Nasledstvennayaのgemoliticheskaya貧血, による赤血球のピルビン酸キナーゼ欠損症の活性に

Nasledstvennayaのgemoliticheskaya貧血, 関連赤血球ピルビン酸キナーゼ欠損症 - 溶血性貧血の比較的まれな形態, 常染色体劣性の遺伝形式をとるれます, それは与えます ホモ接合体における臨床症状, 細胞内溶血の兆候を進めます, 赤血球の大赤血球症, カリウムの低含量. 以上があります。 200 赤字piruvatkinaznoy活動のホモ接合キャリア例.

病因

ピルビン酸キナーゼは、酵素の一つであります, 締結解糖. このリンクの解糖およびATP形成nikotinamiddinukleotid. ピルビン酸キナーゼ活性の欠乏を有する患者の大部分は、これらの2つの代謝物の赤血球の含有量が低減されます, いくつかのケースでは、ATPの含有量が正常です, しかし、インキュベーション中のATPの安定性を乱さ. ATPの正常レベルは、重要な網状赤血球で発見しました. これは、網状赤血球の存在だけではなく、解糖を介してミトコンドリアATPの可能性に起因するものです, だけでなく、酸化的リン酸化に起因します.

ピルビン酸キナーゼ欠損症の結果 また、解糖の生成物の蓄積であります, 前の段階で形成された - fosfofenolpiruvata, 3-ホスホグリセリン酸塩, 特に2,3-ジホスホグリセリン酸. コンテンツpiruvatanlaktataは、赤血球の減少します.

赤血球ピルビン酸キナーゼ欠損症におけるATPの欠如 これは、ATP-aznogoポンプ赤血球の機能の破壊及びカリウムイオンの損失につながります, 前記非増加の赤血球中のナトリウムイオンの濃度. これは、赤血球中の一価イオンの含有量の減少を引き起こします, 細胞およびその収縮の脱水. この現象は呼ばれています dessikotsitoz. 水の赤血球の減少は、ヘモグロビンによる酸素と酸素放出の工程が複雑. この点において、特定の補償役割は2,3-酸difosfoglitserinovoyの赤血球の大幅な蓄積によって演奏します.

酸素に対するヘモグロビンの親和性は2,3-ジホスホグリセリン酸との相互作用によって低減されます. 従って, 2,3-ジホスホグリセリン酸のための高濃度で組織に酸素を返すが促進されます.

ピルビン酸キナーゼ欠損症の活性の臨床症状

欠乏ピルビン酸キナーゼ活性の臨床症状は、溶血の程度に依存します. いくつかのケースでは、増加した溶血は、出生時に明らかにされ、重度の溶血性危機の発生を伴っています, サブ正常レベルにヘモグロビンを維持するために、輸血の必要性を引き起こします. 他の場合において、疾患は、増加した溶血の最初の兆候で、ほぼ無症状の発生する可能性が (subikterichnost強膜と皮膚) 高齢者17-30.

一般に; microspherocytosisと比較, ピルビン酸キナーゼ欠損症はより深刻なを持っています.

触知可能な脾臓とほぼすべての患者. その開示されたいくつかの異常ヘテロ接合キャリアのわずかな増加, 彼らは貧血を持っているが、, 通常, 不足しています. 患者の可能な脾腫の数. 肝臓の有意な増加はほとんど見つかりませんでした. 分離された患者では下肢潰瘍が同定で.

ピルビン酸キナーゼ欠損症の活性の実験室指標

ピルビン酸キナーゼ活性の欠乏を有する患者の大部分は、中程度の貧血を観察し (4,34 - 6,21 ミリモル/リットル, または70〜100グラム/リットル), しかし、危機の際にヘモグロビンが3,1に還元することができます 3,72 ミリモル/リットル (50-60 G / L). コンテンツeritrotsitov- 2.5〜3.0 T 1 L. 溶血性危機は、感染が原因で発生することができ. 月経中の溶血ゲインのケースがあります。.

ピルビン酸キナーゼ欠損症患者の赤血球 normohromieyで大赤血球症によって特徴づけられます, わずかな赤血球不同症と奇形赤血球増加. フェア多染症がありました. 時にはスカラップ端または桑の形態でmishenevidnye赤血球および赤血球を発見, 多くの場合、識別された好塩基赤血球punktatsiya, ジョリー小体. 末梢血中の患者の中にはerythrokaryocytesのかなりの数を明らかにしました, 危機の間に、60~70まで増加させることができます %. ESR, 白血球数, leukogram, 正常範囲内の血小板数. 溶血性貧血の他の形態の場合と同様, 骨髄でシャープな刺激赤い胚芽造血を明らかにしました.

ビリルビンのレベル, 通常, 間接的に起因して増加しました.

無料の血漿ヘモグロビン 通常の, それはハプトグロビンのレベルを減少させることができます. 尿中ヘモジデリンは存在しません. 胎児ヘモグロビンとヘモグロビンAの内容₂ 正常範囲内で.

