Mikroskopinį smegenų skystį

Nustatymas cytosis

Cerebrospinaliniame skystyje sveikų žmonių esanti labai mažą ląstelių skaičių. Klinikinė reikšmė daugiausia leukocitų (limfocitai). Norėdami suskaičiuoti baltųjų kraujo ląstelių nesikerta eritrocitai, Jie juos sunaikinti, pridedant neskiesto smegenų skystį 1/10 dalys acto rūgšties fuksinas. Magenta spalvos branduolius turinčioms ląstelėms raudonai. Dažymui leukocitų naudojant reagentą Samson (mišrus 30 ml ledinės acto rūgšties, 2 ml suskystintų fenolio, 2 ml alkoholio tirpalu fuksinas 1 : 10 ir papildyta 100 ml distiliuoto vandens). Reagentų atsparus, geras dėmių ląstelės ir per kelias valandas saugo juos nuo citolize.

Prašyti kaip išspręsti, apimanti 5 ml 10 % acto rūgštis 0,1 P metilvioleta. Tai yra mažiau stabili, ląstelės nusidažo mėlynai.

Dėl citolitiniais savybių smegenų skysčio suskaičiuoti ląstelių skaičių, turėtų būti iš karto po to, kai. Skystis yra dozuojami į vamzdį arba mikropipetė lašai, proporcingai 10 dalys smegenų skysčio ir 1 dalis dažiklis sprendimas ir palikti 10-25 minučių dažų ląsteles. Dėl veisimo gali būti naudojami maišytuvai leukocitų. Ląstelės likvoro labai greitai prilimpa prie vamzdžių sienelių, taip skystis, Dėžutė in vitro,, Prieš tyrimą turi būti kruopščiai sumaišomi sukimosi judesius tarp delnų.

Norėdami apskaičiuoti ląstelių skaičius yra naudojama Rūmai Fuchs-Rosenthal. Skaičiavimas produkcija visoje tinklo per 5 min po pripildymo kameros. Skaičius ląstelių 1 L yra apskaičiuojama pagal formulę:

X =(* 11)/(3.2*10)

kur X - ląstelių, į 1 L; - Ląstelių,, suskaičiuoti ant ekrano paviršiaus; 3,2 - Kiekis kameros; 11/10 - Skiedimo.

Leidžiama registracija grafų trupmena, pvz 14/3, kur 14 - Ląstelių skaičius skaičiuojami kameroje, 3 - Apvalinimo kameros tūris. Su didelio ląstelių skaičius yra pakankamas, kad juos skaičiuoti vienoje pusėje tinklelio ir skaičių gauta dviguba. Su ryškia pleocitozė (labai padidėjo ląstelių skaičius) leidžiama skaičiuoti ląsteles 16 Mažas kvadratas ir daugintis, kad skaičių 16.

Atsižvelgiant į tai, Fuchs-Rosenthal kameroje nesant gali būti naudojamas Skaičiavimas kamera Goryaeva su žymiai mažesnio pajėgumo, Todėl ji yra skaičiuojami ląstelės bent trys kvadratai, apskaičiuoti aritmetinį vidurkį ir padauginkite jį 1,2. Veiksnys 1,2 gaunamas iš formulės

X =(* 11)/(0.9*10)

kur 0,9 talpos kameros, 11/10 - Skiedimo.

Kai skaičiuojant ląsteles smegenų skystyje gryno vieną iš pirmųjų lašų, kylančių iš dūrio adata, dedamas į Fuchs Rosenthal ir nustatyti ląstelių skaičių, , kaip nurodyta aukščiau.

Paprastai, ląstelių skaičius (limfocitai) į 1 L likvoro iš smegenų ir smegenėlių smegenų rezervuaro skilvelių yra 0-1, ir skystis, gautas juosmeninės punkcijos - 2-4.

