脳脊髄液の顕微鏡検査
細胞数の決意
健康な人の脳脊髄液中の細胞の非常に小さな数が含まれています. 臨床的意義一般に白血球があります。 (リンパ球). 白血球を予防しなかったをカウントするには 赤血球, 希釈していないCSFを追加することによって、それらを破壊します 1/10 酢酸フクシンの部. マゼンタ汚れは赤で、細胞を有核. 白血球の染色用試薬サムソンを使用して (ミックス 30 mlの氷酢酸, 2 液化フェノールのミリリットル, 2 アルコール性フクシン溶液1ml 1 : 10 そして、dolivayut 100 mlの蒸留水). 試薬耐性, 優れた染色細胞と数時間以内に細胞崩壊からそれらを保ちます.
溶液として塗布, を含みます 5 ミリリットル 10 % 酢酸溶液と 0,1 グラムのmetilvioleta. それは耐性が低いです, ブルーで染色細胞.
脳脊髄液のための細胞溶解性質は、直ちに服用後の細胞の数をカウントすべきです. 液体は、チューブやマイクロピペット中に計量供給される割合で低下 10 部品脳脊髄液と 1 細胞を染色する部分の着色剤溶液と10〜25分間放置しました. 繁殖のために白血球を混合するために使用することができます. CSF細胞は急速にチューブの壁に付着します, その液体, 試験管にあります, 研究では、徹底的に手のひらの間で回転運動を混合しなければならない前に、.
cytosisをカウントするために使用 フックスカメラ-Rozentalya. グリッド全体を通して農産物を数えます 5 チャンバを充填した後分. 細胞の数 1 Lは式によって決定されます
X =(* 11)/(3.2*10)
前記X - 細胞の数の 1 L; - セルの数, メッシュの表面に数え; 3,2 - チャンバの容積; 11/10 - 希釈.
留分中の計数結果の可登録, 例えば 14/3, どこ 14 - チャンバーで計数した細胞の数, 3 - 丸い図チャンバ容積. 細胞の大多数は、グリッドの片側にそれらをカウントし、その数を倍増するのに十分であると. 鋭く表現Pleocytosisで (細胞数の著しい増加) で細胞をカウントすることができ 16 小さな正方形とすることにより、その数を乗算 16.
不在フックス・ローゼンタールチャンバ内で使用することができ カウント室Goryaeva 大幅に低い容量を持ちます, それは、少なくとも3つの正方形のセルをカウントしません, 算術平均を計算してそれを乗算 1,2. 要因 1,2 式から得られました
X =(* 11)/(0.9*10)
前記0,9-室容器, 11/10 - 希釈.
最初の滴のいずれかから未希釈の脳脊髄液中の細胞を計数する場合, 穿刺針から派生, フックス・ローゼンタールチャンバーに入れ、細胞の数を決定します, 上記のように.
細胞の通常数 (リンパ球) で 1 リットル脳脊髄液 脳室と小脳脳の貯水槽から0-1であります, そして、液体中, 2-4 - 腰椎穿刺によって得られました.
3ヶ月の歳未満の子供には 1 20-23細胞まで検出L脳脊髄液, 14-15 - 1年まで, 2歳まで - 11から14, 二から五年 - 10-12, 5〜7年から、8-10, 七から十年 - 6-8, 十年以上 - 4-5.
とき髄膜炎, 脳膿瘍および脳脊髄液増加中の細胞の数の腫瘍.
いくつかのケースでは出血性脳脊髄液の研究では、真の細胞数を確立する必要があります. この目的のために使用されます フリードマンの方法: 中の赤血球の数をカウントする細胞数および等張塩化ナトリウム溶液を決定するためサムソン試薬を得る出血性流体 1 リットル脳脊髄液.
例えば, 細胞数の 1 L - 20, 赤血球数 - 3600. 患者の血液中の赤血球や白血球の数は、一般的な分析から知っているだろう, 腰椎穿刺前に実行. 例えば, で 1 l 血液 4 200 000 赤血球, 7000 白血球. したがって一つは7000分の4200000 = 600個の赤血球を白血球しなければなりません.
真の値を取得するにはcytosisを同一視:
オン 600 赤血球 - 1 白血球;
オン 3600 赤血球 - X白血球, 従って,
X = 3600/600 = 6 leikotsitov.
真cytosisのCSF 20-6 = 14個の細胞 1 L.
この方法の応用は限られています, 血液のかなりの混合物と脳脊髄液は、このような研究には適していないよう.
脳脊髄液中の赤血球の定量 頭蓋内出血で患者の重症度を確立するために設定されています.
