Anemia, relacionados com a violação da estrutura de cadeias de globina

Anemia, relacionados com a violação da estrutura de cadeias de globina, ou hemoglobinopatias é um grupo de doenças, devido à substituição de um ou mais aminoácidos na cadeia de gene de globina, a falta de enredo ou cadeia seu alongamento.

O quadro clínico de hemoglobinopatias Ele depende da localização de substituição. Distúrbios de hemoglobina pode manifestar anemia, Não faça quaisquer alterações no sangue ou determinar aumento da hemoglobina e glóbulos vermelhos.

A primeira descrição de hemoglobina reestruturado refere-se a 1949 cidade, quando foi descoberto, que a hemoglobina falciforme, eletroforese em movimento em meio alcalino com uma velocidade, às, de hemoglobina de adulto.

EM 1956 g utilizando o método de mapas de péptidos instalado, hemoglobina, encontrada na anemia falciforme e chamado hemoglobina S, diferente da hemoglobina A pessoa saudável mudar apenas um amino-ácido β-cadeia. Okey, na sexta posição da cadeia β do N-end posicionado ácido glutâmico, e quando hemoglobinopatias, S são a aminoácido valina. Difere-se da acusação de ácido glutâmico, Então hemoglobina está se movendo no campo elétrico com velocidade menor.

A maioria das hemoglobinopatias não se entregue sem manifestações clínicas geterozigotnom, Nem em forma de homozigotia. Observa-se, nesses casos, Ao substituir amino ácidos não violam a estrutura terciária ou četvertičnuû de hemoglobina e funções básicas de hemoglobina são salvos. Parte das hemoglobinopatias dá manifestações clínicas em homozigotia ou em combinação com talassemia. Às vezes os sinais clínicos da doença são detectados de heterozigotos portadores do gene anormal, se você tiver um grupo de hemoglobinas anormais instáveis. Quando esses gemoglobinopatiâh de substituição para os aminoácidos mais funcionalmente importantes. Estes aminoácidos estão envolvidos na fixação do hemo para globinu, gene de globina de circuitos de acoplamento entre si.

Anemia Serpovidnokletochnaya, hemoglobinopatias, S, (C) amplamente disseminada em vários países africanos. Entre as formas mais comuns de Hemoglobinopatias incluem hemoglobinopatias (E), D_Penjab.Substituição da β-cadeia de aminoácidos ocorre muito mais frequentemente, do que α-correntes.

Para a identificação de hemoglobina anormal deve primeiro estabelecer sua presença em um paciente. Hemoglobina S e estável gemoglobiny identificado durante a electroforese no filme acetatcellûloznoj, papel. No entanto, o estudo eletroforético oferece uma oportunidade para identificar apenas 1/3 parte de hemoglobinas anormais. Quando anemia, associada a violação da estrutura dos circuitos de gene de globina, diagnóstico de hemoglobinopatia somente quando detecta sinais de instabilidade da hemoglobina, muitas vezes, na ausência de alterações na mobilidade eletroforética.

Depois de identificar os sinais de hemoglobina anormal torna-se necessário para o seu escritório de uma forma ou de outra (eletroforese, desnaturação térmica, cromatografia) da hemoglobina normal (A), esclarecendo a cadeia, Qual substituição ocorre (métodos de cadeias de gidrolizacii, Enduro ou separação cromatográfica de seus).

A próxima etapa é a hidrólise de tripsinovyj de circuitos anormais, obtenção do peptide mapeia para esclarecer o peptídeo, em que há uma anomalia, estudo da composição de aminoácidos do peptídeo patológica, Se necessário, estudar a ordem dos aminoácidos em um peptídeo.