Vaikai, jaunesni kaip trijų mėnesių amžiaus 1 L smegenų skysčio yra nustatyta, kad 20-23 ląstelių, iki vienerių metų - 14-15, iki dvejų metų - 11-14, nuo dvejų iki penkerių metų - 10-12, nuo penkių iki septynių metų, 8-10, nuo septynių iki dešimties metų - 6-8, daugiau nei dešimt metų - 4-5.

Kai meningitas, augliai, smegenų abscesas ir ląstelių skaičiaus smegenų skystyje padidėja.

Į hemoraginio smegenų skysčio tyrimo, kai kuriais atvejais būtina nustatyti jo tikrąją cytosis. Šiuo tikslu Friedman būdas: hemoraginės skystis pelnas reagentas Samsonas nustatyti ląstelių ir izotoniniu natrio chlorido tirpalu skaičiuojant raudonos skaičių 1 L likvoro.

Pavyzdžiui, skaičius ląstelių 1 L - 20, raudonųjų kraujo ląstelių skaičius - 3600. Raudonųjų kraujo ląstelių ir baltųjų kraujo ląstelių skaičius atpažinti pacientą nuo bendros analizės, atliekamas prieš juosmeninės punkcijos. Pavyzdžiui, į 1 ml kraujo 4 200 000 eritrocitas, 7000 leukocitų. Taigi vienas turi leukocitų 4200000/7000 = 600, eritrocitai.

Norėdami gauti tikrąją vertę cytosis prilyginti:

apie 600 raudonųjų kraujo ląstelių - 1 leukocitas;

apie 3600 eritrocitai - X leukocitų, Todėl,

X = 3600/600 = 6 леикоцитов.

Tiesa likvoro cytosis 20-6 = 14 ląstelių 1 L.

Taikant šį metodą yra apribota, Nuo smegenų skysčio su didele priemaiša kraujo netinka tokio tyrimo.

Nustatymas, eritrocitų skaičiaus smegenų skystyje Jis yra nustatyti paciento intrakranijinės kraujosruvos sunkumą.

Dalyvaujant 1 L 2000-5000 eritrocitų smegenų skysčio tampa rožinė, 900-1000 Eritrocitai - tik šiek tiek opalinis. Bespalvis skystis gali būti nustatomas pagal apatinių raudonųjų kraujo ląstelių. Klinikinė reikšmė yra į raudonųjų kraujo kūnelių lygio dinamikos augimas.

Ląstelių diferenciacijos likvoro vyksta skaičiavimo kameroje, vietinių forma ir nudažomi.

Esant dideliam priartinimas (okuliaras 10X arba 15X, 40x objektyvas) į skaičiavimo kamerą atkreipti dėmesį į ląstelių kiekio, forma, vieta ir dydis branduoliais, intarpų buvimas Citoplazmoms. Tai lengva atskirti limfocitai, neutrofilinių granulocitų, makrofagai. Paprastai, smegenų skystyje, kuriose yra tik limfocitus.

Pilną apibūdinimo ląstelių sudėtį smegenų skysčio studijavo tamsintas preparatai. Ląstelės buvo tamsintas skystis blogiau, nei kraujo kūnelių. Yra keletas būdų, dažymas: iki Rosina, Išdykėlis, Papanicolou, Alekseev, Gali Gryunvalydu, Pappengeymw.

Nustatymas, kad fluorescencinės mikroskopijos metodu pleocitozė gamtą

Nugriebti dengta stikliuką ir iš smegenų skysčio lašą sumaišyti jį su fluorochromo dažų (vandeninių druskos tirpalų akridinas apelsinų ir Rodamininių veisimo mišinys 1:20000). Maišytas vaistas yra tiriamas fluorescencinio mikroskopu ML-2-mėlyna violetins šviesos regimojo spektro, naudojant derinius žadinimo filtrų: FS 1-4, FBS 14-4, LST 8-2 ir užraktas filtras LS-1 panardinimo objektyvas. Kaip neflyuorestsiruyuschego panardinimo aliejus naudojamas mokslinių tyrimų dimetil (ortoftalio rūgšties esteris dimetil).

