Określenie ilościowych i jakościowych cech plemników

Określenie ruchliwości plemników

Określenie ruchliwości plemników jest ważnym parametrem, jakości ejakulatu. Sperma, zdolne do zapłodnienia, mają mobilność - Sprawdź, ruch prostoliniowy przodu z prędkością 50 m / s. Można znaleźć w ejakulacie sperma z zaburzeniami mobilności - diskinospermiey w postaci wibracyjna, Ujeżdżalni i inne ruchy, które normalnie nie występują.

Ruchliwość plemników badano w natywnym przygotowania ejakulatu przy ograniczonym polu widzenia (za pomocą okna fonio), Korzystanie soczewki okularu 7X i 40x, gdy skraplacz z kapturem. Liczenie 100 komórka, Uwaga: wiele z nich w ruchu, siedzący tryb życia i stałe spermy. Normalnie, aktywną ruchliwych plemników 80-90 %, siedzący tryb życia - 10-12, stałe - 6 10 %. Biorąc pod uwagę tylko te aktywne poruszające i powolne spermy, którzy czynią stałe postępy.

Możesz także użyć bardziej szczegółowe pięciopunktową skalę ocen:

• "4" - wielka mobilność (wszyscy mają prostoliniowy translacyjnej ruchliwość plemników w znacznym tempie);
• "3" - dobre mobilność (Kilka kropli);
• "2" - mobilność przeciętne (Jeszcze dużo spermy, ale z wibrującym ogona);
• "1" - słaba mobilność (brak ruchu do przodu, Tylko ogon ruchliwość plemników);
• "0" - brak ruchu plemników.

Płodność ejakulat To zależy od czasu ruchliwość plemników, Dlatego konieczne jest, w celu określenia ruchliwość plemników dynamiki (Dynamiczny kinezisgramma).

Drop nasienia jest stosowany do pokrywy szklanej, do góry nogami i umieścić na szkiełku z półksiężycem na wiszącej więc spadek, że spadek ten był w środku wgłębienia. Krawędzie nakrywkowym smarowane ciekłej parafinie i mikroskopowo określenia procentu aktywnego motile-, siedzący tryb życia, a dzięki stałej spermy 1, 3, 6, 12 i 24 godzin po wytrysku. Badania prowadzi się w temperaturze pokojowej. Zwykle, ilość substancji aktywnej, co zmniejsza ruchliwych plemników 2-3 h 20 % ,

• Uwaga. Badanie mikroskopowe nasienia musi być przeprowadzona w laboratorium w jednej osoby, mają wystarczające doświadczenie w zakresie diagnostyki laboratoryjnej, a wyniki oznaczania ruchliwości plemników w różnych badaczy w zakresie do ± 40 % i zależy w dużej mierze na doświadczeniach z ejakulatu.

Próby na "ożywienie" spermy

Próby na "ożywienie" spermy Opiera się on na przywrócenie normalnej mobilności stałe, a za pomocą roztworów stymulujące żywo plemników:

1) Rozwiązanie Becker (Glukoza - 3 g, Już₂HPO₄ - 0,6 g, NaCl - 0,2 g, KH₂PO₄ -0,01 G, distillirovannaya do wody 100 ml; pH - 7,8);

2) 0,1 % roztwór kofeiny (Nie tylko w ampułkach!) - 10 % objętości ejakulatu;

3) 0,1 Rozwiązanie arginina M.

Metoda. Dimensional pipetter 1 ml nasasyvayut 0,1 ml ejakulatu (dobrze wymieszane) i tym samym zyskuje pipety 0,9 ml roztworu stymulujące. Zawartość pipety jest wdmuchiwane na szkiełku zegarkowym, dobrze wymieszać przez wielokrotne ssania i płynu dmuchanie na szkiełka zegarkowego, a następnie spadek gotowy produkt wiszące. Do 5 10 min stałe, ale na żywo plemniki zaczynają się poruszać.

Procent ruchliwych plemników określona natychmiast po przywróceniu mobilność i po 3, 6, 12 i 24 nie. W celu uzyskania bardziej wiarygodnych wyników prowadzi się równolegle do próbki dwa wymagających rozwiązania. Tylko wtedy, gdy jest to niemożliwe, aby "ożywić" plemniki mogą nadal mówić o nekrospermii.

