발작 야행성 hemoglobinuria – 질병 Markiafavy Micheli

발작 야행성 hemoglobinuria - 상대적으로 드물게 용혈성 빈혈의 인수 양식을 발생하지, 적혈구의 구조 변경으로 연결, 호 중구 granulocyte 및 혈소판. 혈관 내 용혈의 증상 수익금, 하는 혈색소뇨이있다, gemosiderinuriya, 무료 혈장 혈색소 수치 증가. 질병은 종종 내부 장기의 말초 혈관 및 혈관의 혈전에 의해 복잡.

병인 및 발작성 야간 혈색소뇨 증의 발병 기전

질병의 첫 번째 설명은로 주어졌다 1882 G. 이는 더 상세히 설명 하였다 1928 G.

질병의 일반적인 이름 - 발작 야행성 hemoglobinuria (PNG), 그러나 질병의 본질에 작은 대응이다, 그것은 실제 발작적과 항상 관찰 혈색소뇨이 없기 때문에.

APG 제외 gemosiderinuriey와 혈관 내 용혈은 열적으로자가 면역 용혈성 빈혈이 여러 형태로 관찰, 차가운 항체, 특히 열 헤와 형태, 뿐만 아니라 유전 용혈 빈혈의 일부 형태, 적혈구 세포막의 구조 붕괴와 관련된.

질병 Marchiafava 미셸은 다른 연령대에서 관찰. 그 이유는 적혈구 자체에 결함이 적혈구의 증가 된 파괴입니다.

APG 환자의 적혈구, 상술 한 바와 같이, 자신의 행동에 대한 최적의 조건을 만들 때 쉽게 보완에 의해 파괴, 또는 혈청의 산성화에 의한, 또는 크로즈 배지에서의 이온 농도를 낮게 만들어 적혈구 보수 주위의 농도가 증가함에. 적혈구 APG 환자는 모두 항체 응집소의 효과에 감도를 향상 시켰습니다, 과, 특히, 헤.

APG는뿐만 아니라 적혈구에 영향을 미치는, 뿐만 아니라 환자의 백혈구 및 혈소판. 혈소판 및 APG 환자의 백혈구 산성화 유청과 같이 보완의 효과에 대한 민감성을 증가, 낮은 이온 강도 크로즈와 환경. 그들은 idioagglutinin의 작용에 더 민감 여러 번 있습니다, 기증자 혈소판 및 백혈구 이상. 이렇게, 혈소판과 백혈구가 동일한 결함을 막을, 그리고 적혈구가.

적혈구의 표면에 면역 글로불린을 감지, 백혈구와 혈소판하여 APG는 autoaggressive 질환 그룹에 속한다는 것을 증명 가장 민감한 방법 실패.

적혈구의 두 개의 독립적 인 인구의 APG의 강력한 증거가있다. 건강한 인간 세포에서 가장 지속 - 망상 적혈구는 APG 가장 깨지기 쉬운. 이 있음을 나타냅니다, 비정상적인 적혈구 인구는 단순히 만기까지 생존하지 않습니다, 나이가 성숙 적혈구 건강 또는 거의 건강한 인구 동안.

IN 1970 적혈구의 혼혈의 연구에서, 고통 APG, 발견, 그들은 포함, 뿐만 아니라 건강한 혼혈 같이, G-6-PD의 두 일반 전기 변종; 옵션 A, 아프리카의 사람들 사이에 널리 퍼져, 및 옵션 B, 전형적인 유럽 인구. 용혈 등장 후, 그 이상 적혈구는 G-6-PD의 한 버전을 포함, 정상 적혈구 - G-6-PD의 전기 변형의 양. 따라서, 용혈 적혈구 세포는 단일 세포의 후손.

이 사실은 적혈구의 두 집단이 있다는 높은 신뢰를 나타냅니다, 단지 작동하지 다른, 으로, 예를 들어,, 때 microspherocytosis, 또한 근원에 의하여: 즉, 그는 병적 인 세포 클론의 존재를 확인, 티. 그것은. 체세포 돌연변이. 적혈구 막의 파괴의 ID, 호중구 및 혈소판 제안, 그 병리 정보는 가능성이 셀을 수신, 줄기 다음, 티. 그것은. 전구 세포 myelopoiesis. 종양 성장은 APG 일반적인 아니다. 그것은 빠른 APG의 배경 백혈병의 몇 가지 경우를 설명. 그럼에도 불구하고, 우리는 가정 할 수있다, 그 APG - 혈액 시스템의 양성 종양의 변형, 오랜 시간이 종양 증식을 포기하지 않을, 백혈병의 다른 형태의 특성.