の存在下で 1 L 2000-5000は、脳脊髄液がピンク色に着色された赤血球, 900-1000赤血球 - わずかに乳白色. 無色の液体は、赤血球の低い含有量によって検出することができます. 臨床的意義レベルがダイナミクスに赤血球を増やします.
分化脳脊髄液の細胞 これは、計数チャンバーで実施し、天然型を染色します.
高倍率で (10Xの15X接眼レンズまたは, 40Xレンズ) カウンティングチャンバー内の細胞の大きさに注意を払います, フォーム, 核の位置及び大きさ, 存在は、細胞質を有効に. 簡単に分化した細胞, 好中球顆粒球, マクロファージ. 通常、脳脊髄液中のリンパ球のみが含まれています.
脳脊髄液の細胞組成の完全な特性のために染色の準備を研究. 細胞は、流体悪化し染色しました, 血液細胞より. 絵画のいくつかの方法があります。: Rozinoyによって, 悪童, Papanikolaou, アレクセイエフ, 月Gryunvalydu, Pappenheim.
蛍光顕微鏡によって自然pleocytosisの決定
脱脂スライド降下に脳脊髄液を塗布し、蛍光色素とそれを混ぜます (希釈におけるアクリジンオレンジおよびローダミンの塩水溶液の混合物 1:20000). 調理された調製物は、可視スペクトルの青紫色光でML-2、蛍光顕微鏡下で検査されます, 励起光フィルタの組み合わせを適用します: FS 1-4, FBS 14-4, BS 8-2とロックフィルタLLL-1、液浸対物レンズと. ジメチルの研究のために使用neflyuorestsiruyuschegoイマージョンオイルなど (オルトフタル酸ジメチルエステル).
ビュー多核リンパ球のフィールドの暗い背景に、容易に細胞質の緑色に点灯することによって同定さ. カウント行 100 セル, リンパ球および好中球の数、所与の.
リンパ球 自然核における好中球顆粒球は異なります (オレンジ色の介在物とglybchatoy構造) 明るい緑色の蛍光.
好中球顆粒球 彼らは明確な構造を持っています, クロマチンは、拡散し、その核を点灯しています, 均一な明るいです- グリーン. 黄色の細胞質- グリーン, それ散乱赤レンガ色のビーズ.
小細胞数の例ではネイティブ脳脊髄液を遠心分離し、沈殿物を研究されて.
脳脊髄液の蛍光顕微鏡検査は、好中球についての結論を引き出すことが簡単になります, リンパ球または多形核細胞キャラクターpleocytosis.
形態学的特性脳脊髄液の細胞
リンパ球
健康な人の脳脊髄液で満たします 中小リンパ球 (1-2で 1 L) サイズ4-6ミクロン. 大きな核とglybchatym非常に狭い細胞質とこの丸い形の細胞.
場合にはリンパPleocytosis (結核性髄膜炎, 脳嚢虫症) 中小大型リンパ球が現れると一緒に (8-9 M), 時にはリンパ球は直分割核で検出することができます.
リンパ球の数 (他の細胞と一緒に) 脳腫瘍と脳脊髄液中に増加しています, 髄膜炎の慢性のコース. 脳神経外科疾患における術後期間におけるリンパ球の数の増加は、好中球の数の増加、良好な結果の証拠の後に発生します.
形質細胞
形質細胞は、脳のみと髄膜での長い現在の炎症過程で脳脊髄液中に検出することができます. 形質細胞の形態は同じです, 血液や骨髄点状で.
これは、偏在核と細胞を四捨五入して強く染色, bazofylnoy質. いくつかのケースでは、その数が到達する可能性 26%. 脳外傷での修復過程における術後と低迷中の形質細胞があります。.
Gistiocitы
通常のCSFで時々単一コピーとして発見.
染色の製剤では組織球は、大きなコアと比較的狭い細胞質を持っています. 細胞の大きさ 7 へ 10 M, 円形または不規則な形状. カーネルBeanまたは不規則な形状のパドル, 正色素性. 核小体は、位相差顕微鏡下で、ネイティブの準備に表示されます.
脳脊髄液中の結核性髄膜炎で組織球の多数を明らかにしました, 個別に配置されたクラスタ, その細胞質は好塩基性であります, より集中塗装.
利用可能なデータによれば、, いくつかの種のグリア細胞は組織球に変換することができます. 患者に見られる脳脊髄液中の組織球の数が多いです, 脳や脊髄の手術を受けました (これはアクティブな組織反応と正常な創傷治癒を示し、), 個人で, 炎症時に低迷して結核性髄膜炎と嚢虫症に苦しんで. くも膜下腔または心室壁組織球に発芽と脳腫瘍に改変された細胞とマクロファージとの組み合わせで脳脊髄液中に表示されること, 腫瘍の反応ゾーンの周りの出現のための典型的です.