Identyfikacja żywych plemników wśród stałe

Zasada sposobu opiera się na, enzymy, które żyją plemniki odbarwia eozyną. Jak są wykorzystywane odczynniki 5 % wodnego roztworu potasu i eozyną 10 % Wodny nigrozyny.

Metoda. Na slajdzie spowodować małą kroplę nasienia, umieszczony w pobliżu dwa razy spadku 5 % Roztwór eozyną i spadek potasu 10 % Rozwiązanie nigrozyny, Jest również dwa razy większe krople eozyną potas. Po pierwsze, miesza się z ejakulat eozyną potasu, czeka kilka sekund, i następnie zmieszano z kroplą nigrozyny, jeszcze poczekać kilka sekund i zrobić cienkich rozmazów polerowanej slajd.

Z zastosowaniem mikroskopu systemu zanurzenia, w rozmazie liczone są co najmniej 200 sperma, podkreślając życie (Bezbarwny) i umarłych (eozyną poplamione czerwonej). Ilość żywych i martwych plemników wyrażone jako procent. W przypadku braku nigrozyny nasienia spadek zmieszane ze słomą 5 % eozyną rozwiązanie potasu i przygotować cienkie smugi dla mikroskopii. Nigrozyna barwniki tylko tło leku, gdzie plemniki są przydzielane większy kontrast. Normalnie żyją plemniki 80-90 % całkowitej liczby.

Liczenie plemników w 1 ml i w całej objętości spermy

Liczby plemników w 1 ml całej ejakulacie są obliczane w komorze do liczenia Goryaeva.

Liczba plemników w całym ejakulacie ustala się mnożąc liczbę plemników w 1 ml ilość ejakulatu (mililitrów).

• Uwaga. Komora zliczania może określić ilość ruchliwych plemników, Dlaczego ejakulat należy rozcieńczyć ciepłą izotonicznego hloridz sodu i policzyć liczbę plemników stacjonarnej, a następnie odjąć ją od całkowitej.

Normalnie, w 1 ml nasienia zawiera 60-120 mln. sperma, kiedy giperspermii - więcej 120 mln., w oligo - od 30 do 60 mln., co, zwykle, co uniemożliwia zapłodnienie. Jednakże opisane przypadki, Gdy pojawia się i zawartość nawożenie 1 ml z эyakulyata 5 do 30 milion. sperma.

W każdym razie w identyfikacji oligospermii 2-3 niezbędne kontrole zliczania liczby plemników w odstępach 3-4 tygodni w celu określenia ich wartości maksymalne. W tym samym człowieka spermy podlega znacznym wahaniom w fizjologicznym.

Zwykle około ejakulat zawiera więcej niż 150 milion. sperma.

Liczenie spermiogram

Spermiogram - jest procentową różnych postaciach morfologicznych plemników i spermatogenezy.

W rozmazie, barwione hematoksyliną i eozyną lub Pappenheim, obliczona minimalna 200 sperma, w którym liczba prawidłowych i patologicznych postaciach, i komórki spermatogenezy wyrażona w procentach. Obliczenia wykonane za pomocą mikroskopu zanurzenie systemy i maszyny do liczenia leukogram pre zmianie nazwy przycisków.

W normalnym wytrysku nasienia normalnych form jest 80-85 %, czasami 100 %, są to zmiany fizjologiczne, charakteryzuje się niezwykłym i szyi, lub zmniejszone, lub powiększona główka.

Młody, lub niedojrzałe, kształcie nasienia wokół głowy i szyi reszty cytoplazmy ("Collar"), obserwuje się często stosunku seksualnego, a nie są zdolne do zapłodnienia.

Dawne formy spermy (hyperchromia, axromija, wakuolizacja głowy) pojawiają się w ejakulacie po rozszerzony abstynencji i nie nadaje się do zapłodnienia.

Formy patologiczne to plemniki z deformacje głowy: megalospermatozoidы (gigantospermatozoidы), makro-, mikrospermatozoidy, Stożkowy, dwa headed spermy z szyi i ogona, bez szyjki z jednym lub więcej ogonów, bez ogona, bez nasady ogona, etc..