개발 komplementchuvstvitelnosti APG의 메커니즘은 명확하지 않다.

해당 작용 및 펜 토스 포스페이트 사이클의 효소의 활성에 실질적인 변화는 존재하지 않는다.

APG는 적혈구 아세틸 콜린 에스 테라 제의 활성을 감소하면, 아마도 적혈구 막의 구조의 붕괴에, 효소는 멤브레인의 표면 상에 위치되어 쉽게 패배 동안 파손되기 때문에. 알려진, 아세틸 콜린 에스 테라 제 억제제의 사용은 적혈구의 생존에 아무런 영향을 미치지 않았다. 그러나, 아세틸 콜린 에스 테라 활동의 감소는 용혈성 빈혈의 다른 형태로 관찰, 그래서이 증가 komplementchuvstvi의 현상을 설명 할 수 없다- telnosti.

증거가있다, 불포화 지방산의 양의 증가를 보여, 인지질의 회원, 적혈구 막. 그것은 가능하다, 지질의 변화 있음 - 적혈구 세포막의 구성에 다른 변경만을 반영. 소듐 도데의 존재하에 폴리 아크릴 아미드 겔 전기 영동에 의해 적혈구 세포막 단백질 연구 환자 APG 찾을 때, 단백질 함량의 분획의 개수에 그 제어 크게 달랐다.

응고 인자의 주요 적혈구의 혈관 APG 할당 붕괴의 혈전 성 합병증의 발병 역할, 자극, 자신의 부패 동안 적혈구에서 출시. APG는 주로 망상 적혈구를 파괴, 아마도, 이 주파수는 용혈성 빈혈 다른 형태 대조적으로,이 질환의 혈전 성 합병증을 설명한다, 심한 혈관 내 용혈을 동반.

발작성 야간 혈색소뇨 증의 임상 증상

질병은 종종 서서히 시작. 환자는 약점을 호소, 불쾌, 현기증. 때때로이 subikterichnost 공막. 종종, 첫 번째 불만은 두통이다, 다양한 현지화의 복통. 증가 혈전증에 대한 경향은 의사를 볼 수있는 환자 발생. 혈색소뇨 드물게 질환의 제 증상, 일부 환자는 APG에 존재하지 않을 수도. 경우에 따라서는 심지어 이후, 제 2-3년 나타난다 10 질병의 발병 후 년.

APG의 특성 특징 중 하나 - 복통의 관찰. 그것의 현지화는 매우 다를 수 있습니다. 위기 기간 이후, 복통, 보통, 관찰되지. 종종 구토를 조인. 대부분의 경우, 장간막 혈관의 혈전증과 관련된 APG 환자에서 복통.

말초 혈관 혈전증의 (무엇보다도 - 상부 및 하부 사지의 정맥, 드물게 - 신장 혈관) 발작성 야간 혈색소뇨 증의 증상과 같은 특성. 에 12 % APG는 환자의 혈전을 관찰. 혈전 성 합병증이 질병 사망의 가장 흔한 원인이다.

환자의 객관적인 연구는 종종주의 창백 약간 황달을 끈다. 종종 얼굴의 붓기가, 때로는 과도한 충만. 비장과 간 아마도 약간 확대, 그것은 APG 일반적인 것은 아니지만.

혈관 내 용혈의 발작성 야간 혈색소뇨 특징적인 증상, 무료 플라즈마 헤모글로빈의 증가 -이 중 가장 중요한. 이 기능은 주기적으로 APG 거의 모든 환자에서 관찰. 그러나, 혈장 헤모글로빈 증가의 양은 변화에 의존하며, 조사 대상 질병의 기간에. 크게 위기 기간 속도 증가, 또한 플라즈마 metalbumina 증가 표시된.