Per tamsiame fone į vaizdo ir limfocitų polynuclears lengvai atpažįstami pagal žalia švyti citoplazmą srityje. Grafas eilutė 100 ląstelė, atsižvelgiant į limfocitų ir neutrofilų skaičius.

Limfocitų skiriasi nuo neutrofilų branduolio pobūdžio (glybchatoy struktūra su oranžiniais intarpais) ir ryškiai žalia fluorescencijos.

Neutrofilinių granulocitų turėti aiškią struktūrą, jų branduoliai chromatino difuziškai dega, vienodas šviesus- žalias. Citoplazmos geltona- žalias, IT išsibarsčiusios plytinio raudonumo granulės.

Tais atvejais, kai nepilnametis cytosis gimtoji likvoro centrifuguojamas ir nuosėdos tyrimas.

Liuminescencinės mikroskopinį smegenų skysčio lengva padaryti išvadą, kad neutrofilų, limfocitų arba polimorfonuklearinių ląstelių pobūdis pleocitozė.

Morfologinės savybės ląstelių smegenų skysčio

Limfocitų

Be smegenų skysčio sveikų žmonių nerasta mažų ir vidutinių limfocitai (1-2 1 L) dydis 4-6 mikronų. Šis turas formos ląstelės su dideliu branduolio ir glybchatym labai siaurą citoplazmos.

Kai limfoidinis pleocitozė (tuberkuliozės meningitu, Cisticerkozė) kartu su mažų ir vidutinių didelių limfocitai atrodo (8-9 M), kartais tai yra įmanoma, aptikti ląsteles tiesioginio dalijimosi.

Limfocitų skaičius (kartu su kitais ląstelių) padidėja smegenų skysčio smegenų auglių, Per lėtinį meningito. Kai Neurochirurginiai ligos padidinti limfocitų skaičiaus pooperaciniu laikotarpiu įvyksta po didinant neutrofilų skaičių ir nurodo palankų rezultatą.

Plazminių ląstelių

Plazma ląstelės gali būti aptikta smegenų skysčio tik tada, kai srovė ilgai smegenų uždegimą, ir dangalų. Morfologija plazmos ląsteles, pavyzdžiui,, kraujo arba kaulų čiulpų taškinę.

Šis turas formos ląstelės su ekscentriškai esantį branduolį ir intensyviai spalvos, bazofiliniai citoplazma. Kai kuriais atvejais, suma gali pasiekti jų 26%. Yra plazminių ląstelių pooperaciniu laikotarpiu ir vangus kursas atstatomuosius procesus smegenų traumos.

Gistiocitы

Esant normaliam smegenų skysčio kartais randama pavienių kopijų forma.

Tamsintas preparatai histiocytes turime didelį branduolį ir santykinai siaurą citoplazmos. Ląstelių kiekis 7 į 10 m,, apvalios arba netaisyklingos formos. Pupelių ar neteisingą disko forma branduolys, normohromnaja. Nucleoli matomi vietinių preparatų, kurių fazių kontrasto mikroskopija.

Kai Zagruźliczony meningitas cerebrospinaliniame skystyje atskleidė didelį skaičių histiocytes, viena nuo kitos nutolusios ir klasteriai, jų citoplazma bazofiliniai, dažytos intensyviau.

Pagal turimus duomenis, kai glijos ląstelių tipai gali paversti histiocytes. Didelis skaičius histiocytes yra aptinkamas smegenų skysčio pacientų, atlikta operacija smegenų ar stuburo (kuris rodo aktyvią audinių reakcija ir normalus gydomųjų žaizdas), ir asmenims,, kenčia nuo tuberkuliozinio meningito ir cisticerkozės į vangus dabartinės uždegimas. Kai smegenų navikai invazijos į subarachnoidinį erdvės ar histiocytes į skilvelio sienos gali atsirasti smegenų skystį kartu su pakeista ląstelių ir makrofagų, kuri yra būdinga aplink naviko reaktyviosios zonoje atsiradimą.

