Anemie, asociate cu deficitul de acid folic

Oricare ar fi motivul folic anemia deficit de acid se caracterizează prin apariția în megaloblasts maduva osoasa, distrugere intramedulare erythrokaryocytes, patsitopeniey, macrocitoza și hyperchromia Celulele rosii din sange si, uneori, - tulburări mintale.

Folievaya (pteroilglutaminovaya) acid (витамин B9) Se compune din trei componente:

  • inel pteridină;
  • Acid p-aminobenzoic (constituie împreună de acid pteroievuyu);
  • acid glutamic.

Greutatea moleculară a acidului folic - 441. Acidul folic este activ sub formă de derivați ai acidului tetrahidrofolic. Conținutul de acid folic în diferite forme, în corpul uman este de aproximativ 5-10 mg. Stocurile în încălcarea admiterea în organism poate fi epuizate peste 4 lunii.

Necesarul zilnic de acid folic este 100-200 micrograme, Sarcină, anemie hemolitica, crește de mai multe ori.

Cantitatea totală de acid folic in dieta cu întreaga putere de 500-600 micrograme pe zi. Acid folic - folati conținută în cantități considerabile în ficat, drojdie, spanac, carne. Mai Mult 50 % acid folic, în produsele alimentare, Acesta poate fi distrus atunci cand este gatita.

Acidul folic este absorbit la nivelul intestinului subtire superior. Capacitatea de intestine pentru a absorbi acidul folic este mult mai mare decât cerința de zi cu zi.

Acidul folic participă la sinteza pirimidinice și purinice baze, împreună cu methylcobalamin - sinteza uridinmonofosfata nofosfata timidinm. Coenzime acid folic Mai implicat într-o serie de reacții. În special, tetrahidrofolat participă la sinteza histidină acid glutamic.

Etiologia și patogeneza anemiei în timpul deficit de acid folic

Deficit de acid folic, precum și deficit de cobalamina, Aceasta conduce la dezvoltarea de anemie megaloblastică.

Sindrom de malabsorbție de acid folic observate la persoanele, rezecția intestinului subtire, în special jejun, precum în termen lung ia medicamente antiepileptice, cum ar fi difenilhidantoina (difenina) și fenobarbital (luminal). Aportul de acid folic este rupt atunci cand boala celiaca si sprue. Deficit de acid folic, precum și deficit de cobalamina, observată la Sindromul buclă orb. Descris cazuri rare de tulburări ereditare de transport acid folic a lungul peretelui intestinal și în lichidul cefalorahidian. Absorbția alte substanțe fără a suferi.

Deficit de acid folic la nou-nascuti observate în prematuritate, încălcare a absorbției intestinale, lapte de capră Fed, conținând o cantitate mică de acid folic.

Un sindrom de malabsorbție semnificativ de acid folic poate să apară la pacienții, alcoolici.

Consumul crescut de acid folic în timpul sarcinii Aceasta poate duce la un deficit de acid folic, Cu toate acestea, în țările dezvoltate de astăzi este rar. Deficit de acid folic la femeile gravide se găsește în redus de energie, prezența anemiei hemolitice, utilizați înainte de sarcină un număr mare de băuturi alcoolice.

Manifestările clinice ale deficitului de acid folic

Deficit de acid folic la copii și femeile tinere. În același timp, pacienții se plâng de slăbiciune generală, amețeală. Spre deosebire de deficitului de cobalamină dureri limbii se observă foarte rar. Parestezii, și alte semne de funicular myelosis lipsă. Sclera adesea ikterichnost.

În contrast cu deficitul de cobalamină deficit de acid folic este gistaminoupornaya rareori observată Akhil, gastratrophia, deși scăderea secreției gastrice este adesea.

Pentru deficit de acid folic, precum și pentru deficit de cobalamină, caracterizată prin apariția în macrocitoza sângele periferic, megalocitov și megaloblasts, prezența anemiei hipercrom, reducerea numărului de reticulocite, trombocite și leucopenie cu trecerea neutrofile la stânga și la dreapta. In maduva osoasa - megaloblasts.

Schimbările din sistemul nervos sunt diferite de manifestările de la B12-deficit de anemie.

S-au dovedit, că persoanele cu epilepsie, Deficiență de acid folic duce la atacuri frecvente, de gravitatea lor mai mare. Acest lucru este deosebit de important datorită faptului, că, ținând anticonvulsivante poate provoca sindrom de malabsorbție de acid folic. Conform literaturii, la persoanele cu deficit de acid folic schizofrenie duce la agravarea bolii, simptome mai severe si de tratament mai putin eficace.

Diagnosticul diferențial al deficitului de cobalamină și acid folic

Pentru diagnosticul diferential al deficitului de cobalamină și acid folic este utilizat Metoda radioimunoanaliză pentru determinarea acidului folic în ser și în special în eritrocite. Conținutul de cobalamină este determinată prin metoda microbiologică. Ca un organism de testare utilizat ca Streptococcus faecalis și Lactobacillis casei. In mod normal, conținutul de acid folic în intervalele în serul sanguin, Potrivit autorilor, folosind diferite metode de cercetare, de la 3 la 25 ng / ml, și eritrocitare - din 100 la 425 ng / ml.

