血液凝固の研究

血液凝固システムの調査方法は、以下の基が挙げられます:

1. 指示します (一般的), 全体として全体の凝固カスケードの状態とその各段階についての考えを与えます (登録 視覚的に、または個々のデバイスによって行うことができる - koagulografa, トロンボエラストグラフィーら。);
2. 個々の要因の差別赤字 - 補正凝固検査, 特定の要因の既知既知欠乏を有する患者における血漿の血漿研究と血液を混合するテスト;
3. システムのその機能的活性上の個々のコンポーネントの定量 (凝固検査, 研究及びその他の発色性基質) と (または) 免疫学的マーカーで;
4. 活性化された凝固因子の循環検出するために - 機能的理由又は分子マーカーような活性化に血管内血液凝固及び線維素溶解の活性化を検出します, 血小板脱顆粒製品, 血液凝固系またはその代謝産物の分離成分, アクティブ化因子およびそれらの複合体の新たな抗原性マーカーの出現, 血液凝固系の促進代謝標識成分 (循環における半減期の期間を短縮).

このようにして, 血液凝固の評価に適切に使用されています 凝固手続き (研究室や楽器), 診断方法の基礎を形成します, と 免疫学, 放射性核種および研究の他の形態. 多くの場合、システムの構成要素は、機能的活性として定義することができます。, および免疫学 - 血液中の、関連する抗原の内容. このような技術の同時使用は、病理学の形態を区別することを可能にします, 適切な凝固因子の合成の欠如に関連しました (この場合も同様の機能活性を低下させます, そして抗原の量), そして、フォーム, 因子分子が合成されます, それは異常と機能的に欠陥があります.

符号に追加番号に対応する第一の要因の形状を示すために「 - 」 (例えば, 第VIII, 9- とt. D。), 第二中 - 「+」記号 (例えば, VIII +, IX +).

見積 (一般的) 凝固検査

血液凝固時間の決意

血液凝固時間の決意 (好ましい方法リーホワイト) - 長い間使用されてきたbystrovypolnimy (ベッドサイドで) 指標とテスト, 重大な出血障害を識別することができます, 血液凝固因子の欠乏に関連しました (第VII因子を除きます) または抗凝固薬および血栓溶解のアクションに. これは、ヘパリン治療の試験および制御のためのガイドとして使用しました, ヘパリン硫酸プロタミンの排除. テストでは、比較的低感度であります, そのパラメータが壊れている場合にのみ、血漿凝固因子の著しい減少 (4-5以下 %), 軽症血友病AおよびBの検出には適していないものに関して, angiohemophilia時だけでなく、凝固障害, XI因子の欠乏, プレカリクレイン、および高分子量キニノーゲン. これらの理由から、テストが患者の術前評価に使用することはできません: 通常の試験性能の下で (5-10分) あなたはおびただしい術後の出血が発生する可能性があります.

プラズマ再石灰

プラズマ再石灰時間 - 非標準化された低感度テスト, 抗凝固の検出のための信頼性の低いです, 全血凝固時間より. それは、止血の障害の診断のためにお勧めすることはできません.

活性化部分トロンボプラスチン時間、プラズマ

活性化部分トロンボプラスチン時間、プラズマ (aPTTの, カオリン、kefalinovыyテスト) - 高感度な方法, プロセスの内部機構を開始する際、凝固の違反を検出. プラズマ凝固因子の欠乏に選択的に敏感 (血小板や要因欠乏症など 3 血小板補償外部から入力されたケファリンまたはeritrofosfatidom).

これは、ヘパリンを監視するために使用しました, 術前の患者など. D. 標準指標はkephalineを用いたサンプルに依存します, 37-50までのほとんどの場合、 (最適 - 37-45で).

カオリンプラズマ時間

カオリンプラズマ時間 - テスト, 以前に似ました, しかし、プラズマkephalineに追加することなく、 (eritrofosfatida), それだけでなく、プラズマ凝固因子の欠乏に敏感である結果に, だけでなく、血小板および因子の欠乏に 3 血小板. この要因の推定活性評価は、血小板の高および低含量で調査時間カオリンプラズマを比較することによって行うことができます (規範 - 57-70で).