Na designação de hemoglobina além de seu nome fornece a corrente, Qual substituição ocorre, o número de aminoácidos da cadeia (começando com n fim), título de aminoácidos, é neste site, bem como o nome de aminoácidos, que era suposto para ser nesta seção. Por Exemplo, Eα HB₂b₂^{26Eixo → Glu} meios, O que estamos a falar de Hemoglobinopatias (E), onde a substituição ocorre 26-th amino ácido β-correntes-glutâmico ácido para valina.

Anemia, devido ao acúmulo de hemoglobina, modificando a estrutura em hipóxia

A anormalidade mais frequente da estrutura da hemoglobina é gemoglobinopatiâ Sα₂b₂^{6Eixo → Glu}. No caso de gomozigotnogo conversa sobre anemia falciforme, geterozigotnogo é sobre anormalidades falciforme.

Drepanocytemia distribuído em países africanos (Angola, Moçambique, Congo, Libéria, Argélia, Tunísia, etc.). Esta doença é frequentemente encontrada na Índia, sobre a ilha de Ceilão, na Turquia, Irã, Iraque, em Cuba.

O fenômeno da serpovidnosti é uma consequência da reduzida solubilidade de hemoglobina, dar oxigênio, em comparação com hemoglobina A. Hemoglobina A, sem oxigênio, solúvel em meio, do que a hemoglobina A, saciado com oxigênio. Solubilidade da hemoglobina S quando oxigênio diminui 100 Tempo. Isto leva à formação do gel. Por microscopia detectou tamanho de cristais 1,5 m, lembrando-se sob os forma em forma de foice glóbulos vermelhos. Cristais, crescer na mesma direção, chamado taktoidami. Eles desaparecem quando você anexar ao oxigênio da hemoglobina. Pode-se supor, que a substituição do ácido glutâmico na sexta posição na valina leva a aumento uma moléculas de hemoglobina, por outro lado em casos, Quando uma molécula de hemoglobina não é anexado oxigênio. Isto e garante a baixa solubilidade da molécula. Presença nas hemácias de hemoglobinas (C), D_Penjab, Ó_Árabes aumenta o fenômeno serpovidnosti, Considerando que a presença de hemoglobina (p) em um grande número reduz o grau de eritrócitos serpovidnosti.

Forma homozigótica de hemoglobinopatias, S (drepanocytemia)

Clinicamente caracterizada por anemia moderada normohromnoj, trombose, os pontos de vista peculiares dos pacientes. As primeiras manifestações da doença ocorrem apenas alguns meses após o nascimento de uma criança, Desde hemoglobina fetal, o diretor da nascimento, Não contém β-correntes anormais e não quebrado. Além Disso, alto nível de hemoglobina fetal em crianças pequenas depois de aparecer patológica cadeia reduz o fenômeno de serpovidnosti devido a maior afinidade para o oxigênio.

O sintoma mais comum da anemia falciforme na primeira infância é a derrota dos ossos e articulações.

Em relação a trombose vascular pulmonar em crianças frequentemente observada luz do coração. Este processo pode ser acompanhado por aumento de temperatura para altos dígitos, o aumento do número de células. Podem desenvolver infarto renal.

Às vezes durante os períodos de maior processo nas articulações ou nos pulmões das crianças desenvolver crises hemolíticas graves com sintomas de hemólise intravascular com preto urinarily, a queda acentuada do nível de hemoglobina, febre alta. Mais tarde na vida a esses fenômenos muitas vezes junta-se a dor aguda no abdómen, complicações relacionadas à trombotičeskimi da doença.

Hemorragia vítrea e descolamento de retina são frequentemente a causa de cegueira.

Danos ao sistema nervoso também podem ser devido a trombose vascular, alimentando as várias partes do cérebro.

Na primeira infância o baço inchado, Daí em diante ela diminui, e depois 5 observou-se raramente anos de esplenomegalia. Está associado a um sintoma característico de anemia falciforme — autosplenèktomiej, causada pela fibrose do baço como resultado de frequentes ataques de coração. O fígado aumentado mais frequentemente.

