免疫学的に引き起こされる不妊の診断

避妊を使用することなく、長い結婚生活の間に, そして、生殖器における粘膜の微小領域の存在にスポット徐々に発生する可能性があります 精子の免疫抗原. 配偶者の身体検査, 不毛の結婚になります, 10-15に不妊の原因を特定することはできません % ケース. 捜査秘密の子宮頸管の特別な方法を適用するときには、不妊夫婦のこのグループにあり, 精液、血漿及び血清精子抗体がしばしば検出され (ASAT), 免疫学的研究の定性的および定量的なテストを使用します.

Postkoytalnыyテスト (FCT)

Postkoytalnыyテスト (FCT) これは、定性的な免疫測定法を参照. 陰性の検査結果は、子宮頸管の秘密で精子が存在しないことを示しています, しかし、あなたは彼らの不在の原因を特定することはできません.

メソッド. 子宮頸管の秘密における運動性精子の数で, 性交後に得られました, 子宮頸管の不妊やそれらに対する免疫粘液との貫通能力の違反の程度を確立します.

FCTは、以下の条件を行う必要があります: 研究は、排卵の周期で行われるべきです, colpocytologicまたは他の方法を明らかにしています, 2-3日以内に事前の禁断の配偶者の後.

の方法論. 女性のための通常の性交後 30 分は彼の背中の上に横にする必要があります, あなたの膝を曲げ. Douchingと禁止クリーニング, 唯一の生理用ナプキンを必要とします, 子宮頸管の粘液の研究のためのキャプチャ中に除去されます. 2-4時間後, 許容および6-10時間後 (時間, 調査までの経過, 分析に示されています) 性交頸は鏡クスコと子宮頸管粘液を吸引またはツベルクリン注射器を用いて露光した後、 (針なし), ゴム球でピペット, またはポリエチレンカテーテル.

楽器を洗浄すると消毒剤を使用すべきではありません, 彼らは、精子の運動性に影響を与えるとして、. 子宮頸管の結果粘液の一滴まで加温し、ガラススライドに転送され、, コー​​ティングされたカバースリップ, 漏出した液体パラフィンで潤滑テリトリー. 製剤はすぐmikroskopiruyut (接眼レンズ7X, 対物レンズ40倍), 精子の運動性の数と性質を決定します. 薬剤は、アクティブな精子前進運動を検出することができます, 振動 (スイングの現象) 固定.

受理は、結論FCTの5種類を提供.

• エクセレント (関連する規範): アクティブな精子プログレッシブモビリティとそれ以上と15〜20に表示するまでの5つのフィールドで. 振動の現象と精子は以下であります 25 %.
• 満足な: ビューまでの5つのフィールドで 10 アクティブな精子プログレッシブモビリティと少ないです 25 % スイングの現象と精子.
• プア: もっと少なく 5 ビューの5つのフィールドで精子.
• 引きました: 精子の不在.
• 怪しいです: より多くのビューの5つのフィールドで 5 アクティブ運動精子とより 25 % スイングの現象.

ときFCTの五種類 多くの場合、配偶者間の非互換性免疫を観察, ACATを決定することが必要. ACAT秘密子宮頸管を同定するために、, 血漿、精液または血清して表示 (凝集または固定化) これは、定量的なイムノアッセイの任命が必要です.

負PBC 研究では、貫通の定義で始まります (浸透) 浸透性のテストを介した精子の能力 (金) そして、精子の精子の検査接点を使用して、子宮頸管の分泌と頸管粘液に対する感受性 (TKSTSS).

Penetracionnyjテスト (TP)

細いキャピラリー長 10 子宮頸管の粘液排卵時に入力された参照してください. キャピラリーの一方の開放端は、粘土を閉じ, 第二は、テスト新鮮な精液を試験管に入れています (もういや 3 射精後の時間). キャピラリー中の粘土が直立管に装着されていると. サンプルを恒温槽でインキュベートします 37 ℃で 1 いいえ. 精液の質に子宮頸管の粘液中の精子の浸透の深さによって判断されます. 温室効果ガスの3つのタイプがあります。.

• 肯定の - 浸透の深さ (センチメートルで最大距離, 少なくとも一つの精子で走行) 上記 5 cm; 最大の浸透の点で精子の数より 5 間近に, キャピラリーの上部3分で運動性精子の数がより大きい 50 %.
• 怪しいです - までの侵入深さ 5 少ない精子の数を参照してください。 5, キャピラリーに達するの上部3分の1でのモビリティ 50%.
• 引きました - 精子に達するの浸透の深さ 1 cm.

浸透精子の能力 これは、月経周期の段階に依存し. 彼女は、月経周期の9日目から出現し始め、, 徐々に活性化, 排卵期にその発現が最大に達します, 二日間、このレベルに保持, 徐々に減少します.

テスト接触精液と頸管粘液 (TKSTSS)

スライド上の子宮頸管粘液の小滴を入れています, 排卵中の女性から採取しました, そして、射精の同じサイズのドロップ数. 両方の滴をカバーガラスで覆われています, これは少しのために押されました, ドロップに参加して. 薬物は、湿ったチャンバ内に配置され、 (湿らせた綿棒でシャーレ) そして、恒温槽でインキュベート 37 ℃で 1 いいえ.

これらの条件下では、通常の精子が正常な子宮頸管の秘密に浸透, 倍率200倍の顕微鏡下で見られるように. 2メディアの境界付近の反応を考慮するためには、ビューの隣接する二つの分野で子宮頸管精子の秘密を貫通数をカウント.