Makrofagai

Makrofagai suformuotas iš vieno- endotelio ląstelių ir daugelio Pajęczynówka Mater ir monocitų. Elementai endotelio voratinklinį dangalo yra atskirta nuo sincitiumc ir tapti užapvalintais ląstelės, turintis amebiniais judėjimą ir skverbtis į smegenų skystį.

Makrofagai aktyviai praryti ir suvirškinti ląsteles ir kitus elementus, mažėja į cerebrospinalinį skystį patologinių procesų, prisidėti prie jo valymo. Į makrofagų citoplazmos intarpai diferencijuoti lengvai kameroje ir tamsintas.

Makrofagai phagocytose eritrocitai, sunaikinti arba nemodifikuotas neutrofilinių granulocitų, riebalų lašeliai, gematoidina kristalai, ir tt. Dažnai atsižvelgiant į makrofagų vakuolėmis įvairių dydžių Citoplazmoms galima gauti, arba viena iš didelio vacuole, kuris užima beveik visą citoplazmos, o šerdis yra perkeliama periferijos. Tokiais atvejais, ląstelė turi žiedo formą - cricoid makrofagus.

Paprastai makrofagų į stuburo skysčio Nesant. Jų išvaizda normalioje ląstelių skaičiaus rodo hemoragijos ar uždegimo į centrinę nervų sistemą,. Didelis skaičius makrofagų cerebrospinalinį skystį pooperaciniu laikotarpiu nurodo aktyvųjį išvalymo (Teigiama perspektyva). Nedaugelis makrofagų arba jų nebuvimas, kai išreiškė pleocitozė - nepalankus prognozinis požymis.

Granuliuotų kamuoliai – putų ląstelės

Granuliuotų kamuoliai (putų ląstelės) Makrofagai yra dideli su keliais intarpai riebalų lašelių į citoplazmą.

Tai dažniausiai ląstelės apvali forma, purpurinės spalvos tamsiai rudos spalvos. Atsižvelgiant į nugaros smegenų skysčio Sudanas III granulių kamuolius gydymo nudažytas raudonai oranžinės.

Aptikta smegenų skystyje, kuri liečiasi su skysčio jį iš cistos skirtingų etiologies, smegenų audinio irimo (su lašų riebalų), kartais pooperaciniu laikotarpiu, tam tikrais smegenų auglių (kraniofaringiome, ependymomas ir kt.). Jei navikas yra netoli skilvelių, granulinės rutuliukai dažnai aptikta smegenų skysčio iš skilvelių. Granulių pavidalo kamuolius šaltinis yra mikroglijai, ir oligodendrocytes, išorinio apvalkalo laivų ir voratinklinį ląstelės.

Neutrofilinių granulocitų

Neutrofilų granulocitų į smegenų skystį panašus į kraujo neutrofilinių granulopitami, jų citoplazma (į skaičiavimo kameros ir vietinių preparatų) dažnai ištemptos ar turi iškyšą (pseudopodia). Šis pastebėtus per pirmuosius 10-15 minučių po to, kai į smegenų skystį ląstelių ir įvairovė rodo neutrofilinių išsaugojimą- granulocitų galimybę judėti. Būdinga yra segmentuota branduolys, segmentų skaičius, kuris kinta nuo dvejų iki penkerių; stab neutrofilų granulocitų yra reti.

Laikant smegenų skystyje neutrofilinių granulocitų pasikeitė prieš, nei kitų ląstelių. Iš neutrofilų granulocitų branduoliai gali būti lizuoti arba segmentai yra suapvalintos, su aiškiais kontūrais, prijungtas plonu tilto; vėliau jie imtis atskirų granulių formą. Microphage, kuris yra saugomas tik vienas branduolys segmentas suapvalintos formos, išvaizda panaši Loevit ląstelių. Ten patinę neutrofilinių granulocitų su sunkiai apibrėžiamų kontūrai segmentus, užima beveik visą citoplazmos. Be tamsintas preparatų gali stebėti visus neutrofilinių granulocitų žlugimo etapus - patinimas šerdies prie visiško sunaikinimo ląstelių struktūrą, kai kontūrai nėra matomas citoplazma, ir pagrindiniai segmentai yra beformė, sudarytas iš minkšto akučių chromatino. Narystė šių ląstelių į neutrofilinių granulocitų gali būti nustatytas tik reakcijos į peroksidaze: žalių ir geltonų ar rudų granulių buvimas sunaikinti citoplazmoje.

