala. Acesta oferă o indicație a conținutului de globuline în lichidul cefalorahidian.
Numărul globulina crescut semnificativ în procesele inflamatorii și degenerative cronice în sistemul nervos central (meningita, meningoэncefalit, paralizie generală, scleroză multiplă). Prin creșterea nivelului de albumină, globuline raport globulina rupt de lichid cefalorahidian. În mod normal, aceasta variază între 0,2-0,3. Pentru o imagine mai exactă a fracțiunii de proteine din lichidul cefalorahidian ar trebui să le definească prin electroforeză sau prin alte metode cantitative.
Studiul compoziției proteine de lichid cefalorahidian prin electroforeză - Un proces de consumatoare de timp, decât studiul compoziției serului sanguin. În lichidul cefalorahidian de 200-400 de ori mai puțin de proteine, Prin urmare, pre-concentrat (concentrat) prin ultrafiltrare în vid, dializom împotriva gummiarabika sau dextran, și evaporare în vid. Cu toate acestea, îngroșarea lichidul cefalorahidian poate fi pierderea fracțiuni proteice sau identifica obiecte. În legătură cu această determinare are, fără îndoială, un avantaj proteinogramei lichid cefalorahidian prin electroforeză pe gel de agar sau de poliacrilamidă.
Electroforeza în gel de agar în cefalorahidian γ izolate fluid sănătos uman2– и C3-globulinы.
O metodă mai sensibilă de fracționare proteine de lichid cefalo-rahidian, aceasta nu are nevoie de îngroșare, Este эlektroforez de poliakrilamidnom Gele, permițând identificarea fracțiunilor proteice 30-40, în principal în γ-globulina.
Metoda de imunoelectroforeza detectate în lichidul cefalorahidian imunoglobulină A, M, G, conținut este de 3-4 ori mai mic, decât serul: 2,65 мг / л IgG, 2,05 mg / l IgA și 0,24 мг / л IgM.
Compoziția fracționată a proteinelor în lichidul cerebrospinal vârstă suferă schimbări majore. Pentru copii este caracterizată prin niveluri scăzute ale albuminei, deși nivelul de pre- fracțiune de albumină este relativ mare. Creșterea în vârstă observată în IgA și IgG, care se referă la y-globulinele.
Studiul compoziției fracționată a proteinei lichidului cefalorahidian are o valoare de diagnostic importantă, Deoarece un număr de boli ale SNC (Tumorile, rasseânnom scleroza) suma totală nu poate schimba. Cel mai diagnostic valoros este determinarea simultană a fracțiuni proteice, Lipo- și glikoproteidov.
Stabilit, că în bolile inflamatorii acute ale sistemului nervos caracterizată printr-un conținut crescut de cel mai mult în lichidul cefalorahidian a-globulinele, pentru procesele inflamatorii cronice - imunoglobulină, și pentru neoplasme maligne - β-lipoproteinelor.
Determinarea proteinei reacție coloidal
Reacție Lange Pe baza, că contact cu fluidul cerebrospinal patologic modificate cu soluție coloidală fin divizat de clorură de aur, în prezență de electroliți avansează coagulare și culoarea soluției schimbată.
In mod normal, lichidul cerebrospinal nu modifică culoarea soluției coloidale de aur, El rămâne roșu. Modificarea culorii soluției adoptate în patologia a evalua numerele:
- Roșu - 0;
- roșu și violet - 1;
- Violet - 2;
- roșu și albastru sau roșu și opalescentă cu o mică depunere de particule - 3;
- albăstrui - 4;
- culoare slab roz cu tentă albăstruie o, și sedimente - 5;
- incolor, cu sedimente - 6.
Distinge patru tipuri de reacții Lange:
- normal, în care schimbarea de culoare nu se produce deloc, sau trei - cinci tuburi de culoare ușor diferite de culorile din tubul de control (roșu cu o tentă mov slab);
- degenerativnыy, caracterizată printr-o schimbare a culorii în jumătatea stângă a numărului de tuburi (de la violet la albire) și aspectul sedimentului; observată în sifilisul ale creierului, rasseânnom scleroza, tumori ale creierului si a maduvei spinarii, înmuiere a creierului, și altele.;
- inflamator, care tind să se schimbe culoarea de pe partea dreaptă sau în rândul din mijloc de tuburi; meningitei observat la diferite etnologie;
- amestecat, în care schimbarea culorii are loc în stânga, și pe partea dreaptă a rândului de tuburi; Leziunile mixte observate în membrane și tesutul cerebral.
Reacție Takata-Ara completează sau confirmă Lange reacție. Bazat pe proteine de coagulare lichid cefalorahidian sub influența diclorură mercur și soluția își schimbă culoarea în prezența unei soluții amestec de fucsin.
Sunt Patru tipuri de reacții:
- negativ (normal) - Culoare violet a modificărilor amestecului, lichid limpede;
- degenerativnыy - Pierderea de precipitat albastru-violet, peste care este un lichid limpede;
- inflamator - Un amestec de culoare roz, fără sedimente, timp decolorat;
- amestecat - Lichid limpede peste un precipitat de culoare roz.
Reacție Takata-Ara este mai sensibil, decât reacția Lange.
Pentru diagnosticul de procese degenerative și inflamatorii în SNC folosit reacție mastic.