私たちは、リン脂質成分の使用はお勧めしません。, 同等のaPTTで凝固時間​​を与えます 55 sであり、より多くの, これは劇的に試験の精度および再現性を減少するため, 因子VIIIおよびIXの定量決意を含みます.

シリコーンプラズマ時間

シリコーンプラズマ時間 - 血漿カルシウム再の時間, 針silikonirovaniyaの条件で得られました, チューブ, pipetok, T. それはあります. 接触活性化の最小と. 試験は、起動の接触相の凝固亢進状態の血管内活性化に敏感です (要因XIIおよびXI), しかし、この違反は、全血のシリコーン凝固時間を定義することによって、より明確に明らかにされます (シリコン処理キュベット中のリー・ホワイトの方法やtromboelastograficheskoy登録プロセスに基づいて、).

標準的な指標は、シリコーンに依存し、それは別に、各サンプルのために健康な人の血液を調べることによって決定されます. 選択する際にシリコーンがベストです, その凝固時間を最も長くています (プラズマ).

プロトロンビン (トロンボプラスチン) プラズマ時間

プロトロンビン (トロンボプラスチン) プラズマ時間 (クイックタイム, プロトロンビン指数) プロセスの外部メカニズムを開始するときには、血漿カルシウム再凝固の速度を特徴付けます, T. それはあります. トロンボプラスチン人間の脳を追加 (またはウサギ).

アクティビティトロンボプラスチン 混合正常サンプルに対して標準化 (テスト) プラズマ. 12-18で最も一般的に使用されるトロンボプラスチン活動 (Kvika- 12-13と古典技法で). 弱いトロンボプラスチン, より多くのエラー方法.

VII - 正常プロトロンビン時間プラズマ試験にプロトロンビン複合体の因子の単離または合成欠損を明らかにする, バツ, VおよびII, そのうちの三つの要因 (七, XおよびII) K-vitaminozavisimyとその活動は、間接的な抗凝固剤の影響で減少します. この点で、プロトロンビン試験は、投与クマリンを制御する際に基本となります (neodikumarin, またはpelentan, sinkumarなど。) このグループの他の薬剤と (fenilin).

プロトロンビン時間は、プロトロンビナーゼの内部活性化機構の因子の欠損と正常である - 因子XII, 11, 9, 8 (T. それはあります. 血友病や欠陥ハーゲマンのすべてのタイプの), だけでなく、プレカリクレインおよび高分子量の不足キニノーゲン (VMキニノーゲン)

別の文献で 指定プロトロンビンテスト結果. プロトロンビン時間のテストを指定し、秒で血漿を制御するのが最も得策 (アクティビティと使用トロンボプラスチンについての情報を与えます). これら2つの値の時々使用率, T. それはあります. 指数 (PVの研究プラズマ, から ,)/(MF制御プラズマ, から), (0.9〜1.1の割合).

この指標の評価のもう一つの形, これは、実験室の中で最も広く使用されています, これは、フィードバック演算割合をコンパイルしてプロトロンビン指数の割合を計算することです (規範 - 90から110パーセント), しかし、この計算は間違っています, 凝固因子の濃度と凝固時間の間に演算がないので, 対数関係. ほかに, 下記の凝固因子を減らすためにのみプロトロンビンテスト敏感 50 % 彼らの正常値. このため、希釈曲線のプロトロンビン指数割合の定義を使用することが好都合です (1:2, 1:4, 1:8 とt. D。) 正常血漿の混合試料. このような曲線は、トロンボプラスチン異なる初期活性のために一度構築されます (から 12 へ 18 から) そして、プロトロンビン指数は、研究の患者で、それによって決定されます. この技術の利点は、その中に構成されてい, すべての研究の結果は、, 別の日にダイナミクスに実行されるものを含みます, 正常血漿の種々のランダム血液試料に対応してい, そして、同じ標準的なパラメータを平均化します, この方法の誤差が大幅に低減されます. 索引, 正常血漿の割合および希釈曲線によって得られました, 互いに対応していません. 間接的な抗凝固薬の効果をモニタリングするときに考慮すべきです, に、従来のインデックスの削減のために 50 % およそこの点で25から30パーセントの削減指数曲線希釈•に対応し、分析は常に指定する必要があります, プロトロンビン指数はどのようにあります, 与えられたトロンボプラスチン活動のための性能基準は何ですか.