Em adultos, sofrendo de anemia falciforme, Às vezes há priapismo, associados, provavelmente, com a estagnação da anemia falciforme de eritrócitos nos corpos cavernosos, oque, por sua vez, aumenta a formação de hipóxia e falciforme de eritrócitos.

No estudo de sangue fora de foco é encontrado expresso anemia normochromal: hemoglobina 3.72-4,96 mmol/l (60- 80 g / l). Em uma mancha colorida pode às vezes ser identificado em forma de foice glóbulos vermelhos, No entanto, mais característica da presença de hemácias punktacii Basophilic, mišenevidnosti. Cambagem pode ser detectada usando amostras com metabisul′fatom de sódio ou por meio de um cinto de segurança na base do polegar.

O teor de reticulócitos, o número de èritrokariocitov de medula óssea e bilirrubina indireta nível aumentado, ESR é o mais frequentemente dentro dos limites normais, como as células do sangue vermelho em forma de foice resolver mais lentamente, que o normal.

Talvez a presença de crises de sequestro, onde uma grande parte dos eritrócitos desaparece em órgãos internos. Isso pode levar ao desenvolvimento de colapso, para reprodução de que exigem uma rápida transfusão de sangue.

Descrito crises de aplastičeskie, em que expressa a anemia, leucopenia, desaparecimento de reticulócitos. Eles ocorrem frequentemente após infecções virais graves.

A maioria dos pacientes com doença falciforme morre na infância. Muito elevada taxa de mortalidade entre as mulheres grávidas, sofrendo de anemia falciforme. De acordo com alguns relatórios, mortalidade materna em aplazii falciforme é 6 %.

Geterozigotnaâ forma de hemoglobinopatias, S (falciforme, a anomalia)

Nesta forma de hemoglobinopatia pacientes às vezes são inconscientes de sua doença, Eles têm hemoglobina normal, condição satisfatória. O único sintoma da doença em alguns pacientes é hematúria, associados com pequenos infartos dos vasos renais. O conteúdo de uma hemoglobina anormal em eritrócitos de pacientes com hemoglobinopatia heterozigotos forma pequena, as manifestações clínicas da doença são observadas somente durante a hipóxia, no caso de pneumonia grave, durante a anestesia, Ao voar em avião razgermetizirovannom.

Manifestações tromboembólicas pode ocorrer em qualquer corpo, a derrota que o ocorre com anemia falciforme. O fenômeno da serpovidnosti é detectado em pacientes quando usando amostras de metabisul′fatnoj. Quando a eletroforese de hemoglobina detectado duas grandes facções — uma hemoglobina e hemoglobina S.

A combinação de forma heterozigota hemoglobinopatia S (doença falciforme) com β-talassemia.

Ocorre frequentemente, Flui muito mais suave, β-talassemia homozigótica e homozigoto gemoglobinopatiâ S.

É caracterizada por um aumento significativo no baço, pronuncia-se gipohromiej hemácias, um elevado grau de mišenevidnosti. Complicações tromboembólicas são muito menos, do que na anemia falciforme. Pode haver ataques de dor nas articulações, estômago. Atrasados no desenvolvimento físico. Caracterizado por um aumento significativo no nível de hemoglobina fetal. Se não houver nenhum eletroforese de hemoglobina A, e a hemoglobina S pode ser quase a única hemoglobina. Quando β-talassemia além de Hb S, UMA₂ e a hemoglobina fetal é detectada por um.

Fenômeno de serpovidnosti alta hemoglobina F é expresso fora de foco.

Anemia, devido ao acúmulo de hemoglobinas anormais estáveis

As formas mais comuns desta anemia são hemoglobinopatias (C), D_Penjab e (E).