혈장 헤모글로빈 수준은 본 용혈의 정도에 따라, 합 토글 로빈의 내용, 소변 및 파괴 복잡한 헤모글로빈의 속도에서 필터링도 헤모글로빈 - 토글 로빈. 헤모글로빈의 혈장 수준의 용혈의 작은 정도의 경우 신장 필터를 통해 여과 부족한 것. 따라서 혈색소뇨 질병의 의무 증상 아니다. 네프론 세뇨관 분비 헤모글로빈 통과 할 때 부분적으로 붕괴 관상 상피 퇴적. 이 헤 모시 데린의 소변 배설의 원인.

발작성 야간 혈색소뇨 증 환자의 대부분에서 소변으로 배설 헤 모시 데린. 때로는 gemosiderinuriya 즉시 나타나지 않습니다. 이것은 중요하다, 그러나 질병의 APG 기호에 국한되지.

발작성 야간 혈색소뇨에서 검사 소견

환자의 헤모글로빈 함량은 APG는 범위 1,86- 3,1 밀리몰 / ℓ (30-50 g / l) 와 관해 동안 정상에 더 낮은.

APG 환자에서 적혈구의 수 감소 대응 헤모글로빈 수준을 낮추는. 오랜 기간의 색상 표시는 단결에 가까운 남아. 어디에, 환자는 헤 모시 데린과 헤모글로빈의 형태로 소변에서 철의 상당한 양을 잃으면, 점차 철의 수준을 감소. 환자의 약 절반에서 관찰 낮은 컬러 인덱스. 일부는 헤모글로빈 P의 수준을 제기, 특히 악화의 기간.

환자의 상당한 부분 망상 적혈구 수가 증가 내용, 하지만 상대적으로 낮은 (2- 4 %). 대부분의 경우 APG와 백혈구의 수 감소. 많은 환자에서는 1.5-3 F에 1 L, 그러나 경우에 따라서는 T에 0.7-0.8로 감소 1 L. 백혈구 감소증, 보통, 이 호중구 과립구의 수를 줄임으로써. T 10-11까지 - 때때로 APG의 정상에서 백혈구의 내용이나 증가 1 L.

APG는 호중구 과립구 대 식세포의 활성을 감소되면.

혈소판 감소증 그것은 종종 APG에서 관찰 될 때, 그러나 기능적 상태에있어서 정상 혈소판. 아마, 이것은이 질병에 출혈성 합병증의 희귀 설명, 혈소판 수는 종종 상당한 정도까지 저하되었지만 - 10-20 T에 1 L. 일반적으로, 대부분의 환자의 혈소판은 50-100 g에 계산 1 L. 정상 혈소판 수는 발작성 야간 혈색소뇨 증의 진단을 배제하지.

골수 검사 증상을 발견, 정상적인 양의 myelokaryocytes에 자극 빨간색 성장 조혈 - 용혈성 빈혈의 일반적 특성. 일부 환자에서 거대 핵 세포의 수가 약간 감소가.

혈청 철 APG 그것은 질병의 단계에 따라 달라집니다, 혈관 내 용혈 및 조혈 활동의 정도. 어디에, 환자는 지속적 또는 자주 혈색소뇨 증이있는 경우, 뿐만 아니라 일정 gemosiderinuriya로, 몸에서 철분, 따라서, 혈청 감소, 때로는 매우 크게. 때로는 APG는 발육 부전의 징후로 시작. 환자의 몸에서 철 상점은 APG에 따라 달라집니다, 한편, 소변 철의 손실, 및 적혈구의 강도에 다른. 따라서, 철 결핍 성 발작성 야간 혈색소뇨 증의 진단 간주되어서는 안됩니다.

혈청 빌리루빈 APG 대부분의 경우 경미한 상승 또는 정상, 간접 주로 기인. 평균적으로, 빌리루빈 함량은 22 ~ 28 밀리몰 / L이다. 그것은 고려되어야, 헤모글로빈의 혈관 파괴 용 즉 헤모글로빈 착체를 형성 gaptoglobinovy, 또한 결국 빌리루빈을 형성하기 위해 분해한다.

일부 환자에서 질병은 PNG 사진 재생 불량성 빈혈로 시작.