血漿トロンビン時間

血漿トロンビン時間, T. それはあります. それにトロンビンの標準活動を追加することにより、クエン酸血漿の凝固時間, これは、血液凝固の最終段階を評価するための主要なテストです. この指標を含めることは、他のすべての凝固試験の正しい解釈のために重要です, 血液凝固の最終段階の違反のために、必然的に、すべての上記の方法で凝固時間​​の延長につながる必要があります.

ほとんどの場合、使用して試験を行うようなトロンビン濃度のトロンビン溶液, これは、与えるための血漿凝固の等量と混合した場合12- 18 から, しかし、弱い濃度disfibrinogenemy認識時に使用されます (30〜35秒の削減につながります).

トロンビン時間 - 重要な診断指標, 出生時の観察の両方の違反, そして、共通で取得しました (二次) gipoprotrombinemii, 最もdisfibrinogenemyで, 同様に、ヘパリンの影響下, 線維素溶解の製品 (PDF) そして抗トロンビンおよび他の自己組織化阻害剤の数は、フィブリンモノマー. このため、最初の場所でトロンビン時間は、より急性および亜急性DICによって乱さ, それは、この病理の迅速な診断に重要な役割を果たしています.

Autokoagulâcionnyjテスト

Autokoagulâcionnyjテスト (許可) - 高感度二段階, それは、その内部機構の開始時に血液凝固の過程を説明します. aPTTのような, テストでは、第VII因子の欠乏に敏感ではありません, しかし同時に、彼の証言は、フィブリノゲンの内容に依存しません (因子I) 血漿の研究で, それは、凝固の指標と他のすべてのサンプルからどのように異なりますか.

もう一つの利点は、ACPということです, その調査希釈された血液, 大幅凝固因子の欠乏に対する感度を高め、, ほかに, ACPの実装は、カオリンとkephalineの使用を必要としません, リン脂質hemolisate自身の赤血球細胞を活性化し、接触の標準化以来、それは調査達成され、.

ACTの本質は、, それに 2 低張液のミリリットル (0,222 %) 塩化カルシウムを添加します 0,1 ml血液を調べました.

この溶血カルシウム混合物が形成さおよびプロトロンビナーゼトロンビン, 活性は、順次加算することによって決定されます 0,2 この混合物へのミリリットル 0,2 テストプラズマのミリリットル (すべての 2 最初の時の分 10 M, その後、 - あらゆる 10 分間 1 いいえ).

プラズマは、フィブリノゲンのソースが検討されています, 活性は、形成されたトロンビンの混合物で試験されました. 数多くの研究によって示されているように, それは血の健康な人の血漿またはフィブリノーゲンの溶液で置き換えることができます. この場合、患者の血流量が0.1-0,2 mlに減少しています (これは、指から撮影することができます!), 何 autokoagulyatsionnyテストmikrokoagulyatsionnyを変換 (MKT) それは小児用、それは非常に便利です, 新生児における止血の研究など、.

ACPとMKTで凝固活性 最初は健康な人に増加、通常は10分の最大値に達し、, インキュベーション血中カルシウム混合物 (KKS), 凝固は、10±1秒間基板にプラズマを発生した場合. そして、CCFの凝固活性は低下し始めます, その中に形成されたトロンビンの不活性化を示します. 血友病で, ヘパリンおよび活性を凝固他の凝固障害の作用が急激にCCFを減少させ, 後日最初の分から10の移動の最大. CCSにトロンビン活性に早く、より有意な増加が認められた場合亢進.

試験管内の試験を行うには (唯一の10分のインキュベーションKKS上の定義) ヘパリン治療を監視するために使用することができます. この方法の利点は、活性化部分トロンボプラスチン時間はテストします, それは異なるセファリンヘパリン凝固時間の差の影響を平準化していること.