În deficitul de acid folic scade pe măsură ce nivelul de ser, și în eritrocite. Conținutul de acid folic deficiență la kolabaminov în serul sanguin de multe ori se ridică, și eritrocite poate fi uneori reduse, deși declinul, obișnuit, un mic.

Pentru diagnosticul de deficitul de acid folic este de asemenea utilizat Metoda de încărcare histidină (15 g), apoi defini conținutul de acid în urină formiminglutaminovoy. În mod normal, cea mai mare parte a formelor de histidină acid glutamic. Cu diurezei 1-18 mg de acid formiminglutaminovoy. La deficit de acid folic pentru 8 oră după introducerea sa în organism este eliberat din urină 20 la 1500 Acid formiminglutaminovoy mg. Un număr semnificativ de acid formiminglutaminovoy excretată în urină după administrarea histidină de persoane, tratați cu metotrexat. La deficit de cobalamină, ciroză hepatică excreția urinară de acid creste formiminglutaminovoy, într-o măsură mai mică, decât cu un deficit de acid folic. Niveluri normale de urinare metilmalonic crește conținutul de acid formiminglutaminovoy histidină Acid de la primirea probelor de deficit de acid folic, în loc de cobalamină.

El ajută să se diferențieze aceste două state și de studiu de radionuclizi. La deficit de cobalamină, asociată cu încălcarea secreției de factor intrinsec, afectarea absorbției de cianocobalamina marcat, un deficit de acid folic, se absoarbe în mod corespunzător.

La deficit de acid folic, introducerea sa în organism duce la un conținut mai mare de reticulocite, întrucât injectarea de cianocobalamina (derivați) ineficace. Folic methylcobalamin deficitul de acid creste nivelul de reticulocite.

Definirea neutrofile index de segmentare

Conta numărul de neutrofile, cu 4 segment și mai (Total 200 celulă). Se determină procentul de celule, cu 5 segmente și mai față de cantitatea de celule, cu 4 segment. Indicele se determină prin formula:

IS =(KS (5 Și altele))/KS(4);

în cazul în care IC - indicele de segmentare;

KS (5 Și altele) - Numărul de neutrofile segmentate (pe 200 celulă), în care numărul de segmente este egal cu 5 sau mai mult;

KS (4) - Numărul de neutrofile segmentate, în care numărul de segmente este egal cu 4.

În mod normal, acest indice variază 2,5 la 25 %. Unde, atunci când aceasta depășește 30 % (oscilații 120%), Puteți vorbi despre neutrofile hypersegmentation. Acesta a observat deficit de acid folic, metilkoʙalamina, și uremie.

Determinarea acidului metilmalonic în urină Giordio și Plaud

Reactivi.

1. Rășina schimbătoare de ioni Dowex-Zx4 (sub formă de clorură, 200-400 Mesh). Rășina a fost spălată cu cinci volume de apă distilată 3 ori, a fost suspendat în două volume de apă distilată și depozitată într-un vas închis la 4 ° C.

2. O soluție de para-nitroanilină 0,075 % preparată prin dizolvarea 37,5 reactiv mg 500 ml 0,2 Soluție M de acid clorhidric. Magazin într-o oală de culoare închisă, Acesta a rămas stabilă timp de câteva luni la temperatura camerei.

3.Tampon acetat (pH 4,3) realizate din 1 Acetat de sodiu M și 1 Soluție M de acid acetic.

4.Diazoreaktiv: 4 ml 0,5 % Soluție de nitrat de sodiu s-a amestecat cu 15 ml para-nitroanilină. Amestecul a fost plasat într-un frigider la 4 ° C și s-a adăugat soluția răcită 4 ml 0,2 Acetat de sodiu M. Stabil reactiv la temperaturi 4 ° C pentru o zi.

5.Normal 0,05 Soluție de acid metilmalonic M de: 295 Acidul metilmalonic mg se dizolvă în 50 ml de apă.

Metodă

Urina a fost colectată într-un recipient de sticlă și înghețate până la finalizarea studiului. Pentru a studia porțiunea de încărcare a urinei (20- 25 ml), decongelate, tsentrifugiruyut, și supernatantul a fost colectat folosind o soluție slabă de hidroxid de sodiu sau acid clorhidric pentru ajustarea pH-ului 6,5.

Înălțime coloană cromatografică 20 cm și un diametru 1 cm a fost umplut cu rășină Dowex-Zx4. Stratul de rășină trebuie să fie în termen de 3 cm. Este trecut prin rășină 5 ml de urină, spălat cu apă distilată (2 × 50 ml la o rată de nu mai mult de 15 ml 1 de la). Acidul metilmalonic pot fi eluat din rășină 20 ml 0,1 Soluție M de acid clorhidric. Mai departe 2 ml de eluat au fost amestecate cu 3 ml 1 M tampon acetat pH 4,3 într-o eprubetă cu un dop de sticlă (15×2cm). Pentru se adaugă amestecul 3 diazoreaktiva rece ml, care pH-ul este ridicat la 4,0. Amestecul a fost încălzit într-o baie de apă la o temperatură 94 ° C. 3 min și 2 ml 3 Soluție de hidroxid de sodiu M. Tubul a fost apoi îndepărtat din baia de apă, dop și conținutul a fost agitat. Amestecul a fost răcit la temperatura camerei, timp de 10 min și la fotometriruyut 620 nm într-o cuvă cu un pathlength 1 cm.