マクロファージ
マクロファージは、1つに由来しています- そして多核内皮細胞くも膜および単球. くも膜の内皮要素は、合胞体から分離され、丸い細胞に有効にされています, 脳脊髄液中にアメーバ運動や浸透を有します.
マクロファージの活性は、細胞および他の要素を巻き込むとダイジェスト, 病理学的プロセス中の脳脊髄液に陥ります, その精製を容易に. チャンバ内に容易に分化したマクロファージの細胞質内染色調製物中の介在物.
マクロファージは、赤血球を貪食しました, 破壊されたまたは修飾されていない好中球顆粒球, 脂肪滴, gematoidina結晶など. 多くの場合、マクロファージの細胞質内で様々なサイズの液胞がある、または一つの大きな液胞, これは細胞質の大部分を占めます, 核は周囲にシフトしています. 輪状マクロファージ - そのような場合、セルは、リングの形状を有しています.
通常、脳脊髄液中のマクロファージが存在しません. 正常な細胞数の彼らの出現は、中枢神経系における出血や炎症を示し、. 術後期間における脳脊髄液中のマクロファージの数が多いアクティブ再編成を示し (前向きな見通し). マクロファージの少数またはその欠如発現pleocytosis - 乏しい予後徴候.
粒子の粗いボール – 泡沫細胞
粒子の粗いボール (泡沫細胞) マクロファージは、細胞質内脂肪滴の複数の介在物と大きく、.
これは、ほとんどの場合、丸みを帯びた形の細胞であります, 暗褐色に着色マゼンタ. 橙赤色に塗ら脊髄液スダンIII粒状ボールの治療に.
それは、様々な病因の嚢胞からの流体に入るときに脳脊髄液で発見, 脳組織の崩壊 (一緒に脂肪滴を持ちます), 時々、術後期間中, 特定の脳腫瘍で (kraniofaringiome, 上衣腫ら。). 腫瘍が脳室の近くに配置されている場合, ほとんどの場合、脳室から脳脊髄液中に検出された粒子の粗いボール. 粒子の粗いボールの供給源は、ミクログリアです, そして、オリゴデンドロサイト, 外殻容器とくも膜細胞.
好中球顆粒球
脳脊髄液中の好中球顆粒球 血液好中球のgranulopitamiに類似, その細胞質 (カウンティングチャンバー内とネイティブの準備中) 多くの場合、引き伸ばされたり突起を持っています (偽足). 脳脊髄液を取った後の最初の10~15分で観察された細胞とのこの多様性は、好中球の保存を示します- E顆粒球の歩行. 特徴は、セグメント化された核であります, セグメントの数は2〜5の範囲である、請求; 刺す好中球顆粒球はまれです.
前脳脊髄液の好中球顆粒球の変更を保存するとき, 他の細胞より. 好中球顆粒球の核 溶解され得るか、またはセグメントが丸められています, 明確な輪郭を持ちます, 細いブリッジによって接続されました; さらに彼らは、個々のペレットの形をとります. ミクロファージ, その唯一のセグメント丸め核を持続, 外観でLoevit細胞に似ています. そこ 不明瞭な輪郭セグメントで膨潤好中球顆粒球, ほぼ全体の質を占めます. 染色された製剤には減衰好中球顆粒球のすべての段階を観察することができます - 細胞構造の破壊を完了するために、核の腫脹, 輪郭が表示されていない細胞質, コアセグメントは型崩れています, ソフトメッシュクロマチンから成ります. 好中球顆粒球に対するこれらの細胞のメンバーシップは、ペルオキシダーゼとの反応によってのみ設定することができます: 細胞質中の黄緑色や茶色顆粒の存在が粉々.
時々、脳脊髄液に濃色不規則な形状の塊の形で核濃縮核を有する好中性顆粒球を発見.
好中球顆粒球は、脳脊髄液中に表示されます くも膜下腔における出血と, 神経系の炎症性疾患, 脳神経外科手術後. 脳脊髄液中の血液中の好中球顆粒球の存在は、髄膜の炎症を示し.
変わらない好中球の優位性 急性炎症の証拠.
突然 好中球pleocytosisの出現 脳膿瘍のライニングの下ブレイクアウトで観察.
膿瘍の場合, 脳組織の深い位置, 通常発生します リンパ球の優勢と軽度発現pleocytosis.
脳脊髄液中の炎症の減衰が表示されたら 好中球顆粒球の縮退フォーム.
修飾および非修飾の好中球の存在は、進行中の炎症過程の特徴であります. これは、考慮されるべきです, 好中球顆粒球は、不純物新鮮な血液と脳脊髄液中不変で表示されていること, このような場合には、是正細胞数の決意.