ACPに基づいて (MKT) これは、鑑別診断の血友病のシンプルかつ正確な方法を開発しました.

変換テーブルの参考書に与えられた助けを借りて測定値をACT (MKT) パーセンテージとして表し、グラフ化することができる - autokoagulogrammy.

血液凝固の一般的なパラメータの数を推定するために広く調査の楽器の方法を使用しています, 有利異なるkoagulografov及びトロンボエラストグラフィーを用いて.

トロンボエラストグラフィー これは、血液または血漿凝固の時間パラメータだけでなくアイデアを提供します, だけでなく、血栓の構造と機械的性質の上に形成され. 近年では、登録のハードウェアおよび方法は、標準化と凝固プロセスのリン脂質接触活性化を導入しました. APTT - 凝固はまた、一般的な凝固試験の質量の実行のために作成されています, プロトロンビン, トロンビンおよび結果の自動記録と他の.

様々な凝固因子の欠乏とその定量化を差別化するための方法

ショーの下の表形式データ, 3つの基本的なテストによる血液凝固の研究は異なるプラズマ凝固因子の赤字のグループ描写を可能にしていると推定. そう, 唯一のプロトロンビン試験における凝固を遅らせます (タイプI違反) 遺伝性第VII因子欠乏症の他のすべての特性の通常の測定値下または閉塞性黄疸の開発の初期段階で、または間接的な行動の抗凝固薬による治療の最初の1〜2日でこの因子のレベルを減少させるために, すべての他の還元K-凝固因子の開発における場合因子VII合成阻害進むvitaminozavisimyh.

違反のみ内部凝固メカニズム, T. それはあります. 活性化部分トロンボプラスチン時間およびACP (IIтип), 第XII因子欠乏症で観察, 11, 9, 8, ビルブラント (すべてではない形で), プレカリクレインおよびキニノゲンVM. 遺伝的欠陥凝固因子XII欠損症の人の, プレカリクレインとキニノーゲンVMは非常にまれであり、任意の出血を伴いません, 第VIII因子欠乏症のに対し、 (血友病A), 9 (血友病B) そして、フォンヴィレブランド因子は非常に一般的です (以上です 96 % すべての遺伝性凝固障害) 深刻な出血を伴います. 最初の場所で、さらに鑑別診断を行うために、それらの間の.

第XI因子の欠乏 比較的まれ (およそ0.5〜1.0 % すべての血友病), 非常に穏やかな血友病と進行 (主に怪我や操作の後) それが最初の無症候性の疾患のサブグループおよび血友病およびフォンウィルブランド病の間の中間位置を占めます.

違反の別のタイプは、部分トロンボプラスチン時間の延長及びACPとして特徴付けられます, そして、プロトロンビン時間. これは、V因子欠乏症の特徴であります, XまたはIIまたはK因子の複合体欠乏のためvitaminozavisimyh (七, バツ, 9, 二), 閉塞性黄疸とK-ビタミン欠乏の他の形態で観察されるもの, だけでなく、標準でantykoahulyantov間接的なアクションを受け取ります.

遂に, この表から分かるように、, 3つのテストすべての証言の違反の可能性 (IVтип), 遺伝性および後天ハイポで観察されました- そして、disfibrinogenemiyah (すべてではありません), 直接作用の抗凝固薬を服用するとき (geparina, gyeparinoidov, ヒルジンなど。), 線維素溶解活性化因子とdefibriniruyuschimi薬の治療 (ストレプトキナーゼ, ウロキナーゼら。), 血液および病理学的抗トロンビン物質に表示されます。, 接続を防止 (アセンブリ) フィブリンモノマー - パラプロテイン, クリオグロブリン, 免疫複合体, だけでなく、複雑な凝固障害, 原因DIC. 同じトロンビン時、それは多くの場合、より大きな程度早く、よりに乱れています, 他のテストより.

アカウント疾患の制限及び遺伝性起源または他の疾患や薬物療法や他のエフェクトと二次のリンクの可能性を考慮すると, 出血とそのタイプの有無が正確に血液凝固のこれらの深い障害の起源を特定することはできません.

