유전 piropoykilotsitoz
유전 piropoykilotsitoz — своеобразная, 드물게 유전성 용혈성 빈혈이 발생하지, 적혈구 세포막의 구조 단백질과 관련된 장애. 뚜렷한 세포가 특징 гемолизом и пониженной резистентностью эритроцитов к изменению температуры.
Этиология и патогенез пиропойкилоцитоза
У больных пиропойкилоцитозом обнаружен дефект структуры спектрина. Белок нестабилен, имеет тенденцию к повышенной агрегации. Количество спектрина при пиропойкилоцитозе уменьшено.
Клинические проявления и лабораторные показатели пиропойкилоцитоза
У детей раннего возраста выявляются резко выраженная желтушность, значительное увеличение селезенки и увеличение печени. Содержание гемоглобина снижается до 3,1—3,41 ммоль/л (50—55 г/л), количество ретикулоцитов повышается до 30 %, в периферической крови обнаруживается значительное количество эритрокариоцитов. В мазках крови выявляются микросфероциты, отмечают ся выраженный анизоцитоз, poikilocytosis이었다, фрагментация эритроцитов, значительно выраженная базофильная пунктация эритроцитов. Осмотическая резистентность их понижена. Обнаруживается значительный аутогемолиз с частичной коррекцией глюкозой. Активность исследованных ферментов нормальная, патологии структуры гемоглобина не выявлено.
Характерной особенностью заболевания является повышенная чувствительность эритроцитов к небольшому нагреванию. При повышении температуры до 48 °С эритроциты резко деформируются. Появляется выраженная фрагментация пойкилоцитов. В норме такая деформация наступает при 52—55 °С. При пиропойкилоцитозе в эритроцитах выявляется большое количество ионов кальция, отмечается их повышенное проникновение внутрь эритроцитов и замедленное выведение.
Метод определения осмотической резистентности эритроцитов до и после суточной инкубации
Определение осмотической резистентности может производиться как свежих эритроцитов, так и эритроцитов, инкубированных в течение суток при температуре 37 °С в стерильных условиях.
시약.
1. Основной раствор, осмотически соответствующий 10 % раствору хлорида натрия.
2. 에2HPO4 - 27,31 G.
3. NaH2후에4 - 4,86 G.
4. NaCl — 180 G. Все реактивы растворяют в 2 물 L; pH полученного раствора должен быть 7,4. Раствор может храниться в закрытой посуде в холодильнике в течение нескольких месяцев. Из него готовят 1% 해결책, из которого приготавливают все остальные: 0,85; 0,75; 0,65; 0,55; 0,5; 0,45; 0,4; 0,35; 0,3; 0,25 과 0,1 %. Можно приготовить сразу по 100 мл рабочих растворов разных концентраций и хранить их в течение 2 недель в холодильнике.
방법. В две стерильные пробирки, 포함 2 капли гепарина, наливают по 1,5 혈액 ml의.
Одну пробирку помещают на сутки в термостат, кровь во второй исследуют в день взятия.
로 5 мл раствора хлорида натрия (1 %) и всех рабочих растворов разливают в центрифужные пробирки. К каждой пробирке пипеткой от гемометра добавляют по 0,02 мл перемешанной крови. Пробирки оставляют при комнатной температуре на 30 M, затем центрифугируют при 2000 об/мин в течение 5 M. Сливают верхний слой из каждой пробирки и колориметрируют на медицинском колориметре при зеленом светофильтре в кювете с длиной оптического пути 1 см против надосадочного слоя пробирки, 포함 1 % 염화나트륨.
용 100 % гемолиз принимают оптическую плотность в надосадочном слое пробирки, 포함 0,1 % 염화나트륨 (в таблице).
Показатели нормальной осмотической резистентности эритроцитов | ||
Концентрация раствора хлорида натрия | 용 혈, % | |
в свежей крови | 혈액에, инкубированной в течение суток | |
| 0,2 | 98-100 | 95-100 |
| 0,3 | 97-100 | 85-100 |
| 0,35 | 90-100 | 75-100 |
| 0,4 | 50-100 | 65-100 |
| 0,45 | 5—45 | 55-95 |
| 0,5 | 0-6 | 40-85 |
| 0,55 | 0 | 15-70 |
| 0,6 | 0 | 0-40 |
| 0,65 | 0 | 0-10 |
| 0,7 | 0 | 0-5 |
| 0,75 | 0 | 0 |
| 0,8 | 0 | 0 |
| 0,85 | 0 | 0 |
예.
IN 0,1 % растворе хлорида натрия оптическая плотность равна 0,65, 에 0,4 % - 0,22.
0,65 - 100 % gemoliz
0,22 — x
x=(0,22*100)/0,65=34%
Вторую пробирку, помещенную в термостат, извлекают через 24 ч и исследование повторяют.
Диагностическое значение
При микросфероцитарной гемолитической анемии наблюдается понижение осмотической резистентности эритроцитов. Гемолиз наблюдается уже в 0,7—0,65 % растворах хлорида натрия У некоторых больных микросфероцитозом выявить понижение осмотической резистентности эритроцитов в свежей крови не удается, однако в инкубированной крови она резко понижается. Гемолиз может начаться в концентрации раствора хлорида натрия 0,85 %.
При талассемии, а также при некоторых видах несфероцитарной гемолитической анемии осмотическая резистентность эритроцитов повышается. Гемолиз может начаться в 0,35 또는 0,3 % 염화나트륨.
Определение осмотической резистентности эритроцитов необходимо проводить во всех случаях наличия внутриклеточного гемолиза. Желательно исследовать осмотическую резистентность не только свежей крови, но и инкубированной в течение суток.