Kartais, smegenų skysčio, neutrofilinių granulocitų su pyknotic branduolį, gabalų netaisyklingos formos hyperchromatic formos.

Neutrofilų granulocitų atsiras smegenų skysčio su kraujavimas į subarachnoidinį vietos, uždegiminių ligų, nervų sistemos, po neurochirurginių operacijų. Neutrofilinių granulocitų buvimas kraujo į smegenų skystį nurodo uždegimą dangalai.

Neutrofilų nepakeistų vyravimas įrodymų ūminio uždegimo.

Staigus neutrofilinių pleocitozė išvaizda matyti kad pūlinys pagal smegenų dangalų.

Kai abscesas, Įsikūręs giliai į smegenų audinį, paprastai stebimas išreiškė švelnų pleocitozė su limfocitų vyrauja.

Kai uždegimo slopinimas smegenų skystyje atsiranda degeneruoti formos neutrofilinių granulocitų.

Pakitusi ir nepakeistomis neutrofilų buvimas yra būdinga nuolat uždegiminis procesas. Reikėtų atsižvelgti į, kad nemodifikuotas neutrofilinių granulocitų atsiras smegenų skysčio mišinyje šviežio kraujo, Tokiais atvejais korekcijos apibrėžimas cytosis.

Eozinofilinė granulocitų

Eozinofilinė granulocitų gimtąja pavyzdžių smegenų skysčio diferencijuoti su kitais ląstelių pagal būdingą didelio blizgančio smėlio buvimo, pildymo citoplazmą. Ląstelės su dviem ašmenimis branduolio retas, Dažnai pastebima, mononukleininėje forma. Morfologija ir tamsintas eozinofilinė granulocitų pačių, kraujyje. Smegenų skystyje dažnai rasti sunaikinti eozinofilinė granulocitų.

Turinys eozinofilinė granulocitų į nugaros smegenų skysčio at svyruoja nuo cisticerkozės 1 į 46%.

Meningito kaip Arachnoiditas tsistitserkoznogo komplikacija įvykis lydi neutrofilinių pleocitozė ir atsižvelgiant į eozinofilinė granulocitų skaičiaus sumažėjimas. Dėl abstsedirovaniya Echinococcus burbulas smegenyse būdingas buvimo savo turiniu neutrofilų ir eozinofilų granulocitų, , kuri tarnauja kaip pagalbinis bruožas, skiriantis ją iš pūlinio. Kartais daug eozinofilinė granulocitų galima rasti iš cistos navikų galvos ir nugaros smegenų turinį (neuroma, kraniofaringiome, ependimomos, vėžio metastazių smegenyse). Gerokai padidėjo eozinofilinė granulocitų skaičius smegenų skystyje galima pastebėti po skilvelio tsisternoskopii.

Po to, kai smegenų navikų pašalinimo kartu su aktyvi žaizdų chirurginės žaizdos padidina eozinofilinę granuliocitų skaičių, kuris gali būti laikomas vietinės alerginės reakcijos į dangalai traumos ir audinių irimo produktų absorbcija.

Į modifikuotos ląstelės ir ląstelės šešėlis

Ačiū citolitinį savybės smegenų skysčio ląstelių, joje esantis ilgą laiką, išlaikyti tik į citoplazmą kontūrus ir branduolius likučių. Norėdami nustatyti savo morfologinę pažiūros neįmanoma. Daugeliu atvejų šie pokyčiai yra taikomos neutrofilinių granulocitų, kartais tai piktybinių navikų ląstelės. Lengva atlikti citolize voratinklinį ląsteles ir ependymal skilvelius.