U zdrowych mężczyzn w normalnym ejakulacie plemników są nietypowe formy zwykle nie znaleziono, ale czasem ich liczba w czasie normalnej płodności może osiągnąć wytrysku 20 %, niektórzy z nich 15 % Szef patologii, 3-5 % - Ciało, 2-5 % - Ogon.

W patologicznej spermatogenezy, wydzielnicze forma niepłodności plemników z nieprawidłową zidentyfikowanej głowy i szyi. Ogon Patologia Pochodzenie zwykle wydalniczy, Występuje podczas przejazdu plemników sposobów nasieniowodów.

W preparatach barwionych są również wyraźnie widoczne komórek rozrodczych oddzielnie umieszczone w różnych etapach różnicowania i dojrzewania, ważne jest rozróżnienie aspermia i azoospermii.

Spermatogonii są zaokrąglone, czasem owalne, Średnica 5-12 mikronów. Rdzeń zajmuje około jednej trzeciej komórki, ciemny- lub w jasnych kolorach, 1-2-3 Nucleo- Lama, często znajduje się w pobliżu karyotheca (otoczka jądrowa), na strukturę chromatyny melkozernystaya. Cytoplazma jest wąska, zasadochłonne, Jednorodny. Spermatogonii dzielenie kilka razy mitotycznie. Są to komórki z dobrze zdefiniowanych etapów mitozy.

Niektóre komórki, powstały w wyniku mitozy, дифференцируются в сперматоциты I, a następnie II zamówienie. Spermatocytu zamawiam - Okrągły lub wielokątny komórek o średnicy 17-19 mm, z dużym okrągłym jądra i cytoplazmy światła grzywny. W preparatach barwionych wyraźna strefa okołojądrową.

Spermatocytami II rzędu powstały w wyniku mejozy. Są one mniejsze, niż spermatocytów zamawiam (średnica 15 m), ale w niemal identycznej morfologii. W ejakulacie bardziej powszechne, niż spermatocytów zamawiam, ale znacznie rzadziej, niż spermatydy.

Spermatydы - Mały, okrągłe lub wydłużone komórki o średnicy 12-15 mm z okrągłymi hyperchromatic jąder, położony centralnie lub ekscentrycznie. Nie może być spermatydy wielordzeniowe. Pale cytoplazmy, bazafilnaya, Często vacuolated.

Spermatydy przekształcają się w plemniki.

Komórki spermatogenezy w normalnych spermiogramu wynosi nie więcej niż 2 %. Duża liczba niepłodności obserwowano w charakterze wydzielniczym.

Do mikroskopu z kontrastem fazowym nasienie rozcieńczono izotonicznym roztworze chlorku sodu z dodatkiem małej ilości 1 % Wodny roztwór lub kwas rivanola zmniejszyć karbolowy ruchliwość plemników.

Mikroskopii fluorescencyjnej z Stosuje się go na szkiełku kropli spermy kroplę oranżem akrydynowym w hodowli 1:20000. Krople są mieszane i przykryto szkiełkiem nakrywkowym. Okular mikroskopu cel 7X i używane 40x. Plemniki są barwione na żywo zielony, martwe - pomarańczowy. Normalne i nieprawidłowe formy plemników są łatwe do rozróżnienia ze względu na ich cechy morfologiczne.

Zasady Rabotы fazy-kontrastnom i mikroskopem lyuminestsentnom opisanы w instruktsiyah k эtim Instrumentów. Podczas korzystania z kontrastem fazowym oraz mikroskopii fluorescencyjnej spermiogram obliczoną zgodnie z ogólnymi zasadami.

Na podstawie badań mikroskopowych ejakulatu można zidentyfikować różne stany patologiczne.

• Spermatoschesis - Brak plemników w ejakulacie, a komórki spermatogenezy.
• Azoospermia - Brak plemników w obecności spermatogenezy.
• Asthenospermia - Zmniejszenie liczby komórek ruchliwych i zwiększenie liczby form patologii w normalnych całkowitej liczby plemników.
• Oligoastenospermiya - Zmniejszenie liczby plemników oraz ich form komórkowych oraz zwiększenie liczby form patologii.
• Nekrospermiya - Naprawiono wszystkie plemniki w przygotowaniu, nawet po "odrodzeniu".
• Akinospermiya - Państwo, w którym, w przeciwieństwie do wcześniej ustalonej nekrospermii spermy po "odrodzeniu" zaczynają się poruszać.