すべてのもの 差別化テストは、補正の原理に基づいています, T. それはあります. 定義上, エクステントは、出血性疾患を明らかにしまたは除去します, 逆に, これは、凝固因子の人為的に明確に知られている欠陥を取得した血漿のサンプルや血液製剤を持続します.

このためには、専門の研究所は、血漿のコレクションを作成するにはfaktorodefitsitnyh, 患者からそれらを受けて、明らかに深い設立 (もっと少なく 1 %) 要因のそれぞれの欠乏、および小型パッケージに保管してください (上 0,5 ミリリットル) 温度で - 30 °C. 必要に応じて、これらのサンプルを解凍し、診断試験で使用されています.

プラズマ, 誤っていたり、残りの未使用の凍結を解除しています, 再凍結の対象にはなりません. 矯正試験において特定の因子の血漿免疫阻害剤と一緒に使用されるべきではありません. 企業の数の診断キットは、欠損凝固因子を決定し、凍結乾燥した血漿サンプルを含みます (基板のプラズマ). めったに臨床現場では見られないが、多くの出血性疾患, これらに関連して人為的に特定の凝固因子の欠乏と正常な血液成分を用いて調製し, だけでなく、異種血漿など (鶏, アヒルの子ら。).

次の表は、血液成分中の凝固因子のコンテンツに関する情報を提供します, そのストレージの条件に応じて、凝固試験の補正に使用. この表を使用して, 三つの主要な凝固試験のいずれかの測定値を解読するのは簡単. テストを使用し、この種の矯正技術, 標準化された連絡先およびリン脂質の活性化, T. それはあります. 溶血を使用して、カオリンまたはkefalinovye (行為で).

患者血漿と血漿混合試験, 明確に特定の因子の欠乏を知られました

血漿の研究では、活性化部分トロンボプラスチン時間を決定します, 正常血漿 (コントロール) プラズマ中のはっきりと知られている第VIII因子欠乏症 (血友病A患者の), 9 (血友病Bの), ИXI XII. その後、クエン酸血漿試料の混合物を調査します (7/10 ボリューム) 順次欠損血漿のそれぞれと (3/10 ボリューム), VIIIおよび第IX因子欠乏から始まります (疾患の最も頻繁な形!).

混合物にカオリンおよびセファリンを加え, とにより 2 再石灰化に供分 (温度で 37 °C). 彼はブレンドのよう, 活性化部分トロンボプラスチン時間は、正規化されていない場合, これは、凝固における同一の欠陥を持っています.

そう, 対象は、部分トロンボプラスチン時間は、患者の血漿を追加することによって、明確に知られている第VIII因子欠乏症を正規化されていない患者を有効にした場合, しかし、患者の血漿欠損第IX因子を修正, 彼が持っています 血友病A.

同様に、, しかし、プロトロンビンテストに基づいて赤字プロトロンビン複合体を区別 (バツ, Ⅴ, VIIのиII).

トロンボプラスチン生成テスト

血液凝固機構の内部分化の違反のために最も頻繁に使用されている古典的な トロンボプラスチン生成テスト 血小板成分の交換で, 準備は時間と血液のかなりの投資が必要, セファリントロンボプラスチン生成テスト欠点は、その嵩高されています, 食品は、多数の試薬を必要とします, その実現のために、時間がかかります.

補正用テスト, テストautokoagulyatsionnogoの基礎に基づいて、.

問題の迅速な診断は、完全に別の補正用テストを満たしています, 第二の補正に基づいて、同一の正常な血液成分は、試験autokoagulyatsionnogoに基づきます.

このテストは、非常に信頼性があります, スピードと実装との容易さが少し必要です (もういや 0,5 ミリリットル) 血液検査の量, それは小児患者に使用することができます.

それは, トロンボプラスチン生成試験と, 吸着血漿の補正に使用し、血清古いです, これは従来の研究に再び遠心分離. 3本の管を注ぎ 2 ミリリットル 0,222 % 塩化カルシウム溶液、及びそれらの二つに添加します 0,1 正常血漿の吸着ミリリットル (1-Iバイアル) と 0,1 古いmlの正常血清 (2-Iバイアル). 他の三つのチューブピペットで 0,2 クエン酸化正常血漿のミリリットル. 次いで、塩化カルシウムの溶液で全てのチューブに添加しました 0,1 テストmlのクエン酸血.