발작성 야간 혈색소뇨 증의 진단

발작성 야간 혈색소뇨 증에서 적혈구 쉘 구조를 붕괴, 이는 그 보완의 효과로 증가 감도 각성. 이 증가 된 감도 샘플 HEMA를 검출, 또는 자당 샘플 민감한. 그러나 어떤 경우에는,, 특히시 헤자가 면역 용혈성 빈혈의 형태, 자당 샘플 위양성 결과를 제공 할 수있다. 용혈은 자신의 적혈구의 표면에 고정 자당 매체에서 보완의 존재를 파괴하는, APG위한 반면는 항체에 노출하지 않고 세포의 보체 파괴 특징.

용혈의 형태로자가 면역 용혈성 빈혈 권장 학습 hemolysins 방법은 위 환자의 혈청과 공여자의 적혈구의 odnogruppnoy와 크로스 크로스 테스트를 사용하여 설명 제외하려면, 그리고 그 반대, 같은 관례입니다. APG 직접 테스트는 긍정적이다, 크로스 - 부정적. 용혈 폼 AIHA는 긍정적으로 관찰 할 수있는 경우, 네거티브 크로스 샘플. 모두 혈청을 이용하여 - 이러한 경우는 자당 시험의 제 3 실시 예를 사용하는 편법, 환자의 적혈구. 본 실시 APG 용혈 형태 AIHA의 최소 및 최대의 용혈의 정도. 단지 환자 혈청의 용혈 형태 면역 용혈성 빈혈 항원 특이성 항체 될 수있는 결과를 설명, 환자의 적혈구에 빠져 죽은, 기증자 적혈구보다. 이러한 환자에서 직접 자당 양성이 관련되어, 아마, 적혈구에 고정 된 항체의 존재와.

agregatgemagglyutinatsii에 의한 용혈의 식별 다른 사람은 정확한 진단을 내릴 수 있도록. 그것은 환자의 기증자의 혈청으로 사용할 수 없습니다, 마찬가지로 용혈 결과 콘텐츠는 위양성 수있다. 부정 결과가 발생할 수있다, 환자의 혈청 또는 간경변 환자의 보완의 소스 세럼 APG으로 사용하는 경우, 류마티스 관절염, 전신성 홍 반성 루푸스 및 기타 질병, 있는 보완의 수준을 감소. 자당 샘플 및 헤마 덜 두드러지게 샘플, 환자의 혈액 항응고제 헤파린으로 간주되는 경우, 대신 구연산 나트륨. 용혈성 위기 헤마의 샘플의 강도와 시료 후 자당 감소, 그러나 그들은 부정 될 수없는거야.

발작성 야간 혈색소뇨 플라즈마 무료 헤모글로빈 방법 빙 수정 Derviz 및 Byalko의 결정

상기 방법은 녹색을 형성하는 과산화수소의 존재 하에서 산성 매질에서 벤지딘과 반응 헤모글로빈의 능력에 기초, 파란색으로 첫 통과, 다음 보라색 붉은하기. 정색 헤모글로빈의 양에 비례.

시약.

1. 아세테이트 버퍼 0,1 M, pH를 4,6: 27,22 아세트산 나트륨 g에 용해 1 물 L (0,2 의 M 용액); 다른 플라스크에서 제조 1 L 0,2 M 아세트산 용액; 혼합 된 480 ml의 № 1 과 520 ml의 № 2.
2. 과산화 수소 0,3 % 해결책 (퍼 하이드 롤에 희석하여 사용하기 전에 준비 100 시간).
3. 벤지딘 염산염 0,1 % 해결책: 50 밀리그램 벤지딘 히드로 클로라이드 아세트산 완충액 35-40 ㎖에 용해시키고,, 용액을 가열하여 80 ° C 수조 냉각 후에는 아세트산 버퍼로 조정 50 ml의.

어두운 병에 여과되어 더 이상 상온에서 보관 7 일. Pozheltevshiy 시약은 적합하지, 빠른 어두워으로는 알코올 벤지딘에서 재결정해야한다.

방법.

건조 실리콘이 튜브에 정맥 바늘에서 가져온 연구 혈액, 어떤 항응고제를 포함. 항응고제와 혈액 대부분에서 원심 분리 10 분 1500 / 분. 혈장 분리 후에는 다시 원심 분리 10 분 8000 REV / 분 백혈구 펠렛.