Todos estes tipos de Hemoglobinopatias na condição de geterozigotnom e com a sua combinação com os outros ou com talassemia não dar manifestações clínicas. Quando homozigotos hemoglobinopatias com fora de foco é encontrado expresso anemia hemolítica, com aumento do baço e fenômenos diarreicas. Na biópsia identifica hemácias mišenevidnye. Com as hemoglobinopatias (D)_Penjab aparece na forma de homozigotia extremamente rara, e com as hemoglobinopatias E na forma de homozigotia detectado fora de foco, expressado por anemia hemolítica, um ligeiro aumento no baço. Uma combinação de todos os três tipos de Hemoglobinopatias com talassemia faz com que o quadro clínico significativamente mais grave e pronunciado aumento do baço.

Todos os três tipos de hemoglobina são caracterizados pela substituição de cadeia β. Em hemoglobina C ligação 6-e o ácido glutâmico é substituído pela lisina, na hemoglobina E link 26-e o ácido glutâmico é em lisina, em hemoglobina (D)_Penjab 121-(e) ligação o ácido glutâmico-glutamina.

Mobilidade de hemoglobina D_Penjab corresponde a mobilidade de hemoglobina S, Mas ao contrário de Hemoglobinopatias S hemoglobinopatias (D)_Penjab são testes normais na solubilidade e Camber. Mobilidade de hemoglobina E mesmo, como a mobilidade e a hemoglobina A₂, Mas a quantidade de hemoglobina A₂ Nunca tal um, tal como acontece com as hemoglobinopatias (E).

A doença ocorre na África Ocidental, Turquia, Irã, Índia (Punjab).

Gemoglobinopatiâ (E) encontrado na Índia, Camboja, Birmânia, Indonésia.

Anemia, devido ao acúmulo de instável de hemoglobinas anormais

Sob gemoglobinami instável entender estes anormais gemoglobiny, que, devido à volatilidade das moléculas precipitar em eritrócitos, que leva ao desenvolvimento de anemia hemolítica em heterozigotos portadores do gene anormal.

Etiologia e patogénese

EM 1952 g. Cathie descritas a criança com a anemia hemolítica congênita, que após esplenectomia em todos os eritrócitos encontrado Taurus Gejnca. Só depois 18 anos, verificou-se, que a causa da facção hemoglobina anormal foi um Taurus. Inicialmente, este grupo de doenças chamado anemia hemolítica congênita com células Gejnca.

A primeira estrutura de hemoglobina instável foi instalada Hb_Zurique, descoberto em 1962 g. dois pacientes, sobreviventes da crise hemolítica aguda após tomar sulfanamides.

Pesquisa que foi encontrada, Essa parte de hemoglobina em pacientes com células Gejnca precipita facilmente quando aquecido. EM 1969 g. Foi sugerido que um novo nome para este grupo de doenças é anemia hemolítica, devido ao acúmulo de hemoglobinas volátil.

Este tipo de anemia é herdado por ateroma. A instabilidade da molécula de hemoglobina é encontrada nos casos, Quando a substituição de aminoácidos relacionados com a ligação com a conducao de gene de globina, conexão α- e circuitos de gene de β-globina entre eles, assim como quando há substituição de aminoácidos, caindo em uma espiral de hemoglobina, prolinom de aminoácidos, que é devido a peculiar estrutura não pode ser parte de uma espiral.

A instabilidade das moléculas de hemoglobina, detectada em casos, Quando o gene de globina de moléculas de trama, ao qual contíguo com uma joia, na gemovom so-called bolso, aminoácidos apolares (glicina, valina, alanina, etc.) substituído por polar (glutamina, aspártico, etc.). Neste caso, o gemovyj bolso penetra uma molécula de água, viola a estabilidade das moléculas de hemoglobina.

Instabilidade da hemoglobina Também pode ser devido a deleciej um ou mais aminoácidos ou subunidades de alongamento. Isto leva a deformação das moléculas de hemoglobina e perturbar a sua estabilidade. Como resultado, algumas formas de Hemoglobinopatias em eritrócitos aparecem vários bezerro-inclusão, devido à precipitação na lama da hemoglobina instável. Em outros casos, encontram-se nas hemácias de esporádico bezerro Gejnca, que constituam ou hemoglobina, desprovido de hemo, ou precipitar o gene de globina circuitos isolados.