丁度1 4 分間のインキュベーションは、その凝固活性の混合物を、正常血漿で試験しました。.

最初のチューブにおける凝固活性の急激な低下 (通常のBaSO₄-プラズマ) それは、患者の第IX因子欠乏の存在を示します (血友病B), 唯一の第二の管で (古い血清と) - 第VIII因子の赤字 (血友病A); 補正は、2本の試験管内で行われる場合 (同じように強いです), その後, 明らかに, 因子XIまたはXIIの欠乏があります (cm. テーブル. 14).

このテストは非常に敏感です, 研究では、希釈した上で行うため、 20 時間血液因子補償 3 血小板溶血. 使用される唯一の試薬 - 塩化カルシウムの低張液, これは、公開裁判を行っています.

同様に、単純な補正サンプルの方法であり、, 分化因子II欠乏症のためのプロトロンビン試験に基づいて行います, VII + Vのи, バツ (表中の).

赤字を区別するために、VII及びX因子, 調製 - 余分な凝固試験は、アッセイプラズママムシ毒ヘビの溶液に添加して行われます lebetoks (毒の濃度は、選択され, 塩化カルシウムの存在下で凝固20-25を引き起こすkephaline; すべての成分を大量に取得されます 0,1 mlのミックス) (下記の表).

同じ目的毒準備ラッセルマムシと, インドに住みます (準備 stipven).

欠損因子または免疫の特異的阻害剤を定量化する必要があれば鑑別診断が完了すると、, 特別な高感度の標準化方法を適用しているため. 要因の補正不足と正常血漿の血液の混合試料の希釈曲線を用い、これらの工法で, テストを除きます. これらの曲線から、患者の血漿中の試験因子の活性によって決定されます.

特に 因子VIIIおよびIXの濃度の重要な定量的決意, ならびに血友病AおよびB患者においてその阻害剤を有します (特に前と手術中、集中補充療法中), だけでなく、大量の分娩後出血を延期, 免疫出現第VIII因子阻害剤 - DIC以上の希少な病理を区別する必要がある場合 (まだはるかに少ない - V因子).

XIII因子の欠乏と深いです (非常にまれな遺伝性の病態) すべての凝固検査は正常です, しかし5Mと7M尿素で血栓を溶かします.

それは程度に応じて、さまざまな凝固因子の欠乏とを区別するのに役立ち、, 特に, 血液製剤の患者への静脈内投与後の証拠テストの正常化の条件, T. それはあります. 調整 インビボの に記載の方法. 3. Barkagana.

循環中の寿命に大きな差が微分係数場合、この技術は特に有効です. そう, 半分の平均寿命要因のプロトロンビン複合体は、数時間ごとに異なります (факторVII) 数日へ (ファクターII). それらの間の中間位置Xファクターを占めます (2-2.5日) とV (12-18).

したがって、第VII因子欠損症大量輸血ジェット血漿プロトロンビン指数が増加した後、非常に短いです, V因子の欠乏に - やや長いです (約4〜6倍), そして、するとき、X因子および欠乏症, 特に, 長い期間II (1-2日以上). この点で示すと、プロトロンビン指数PPSB準備への影響 (第VII因子濃縮物, 9, XおよびII). また、簡単に第VII因子の欠乏でプロトロンビン時間を正常化し、より耐久性 (何回も!) 要因XおよびIIの欠乏で. この薬はV因子ではありませんので、, 赤字はそれらを補正しません.

同様の差が凝固因子の内部機構の輸血および置換療法中に検出され (12, 11, IXиVIII), 活性化部分トロンボプラスチンテストを登録しています.