튜브를 부어 4 ml의 아세트산 버퍼, 2 용액 과산화수소, 2 ML의 벤지딘 및 0,04 시험 혈청 ml의 혼합이고 방치 3 M, 다음 광로 길이를 갖는 큐벳 붓고 1 녹색 광 필터에서 cm 보상 용액에 대한 광도. 청색의 강도 4 ~ 5 분 동안 성장, 이렇게 측정을 행 3-5 회 반복하여 최대 값을 기록한다. 5~6분 후, 혈청 색상은 보라색 - 갈색 색조를 획득, 광학 밀도의 값은 감소하기 시작. 두 흡광도 최대의 결과 중 촬영 평균을 밝혀.

보상 솔루션, 구성 6 ml의 아세트산 버퍼, 8 용액 과산화수소, 3 벤지딘 ml의 용액 및 0,06 등장 성 염화나트륨 용액 ml의, 시료와 동시에 제조.

검량선은 헤모글로빈 용액에 의해 출력되고. 혈액에서, 헤모글로빈 용액의 제조에 걸리는, 그 함량을 측정 (의료 또는 의료 굴절계에 색도계). 농도로 헤모글로빈 용액을 제조 1 G / L, 농도 이의 제조 솔루션: 0,005,0,025, 0,05, 0,1 과 0,2 G / L. 얻어진 용액을 각각 첨가 가입일 0,04 혼합물 ml의 4 ml의 아세트산 버퍼, 2 벤지딘 ml의 용액 및 2 용액 과산화수소.

기본 솔루션 hemolysate (1 G / L) 검량선을 위해 저온에서 보관해야, 낮은 농도의 작업 용액은 분석 직전 제조한다.

일반적으로,의 1 혈장 난 포함 0,0005 밀리몰 / ℓ (0,01-0.04 G) 헤모글로빈.

발작성 야간 혈색소뇨에서 소변 헤 모시 데린의 결정

헤모글로빈의 철의 붕괴에서 그것은 헤 모시 데린의 신 세뇨관 상피 및 부품을 흡착. 이러한 경우에 신장 세관의 박리 상피 세포는 곡물 헤 모시 데린를 포함.

원심 분리 곡물 헤 모시 데린 볼 수 후 특수 염색없이 소변 침전물의주의 연구. 에 그림 그러나, 그들은 더 명확하게 눈에 띄는 Perls 방법.

방법.

소변의 원심 분리 후의 상층 흡출, 잔사에 갓 제조 한 용액에 1 % 페로와 1 % 염산 (동일 볼륨 2 % 염산 및 페로). 후 10 분 교반, 혼합물을 원심 분리시키고, 펠릿을 검색 후. 곡물 헤 모시 데린 파란색 스테인드.

Methemalbumin 정의 플라즈마 광도법

시약.

1. 삼투 성 인산염 완충 (pH를 7,4): 혼합 된 18 ml의 0.15 인산이 수소 나트륨의 M 용액 (24,4 g에 YaN2R04 1 물 L) 과 82 ml의 0,15 인산이 수소 나트륨의 M 용액 (21,3 г의 NaH₂후에₄ 에 1 물 L).
2. 나트륨 하이드로 설 파이트.
3. 수산화 나트륨 용액 1 M.
4. 인간 혈청 알부민 용액 (40 G / L).
5. 헤민의 솔루션 (5 밀리그램 / 100 ml의); 즉시 수산화 나트륨을 소량 용해시켜 제조 하였다 헤민, 그리고: 볼륨 혈청 알부민 솔루션에 데려.

방법.

케이 2 혈청 또는 혈장 ㎖를 첨가하여 1 zabuferernogo ml의 용액 isoosmotic, pH를 7,4. 혼합물을 원심 분리 30 1200-1500 m / 분에서. 광학 밀도의 결정 569 나노. 이어서, 희석 된 혈장을 유리 병에 넣고, 약 가하고 5 건조 황산 수소 나트륨의 mg의. 통해 5 분 동일한 파장에서 흡광도를 재 계측. 광학 밀도의 두 값의 차이는 광학 밀도에 대응 methemalbumin. Methemalbumin 농도는 교정 그래프로부터 결정된다.

