La definizione delle caratteristiche quantitative e qualitative di sperma

Determinazione della motilità spermatica

Determinazione della motilità spermatica è un parametro essenziale, che caratterizzano la qualità del liquido seminale. Sperma, capace di fertilizzazione, hanno una mobilità — commettere moto rettilineo con velocità 50 µm/s. Possono essere trovati nel liquido seminale mobilità-alterati-diskinospermiej di sperma sotto forma di oscillazione, dressage e altri tipi di traffico, che normalmente no.

Motilità degli spermatozoi nel prodotto nativo di eiaculare con un campo visivo limitato (utilizzando la finestra Fonio), utilizzando l'oculare e la lente x 40 x 7, Quando poluopuŝennom condensatore. Conteggio 100 cella, Prendere nota del numero di fra loro di movable, sedentario e stazionario sperma. Spermatozoi di muoversi attivamente OK compongono 80-90 %, sedentario è 10-12, ancora — 6 — 10 %. Solo prende in considerazione tali spermatozoi attivamente in movimento e sedentari, che si impegnano moto translatorio.

È possibile utilizzare la valutazione più dettagliata scala del voto di punto:

• «4» è un'eccellente mobilità (tutti gli spermatozoi hanno una mobilità di dritto in avanti con velocità significativa);
• «3» è una buona mobilità (più ridotto);
• "2" è una mobilità di ampiezza media (ancora un sacco di sperma, ma con le code vibrante);
• "1"-mobilità male (la mancanza di slancio, mobilità delle code di sperma solo);
• "0" è che un movimento di sperma è manca.

Fertilità del liquido seminale dipende dalla durata della motilità spermatica, È quindi necessario determinare la motilità dello sperma nelle dinamiche (kinezisgramma dinamico).

Goccia di liquido seminale messo su un vetrino coprioggetti, Capovolgere e mettere su una diapositiva con lunočkoj per appendere gocce così, quella goccia era al centro di un approfondimento. Vetro di copertura bordo spalmato con paraffina liquida e sotto il microscopio determinare la percentuale di muoversi attivamente, sedentari e stazionari gli spermatozoi attraverso la 1, 3, 6, 12 e 24 ore dopo l'eiaculazione. La ricerca è condotta a temperatura ambiente. Normalmente, il numero di spermatozoi motili attivamente diminuisce ogni 2-3 h 20 % ,

• Note. Esame microscopico del liquido seminale dovrebbe essere effettuato in un laboratorio da una sola persona, chi aveva sufficiente esperienza nel campo della diagnostica di laboratorio, come risultati di motilità dello sperma da diversi ricercatori variare di ± 40 % e in gran parte dipende da esperienza con èâkulâtom.

Il "rivitalizzante" il campione di sperma

Il "rivitalizzante" il campione di sperma basato sul recupero della mobilità ancora, ma sperma in tensione utilizzando soluzioni incentive:

1) soluzione Becker (glucosio- 3 g, Su₂HPO₄ - 0,6 g, NaCl - 0,2 g, KH₂DOPO₄ -0,01 g, acqua distillata per 100 ml; pH - 7,8);

2) 0,1 % soluzione di caffeina (non solo in sigillato!) - 10 % del volume del liquido seminale;

3) 0,1 Soluzione M di arginina.

Metodo. Capacità di misurazione pipetta 1 ml nasasyvaût 0,1 ml di liquido seminale (buon misto) e questa stessa pipetta guadagnando 0,9 ml di soluzione di catalizzatore. Il contenuto della pipetta punta spingere gli hour glass, buon mix di fluidi ripetutamente soffiaggio e aspirazione a hour glass, e poi Cook farmaci gocce d'attaccatura. Attraverso 5- 10 miniere ancora, ma spermatozoi iniziano a muoversi.

La percentuale di spermatozoi motili definire immediatamente quando si ripristina la mobilità e versioni successive 3, 6, 12 e 24 no. Per ottenere risultati più accurati, conducendo una sperimentazione parallela con due soluzioni stimolante. Solo quando l'incapacità di "rivivere" lo sperma immobile può parlare di nekrospermii.