Audinių bazofilų randama stuburo skystyje po neurochirurgijos.

Ląstelės Pajęczynówka Mater smegenų skystyje

Ląstelės Pajęczynówka mater (arahnoэndoteliya) - Vieno sluoksnio epitelio ląstelių, jie gali būti diferencijuojami kaip skaičiavimo kamerinės ląstelių skaičiaus, ir tamsintas, paruošti iš dumblo smegenų skysčio. Tai gana didelis netaisyklingos formos ląstelių suapvalinti su palyginti mažu Skritulio arba ovalo formos branduolys, arba, centralizuotai įsikūręs.

Mobilieji branduoliai nudažomi Hypochromic, ir citoplazma - šviesiai- arba pilkšvai mėlynos spalvos, todėl dažnai nelygios kontūrai ir yra intarpai dalelių fagocituojamos (riebalų lašeliai, mobilieji elementai, vacuole). Iš voratinklinį mater ląstelių citoplazma dažnai sunaikinta, Tokiais atvejais aptinkami charakteristika iš branduolio ir citoplazmos fragmentų. Chromatino turi melkopetlistuyu šerdims ar grūdėtumas, kartais daug viena mėlyna Branduolėlis. Iš branduolių dydis 5 į 19 m,.

Smegenų skystyje vieneto ląstelių voratinklinį buvimas yra dar įrodymas patologijos, kaip šios ląstelės linija subarachnoidinį erdvę ir, Drėkinamasis, patenka į smegenų skystį. Didinti ląstelių pastebėtas voratinklinį arachnoidito skaičių, smegenų Cisticerkozė. Iš voratinklinį cistos turinys yra rasti skirtingose ​​vietose voratinklinį ląstelės ir jų symplast kaip grupių branduolių įvairių dydžių ir spalvų intensyvumo, apsuptas šviesiai citoplazmoje be aiškių ribų tarp ląstelių.

Iš chorioideus rezginio ląstelių

Nuo gyslainę rezginio iš skilvelių į nugaros smegenų skysčio galite įvesti daugiakampio formos, apvalus, kartais didelis cilindro (15-19 M) ląstelė. Mažas (4-5 M) Įsikūręs branduolio centre, arba ekscentriškai, hyperchromatic, eozinofilinė citoplazma, intensyviai spalvos. Atsižvelgiant į tai, gyslainės rezginio ląstelių citoplazmoje turi grūdėtumą, kartais intarpų ir gumulėlių formos, dydis 1-3 mikronų, apvalios arba netaisyklingos formos, žalsvos spalvos arba melsvai spalva. Kai ląstelės gali būti nustatoma ar sugautas raudonųjų kraujo kūnelių vacuolar.

Iš chorioideus rezginio ląstelių dažniausiai randama skysčio iš smegenų skilvelių.

Ląstelės ependymal skilvelio likvoro smegenyse

Ląstelės ependymal skilvelio likvoro smegenyse, gautas juosmeninės punkcijos, Jis yra lengvai sunaikinami kepimo procesą ir dažymo. Be nudažytus tepinėlius jie turi išsilavinimą natūra, sudarytas iš ovalo formos branduolys su subtilus struktūra. Kai ląstelių citoplazma konservuoti supa į siauros sienos forma branduolį.

Skystis iš smegenų skilveliai yra dažniausi ependymal ląstelių konservuoti struktūra, morfologiškai panašūs į voratinklinį mater ląsteles, bet jų dažytos šviesesnė šerdis ir turėti daugiau pasiulymo, pasiskirstęs tolygiai chromatino. Ovalo ependymal ląstelių poliai dažnai nurodė, Citoplazma yra pilkšvos spalvos atspalvis. Yra atskirai įsikūręs ir didelės grupės ląstelių, kurie negali būti nustatomas pagal atskirų ląstelių ribų.