2つの視野に優れたTKSTSSは、より多くを明らかにして 25 少ないスイングの現象で積極的に運動精子 25 %. 2つの視野で満足TKSTSSは、より多くを明らかにしている場合 15 積極的に運動精子, 低中TKSTSS - 未満 15. 負の不在浸透TKSTSS, 疑わしい場合 - 振動の現象が超えて 25 %.

この試験では, PCTのように、, スイングの現象, 超過 25 %, 恐らく, これは、ACATの存在を示し、定量的イムノアッセイの任命が必要です.

精液と頸部の分泌物を使用すると、不妊の夫を識別TKSTSSを使用して種々の量で不妊と肥沃な男性チャンネル.

• 例 1. 女性不妊カップルや制御射精健康な男性で子宮頸部の秘密チャネルを撮影. 優れたTKSTSSは夫の精子の弱い浸透性を示し、子宮頸管の正常な分泌の感受性.
• 例 2. 子宮頸管健康女性と不妊夫婦の夫の精液の撮影完全秘密. 悪いTKSTSSは精子の弱い浸透を示し、.
• 例 3. 撮影した秘密子宮頸管女性不妊カップルや制御射精健康な男性. 悪いTKSTSSは劣等秘密子宮頸管を示し、, これは明らかに正常な精子を貫通しません.

定量的免疫学的試験

MikroagglyutinatsionnyテストFribergの

MikroagglyutinatsionnyテストFribergの (TF) 十分な感度および臨床診断検査室で利用可能です. TFを使用すると、様々な材料でのACATと凝集力価の存在を決定することができます (プラズマ射精, 子宮頸管の粘液の両方の配偶者の血清中の抽出物).

試薬:

1. リン酸緩衝生理食塩水 (FSB) 0,01 МのpHは7,2-7,4.

2. Vazelinovoe油.

機器: 顕微鏡, ツベルクリン注射器, mikroagglyutinatsionnyeピペッター 1 ミリリットル, マイクロピペットの容量 0,1 ミリリットル.

メソッド. 血液検査血清をインキュベーター中でインキュベートすることによって不活性化されます 56 ℃で 30 M. 精液, マスターベーションによって得られました, すぐになるように希釈したFSB, 精子の濃度は 40 100万. で 1 ミリリットル.

材料のため、 (プラズマ射精, 子宮頸管の秘密又は血清を抽出) 一連の希釈を準備しています 1:4 へ 1:128 希釈用液体として使用してFSB. 針でツベルクリン注射器をプランシェットmikroagglyutinatsionnyhパラフィン油でウェルに導入され、 (vazelinovoe油の下で) 試験材料の各希釈液の小滴. 各サンプルを4回注射器を洗浄した後に. 各希釈でに追加されます 5 精液の倍小さいドロップ, とにより 4 室温でhは凝集を検出しました. 最後の繁殖, これにより検出された100Xの倍率で顕微鏡下 3 レビューとより下の凝集, 凝集力価は、ACATに対応.

SpermoimmobilizuyuschyテストIzodzhima (SIT).

力価固定化ACAT血清, プラズマや精液は秘密子宮頸管が抗原の存在下での運動性精子の数によって設定されている抽出します (精子).

コンポーネント.

1. 精液, 作製し、同様に調製されました, FSBを使用して、TFのための; 運動性は超え 70 %.

2. モルモットのKomplementsoderzhaschaya血清.

3. 免疫ヒト血清 (IChS), 補体の存在下で与えます 1 時間のインキュベーションの固定化 90 % 精子.

4. 正常ヒト血清 (NCH​​S), 温度で加熱することによって不活性化 56 ℃で 30 M.

5. テスト不活性化血清, プラズマと精液は秘密子宮頸管を抽出.

メソッド. 第一チューブを固定する補体活性を評価するために導入され 0,5 等張性塩化ナトリウム溶液のミリリットル, ASAT第二試験管なし精子の運動性の変化を決定するために - 0,5 mlのNHS, コントロール固定化第3チューブ - 0,5 第4回チューブを固定ACATを決定するICHS mlの - 0,5 ml血清, 精液のまたは血漿, 抽出物または分泌子宮頸管.

その後、各チューブは、以下によって導入され 0,1 mlの補数. 全てのチューブに最後のものが追加されます 0,05 濃度のmlの精子懸濁液 40 100万. で 1 ミリリットル. 三脚管は温度のインキュベーターに入れました 37 °C 1 いいえ. チューブをオーブンから取り出し、注意深く沈降凝集精子を反映するために振盪し.

高倍率顕微鏡下で結果を評価するために (400バツ) 試験管の降下運動性精子の割合を算出し, スライドガラス上に堆積し、カバーで覆われました. 同様に、NHSとICHS付き試験管の液滴で運動精子の割合を設定します. 式により口座に反応の結果

SIT = K / A

ここで、K - ICHSおよびNHSと制御における運動性精子の数;

- 試験管内の運動性精子の数 (血清試験, 精液のまたは血漿, または頸管の秘密).

平均SITで<2 試験は陰性であります (コントロールのとほぼ同じの試験管内の運動性精子細胞の数), もしインデックスCTI>2 - 試験は陽性であります, T. それはあります. 材料中の (血清, プラズマや精液は秘密子宮頸管を抽出) ACATを固定化されています.

• 例 1. ICHSにグラウンドコントロール - 10 % 運動精子. NHSと第二の制御 - 80% 運動精子. 2つのコントロール一緒に - 90 % 運動精子. 試験管内 - 80 % 運動精子.

SIT = R / D = 80分の90 = 1.1

試験は陰性であります, 固定化されたACATの不在.

• 例 2. 試験管内 - 40 % 運動精子, ただし、コントロールで, 例で 1.

KN = 40分の90 = 2.2

陽性試験. 固定された抗体があります (ASAT), 精子の運動性を著しく低減それを通して.