特に興味深いのです 力学第VIII因子レベル補正や血友病AとのvWDのaPTTの輸血療法で読みました. これらの条件の第一は、輸血後の即時凝固最大の改善が検出されます (スプレー, 速いです!) 抗血友病寒冷沈降物をプラズマもしくは投与, かなり急速に続いて (10-18時間) その中に着実な減少, いくつかのvWDがある場合には輸血後数時間以内に凝固活性を高める一方、, その後、その減少は - はるかに遅いです, 時より. この点において、まれフォンヴィレブランド病の治療は、置換輸血に頼ら, 血友病Aより.

発色基質を用いた凝固因子及びカリクレイン - キニンのコンポーネントおよびフィブリン溶解システムの機能的活性の調査

方法は、タンパク質分解酵素とその阻害剤の活性の研究に基づいています, 血液凝固に関与, 線溶とキニンobrazovanii, 強度のこれらの酵素のペプチドに対して特異的に感受性の切断の速度, 着色剤は、分解を解除されました (β-nytroanylyn).

反応混合物の着色度 分光光度法によって決定, その強度は、対応する酵素の活性に判断されます (凝固因子, kallickreina, プラスミンなど。), プロセスの阻害 - 酵素阻害剤の活性.

そう, 例えば, アンチトロンビンIIIおよびヘパリンの作用は、第Xa因子またはトロンビンを弱める発色基質の切断により評価することができます, そして、αの活動₂-抗プラスミン - 適切な発色性基質上のプラスミンの作用を弱めます. 発色性基質 やデジタルサイネージを持っています (例えば, S-2222), または縮合アタッチメントhromozinamiと称される, 酵素ことを示します, その感応基板へ (例えば, クロモザイムPL - プラスミン基質, クロモザイムTH - 基板トロンビン, クロモザイムPK - プレカリクレイン基板/カリクレインなど. D。).

発色基質は、止血システムの研究能力を拡張します, しかし、多くの研究室に十分な空きがありません. いくつかの研究, それらで作られました, 彼らは、従来の凝固試験上の利点を持っているとのマッチング結果とそれらを提供します; 他の例では、それらの使用は、研究を簡素化し、加速します, それは、より正確になっています; 第三に - これらの技術は、独立した意味を持っているし、凝固試験を交換することはできません (例えば, 定義prekallikreina).

止血系の成分の免疫学的決意

止血システムコンポーネントの免疫学的決意をする方法により行われます:

• 免疫沈降;
• 免疫電気泳動;
• ラジオイムノアッセイ、および適切な抗血清と他の

このコンテンツは、凝固因子の抗原の血漿中で評価されている場合 (またはその断片), むしろ、機能活性より, 劇的血漿中の正常な抗原を用いて低減することができます. この状況は、すべての場合に典型的です, 異常な体内で合成すると (機能的欠陥) 要因, それらの抗原性を保持, しかし、止血に参加する能力を欠きます.

これは、関連する因子の合成の完全な停止および異常な形態の形成を区別することができます.

しかし、止血システムのいくつかのコンポーネントは、免疫学的に決定することができます.

このグループは、このような重要な研究が含まれて, 次のコンポーネントの定義として:

• B-тромбоглобулина;
• α2-makrohlobulyna;
• タンパク質CとS;
• 抗原ファクターVIII:CиVIII:R_メモリ;
• 線維素溶解の製品 (PDF);
• neoantigenov kompleksovトロンビン - アンチトロンビンIIIおよびプラスミン - 抗プラスミン;
• 他のテストの数.

したがって、免疫学的研究は大幅に止血システムの異なるリンクの機能評価を補完します.

診断テスト, ヘビ毒からの試薬などの薬物の使用に基づいて

それは長い確立されています, 毒ヘビ多くは非常に活性なタンパク質分解酵素を含むこと, 血液凝固を引き起こし、凝固カスケードの様々なリンクに作用します. その結果、ヘビ毒広く止血の障害を検出するために使用されるそれらから単離されたコアグラーゼとして, 凝固因子の定量決意, 検出および可溶性フィブリンモノマー複合体の定量決意 (RFMK) そして他の多くの研究.

ヘビ毒のサンプルは、多くの場合、はるかに簡単ですし、止血障害のよりタイムリーな診断を下します.