好酸球顆粒球
ネイティブ製剤中の好酸球顆粒球は、大粒径特性光沢の存在によって他の細胞から分化CSF, zapolnyayuschey細胞質. レアの二ブレードコアを有する細胞, しばしば観察単核形. 同様に好酸性顆粒球の染色標本の形態, 血液中の. 脳脊髄液は、ほとんどの場合、破壊された好酸球顆粒球を発見されました.
嚢虫症からの範囲で脊髄液への好酸球顆粒の内容 1 へ 46%.
くも膜炎のtsistitserkoznogoの合併症として髄膜炎の発生は、好中球pleocytosis及び好酸性顆粒球の数の減少を伴います. 好中性顆粒球及び好酸球の含量で存在することを特徴脳におけるabstsedirovaniyaエキノコックスバブル用, すなわち、膿瘍からそれを区別する補助機能として働きます. 時には、好酸球顆粒球の大多数は、嚢胞脳や脊髄腫瘍の内容で検出することができます (神経鞘腫, kraniofaringiome, 上衣腫, がんの脳転移). 脳脊髄液中の好酸性顆粒球の数の著しい増加は、心室tsisternoskopii後に観察することができます.
手術創の治癒アクティブと脳腫瘍の除去は、好酸球顆粒球の数を増加させた後、, それは、組織分解産物の髄膜の損傷および吸収に局所アレルギー反応とみなすことができます.
修飾された細胞と影の細胞
脳脊髄液細胞の細胞溶解性質に, 私たちは長い時間のためにそれであります, 残基の細胞質と核の輪郭のみを保持. その形態学的所属が不可能であるかを決定. ほとんどの場合、これらの変更は、好中球顆粒球の対象となります, 時にはそれは、悪性腫瘍の細胞であります. 容易に脳室のクモ膜と上衣の細胞溶解細胞を受けます.
脳神経外科の後に脳脊髄液で見つかった組織好塩基球.
脳脊髄液中の細胞くも膜
細胞くも膜 (arahnoэndoteliya) - 上皮細胞の単層, 彼らは、計数チャンバーcytosisとして区別することができ, とでは、染色します, 汚泥脳脊髄液から調製しました. これはかなり大きな不定形細胞又は比較的小さい円形または楕円形の核を有する丸みを帯びています, 中心部に位置します.
細胞核を低色素染色されます, 細胞質 - 淡いです- または灰青色, したがって、不均一な輪郭を持っており、多くの場合、粒子の介在物が含まれています貪食 (脂肪滴, 細胞要素, 液胞). 多くの場合、破壊された細胞質くも膜細胞, 核および細胞質スクラップのような場合には、検出された特徴. クロマチンまたは核は、顆粒状の構造を有しているmelkopetlistuyu, 時々著しくつの青核小体. 核の量 5 へ 19 M.
個々の細胞のクモの脳脊髄液中に存在することは、まだ病状の証拠はありません, これらの細胞は、くも膜下腔に並ぶようと, 角質除去, 脳脊髄液中に落ちます. クモ膜炎で観察くも膜細胞の数を増やします, 脳嚢虫症. 内容クモ膜嚢胞は、異なるサイズと色強度の核のグループとして別々に配置クモ膜細胞およびそれらsymplasts検出されます, 細胞間には明確な境界線と淡い細胞質に囲まれて.
脈絡叢細胞
脳脊髄液中の心室の脈絡叢からの多角入力することができます, 丸みを帯びました, 時々大きな円筒 (15-19ミクロン) セル. 小さいです (4-5ミクロン) カーネル中心部に位置しまたは偏心, 高色素, 細胞質eozinofilnaya, 強く着色. 脈絡叢の細胞の細胞質で粒状性を持っています, 時々しこりや介在物の形で, 1-3ミクロンの値, 円形または不規則な形状, 緑がかったり青みがかった色. いくつかの細胞では液胞赤血球を検出または捕捉することができます.
脈絡叢細胞は、多くの場合、脳の脳室から流体中に発見されました.
脳脊髄液中に心室上衣細胞
脳脊髄液中に心室上衣細胞, 腰椎穿刺によって得られました, 簡単に準備や染色の準備の際に破壊されました. ステンド塗抹標本では、彼らは教育の種類を持っています, 繊細な構造を持つ楕円形の核からなります. 一部の細胞では細胞質は狭い縞の形で核を取り囲んで保存.
脳室からの流体は保持構造の最も一般的な上衣細胞であります, 形態学的に似た細胞くも膜, しかし、それらの核は淡い色に着色し、より多くの入札を持っています, クロマチンの均一な分布. 楕円形の上衣細胞の極はしばしば指摘します, 細胞質は灰色がかった色合いを持っています. 個別に位置し、大規模な細胞クラスターがあります。, 個々のセルの境界によって決定することができません.