通常ほとんどの場合、赤血球ピルビン酸キナーゼ欠損症の浸透圧抵抗, 時には日間のインキュベーション後に減少. Autogemoliz, 通常, 様々な程度にアップグレード. 通常autogemolizomとピルビン酸キナーゼ欠損症のケースがあります。. 最初にピルビン酸キナーゼ欠損症の症例は、II型autogemolizaを登録されていると報告, ATPの添加を修正し、修正またはわずかにグルコースの添加を補正しません. その後、多くの場合は、酵素欠損型で記載されているI autogemolizaまたはno. したがって、溶血性貧血の鑑別診断のための方法のautogemolizaを適用することは推奨されません. ピルビン酸キナーゼ活性の欠乏と赤血球の寿命は常に短くなります.

型の継承ピルビン酸キナーゼ活性 常染色体劣性の. 実質的に健康的なヘテロ接合体, 様々な研究者によると、, 赤字の深刻​​度は、の範囲であってきました 50 へ 70 % 規範.

ピルビン酸キナーゼ欠損症の診断活動

赤血球のピルビン酸キナーゼ欠損症の診断は、溶血性貧血の場合に送達することが期待できます, 脾臓の増加に伴って年間流れます, 末梢血塗抹標本標識の欠如microspherocytosis, elliptotsitozaとstomatotsitoza.

ピルビン酸キナーゼの活性を測定するための定性的試験. この目的のために、この方法は、広く、蛍光染色が使用されています, に基づきます, その反応の過程で, kataliziruemoyのpiruvatkinazoy, nikotinamiddinukleotid酸化され、蛍光が消失します.

健康な個体におけるピルビン酸キナーゼの活性は、の範囲でした 4,0 へ 7,7 ミリモル (分/ 1010赤血球) または 4,0 へ 7,7 力. ホモ接合性の疾患の酵素活性の大部分は、以下 1 力. しかし、酵素の活性のわずかな減少場合もあります. 溶血性貧血のまれな形態の診断は非常に困難です, 診断は、酵素反応速度論の研究で作製することができます.

溶血性貧血の鑑別診断, ピルビン酸キナーゼの欠損に関連します

溶血性貧血の鑑別診断, ピルビン酸キナーゼの欠損に関連します, 遺伝性溶血性貧血の他の形態を実行するのに必要な.

個体とは異なり、ピルビン酸キナーゼ活性を欠損するので、ほとんどの患者, 苦しみmicrospherocytosis, elliptotsitozom, stomatocitozom, 溶血性貧血, コンディショニングキャリッジ不安定ヘモグロビン, とサラセミア病は常染色体劣性で遺伝します, この病理は、同じ世代で見られ、両親の間で見たことはほとんどないされていること.

とき遺伝性貧血, コンディショニングキャリッジ不安定ヘモグロビン, 特に重篤な疾患で, 時々発端者は、突然変異の最初のキャリアであります, その後疾患は次の世代に伝達されます。. このため、鑑別診断は異常ヘモグロビンで行わなければなりません, コンディショニングキャリッジ不安定ヘモグロビン, ならびに劣性継承溶血性貧血, 他の酵素の活性欠損によって引き起こされます.

これは、支持ロールヘモグロビン安定性を演じます, yego電気泳動. 他fermentopathiaを除外するには、赤血球の他の酵素の活性を調べました, とクームス行っ自己免疫性溶血性貧血を除外するために, agregatgemagglyutinatsionnaya.

piruvatkiiazyによって活性を測定するための蛍光法 ボイトラー

試薬.

1. Fosfoenolpirovinogradnaya酸 (tritsiklogeksilammoniynaya塩) 0,15 Mの溶液, pHを7.0〜8.0に中和 0,2 MのNaOH溶液 (0,03 ミリリットル).
2. ADF 0,03 Mの溶液, 中和されました (0,1 ミリリットル).
3. NAD-N 0,015 Mの溶液, 中和されました (0,1 ミリリットル).
4. 硫酸マグネシウム 0,08 Mの溶液 (0,1 ミリリットル).
5. カリウムのリン酸緩衝液 0,25 M, pH値 11 7,4 (0,05 ミリリットル).
6. Distillirovannaya水 (0,62 ミリリットル). 混合物で保存することができます - 20 °C週間以下であります.

メソッド.

研究用の血液のために, ヘパリンまたはクエン酸ナトリウムで撮影. これを遠心分離し, 吸引し、プラズマを準備 20 % 等張性塩化ナトリウム溶液の4つのボリュームを追加することによって赤血球の懸濁液.

量の赤血球懸濁液 0,02 ミリリットルと混合します 0,2 試薬mlのインキュベーション 30 分で 37 °C. 液滴は、濾紙上に置き、X線透視を閲覧しました. ベースライン蛍光は、インキュベーションの直前に混合物の赤血球の添加後に検出されました. 通常、それが消えるのインキュベーションの30分後, ピルビン酸キナーゼ欠損が残るのと活動. これは, 領域にUV放射の影響下で蛍光を発するNADH, 可視に近いです, NADは蛍光を発しないのに対し、. 上記の溶液は不安定で容易に分解されるので, 監視が必要です. あなたは慎重に白血球の層を分離する必要があります, 白血球におけるピルビン酸キナーゼ欠乏赤血球酵素活性の活性が正常であることができるので.