次の表は、血液凝固系における毒の作用のメカニズムに関するデータと、それらのそれぞれの診断使用の可能性を提示します.

これらの機能は、いくつかの毒と、単純な一般的な凝固試験の同時使用により、さらに拡大しています. そう, 例えば, 蛇毒と凝固検査とF-穴の同時適用は、赤字の要因VIIを区別することが容易になります, X-VおよびII (下の表で), そして濾過正常血漿の追加の補正と (因子II及びVのソース) -defitsit因子XとV.

基本的な生理学的な抗凝固薬の決意

最も重要なのは、主要な生理学的抗凝固活性の決意である - アンチトロンビンIII, その減少は遺伝的に決定することができます (主血栓) またはセカンダリ集中的に使用するため、 (DIC, 大規模な血栓症) または代謝を加速 (ヘパリンによる治療, L-asparagïnazoy, 合成避妊) および免疫複合体の遮断, パラプロテイン, フィブロネクチン, 急性期タンパク質.

いずれの場合においても、アンチトロンビンIIIの活性低下60~65以下 % これは、血管内凝固をサポートしています, これは、ヘパリンの抗凝固あまり顕著な効果を作ります. しかしながら、非常に多くの場合、アンチトロンビンIIIのレベルとの間およびヘパリンに対する感受性を低下適合性を有しますlaw-.

ヘパリンのこの通常弱める抗凝固作用は、実質的にアンチトロンビンIIIの活性の低下の程度より優勢. 実績のあります。, それは異なる程度で変化してもよいヘパリンへのアンチトロンビンIII欠損親和性の様々な形態のもの. ほかに, ヘパリンの異なる画分, 割合は医薬品では非常に揮発性であります, また、アンチトロンビンIIIのために異なる親和性を持っています. したがって、実用上重要なアンチトロンビンIIIの方法を実際の活動を調査します, 速効性の抗凝固剤のヘパリンの影響を受けてオンにすると、その能力.

アンチトロンビンIIIの抗凝固活性

アンチトロンビンIIIの抗凝固活性 これは、研究血漿の能力によって決定されます (希釈 - メソッドコプリーWintersteinか 脱線維素熱変性 温度で 56 °C - メソッドLoligera, 博士Abildgaarda。) 外部から入力されたトロンビンの一定期間のための不活性化. 血漿中の残留トロンビン活性は、その凝固活性によって決定することができます (fibrinogeneの, 硫酸バリウム吸着血漿) または発色基質の切断に, トロンビンまたは第Xa因子の影響を受けやすいです (アンチトロンビンIIIは、因子を不活性化するように).

ヘパリン補因子活性

血漿アンチトロンビンIIIに含まれているヘパリン補因子活性 ヘパリン血漿の試験公差によって決定長期間, 指標と考えることができます, それは正常値の非常に大きな広がりを与え、十分に再現するため、.

より正確かつREPRO izvodimyテスト, ここで、プラズマトロンビン時間の調査でヘパリンの種々の濃度の効果を調べました, 血小板の少ないです. 比較はトロンビン時間制御正常血漿の延長で作られています, 同じヘパリンサンプルを付加されました.

そう, トロンビン - ヘパリン血漿を研究するためのアッセイは、ヘパリンの量に加算されます, トロンビン時間を延長された制御 15 32-35へと (低濃度) そして、95-110と (ヘパリンの高濃度). これらのデータから、インデックスはプラズマ抗トロンビン剤で計算されています (AAP) および抗凝固血漿準備 (CBA).

同様の技術も広く凝固試験におけるトロンビンの不活性化の程度を推定するために使用されます, そして、発色性基質.

アンチトロンビンIIIの抗原の免疫学的決意

アンチトロンビンIIIの抗原の免疫学的決意 これは、血栓の種類を区別するために私たちをことができます:

• アンチトロンビンIIIの不十分な合成と (抗原性マーカーのレベルが十分に低減活性を低下させます);
• 異常と機能的に欠陥の形態の保存合成と (抗原性マーカーのレベルは非常に高いです, のそれよりも).

タンパク質CとS, trombomodulynとα₂-免疫酵素法によって決定マクログロブリン.