Triptofanovaя reacții și Levinson sunt utilizate pentru diagnosticul tuberculozei.
Reacție Friedman folosit pentru diagnosticarea precoce de meningita. Principiul este, că sub influența permanganat de potasiu au loc procese redox și schimbarea culorii de lichid cefalorahidian, și sub influența acidului tricloracetic precipitat proteic conținut în acesta. Pentru accidente, Tumorile, sifilis a creierului, MS culoare a lichidului nu se schimba.
Fluidul cefalorahidian este detectată prin 20 la 25 aminoacizi liberi. Pentru a studia compoziția de aminoacizi a cromatografiei lichid cefalorahidian folosind metode moderne, ïonoobmennoy flyuorometrïï.
Conținutul de aminoacizi liberi și azotul aminic în lichidul cefalorahidian medie 0.6- 1,4 mmol / l, de mai jos, decât în plasma - 1.9-2.8 mmol / l.
Un rol important in diagnosticarea bolilor sistemului nervos sunt studii de conținut în glucoză lichidul cefalorahidian, enzime, cloruri, bilirubinei, colesterol și azot rezidual.
Glucoza în lichidul cefalorahidian
În mod normal, în lichidul cefalorahidian conținut 2,5- 3,33 mmol / l glucoză. Pentru a determina valoarea acestuia în lichidul cefalorahidian folosind oricare dintre metodele, folosit pentru a determina nivelul de glucoză din sânge. Lichidul este cercetat imediat după captura, pentru că vine glicoliză repede. În inflamația acută și subacută a meningelor nivelurile de glucoza in scade lichidul cefalorahidian, uneori (care este foarte rar) dispare complet. Cel mai adesea, în glucoza lichidul cefalorahidian este absent în meningita meningococică și streptococ.
Nivel crescut de glucoză se observă în encefalita lichid cefalorahidian și epileptic. Atunci când tumori ale creierului glucoza poate creste fie, și plasați.
Acidul lactic în lichidul cefalorahidian
In lichidul cefalorahidian de oameni sanatosi metode enzimatice este determinată printr-un mediu 1,54 (0,89-2.8) mmol / L acid lactic.
Crește mai semnificativ conținutul de acid lactic în lichidul cefalorahidian sub procese hipoxice și distructive în țesutul cerebral, că nu este numai diagnostic, și valoarea de prognostic. Enzime, implicată în metabolismul SNC, găsite în lichidul cefalorahidian în număr mult mai mic, decât în sânge, și sunt determinate prin aceleași metode, și că, în sânge.
Din cauza enzimelor glicolitice aldolaza adesea definite și lactat dehidrogenaza și izoenzimele sale.
Cloruri în lichidul cefalorahidian
Conținutul de clorură în lichidul cefalorahidian adult normal 197-242 mmol / l, la copii - 195-204 mmol / l. Pentru a determina nivelul de cloruri în lichidul cefalorahidian poate fi utilizat prin orice tehnică, folosit pentru a studia clorurile de sânge, Cu toate acestea, metoda de aplicare preferată de determinare a volumului de fluid prin titrare cu azotat de argint.
Reducerea cloruri observate în meningita tuberculoasa, uneori - cu encefalita, povyshenie- în uremie.
Bilirubina în lichidul cefalorahidian
Bilirubina în lichidul cefalorahidian și lichidul din chisturile ale creierului este de origine hematogena si provoaca xanthosis. Pentru determinarea calitativă și cantitativă a bilirubinei folosește aceeași probă, și că, pentru determinarea bilirubinei în sânge. În mod normal, bilirubina în lichidul cefalorahidian nu sunt detectate.
Colesterolul în lichidul cefalorahidian
La persoanele sanatoase, colesterol în lichidul cefalorahidian sau este absent, sau conținutul său variază de la 0.003 la 0.005 până la urme mg / dl. Nivelul de colesterol crescut observate în meningita și tumorile cerebrale, în special maligne.
Pentru a determina colesterol în lichidul cefalorahidian poate fi utilizat Metoda Engelhardt-Smirnov sau Metoda de Ilka.
In mod normal, conținutul de azot rezidual în lichidul cefalorahidian medie 8,6-14,3 mmol / l, t. este. pe 50 % de mai jos, decât în sânge.
Nivelul de azot rezidual în LCR este investigată prin aceleași metode, și că conținutul de azot rezidual în sânge.
Glicoproteine și lipoproteine din lichidul cefalorahidian
Studiul de glicoproteine și lipoproteine loc prin electroforeză pe hârtie într-un agar gel de pre-îngroșată sau lichid cefalorahidian sau nativ de poliacrilamidă. Aceste studii sunt folosite pentru diagnosticarea bolilor inflamatorii și a tumorilor.
In lichidul cefalorahidian dezvăluit substanțe biologic active de natură chimică diferită:
- mediatorы (acetilcolina, noradrenalinei, dofamin, Serotonina, gamma-aminomaslyanaya Chislot);
- hormoni hipofizari, glanda pineala si alte glande endocrine;
- neuropeptide (endorfiny, enkephalins);
- nucleotide ciclice (adenozintsnklofosfat, Acid guanilic);
- prostaglandine;
- kininele.
Majoritatea acestor compuși biologic activi este determinată prin radioimunoanaliză, care este tot mai mult utilizate in diagnostic de laborator clinic.