純粋培養の単離によって影響を受けた組織のスクレイピングでリーシュマニアの検出のための方法

特定の栄養培地リーシュマニアに患者の患部組織をこする播種すると乗算し、それらを顕微鏡によって検出することができます.

試薬

СредаW.W.W. リーシュマニアの栽培 (14 G寒天, 6 グラムの塩化ナトリウム, 約 150 脱線維素ウサギ血液のミリリットル, メディアを準備する前に、心臓から直接取得, 900 蒸留水のミリリットル). 蒸留水に塩化ナトリウムおよび寒天を添加しました. 培地を含有するフラスコに、寒天を完全に溶融するまで加熱し、蒸気滅菌器で滅菌20〜30分でました 147,1 キロパスカル (15 に).

に冷却 56 ℃の寒天は、無菌脱線維素ウサギ血液を追加しました, フラスコを回転させて攪拌し、滅菌ピペットに充填 4 mlチューブ. 調剤中のフラスコ血液寒天培地、温度の水浴であります 58 °C. メディアのヒントとチューブ.

寒天が固化した後、それらを一日インキュベーター内に配置されます 37 無菌性制御のためのC°、凝縮液を受けます. それが生産されている場合は十分ではありません, 無菌バイアル中に播種する前に、約追加することができます 1 以下の溶液1mlの: 0,85 % 塩化ナトリウム, 1 % ペプトン溶液, ハンクス液, 等張濃度のラクトアルブミン加水分解物、または他の栄養培地.

純粋培養の単離によって影響を受けた組織の擦過にリーシュマニアを検出する方法

あなたが文化を選択すると、慎重に無菌性の規則に従います. 皮膚のテスト領域は、綿棒で拭きます, 湿らせました 70 % アルコール.

アルコールを蒸発させた後、2〜3ミリメートルの滅菌眼科用メス切開結核長の鋭い終わり. 滅菌パスツールピペットを用いて、カットの底部から組織をこするん. 漿液-血まみれの流体の結果として低下は環境との試験管に移し、. 操作は複数回実行されます, 新しいチューブ素材たびに播種. 耳栓パラフィンに埋め込まれた、またはそれらにゴム製キャップを入れて、22〜24℃のインキュベーターに入れ.

結果の評価

作物は、原因物質を同定するために日常的に顕微鏡下で検査されています. ネイティブ薬を探索, 破砕液滴の方法によって調製さ, レンズ40×40. 結果は負の播種と考えられています, であれば 40 日の病原体が見つかりませんでした. 培養物は、リーシュマニアを伸長さ (10配線と-12ミクロン).

培養法の適用は、最も有用である場合にリーシュマニア症の結核形, 他の方法は、あまり効果的であり得ることが診断.