Manifestações clínicas

Sintomas clínicos de anemia são variados e dependem da localização da substituição do aminoácido.

Alguns pacientes têm hemoglobina normal, entre outros é levada a 2,48-3.72 mmol/l (40-60 G / l). No caso de um curso pesado da doença, ou em uma média severidade da anemia hemolítica manifestações clínicas observam-se já na infância. Grau de želtušnosti, assim como o grau de anemia, depende da natureza da substituição de aminoácido e às vezes diferentes: alguns pacientes de pele coloração e escleral normal, outra marca želtušnost′ expressa constante ou periódica. Na maioria dos pacientes o baço inchado, No entanto, algumas formas de Hemoglobinopatias permanece normal. Talvez o aumento do fígado. Esta anemia é muitas vezes complicada por colelitíase. Modifique o esqueleto pode ser o mesmo, como em microspherocytosis, nas formas leves de anemia estão faltando.

Os achados laboratoriais

Quando portadores de hemoglobinas instáveis é detectado vários graus de anemia dos sintomas, muitas vezes normocrómica, às vezes a anemia, em relação a parte da hemoglobina no sedimento, especialmente naqueles casos, Quando hemo da otŝeplen do gene de globina, ou quando o precipitado consiste em circuitos separados. Hemácias mišenevidnost′ detectado, anisocitose, polihromaziya. Conteúdo de reticulocytes sempre promovido. Notas de irritação de germe vermelho da medula óssea.

Sangue e manifestações clínicas de Hemoglobinopatias dependem somente o caractere de substituição de aminoácido. Gemoglobinopatija mesmo em pacientes, os não-parentes é uma hemoglobina anormal transportadoras dá semelhantes manifestações clínicas. Assim, Quando Biba gemoglobinopatijah, Savannah, Casper, Volga observada anemia hemolítica severa de clínica, Quando gemoglobinopatijah Tacoma, Belfast, Casper, Moscou tem manifestações clínicas mínimas. Quando parte as hemoglobinopatias é alterada a afinidade do oxigênio.

A maioria dos gemoglbinopatij com a afinidade de oxigênio da hemoglobina alta caracteriza-se por substituição de aminoácido em contatos entre α- e β-correntes (uma₁b₂-contatos). Maior afinidade para o oxigênio também pode estar associada com alterações em aminoácidos, 2.3 ligação substâncias relacionadas-diphosphoglycerate, necessário para os tecidos de oxigênio de hemoglobina normal de impacto. Em gemoglobinopatijah, associado com uma maior afinidade para o oxigênio, Como resultado de tecido hipóxia pode ocorrer eritrotsitoz, ao invés de anemia. Onde, Quando a afinidade ao oxigênio é abaixada, anemia pode ocorrer, devido à hemólise sem aumento, e giperoksiej. Nestes casos, não é a natureza da hemolítica, e associado com uma redução do nível de eritropoietina.

Diagnóstico de Hemoglobinopatias

Diagnóstico de Hemoglobinopatias, devido ao acúmulo de instável de globinov anormal, baseado no, que, quando expostos a sangue de vários agentes oxidantes, por exemplo brilhante azul krezilovogo, algumas formas de desnaturação da hemoglobina instável e sujeito a precipitar-se sob a forma de pequenas inclusões múltiplas.

A inclusão da mesma são detectados com as hemoglobinopatias (H), Takosha, Moscou. Esta coloração é normalmente usada para a determinação de reticulocytes. Para identificar claramente inclusões precisa mais de incubação 2 não.

Em alguns pacientes de coloração como comburentes, e corantes neokisljajushhimi (por exemplo, Violeta cristal) em eritrócitos identificaram único grande bezerro Gejnca, arranjado excentricamente. Maioria das vezes são observados em pacientes, passando por splenjektomiju.

