Методы обнаружения простейших в кале методом консервации
При исследовании этим методом простейшие, паразитирующие в кишках, фиксируются в кале консервантом. Морфологические признаки их вегетативных форм и цист в этом случае сохраняются неизмененными в течение длительного периода.
Реактивы для обнаружения простейших
- Консервант Барроу: а) консервирующий раствор (0,7 мл хлорида натрия, 5 мл концентрированного формалина, 12,5 мл этилового спирта 96 %, 2 г кристаллического фенола, 100 мл дистиллированной воды); б) красящий раствор (0,01 % раствор тионина или азура). Консервант Барроу используют в тех случаях, когда исследование консервированного материала осуществляют на протяжении месяца.
- Консервант Сафаралиева (1,65 сульфата цинка, 10 мл консервированного формалина, 2,5 г кристаллического фенола, 5 мл концентрированной уксусной кислоты, 0,2 г метиленового синего, 100 мл дистиллированной воды). Консервант Сафаралиева применяют тогда, когда консервированный материал должен храниться для исследования более месяца.
Методика обнаружения простейших методом консервации
Консервант разливают во флаконы от пенициллина примерно до половины их объема. Исследуемый материал от каждого больного немедленно после взятия переносят во флаконы в количестве, соответствующем примерно 1/3 объема консерванта. С помощью палочки готовят эмульсию кала. Флакон закрывают резиновой пробкой, которую закрепляют липкой лентой. На каждом флаконе должна быть этикетка, содержащая данные об обследуемом.
Перед исследованием консервированный материал не перемешивают. Каплю придонного осадка переносят пипеткой на предметное стекло и тщательно размешивают стеклянной или деревянной палочкой до получения эмульсии. Если материал был собран в консервант Барроу, добавляют каплю красителя. После этого препарат накрывают покровным стеклом и просматривают при большом увеличении микроскопа. В отдельных случаях целесообразно использовать масляную иммерсию.
Оценка результатов исследования
Просматривают два-три препарата, отмечая всех обнаруженных простейших. Дифференцировать их следует по тем же признакам, которые были описаны для препарата, окрашенного раствором Люголя. Следует, однако, учитывать, что, в отличие от раствора Люголя, красители, применяемые в консервантах, не окрашивают гликоген, но позволяют выявить хроматиновые тела. Структуры простейших в консервантах окрашиваются красителем в синий цвет.
Внутренняя структура балантидиев в консервированном материале становится неразличимой, поэтому их определяют по войлокообразному слою ресничек на периферии клетки. При отсутствии тионина или азура можно применять 0,01 % раствор метиленового синего.