다음 교정 그래프가 출력된다 :. 헤민 알부민 용액의 양을 시험관에 옮겼다 0,01 에 0,1 G / L (부터 0,2 에 2 ml의). 그 튜브, 상기 용액의 양이 적은 2 ml의, 최대 추가 2 용액 알부민 용액. 그런 다음 추가 1 ml의 포스페이트 버퍼 isoosmotic. 혼합물을 원심 분리시켰다 1500 / 분, 다음, 광학 밀도를 측정. 측정치 간의 차이 헤민의 개수에 따라 플롯.

일반적으로 gemalbumin 플라즈마 결석. 그는 혈관 내 용혈의 경우에 나타납니다, 예를 들어,, 발작성 야간 혈색소뇨 증의 용혈 형태 또는자가 면역 용혈성 빈혈, 과 합 토글 로빈의 부재에서, 헴은 알부민에 결합 될 때.

발작성 야간 혈색소뇨에서 헤마 샘플

신선한 혈청 보체의 존재 환자 APG 매체의 pH 감소에 적혈구의 슬라이드 저항에 따라 헤마 샘플.

시약.

1. 염산 용액 0,2 N.
2. 암모니아 용액 0,04 %.

방법.

정맥 5에서 촬영 6 혈액 ml의. 사용되는 항응고제 시트르산 나트륨 옥살산. 동시에, 혈액의 15 ~ 20 ml를 동일한 그룹의 기증자로부터 취한. 환자 및 공여자의 혈액 플라즈마로부터 적혈구를 분리.

혈청 혈액 공여자 붓고 0,5 여섯 개 튜브 용액, 그들 중 두 사람은에 배치 20 수욕 분 56 혈청 보완을 비활성화하기 위해 C를 °, 나머지 4 개의 튜브를 실온에서 방치. 환자의 적혈구는 등장 성 식염수로 두번 세척하고,, 다음의 비율로 동일 액에 현탁 1:1.

연구 설계는 표에 제시되어있다.

각 튜브의 내용물을 교반, 에 배치 1 온도 조절기의 온도에서 H 37 ° C, 다음 원심 분리.

의 빈에 대한 0,05 m 환자와 기증자의 적혈구는 별도로 추가 0,55 등장 성 염화나트륨 용액 ml의.

원심 분리 후, 용혈의 정도를 눈으로 추정 할 수있다. 각 튜브에 용혈의 정도를 정량화 4,7 ml의 0,04 % 암모니아 용액을 첨가 0,3 표면층 ml의, 그리고 빈 테스트 튜브 - 0,3 ml의 원래 혈청.

확인하기 100 % 용혈 4,7 암모니아수 용액을 첨가 0,3 적혈구 현탁액의 용액 (0,05 환자의 적혈구 용액 0,55 등장 성 염화나트륨 용액 ml의).

용액의 흡광도 적혈구없이 광학 밀도 판독 암모니아 용액과 의료용 비색계로 측정 및 비교:

% gemoliza =((IS₁-IS₂)/IS₃)*100;

여기서 E₁ - 시료의 광학 밀도; IS₂- 빈의 광학 밀도; IS₃- 흡광도 100 % gemolizata.

일반적으로,보다 더 용혈 없습니다 5 % 적혈구.

헤마 샘플의 경우 긍정적 인 것으로 간주됩니다, 용혈 경우 더 6 % 적혈구.

50-80까지 때때로 용혈 발작성 야간 혈색소뇨 및 용혈 양식자가 면역성 용혈성 빈혈에서 % 적혈구. 이러한 질병의 경우에만 혈청 noninactivating의 존재 용혈 특징 (튜브 번호 2). 혈청의 비활성화가 용혈을 방지하지 않는 경우 (튜브 번호 3), 우리는 용혈성 빈혈의 다른 형태의 존재 또는 연구를 설정하는 실수를 가정 할 수있다.

pH에서 발작성 야간 혈색소뇨 매체 환자의 적혈구의 파괴 6,5 그것은 보완의 필수 존재를 필요, 신선한 혈청에 포함.

발작성 야간 혈색소뇨와 자당 샘플

자당 샘플을 기반으로, 보완의 존재 낮은 이온 강도의 솔루션으로 파괴 발작성 야간 혈색소뇨 및 용혈 양식자가 면역 용혈성 빈혈 환자의 적혈구.

시약.

