면역 학적으로 인한 불임의 진단
피임약의 사용없이 긴 수명 동안 결혼, 및 생식기의 점막의 미세 영역의 존재 하에서 서서히 발생할 수 더럽힐 정자의 면역 항원. 배우자의 신체 검사, 불모의 결혼에 구성, 10 ~ 15 불임의 원인을 확인할 수 없습니다 % 경우. 조사 비밀 자궁 경관의 특별한 방법을 적용 할 때 그것은 불임 부부의이 그룹에, 정액 플라즈마 및 혈청 정자 항체는 종종 검출 (ASAT), 면역 학적 연구의 정성 및 정량 시험을 사용.
성교 테스트 (FCT)
성교 테스트 (FCT) 그것은 질적 면역을 말한다. 부정적 결과는 자궁 경관 비밀 정자의 부재를 나타낸다, 하지만 당신은 자신의 부재의 원인을 식별 할 수없는.
방법. 자궁 경관의 비밀에 운동성 정자의 숫자로, 성교 후의, 그들에게 자궁 경관의 점액을 불임이나 면역와의 관통 능력의 위반의 정도를 확립.
FCT는 다음 조건을 행할 필요가: 이 연구는 배란 기간에 수행되어야한다, 이는 colpocytologic 또는 다른 방법을 밝혀, 2-3일 내에서 이전에 절제의 배우자 후.
방법론. 여성을위한 보통 성교 후 30 분은 자신의 뒤쪽에 놓여 야, 무릎을 굽힘. Douching하고 금지 청소, 만 생리대 필요, 자궁 경관의 점액의 연구를위한 캡처하는 동안 제거 된. 2~4시간 후, 허용 및 6-10시간 후 (시간, 연구 전에 경과, 분석에 나타난) 성교 자궁 경부 거울 쿠스코와 흡입 자궁 경부 점액 또는 투베르쿨린 주사기를 사용하여 노출 후 (바늘없이), 고무 전구 피펫, 폴리에틸렌 카테터.
기기를 세척 할 때 살균제를 사용하지 않아야합니다, 그들은 정자의 운동성에 영향을 미치는로. 자궁 경관의 점액 생성 한 방울은 따뜻하게 유리 슬라이드로 전송, 코팅 커버 슬립, 액체 파라핀 윤활 지역 누설하기. 제형은 즉시 mikroskopiruyut (접안 렌즈 7X, 40X 목표), 정자 운동성의 수와 성격을 결정하는. 약물 활성 정자 운동성 프로그레시브 검출 할 수있다, 요동 운동 (스윙의 현상) 고정.
FCT 결론의 다섯 가지 유형이 제공 허용.
- 우수한 (관련 규범): 활성 정자 진보적 인 이동성 등을 통해 15 ~ 20에보기까지의 다섯 분야에서. 발진 현상과 정자 미만인 25 %.
- 만족: 보기 최대의 다섯 분야에서 10 활성 정자 진보적 인 이동성과 이하 25 % 스윙의 현상과 정자.
- 가난한: 적게 5 보기의 다섯 분야에서 정자.
- 마이너스: 정자의 부재.
- 의심스러운: 더 뷰의 다섯 분야에서 5 액티브 운동성 정자와 더 25 % 스윙의 현상.
때 FCT의 다섯 번째 유형 종종 배우자 사이의 면역 호환성을 관찰, ACAT를 결정하는 것이 필요. ACAT 비밀 자궁 경부를 확인하려면, 플라즈마, 정액 또는 혈청과이를 표시 (응집 또는 고정) 그것은 양적 면역의 약속을 요구한다.
부정적인 PBC 연구는 관통의 정의로 시작 (침투) 감명 테스트를 통해 정자의 능력 (금) 과 자궁 경관의 정자 분비에 감수성은 정자와 자궁 경부 점액의 테스트 접촉을 사용하여 (TKSTSS).
Penetracionnyj 테스트 (TP)
얇은 모세관 길이 10 자궁 경관의 배란 점액 동안 입력 참조. 모세관의 한 구단은 점토를 닫습니다, 두 번째 시험은 신선한 사정으로 시험관에 위치 (더 이상은 없어 3 사정 후 시간). 모세관 내의 점토는 직립 튜브에 부착하여. 시료 온도 항온기에서 배양 37 ° C. 1 아니. 사정의 질은 자궁 경관의 점액에 정자의 침투의 깊이에 의해 판단한다에. 온실 가스의 세 가지 유형이 있습니다.
