Anemia gemoliticheskaya Nasledstvennaya, devido à actividade da deficiência de piruvato quinase de células vermelhas do sangue

Anemia gemoliticheskaya Nasledstvennaya, Relacionado deficiência de eritrócitos piruvatoquinase - uma forma relativamente rara de anemia hemolítica, que é herdado de forma autossômica recessiva, Dá manifestações clínicas em homozigotos, prossegue com sinais de hemólise intracelular, macrocytosis de eritrócitos, baixo teor de potássio. Há mais do que 200 casos de portadores homozigóticos actividade de défice piruvatkinaznoy.

Patogênese

Piruvato quinase é uma das enzimas, concluindo glicólise. Este glicólise link e ATP formado nikotinamiddinukleotid. A maioria dos pacientes com deficiência de actividade da cinase do piruvato é reduzida no teor de células vermelhas do sangue de estes dois metabolitos, Em alguns casos, o conteúdo de ATP é normal, mas perturbado a estabilidade da ATP durante a incubação. Os níveis normais de ATP encontrados na reticulocitose significativa. Isto é devido à presença de reticulócitos e a possibilidade de ATP mitocondrial não só através da glicólise, mas também devido à fosforilação oxidativa.

A consequência de deficiência de piruvato quinase É também a acumulação dos produtos de glicólise, formada em fases anteriores - fosfofenolpiruvata, 3-fosfoglicerato, e, especialmente, 2,3-difosfoglicerato. Piruvatanlaktata conteúdo diminui nas células vermelhas do sangue.

A falta de ATP em deficiência de piruvato quinase eritrócitos Isso leva a disrupção da função de bomba de ATP-aznogo glóbulos vermelhos e com a perda de iões de potássio, em que a concentração de iões de sódio nos eritrócitos de não aumentar. Isto provoca uma diminuição do conteúdo de iões monovalentes nos eritrócitos, desidratação de células e a sua retracção. Este fenômeno é chamado dessikotsitoz. A diminuição de células vermelhas do sangue de água dificulta o processo de oxigenação e liberam oxigênio pela hemoglobina. A este respeito, determinado papel desempenhado por uma compensatório acumulação significativa dos eritrócitos de 2,3-ácido difosfoglitserinovoy.

A afinidade da hemoglobina pelo oxigênio é reduzido em sua interação com 2,3-difosfoglicerato. Conseqüentemente, a concentrações mais elevadas de 2,3-difosfoglicerato retorna oxigénio para os tecidos é facilitada.

As manifestações clínicas de deficiência de actividade da cinase piruvato

As manifestações clínicas de deficiência de piruvato quinase actividade dependerá do grau de hemólise. Em alguns casos, o aumento da hemólise é manifestada no momento do nascimento e é acompanhada pela ocorrência de grave crise hemolítica, fazendo com que a necessidade de transfusões de sangue para manter a hemoglobina nos níveis sub-normais. Em outros casos, a doença pode ocorrer quase assintomática com os primeiros sinais de aumento de hemólise (esclera subikterichnost e pele) idade 17-30.

Geralmente; em comparação com microspherocytosis, deficiência de piruvato quinase tem uma forma mais grave.

Quase todos os pacientes com baço palpável. O ligeiro aumento em seus divulgadas algumas anomalias portadores heterozigotos, embora tenham anemia, normalmente, ausência de. Um número de pacientes possível esplenomegalia. Um aumento significativo no fígado raramente encontrados. Em pacientes com úlceras de perna isolados identificados.

Indicadores laboratoriais de actividade da deficiência de piruvato quinase

A maioria dos pacientes com deficiência da actividade de piruvato-quinase observada anemia moderada (4,34- 6,21 mmol / L, ou 70-100 g / l), No entanto, durante a crise de hemoglobina pode ser reduzido para 3,1 3,72 mmol / L (50-60 G / l). Eritrotsitov- conteúdo 2,5-3,0 T 1 eu. Crise hemolítica pode ser causado por infecção. Há casos de ganho de hemólise durante a menstruação.

As células vermelhas do sangue de pacientes com deficiência piruvatoquinase caracterizado por macrocitose com normohromiey, ligeira anisocitose e poiquilocitose. Houve um policromatofilia feira. Às vezes encontrado mishenevidnye glóbulos vermelhos e glóbulos vermelhos com bordas recortadas ou sob a forma de amoreira, frequentemente identificado punktatsiya eritrócitos basophilic, Corpúsculos Jolly. Alguns doentes no sangue periférico revelou um número significativo de erythrokaryocytes, durante a crise, pode ser aumentada até 60-70 %. ESR, contagem de células brancas do sangue, leucograma, as contagens de plaquetas dentro da gama normal. Tal como com outras formas de anemia hemolítica, na medula óssea revelou uma irritação acentuada germe vermelho hematopoiese.

O nível de bilirrubina, normalmente, aumentaram devido a indireta.

A hemoglobina plasmática livre normal, mas pode ser reduzido os níveis de haptoglobina. Hemossiderina na urina está ausente. Conteúdo de hemoglobina fetal e hemoglobina A₂ dentro da gama normal.