1. 자당: 9,42 자당에 용해 0,005 M 인산 완충액; pH를 6,2 (91 ml의 0,005 М의 NaH₂후에₄ 과 9 ml의 0,005 М₂HPO₄).
2. 헤모글로빈 농도를 측정하기위한 시약: 200 mg의 적혈구 염에 용해시키고, 1 L 증류수, 첨가 0,5 ml의 아세톤 시아 노히 드린.

방법.

혈액은 두 개의 시험관에 환자의 정맥에서 가져옵니다 - 건조 (8-10 ml의) 및 항응고제와 (2- 3 ml의). 항응고제로서 시트르산 나트륨 인. 응고 시험관에서 적혈구 세포를 등장 성 식염수로 두번 세척하고,. 상등액을 세척 및 흡인 후 0,4 적혈구 용액을 첨가 0,25 등장 성 염화나트륨 용액 ml의.

동시에, 혈액 개의 시험관에서 동일한 혈액형 도너로부터 취해진 다 - 항응고제 (2-3 mL의), 그것은로 취급, 환자의 혈액과 같은, 건조 (8- 10 ml의) 혈청에 대한. 혈청 기증자의 분리 후 0,5 이것은 용액의 온도에서 수조에 넣었다 56 ° C 30 분은 불 활성화를 보완 DLYA. 혈청 혈액 기증자는 추위에 매일 경험과 상점을주의해야한다. 연구 설계 표에 표시됩니다.

튜브는 인큐베이터에 넣었다 30 분 37 ° C, 다음 원심 분리 10 분 2000 REV / 분 용혈 정도.

이를 위해 튜브에 부어 3,4 헤모글로빈 농도를 측정하기위한 시약 ml의 0,6 이상 ML- 각 튜브로부터의 침전물 층. 통해 10 분으로 튜브 용액의 흡광도를 측정 540 나노 의료 굴절계 (분광 광도계) 또는 의료 색도계 (photocolorimeter FEC-M) 녹색 필터, 헤모글로빈 용액을 결정하는 광학 밀도 얻어진 데이터를 비교. 그것은 각 실험의 두 측정 값의 평균 소요. 계산은하기 식에 따라 이루어진다:

% 시험관 내 용혈 =((IS₁-IS₅)/(IS₈-IS₅))*100

여기서 E₁ - 시험관 №에서 용액의 광학 밀도 1; IS₅ - 시험관 №에서 용액의 광학 밀도 5, 가장 혈청 색상을 제거하는 데 필요한; IS₈ - 시험관 №에서 용액의 광학 밀도 8, 여기서 100 % 용혈이 있었다.

크로스 자당 샘플 (튜브 번호 2) 100%-최초의 시험관 용혈 수 연구 7.

결과의 평가.

일반적으로, 체외 № 1, 환자의 적혈구 세포를 포함하는 연구, 2-3를 초과하지 않는 용혈 %.

발작성 야간 혈색소뇨 증의 용혈의 형태와자가 면역 용혈성 빈혈에서 (AIGA) 이 시험관에 용혈 초과 6 % 테스트 튜브 - № 4, 적혈구를 함유하고 비활성화 환자 혈청 공여체 혈액, 튜브 번호 5, 포함 된 적혈구 및 혈액 기증자의 혈청, 과 수 6, 대신 염화나트륨 등장액 혈청 함유 - 용혈 1-2를 초과하지 않아야 %.

CROSS-자당 분석 (튜브 번호 2) 때 용혈 폼 AIHA 일반적으로 긍정적 인 (혈청 용혈의 존재), 그러나 또한 음수가 될 수 있습니다. 체외 № 3 (적혈구와 환자의 혈청) 용혈은 APG에서 모두 관찰된다, 때 용혈 폼 AIHA. 발작성 야간 혈색소뇨 최대 용혈은 종래의 크로스 샘플에서 검출 (튜브 번호 1), 덜 발음 - 환자 자신의 적혈구와 함께 샘플 (튜브 번호 3); 크로스 수 크로스 샘플에는 용혈 없음 (튜브 번호 2).

때 용혈 폼 AIHA 가장 뚜렷한 용혈은 자신의 혈액을 혈청과 적혈구 환자 샘플에서 검출된다 (튜브 번호 3), 다소 덜 두드러 - 체외 № 1. 체외 № 2 용혈 자주 관찰, 그러나 그것의 부재는 용혈 폼 AIHA을 배제하지 않는다.