Kiekybinių ir kokybinių savybių spermos apibrėžimas

Nustatymas spermos judrumui

Nustatymas, spermos judrumas yra svarbus parametras, iš ejakuliato kokybė. Spermatozoidų, galintis apvaisinimo, turi mobilumą - Padaryti tiesiai į priekį judesio tuo greitį 50 m / s,. Tai galima rasti ejakuliato sperma su judėjimo negalia - diskinospermiey į vibracinė forma, Maniežas ir kiti judėjimai, kurie paprastai nėra.

Spermatozoidų judrumas buvo įvertintas gimtojoje rengimo ejakuliato su ribota lauku (naudojant langą Fonio), Naudojant vaizdo ieškiklio objektyvo 7X ir 40x, kai gobtuvu kondensatorius. Skaičiavimas 100 ląstelė, atkreipti dėmesį į jų skaičius juda, Sėdimas ir fiksuoto spermatozoidų. Paprastai, aktyviai judrių spermatozoidų yra 80-90 %, Sėdimas - 10-12, fiksuotas - 6 10 %. Atsižvelgiant į tai, tik tie, aktyviai juda ir lėtai judančių spermatozoidų, kurie daro nuolatinę pažangą.

Taip pat galite naudoti išsamesnę penkių balų skalę įvertinti:

• "4" - puikus mobilumas (Visi turi paprastą progresuojanti spermatozoidų judrumą tuo labai greitai);
• "3" - gera mobilumas (keli lašai);
• "2" - vidutiniškas mobilumas (Vis dar spermos daug, bet su vibruojančiu uodegos);
• "1" - prastas mobilumas (išmatuojama tiesinė judėjimo stokos, Tik spermos judrumui uodega);
• "0" - spermos judėjimas nėra.

Fertilynosty эyakulyata Tai priklauso nuo spermos judrumui trukmę, Todėl yra būtina, siekiant nustatyti spermos judrumą į dinamika (Dinaminis kinezisgramma).

A spermos lašas yra taikomas padengti stiklo, įjunkite jį aukštyn kojom ir padėkite ant stiklelio su už kabančio lašo pusmėnulio taip, lašas buvo išėmos centre. Iš dengiamąja kraštai sutepti skystu parafinu ir mikroskopiškai nustatant aktyviai motile- procentą, Sėdimas ir fiksuoto sperma per 1, 3, 6, 12 ir 24 valandoms po ejakuliacijos. Tyrimas atliekamas kambario temperatūroje. Paprastai, aktyvaus-judrių spermatozoidų skaičius mažėja kas 2-3 h 20 % ,

• Pastaba. Mikroskopinį spermos turi būti atliekamas vieno asmens laboratorijoje, turėti pakankamai patirties laboratorinės diagnostikos srityje, kaip spermos judrumui nustatymo rezultatai, įvairių tyrėjų svyruoti iki ± 40 % ir didžiąja dalimi priklausys nuo su ejakuliato patirties.

Ant "atgimimas" spermos tyrimas

Ant "atgimimas" spermos tyrimas Ji remiasi normalaus mobilumo fiksuoto atkūrimo, bet gyvena spermos priemonėmis stimuliuojantį tirpalų:

1) Becker sprendimas (Gliukozė - 3 g, Apie₂HPO₄ - 0,6 g, NaCl - 0,2 g, KH₂PO₄ -0,01 G, Distiliuotas vanduo iki 100 ml; pH - 7,8);

2) 0,1 % kofeino tirpalo (ne tik ampulės!) - 10 % iš ejakuliato tūris;

3) 0,1 M paprasčiausiai reiškia argininas.

Metodas. Matmenų pipetter 1 ml nasasyvayut 0,1 ml ejakuliato (gerai sumaišyti) ir tas pats pipetė įgyti 0,9 ml tirpalo stimuliuojantis. Iš tūbelės turinys yra prapūsti ant laikrodžio stiklo, gerai išmaišykite pakartotinai siurbimo ir pūtimo skystį ant laikrodžio stiklu, ir tada gatavo produkto kabo lašas. Per 5 10 min fiksuoto, bet gyvų spermatozoidų pradeda judėti.

Iš judrių spermatozoidų procentinė dalis atkuriant mobilumą ir po nustatoma tuojau pat 3, 6, 12 ir 24 ne. Daugiau patikimumas rezultatais, yra atliekamas lygiagrečiai su mėginio su dviem sudėtingas problemas. Tik jei tai neįmanoma "atgaivinti" sperma vis dar galime kalbėti apie nekrospermii.