Pesquisa de método de hemoglobina termolabil'nosti é ele que, que no meio de aquecido a 55 ° C em pH 7,4 em 0,15 Tampão de fosfatnom M normalmente através 1 h em média precipita sobre 13 % Hemoglobina, na presença de hemoglobina instável é mais 25 %.

Express-método para a detecção de hemoglobina instável, É como se segue. Gemolizat sangue é colocado em 17 % álcool isopropílico em tampão TRIS e intubado com uma temperatura 37 ° C. Na presença de hemoglobina instável sedimentos cai através de 5-15 min, Enquanto normalmente aparece somente após 30-40 min.

Reagentes: 17% solução de isopropilo- álcool pilovogo 0,1 Solução-tampão M, Ácido clorídrico-TRIS (pH 7,4). A solução a longo prazo pode ser armazenada em um recipiente hermético.

Método. Gemolizat, contém aproximadamente 6,21 mmol / L (100 g / l) Hemoglobina, é feito de triplo-lavado izotoniceski solução de cloreto de sódio de eritrócitos com adicionado 5 1-1, o volume de água destilada. Hemácias gemolizirujutsja a tremer, lipídios são extraídos metade do volume de tetracloreto de carbono com agitação durante 2 m. Após a centrifugação para 10 minutos a 3000 RPM separa a camada superior para a pesquisa.

Álcool isopropílico é 2 ml 2 tubos de ensaio, trânsito fechado. Os tubos foram aquecidos a uma temperatura de 37 ° C em banho-maria. Em um dos tubos é derramado 0,2 gemolizata ml, obtidos de hemácias do paciente, em outro 0,2 gemolizata ml, obtidos de células vermelhas do sangue do doador. Na presença de hemoglobina instável sedimentos cai através de 5-15 min. Resultados possíveis e errôneos. Se impreciso, altas concentrações de álcool, temperaturas mais altas quando aquecido tubos, mais hemoglobina normal de pH ácido pode cair anteriormente 30 m. A alta concentração de metahemoglobina sedimento pode ocorrer at a despesa de menor resistência metahemoglobina 550nm são comparados com.

Para estudos de estabilidade de hemoglobina usando esse método, você deve usar somente fresco gemolizat. Quando você fizer isso, você precisa considerar, Que concentração de hemoglobina deve ser substancialmente 100 g / l.

Atualmente, para a identificação de hemoglobina instável manipulação de β-merkuribenzoatom ou β-chloromercuribenzoate com subsequente da electroforese em gel de krahmal'nom.

EM 1981 g. como o express-método proposto um novo método de determinação da hemoglobina instável, baseado no, que na presença de sais de zinco com baixas concentrações de hemoglobina instável precipita em temperatura 37 ° C através de 15 min, ao contrário de hemoglobina normal. Enquanto gemolizat em quantidade 0,2 ml (6,21 mmol / L, ou 100 hemoglobina g/l) Adicionar a solução, contém 0,35 ml 0,003 M de solução de acetato de zinco e 1,45 ml 0,1 M TRIS-tampão de pH 7,4. Depois de misturar os tubos são colocados no termostato no 30 minutos a 37 ° C. Na presença de hemoglobina instável aparece o resíduo, que se estabelece através de 30 m.

Quando alguns gemoglobinopatijah após a pré-incubação de sangue dentro de 1-2 dias, e às vezes em sangue fresco metgemoglobina promovido.

Na mobilidade electrophoretic (Ao pesquisar em papel ou acetatcelljuloze) de hemoglobina A é diferente, apenas um terço das conhecido hemoglobinas instáveis. Em alguns casos não é possível identificar modificado mobilidade eletroforética em gel de krahmal'nom ou polakrilamidnom. Estudo sobre a estrutura primária da hemoglobina instável permite ajustar seu tipo.