Ca martor, un amestec de, constând din 2 ml 0,1 Soluție M de acid clorhidric, 3 ml și diazoreaktiva 3 tampon acetat ml. Metilmalonic soluție standard de acid constă din aceleași componente și 0,02 ml 0,05 Soluție de acid metilmalonic M de. Absorbanța acestor soluții au fost măsurate în aceleași condiții.

Conținutul de acid metilmalonic (mg) pe unitatea de volum de urină (1 L) definită prin formula:

 

(ISEșantion-IScontrol)/(ISstandard-IScontrol)*A*((1000*T)/M)

 

în cazul în care E - absorbanta a diferitelor probe;

A - cantitatea de acid metilmalonic într-un tub test standard, ml;

1000 - Cantitatea de urină, luate pentru cercetare, ml;

T - cantitatea de acid clorhidric, luate pentru eluare, ml;

M - numărul de eluat, luate pentru cercetare, ml.

În condițiile de mai sus, formula poate fi simplificată după cum urmează::

 

(ISEșantion-IScontrol)/(ISstandard-IScontrol)*236

 

Unde, în cazul în care cantitatea de acid metilmalonic în urină este mai mare 300 mg / l, Ar trebui re-amestecat cu eluat tampon de acetat și diazoreaktivom, ci 2 ml de eluat este indicat să se ia 4- 10 ori mai mic și aduce volumul la 2 ml 0,1 Soluție M de acid clorhidric. Calculul trebuie să ia în considerare diluarea.

În mod normal, pe zi, cu diurezei 0,6-4,7 mg de acid metilmalonic. La deficit de cobalamină excreție zilnic de acid metilmalonic ajunge 294 mg. În mod normal, recepție 10 g valină nu crește clearance-ul acidului metilmalonic, deficitul de cobalamina crește excreția acidului metilmalonic de.

Determinarea acidului metilmalonic în urină prin Green

Reactivi.

  1. Eter.
  2. Etanol.
  3. O soluție de acid clorhidric 0,1 M.
  4. Sulfat de amoniu.
  5. Strong deatsidit rășină de bază FF (200 plasă, sub formă de clorură).
  6. O soluție de azotat de sodiu 0,5 % (greutate / volum).
  7. O soluție de para-nitroanilină (750 mg dizolvat în 1 L 0,2 Soluție M de acid clorhidric).
  8. Acetat de sodiu 0,2 M.
  9. Tampon acetat 1 M, pH 4,3: amestecat 1 M soluție de acetat de sodiu și 1 Soluție M de acid acetic în raportul 16,35:33,9.
  10. O soluție apoasă de hidroxid de sodiu 3 M.

A. Acidul metilmalonic Soluție standard: 100 mg dizolvat în 100 ml de apă, stocate în frigider.

B. Lucrul de acid metilmalonic standard de: Soluție standard diluată în 20 timp 0,1 Soluție M de acid clorhidric (1 ml standardului și 19 ml acid clorhidric). Această cantitate de echivalent de acid metilmalonic 100 acid metilmalonic mg 1 condițiile de testare L urina.

Pentru prepararea diazoreaktiva mixte 4 ml 0,5 % Soluție de nitrat de sodiu și 15 ml para-nitroanilină. Amestecul a fost plasat într-o baie de gheață și se adaugă 4 ml 0,2 Acetat de sodiu M.

Metodă.

Urina a fost colectată timp de o zi, măsurat volumul său și 10 ml podkislyayut 1 Soluție M acid sulfuric la pH 2,0 sau puțin mai jos. Sulfatul de amoniu se adaugă la saturație. Amestecul a fost plasat într-o pâlnie de separare și extras de trei ori cu eter și etanol într-un raport de 3:1. Pentru a preveni formarea de amestec emulsii extracție utilizată în exces.

Extractul a fost trecută printr-o coloană mică cromatografie (1 – 1,5 cm diametru), terminat 5 rășină ml. Coloana a fost spălată 50 ml apă distilată. Acidul metilmalonic eluat 0,1 Soluție M de acid clorhidric. După eluarea selectat 2 ml eluat, W este ml de tampon acetat adăugat, și 3 ml diazoreaktiva.

După amestecare, tubul a fost plasat într-o baie de apă la o temperatură 95 ° C 3 m. Apoi a adăugat 2 ml 3 Hidroxid de sodiu M și o dată dop tub închis, pentru a minimiza contact cu aerul. După răcire, a măsurat absorbanța la lungimea de undă 620 lor. Pentru testul-martor loc de a folosi eluat 2 ml 0,1 Soluție M de acid clorhidric, și pentru soluția standard - 2 ml de standard de lucru.