Identifikavimas gyvų spermatozoidų tarp fiksuoto

Šio metodo principas yra grindžiamas, fermentai, kurie gyvena spermatozoidų bespalvis eozino. Kaip reagentai yra naudojamas 5 % vandeninis tirpalas kalio ir eozinu 10 % vandeninis nigrozinas.

Metodas. Dėl skaidrės sukelti nedidelį lašą spermos, dedamas šalia didelis kritimo pusę 5 % eozinas sprendimas ir kalio sumažėjimas 10 % Nigrozinas sprendimas, kuris taip pat yra du kartus didesnis už lašas eozinas kalio. Pirma, ejakuliatui yra sumaišomas su kalio eozinu, laukia kelias sekundes, ir tada sumaišyti su nigrozinas lašo, vėl laukia keletą sekundžių ir įsitikinkite plonas tepinėlius poliruoto stikliuką.

Naudojant panardinimo sistemos mikroskopą, į tepinėlių yra skaičiuojami bent 200 sperma, pabrėžiant gyvenimo (Bespalvis) ir mirusieji (eozinas tamsintas raudonas). Iš gyvų ir negyvų spermatozoidų skaičius, išreikštas procentais. Atsižvelgiant į nigrozinas lašo spermos nėra maišyti su šiaudais 5 % eozinas kalio ir paruošti plonus tepinėlius mikroskopavimui. Nigrozinas dažai tik narkotikų fonas, Kai sperma skiriama daugiau kontrasto. Paprastai gyvų spermatozoidų yra 80-90 % nuo bendro skaičiaus.

Skaičiuojant spermoje 1 ml, o į visą tūrio ejakuliacija

Spermos skaičius 1 ml visoje ejakuliato skaičiuojami suskaičiavimo kameros Goryaeva.

Spermatozoidų skaičius visą ejakuliacija nustatomas padauginus spermatozoidų skaičių 1 ml dydis ejakuliato (mililitrai).

• Pastaba. Skaičiavimo kamera taip pat gali nustatyti judresnių spermos skaičių, Kodėl ejakuliato reikia atskiesti šiltu izotoniniu natrio hloridz ir suskaičiuoti nejuda spermos skaičių, ir tada atimti ją iš viso.

Paprastai, į 1 ml spermos yra 60-120 mln. sperma, kai giperspermii - daugiau 120 mln., į oligo - nuo 30 į 60 mln., ką, paprastai, todėl neįmanoma apvaisinimo. Vis dėlto, aprašyti atvejai, Kai apvaisinimas įvyksta ir turinys 1 ml ejakuliato 5 į 30 milijonas. sperma.

Bet kokiu atveju nustatant Oligospermija 2-3 būtinos kontrolės skaičiavimo spermos skaičių su intervalais 3-4 savaites, siekiant nustatyti jų didžiausią sumą. Tuo pačiu žmogaus spermatozoidų skaičius yra taikomos didelių svyravimų fiziologinė.

Paprastai aplink ejakuliato yra daugiau nei 150 milijonas. sperma.

Skaičiavimas spermiogram

Spermiogram - yra įvairių morfologinių formų spermatozoidais ir spermatogenezei procentais.

Tepinėlis, tamsintas hematoksilinu-eozinu ar Pappenheim, apskaičiuojamas minimalus 200 sperma, kuriame įprastos ir neįprastos formos sumą, ir spermatogeninius ląstelės išreikštas procentais. Skaičiavimas atliekamas naudojant panardinimo mikroskopas sistemas ir mašinos skaičiavimo leukogram anksto keisti klavišų pavadinimai.

Esant normaliam spermos ejakuliato normalių formų yra 80-85 %, kartais 100 %, jie apima fiziologinius pokyčius, būdinga neįprasta ar kaklo, arba sumažinti, arba didinant vadovas.

Jauni, arba nezrelыe, formos spermatozoidų turi aplink galvą ir kaklą nuo citoplazmos poilsio ("Apykaklė"), pastebėtas su dažno lytinio akto ir nėra pajėgi apvaisinimo.

Senieji formos spermatozoidų (hyperchromia, axromija, vakuolizacija vadovas) atsiras ejakuliato po pratęstas susilaikymas ir netinka apvaisinimo.

Patologiniai formos yra spermos su deformacijomis galvos: megalospermatozoidы (gigantospermatozoidy), makro-, mikrospermatozoidy, Kūgio formos, du vadovavo spermatozoidų su kaklo ir uodegos, be kaklo su vienu arba daugiau uodegos, be uodegos, Uodega be galvų ir tt.