Resistência osmótica de eritrócitos deficiência de piruvato quinase, na maioria dos casos normais, às vezes reduzida após dias de incubação. Autogemoliz, normalmente, atualizado em diferentes graus. Há casos de deficiência de piruvatoquinase com autogemolizom normais. No primeiro relataram casos de deficiência de piruvato quinase foi registrado tipo II autogemoliza, corrige a adição de ATP, e não corrigir ou ligeiramente corrigindo a adição de glicose. Posteriormente, muitos casos têm sido descritos com o tipo de deficiência da enzima I autogemoliza ou nenhuma. Assim, não se recomenda-se aplicar o método autogemoliza para o diagnóstico diferencial de anemias hemolíticas. O tempo de vida dos glóbulos vermelhos com a deficiência de actividade da piruvato-quinase é sempre encurtado.

Tipo herança atividade piruvatoquinase autossômica recessiva. Heterozigotos praticamente saudáveis, De acordo com vários investigadores, a gravidade do défice variaram desde 50 para 70 % normas.

Actividade de diagnóstico de deficiência de piruvato quinase

O diagnóstico de deficiência de piruvato quinase de células vermelhas do sangue podem ser esperado para entregar no caso de anemia hemolítica, que flui ao longo dos anos, com o aumento no baço, falta de sangue periférico esfregaços sinais microspherocytosis, elliptotsitoza e stomatotsitoza.

Testes qualitativos para a determinação da actividade de piruvato-quinase. Para este fim, o método é largamente utilizado mancha fluorescente, baseado em, que, no decurso da reacção, kataliziruemoy piruvatkinazoy, nikotinamiddinukleotid oxidada e a fluorescência desaparece.

A actividade de piruvato-quinase em indivíduos saudáveis ​​variou entre 4,0 para 7,7 mmol (min / 1.010 eritrócitos) ou 4,0 para 7,7 Poder. A maioria da actividade da enzima doença homozigótica menos 1 Poder. No entanto, pode haver casos em ligeiro declínio na atividade da enzima. O diagnóstico de uma rara forma de anemia hemolítica é muito difícil, e um diagnóstico pode ser feito somente no estudo da cinética da enzima.

O diagnóstico diferencial da anemia hemolítica, associada com deficiência de piruvato quinase

O diagnóstico diferencial da anemia hemolítica, associada com deficiência de piruvato quinase, necessário proceder a outras formas de anemia hemolítica hereditária.

Uma vez que a maioria dos pacientes deficientes em actividade de piruvato-quinase diferentemente dos indivíduos, sofrendo microspherocytosis, elliptotsitozom, stomatocitozom, anemia hemolítica, carruagem condicionado hemoglobina instável, e doença talassemia é herdada como autossômica recessiva, que esta patologia é encontrada apenas na mesma geração e quase nunca visto entre os pais.

Quando anemia hereditária, carruagem condicionado hemoglobina instável, especialmente na doença grave, por vezes probando é o primeiro transportador da mutação, e, em seguida, a doença é transmitida para a próxima geração. Assim, o diagnóstico diferencial deve ser realizado com hemoglobinopatias, carruagem condicionado hemoglobina instável, bem como anemia hemolítica herdada recessiva, causado por uma actividade deficiente de outras enzimas.

Ela desempenha um papel de apoio estabilidade hemoglobina, yego eletroforese. Para excluir outros fermentopathia investigada a actividade de outras enzimas de eritrócitos, e para excluir a anemia hemolítica auto-imune realizada Coombs, agregatgemagglyutinatsionnaya.

Fluorescente método para determinar a actividade por piruvatkiiazy Beutler

Reagentes.

1. Ácido Fosfoenolpirovinogradnaya (sal tritsiklogeksilammoniynaya) 0,15 Solução M de, neutralizou-se para pH 7,0-8,0 0,2 Solução M de NaOH (0,03 ml).
2. ADF 0,03 Solução M de, neutralizada (0,1 ml).
3. NAD N- 0,015 Solução M de, neutralizada (0,1 ml).
4. O sulfato de magnésio 0,08 Solução M de (0,1 ml).
5. Solução tampão de fosfato de potássio 0,25 M, pH 11 7,4 (0,05 ml).
6. Água Distillirovannaya (0,62 ml). A mistura pode ser armazenada a - 20 ° C não é mais do que uma semana.

Método.

Para a pesquisa uso de sangue, tomadas com heparina ou citrato de sódio. Ele é centrifugado, aspirado e preparar plasma 20 % suspensão de células vermelhas do sangue através da adição de quatro volumes de solução de cloreto de sódio isotónica.

Suspensão de eritrócitos em uma quantidade 0,02 ml é misturado com 0,2 ml de reagente e incubadas durante 30 minutos a 37 ° C. Uma gota foi colocada sobre o papel de filtro, e navegar na fluoroscope. Fluorescência basal foi detectado imediatamente após a adição de eritrócitos à mistura antes da incubação. Normalmente, após 30 min de incubação desaparece, ea atividade da piruvato quinase restos de deficiência. Isto é, NADH que fluoresce sob a influência da radiação UV na região, perto de visível, Considerando que NAD não fluorescência. Uma vez que a solução acima é instável e facilmente degradada, requer um acompanhamento. Você deve cuidadosamente separar a camada de células brancas do sangue, uma vez que a actividade da actividade enzimática de eritrócitos deficiência de piruvato quinase em leucócitos pode ser normal.