Identificazione degli spermatozoi dal vivo tra fisso

Principio del metodo si basa sul, Quali enzimi di eosina Blanch spermatozoi dal vivo. Come reagenti usati 5 % soluzione acquosa di eosina di potassio e 10 % soluzione acquosa nigrozina.

Metodo. Sulla diapositiva, mettere un piccolo DAB di eiaculare, Successivamente mettere due volte la goccia 5 % goccia ed eosina soluzione potassio 10 % soluzione nigrozina, che è anche due volte l'eosina gocce di potassio. Eiaculare prima è mescolato con eosina di potassio, attendere alcuni secondi, e poi mescolato con paglia nigrozina, ancora una volta, attendere pochi secondi e rendere sottili strisci spazzolati vetro significativo.

Utilizzando il sistema di microscopio immersionnuû, sbavature di conteggio non meno di 200 sperma, l'allocazione di vita (Incolore) e i morti (verniciato con eosina in rosso). Numero di spermatozoi vivi e morti, espresso in percentuale. In assenza di nigrozina una goccia di sperma mescolato con paglia 5 % potassio soluzione eosina e preparare gli strisci sottili per microscopia. Nigrozin colora l'unica droga di sfondo, dove lo sperma vengono allocato più contrasto. Vita normale sperma compongono 80-90 % del numero totale di.

Numero di spermatozoi 1 ML e in tutto il volume del liquido seminale

Il numero di spermatozoi nel 1 ML e in tutto il liquido seminale viene calcolato nella contabilità camera Gorâeva.

Il numero di spermatozoi nell'eiaculato tutti determina moltiplicando il numero di spermatozoi nel 1 numero di ml di liquido seminale (in millilitri).

• Note. Camera numerabile può anche determinare il numero di spermatozoi motili, Perché eiaculare caldo izotoniceski soluzione diluita di sodio hloridz e contare il numero di spermatozoi immobili, e quindi li sottrarre dal numero totale di.

Normalmente, nel 1 ml di liquido seminale contiene 60 milioni. sperma, Quando giperspermii è più 120 milioni di euro., Quando oligospermia — da 30 a 60 milioni di euro., cosa, generalmente, rende impossibile la fecondazione. Tuttavia, casi, Quando avviene la fecondazione e in 1 ml di liquido seminale da 5 a 30 milione. sperma.

In ogni caso, Quando si identificano oligospermia richiede 2-3 controllo di conteggio del numero di spermatozoi in intervalli di tempo di 3-4 settimane per stabilire il loro numero massimo di. Lo stesso conteggio di sperma maschile è soggetti a notevoli fluttuazioni fisiologiche.

OK tutto il liquido seminale contiene più 150 milione. sperma.

Conteggio spermatogrammy

Spermatogramma è la percentuale delle diverse forme morfologiche degli spermatozoi e delle cellule della spermatogenesi.

Nella biopsia, colorato con ematossilina o Pappengejmu, conta almeno 200 sperma, il numero di forme normali e patologici di, così come le cellule della spermatogenesi sono espressa come percentuale. Conteggio avviene utilizzando sistemi di immersione microscopio e macchine per il conteggio di leukogram con chiave nomi modificati.

In un normale eiaculare forme normali degli spermatozoi compongono 80-85 %, a volte 100 %, Questi includono varianti fisiologiche, caratterizzata da o insolitamente gauntlet, o ridotta, o testa aumentato.

Giovani, o immaturi, la forma degli spermatozoi sono intorno alla testa e il collo del resto del citoplasma ("collo"), Ci sono rapporti sessuali frequenti e non in grado di fecondare.

Vecchie forme di sperma (giperhromiâ, ahromiâ, vakuolizaciâ testa) appaiono nel liquido seminale dopo astinenza prolungata e non adatto per la fecondazione.

Per forme patologiche includono sperma con le deformità della testa: megalospermatozoidy (gigantospermatozoidy), macro-, mikrospermatozoidy, Conico, due punte di sperma con un collo e una coda, colli con una o più code, senza coda, con una coda senza testa ecc.