- 긍정적 인 - 침투 깊이 (센티미터에서 가장 큰 거리, 적어도 하나의 정자에서 여행) 위의 5 센티미터; 최대 침투 지점에 정자의 수가 더 5 눈에, 모세관의 위쪽 1/3 정자 운동성의 개수보다 큰 50 %.
- 의심스러운 - 침투까지의 깊이 5 낮은 정자 수를 참조하십시오 5, 모세관에 도달의 상위 세 번째에있는 그들의 이동 50%.
- 마이너스 - 정자에 도달 침투의 깊이 1 센티미터.
침투하는 정자의 능력 이는 월경주기의 단계에 따라. 그녀는 월경주기의 9 일에서 등장하기 시작,, 점차 활성화, 배란 기간에 최대 발현에 도달, 이틀 동안이 수준에서 유지, 후 점차 감소.
테스트 접촉 정액과 자궁 경부 점액 (TKSTSS)
슬라이드에 자궁 경관 점액의 작은 방울을 넣어, 배란시 여성에서 촬영, 정액과 동일한 크기의 방울의 수가. 두 방울의 커버 유리로 덮여, 약간을 위해하는 누름, 드롭에 가입. 약물은 습기 챔버에 배치됩니다 (적신 면봉으로 페트리 접시) 및 온도에서 배양 항온기 37 ° C. 1 아니.
이러한 조건 하에서, 정상 정자 정상적인 자궁 경관의 비밀을 관통, 배율 200X에서 현미경으로 볼 수있는 바와 같이. 두 미디어 사이의 경계 부근의 반응을 설명하기 도면의 두 개의 인접한 필드에서 자궁 경관 정자의 비밀 침투 수를 카운트.
두 필드의 우수한 TKSTSS로보기 더 보여 25 작은 스윙의 현상에 적극적으로 운동성이있는 정자 25 %. 보기의 두 분야에서 만족스러운 TKSTSS 더 공개하는 경우 15 적극적으로 운동성이있는 정자, 저에 TKSTSS - 이하 15. 음의 부재 침투 TKSTSS, 진동 현상이 초과 - 의심이있는 경우 25 %.
이 테스트에서, PCT에서와 같이, 스윙의 현상, 초과 25 %, 아마도, 그것은 ACAT의 존재를 나타내는 정량적 면역의 약속이 필요.
TKSTSS를 사용하여 정액과 자궁 경부 분비물 다양한 양의 채널 불임과 비옥 한 남성을 사용하여 불임 남편을 식별.
- 예 1. 여성 불임 부부 및 제어 사정 건강한 남성 자궁 경부의 비밀 채널을 촬영. 우수 TKSTSS는 남편의 정자의 약한 침투 능력과 자궁 경관의 정상적인 분비의 감수성을 나타냅니다.
- 예 2. 촬영 전체 자궁 경관 건강 한 여자의 비밀과 불임 부부의 남편의 사정. 나쁜 TKSTSS 정자의 약한 침투를 나타냅니다.
- 예 3. 카메라 비밀 경부 여성 불임 부부 및 제어 사정 건강한 남자. 나쁜 TKSTSS는 열등감 비밀 자궁 경관을 나타냅니다, 이는 분명 정상적인 정자 침투하지 않습니다.
정량 면역 학적 테스트
Mikroagglyutinatsionny 테스트 프리 버그
Mikroagglyutinatsionny 테스트 프리 버그 (TF) 충분히 민감하고 임상 진단 실험실로 사용할 수 있습니다. TF를 사용하여 다양한 물질의 응집 및 ACAT 역가의 존재를 결정할 수있다 (플라즈마 사정, 자궁 경관의 점액의 두 배우자의 혈청에서 추출).
시약:
1. 인산염 완충 식염수 (FSB) 0,01 М 산도 7,2-7,4.
2. Vazelinovoe 오일.
장비: 현미경, 투베르쿨린 주사기, mikroagglyutinatsionnye의 피펫 1 ml의, 마이크로 피펫 용량 0,1 ml의.