Sveikų vyrų ejakuliacija spermos nenormalus formos paprastai nerastas, bet kartais jų skaičius per įprastą vaisingumo ejakuliato gali pasiekti 20 %, iš kurių maždaug 15 % vadovas patologija, 3-5 % - Kūno, 2-5 % - Liekamosios.

Be patologinių spermatozoidų, sekrecijos forma nevaisingumo identifikuoti spermą su nenormaliu galvos ir kaklo. Patologija uodega paprastai Šalinimo kilmė, Tai įvyksta spermos vas būdų ištrauka.

Be tamsintas preparatų yra aiškiai matomų atskirai esančios kamieninės ląstelės įvairiuose etapuose diferenciacijos ir brendimo, svarbu atskirti aspermia ir azoospermija.

Spermatogone'os apvalinamos, kartais ovalo, skersmuo 5-12 mikronų. Šerdies užima apie ląstelių trečdalio, tamsus- arba šviesios spalvos, 1-2-3 Nucleo- Lama, būna šalia karyotheca (branduolinės paketas), smulkiagrūdis struktūra chromatino. Citoplazma yra siauras, bazofiliniai, Vienarūšis. Spermatogone'os Divide mitotically kelis kartus. Yra ląstelės su gerai apibrėžtomis etapuose mitozės.

Kai kurios iš ląstelių, susiformavo per mitozės, diferencijuojasi į spermatocitų aš, ir tada II užsakymas. Spermatocyte užsisakyti - Apvalaus ar daugiakampio ląstelės su 17-19 mm skersmens su dideliu apvaliu branduolio ir citoplazmos šviesos bauda. Be tamsintas preparatų yra aiškus perinuklearinę zona.

Spermatocitais II tvarka suformuota kaip mejozėje rezultatas. Jie yra mažesni, nei spermatocitų užsisakyti (skersmuo 15 m,), bet morfologijos beveik identiškas. Be ejakuliato dažniau, nei spermatocitų užsisakyti, bet daug rečiau, nei spermatozoidų.

Spermatydы - Mažas, apvalios arba pailgos ląstelės su 12-15 mm skersmens apvalių hyperchromatic branduolių, įsikūręs centralizuotai arba ekscentriškai. Čia gali būti daugiagysliai spermatozoidų. Blyški citoplazma, bazafilnaya, dažnai vacuolated.

Spermatozoidų yra transformuojami į spermatozoidų.

Šio spermatogenezės įprastu spermiogram ląstelės yra ne daugiau kaip 2 %. Nemažai nevaisingumo pastebėtas sekrecijos pobūdžio.

Dėl kontrasto mikroskopija fazės ejakuliatui yra skiedžiamas izotoniniu natrio chlorido tirpalu, su mažu kiekiu to 1 % rivanola arba vandeninis tirpalas karbolio rūgštimi, siekiant sumažinti judrumas.

Su fluorescencinė mikroskopija taikomas skaidrės spermos lašas ir iš akridinas oranžinės lašas į veisimo 1:20000. Lašai yra sumaišomi ir padengta padengti stiklo. Mikroskopas okuliaras naudojamas 7X ir 40x tikslą. Live spermos dažomi žalia, mirusiųjų - oranžinė. Įprastos ir neįprastos spermos formos yra lengva atskirti, nes jų morfologiniai požymiai.

Taisyklės darbas fazinio kontrasto ir fluorescencijos mikroskopijos aprašyti instrukcijoje šių prietaisų. Naudodami fazinio kontrasto ir fluorescencijos mikroskopija spermiogram skaičiuojamas pagal bendrąsias taisykles.

Dėl mikroskopinis tyrimas ejakuliato pagrindu gali atskleisti įvairių patologinių sąlygų.

• Spermatoschesis - Spermos nebuvimas ejakuliato, ir spermatogenezės ląstelių.
• Azoospermija - Nebuvimas spermatozoidais į spermatogenezei akivaizdoje.
• Astenospermii - Sumažėja judančių ląstelių skaičiaus ir į patologinių formų skaičiaus padidėjimas pagal įprastą bendro skaičiaus spermoje.
• Oligoastenospermiya - Sumažinti spermos ir savo mobiliųjų formų skaičių ir didinant patologinių formų skaičių.
• Nekrospermiya - Ištaisyta visą produkte spermos net po "atgimimas".
• Akinospermiya - Valstybės, kurioje, priešingai nei anksčiau nustatytas nekrospermii spermos po "atgimimas" pradeda judėti.