Os métodos para a detecção de Leishmania na raspagem dos tecidos afectados por isolamento de uma cultura pura

Quando a sementeira raspando o tecido afectado do paciente para um meio nutritivo específico Leishmania multiplicar e podem ser detectados por microscopia.

Reagente

Среда W.W.W. para o cultivo de Leishmania (14 g de agar, 6 g de cloreto de sódio, sobre 150 ml de sangue de coelho desfibrinado, tirada diretamente do coração antes de preparar médio, 900 ml de água destilada). Em água destilada foi adicionado cloreto de sódio e agar. O balão contendo o meio foi aquecida até fusão completa do agar, e 20-30 min esterilizado num esterilizador de vapor a 147,1 kPa (15 às).

Arrefecido a 56 ° C agar adicionado estéril sangue de coelho desfibrinado, agitou-se por rotação do frasco e preenchido em pipeta estéril 4 tubos ml. Garrafa de agar de sangue durante a distribuição é um banho de água a uma temperatura 58 ° C. Os tubos com as pontas médias.

Depois da solidificação do agar, eles são colocados num incubador de um dia para 37 ° C para o controle de esterilidade e que recebe o condensado líquido. Se foi produzida não é suficiente, antes da semeadura em frascos estéreis, você pode adicionar cerca de 1 Um mL das soluções a seguir: 0,85 % cloreto de sódio, 1 % solução peptona, Solução de Hanks, hidrolisado de lactalbumina ou outro meio nutriente em concentrações isotônicas.

Métodos de detecção de Leishmania em raspas de tecidos afetados pelo isolamento da cultura pura

Quando você seleciona uma cultura siga atentamente as regras de esterilidade. A área de teste da pele é limpa com uma mecha de algodão, umedecido 70 % álcool.

Após a evaporação do álcool a extremidade aguçada de uma incisão oftálmica bisturi estéril comprimento tubérculo de 2-3 mm. A partir da parte inferior do corte, com uma pipeta Pasteur estéril não tecido raspagem. A resultante queda de fluido serossanguíneo foi transferida para um tubo de ensaio com o ambiente. A manipulação é efectuada várias vezes, material de sementeira de cada vez que um novo tubo. Os tampões de ouvido embutidos em parafina ou colocá-los tampas de borracha e colocados numa incubadora a 22-24 ° C.

Avaliação dos resultados

As culturas são examinadas com um microscópio numa base diária para identificar o agente causador. Explorar drogas nativas, preparado pelo método de gotas esmagadas, a lente 40×40. Os resultados são considerados semeadura negativo, Se em 40 dias patógeno não foi encontrado. As culturas são alongadas Leishmania (10-12 Microns com fiação).

Aplicação do método de cultura é mais útil quando tuberculoid forma de leishmaniose, diagnósticos que outros métodos podem ser menos eficazes.