방법. 혈액 검사 혈청에서 항온 배양하여 비활성화된다 56 ° C. 30 M. 사정하다, 자위 행위에 의해 얻어진, 즉시 있도록 희석 FSB, 정자의 농도는 40 백만. 에 1 ml의.
재료의 때문에 (플라즈마 사정, 경부 운하 또는 혈청의 비밀을 추출) 희석 시리즈를 준비 1:4 에 1:128 희석 FSB위한 액체로 사용. 바늘 도입과 파라핀 오일 mikroagglyutinatsionnyh와 우물에서 투베르쿨린 주사기를 planchettes (vazelinovoe 오일에서) 시험 물질의 각 희석액의 작은 방울. 각 샘플은 네 번 세척 주사기되면. 각각의 희석에 추가 5 사정의 시간을 작은 방울, 에 의해 4 실온에서 H는 응집체를 검출. 마지막 번식, 이에 감지 100X 배율의 현미경 3 검토 및 더 아래 교착, 응집 역가 ACAT 대응.
Spermoimmobilizuyuschy 테스트 Izodzhima (SIT).
역가 고정화 ACAT 혈청, 플라즈마 또는 정액 추출 비밀 자궁 경관는 항원의 존재 하에서 정자 운동성의 숫자로 설정된 (정액).
구성 요소들.
1. 사정하다, 제조와 유사하게 제조 된, FSB를 사용하는 TF에 대한; 운동은 초과 70 %.
2. 기니 돼지의 Komplementsoderzhaschaya 혈청.
3. 면역 인간 혈청 (IChS), 보체의 존재를 통해주고 1 시간 배양 고정 90 % 정액.
4. 보통 인간 혈청 (NCHS), 온도에서 가열에 의해 불 활성화 56 ° C. 30 M.
5. 테스트 불 활성화 된 혈청, 플라즈마 및 정액은 비밀 자궁 경부 운하를 추출.
방법. 1 관을 고정 보수 활동을 평가하기 위해 도입 0,5 등장 성 염화나트륨 용액 ml의, ASAT 2 차 테스트 튜브없이 정자 운동성의 변화를 확인하는 방법 - 0,5 ml의 NHS, 제어 고정 제 튜브 - 0,5 와 ICHS의 ml의 4 관을 고정 ACAT을 결정하기 - 0,5 혈청 ml의, 사정의 플라즈마, 추출물 또는 분비 자궁 경부.
그런 다음, 각각의 튜브에 의해 도입 0,1 ML의 보완. 모든 튜브에 마지막 것은 추가 0,05 농도 ML의 정자 정지 40 백만. 에 1 ml의. 삼각대 튜브 온도의 인큐베이터에 넣고 37 ° C 1 아니. 튜브 정착 정자 응집을 반영하도록 신중히 진탕 오븐으로부터 제거되고.
고배율 현미경 결과를 평가 (400엑스) 시험관 드롭 정자 운동성의 백분율을 계산, 유리 슬라이드 상에 증착 및 커버로 덮여. 마찬가지로, NHS 및 ICHS와 시험관 방울 정자 운동성의 비율을 설정. 식 계좌로 반응의 결과
SIT = K /
여기서 K - ICHS와 NHS와 컨트롤의 운동성 정자의 수;
정보 - 테스트 튜브 운동성 정자의 수 (혈청 검사, 사정의 플라즈마, 또는 자궁 경부 운하의 비밀).
평균 SIT와<2 시험은 부정적이다 (대략 제어 및 테스트 튜브에 운동성 정자 세포의 수와 동일한), 만약 인덱스 CTI>2 - 시험은 긍정적이다, 티. 그것은. 재료 (혈청, 플라즈마 또는 정액 비밀 자궁 경부 운하를 추출) ACAT를 고정화.
- 예 1. ICHS에 지상 제어 - 10 % 운동성이있는 정자. NHS와 제 2 제어 - 80% 운동성이있는 정자. 두 컨트롤 함께 - 90 % 운동성이있는 정자. 시험관에서 - 80 % 운동성이있는 정자.
SIT = R / D = 80분의 90 = 1.1
시험은 부정적, 고정 ACAT의 부재.
- 예 2. 시험관에서 - 40 % 운동성이있는 정자, 그러나, 제어, 예에서 1.
KN = 40분의 90 = 2.2
긍정적 인 테스트. 고정화 항체가 (ASAT), 이는 정자의 운동성을 통해 크게 감소.