In uomini in buona salute nel normale eiaculare sperma do solito non forma patologica si incontrano, ma a volte può raggiungere il loro numero durante la normale capacità fecondante del liquido seminale 20 %, di questi, circa 15 % è la patologia della testa, 3-5 % -il corpo, 2-5 % -coda.

La spermatogenesi patologica, forma secretiva di sperma infertilità sono identificati con la patologia della testa e del collo. Patologia della coda solitamente èkskretornogo origine, si verifica quando lo sperma passa su percorsi semâvynosâŝim.

Nelle preparazioni macchiate, chiaramente visibili anche separatamente situato germinativnye cellule a diversi stadi di differenziamento e maturazione, che è essenziale per differenziazione e basso di spermatozoi totali e l'azoospermia azoospermia.

Spermatogonii avere un giro, A volte una forma ovale, il loro diametro è di 5-12 µm. Il kernel prende circa un terzo delle cellule, buio- o svetlookrašennoe, con 1-2-3 Nucleo- Lamy, spesso si trova vicino kariolemmy (membrana nucleare), struttura della cromatina fine. Il citoplasma è stretta, basofili, Omogeneo. Spermatogonii quota mitotičeski parecchie volte. Trovare le celle con ben definite fasi della mitosi.

Parte delle cellule, formata come conseguenza di mitosi, differenziato in spermatotsity (I), e poi (II) ordine. Spermatotsity che ordinare -cellule rotonde o poligonali con diametro 17-19 micron con un grande nucleo rotondo e un citoplasma chiaro a grana fine. Nelle preparazioni macchiati visibile cancellare perinuklearnaâ area.

Ordine di Spermatotsity II formata come conseguenza di meiosi. Sono meno, rispetto spermatotsity ordinare (diametro 15 m), morfologia ma quasi identica. Sono comuni nel liquido seminale, rispetto spermatotsity ordinare, ma molto meno, di spermatidy.

Spermatydы -piccolo, cellule di forma rotonda o allungata con un diametro di 12-15 micron con turno i nuclei giperhromnymi, Situato in posizione centrale o eccentrico. È possibile avere spermatidi multi-core. Citoplasma pallido, bazafil′naâ, spesso vacuolato.

Spermatidy Disabilita in sperma.

Cellule della spermatogenesi in spermatogramme normale sono non più di 2 %. Un gran numero di loro quando la sterilità della natura secretiva della.

Per la microscopia di contrasto di fase liquido seminale viene diluito con soluzione salina isotonica con aggiunta di una piccola quantità di 1 % una soluzione acquosa di acido fenico per ridurre la motilità dello sperma o rivanola.

In microscopia a fluorescenza la diapositiva è mettere una goccia di liquido seminale e una goccia di arancia akridinovogo in allevamento 1:20000. Gocce sono mescolati e sono coperti con copertura in vetro. Per microscopia usato 7 x 40 x oculare e la lente. Spermatozoi tinto verde, i morti — in arancione. Forma normale e anormale dello sperma facilmente distinguibile a causa delle loro caratteristiche morfologiche.

Le regole di lavoro sui microscopi a fluorescenza e contrasto di fase sono descritti nelle istruzioni per questi dispositivi. Quando utilizzando spermatogramma di microscopia di fluorescenza e contrasto di fase viene calcolato secondo le regole generali.

Basato su esame microscopico del liquido seminale può rivelare varie circostanze patologiche.

• Aspermia -l'assenza di spermatozoi nel liquido seminale e cellule germinali immature.
• Azoospermia -assenza di spermatozoi in presenza di cellule germinali immature.
• Astenospermiâ -riduzione del numero di cellule motili e un aumento del numero di forme patologiche con normale numero totale di spermatozoi.
• Oligoastenspermia -riduzione del numero di spermatozoi e le loro forme mobili e aumentando il numero di forme patologiche.
• Nekrospermiâ -rigidità di tutto lo sperma del prodotto anche dopo la "rivitalizzazione".
• Akinospermiâ — Stato di, che, a differenza di nekrospermii precedentemente immobile sperma dopo liven cominciano a muoversi attivamente.