L'esame al microscopio del liquido cerebrospinale

Determinazione citosi

Nel liquido cerebrospinale di individui sani contenevano un numero molto piccolo di cellule. Il significato clinico ha soprattutto leucociti (linfociti). Per contare di globuli bianchi non interferiscono eritrociti, Li distruggono con l'aggiunta di liquido cerebrospinale non diluito 1/10 parti di fuchsin acido acetico. Colori Magenta nucleate celle in rosso. Per la verniciatura dei leucociti utilizzando il reagente Samson (misto 30 ml di acido acetico glaciale, 2 ml di fenolo liquefatto, 2 ml di una soluzione alcolica di fucsina 1 : 10 e sormontata 100 acqua distillata ml). Reattivo resistente, cellule buone macchia e nel giro di poche ore li tiene da citolisi.

Applicare come una soluzione, comprendente 5 ml 10 % acido acetico 0,1 Mr. metilvioleta. È meno stabile, cellule macchia blu.

A causa delle proprietà citolitica di liquido cerebrospinale per contare il numero di cellule dovrebbe essere subito dopo l'adozione. Il liquido viene dosato nel tubo o micropipetta gocce in proporzione 10 parti di liquido cerebrospinale e 1 soluzione colorante parte e sinistra per 10-25 minuti per tingere le cellule. Per la riproduzione può essere utilizzato leucociti mixer. Cellule liquido cerebrospinale bastone molto rapidamente alle pareti dei tubi, così liquido, box in vitro, prima che lo studio deve essere accuratamente miscelato movimenti di rotazione tra le palme.

Per calcolare il numero di cellule viene utilizzato Camera Fuchs-Rosenthal. Contando i prodotti in tutta la rete attraverso 5 min dopo il riempimento della camera. Numero di celle 1 L è data da:

X =(A * 11)/(3.2*10)

in cui X - numero di cellule in 1 l; A - numero di cellule, contato sulla superficie dello schermo; 3,2 - Volume della camera; 11/10 - Diluizione.

Ammessi registrazione dei conti come frazione, ad esempio, 14/3, dove 14 - Il numero di cellule contate nella camera, 3 - Volume della camera di arrotondamento. Con un gran numero di cellule è sufficiente a contarli in una metà della griglia e il numero di ricevute doppia. Con una pleiocitosi pronunciato (un significativo aumento del numero di cellule) ha permesso di contare le cellule 16 Piazze piccole e moltiplicare quel numero per 16.

In assenza della camera di Fuchs-Rosenthal può essere utilizzato Camera di conteggio Goryaeva con capacità notevolmente inferiore, celle pertanto si conta almeno tre piazze, calcolare la media aritmetica e moltiplicarlo sulla 1,2. Fattore 1,2 ottenuto dalla formula

X =(A * 11)/(0.9*10)

dove camera di 0,9 capacità, 11/10 - Diluizione.

Quando il conteggio delle cellule nel liquido cerebrospinale di diluito una delle prime gocce, derivante dalla puntura, posto in una Fuchs-Rosenthal e determinare il numero di cellule, come sopra.

Normalmente, il numero di cellule (linfociti) in 1 liquido cerebrospinale l dai ventricoli del cervello e del serbatoio cervello cerebellare è 0-1, e liquidi, ottenuto dalla puntura lombare - 2-4.

I bambini di età inferiore ai tre mesi 1 liquido cerebrospinale l si trova a 20-23 cellule, fino a un anno - 14-15, fino a due anni - 11-14, da due a cinque anni - 10-12, da cinque a sette anni 8-10, sette-dieci anni - 6-8, più di dieci anni - 4-5.

Quando la meningite, tumori del ascesso cerebrale e il numero di cellule nelle cerebrospinale fluido aumenta.

Nello studio di liquido cerebrospinale emorragica in alcuni casi è necessario stabilire la sua vera citosi. A tale scopo il Metodo di Friedman: emorragica guadagno fluido reagente Samson per determinare il conteggio delle cellule e la soluzione isotonica di cloruro di sodio per contare il numero di globuli rossi 1 liquido cerebrospinale l.

Per Esempio, numero di celle 1 l - 20, il numero di globuli rossi - 3600. Il numero dei globuli rossi e globuli bianchi riconoscono il paziente dalla analisi generale, eseguita prima puntura lombare. Per Esempio, in 1 ml di sangue 4 200 000 eritrociti, 7000 leucociti. Da qui si deve leucociti 4200000/7000 = 600 eritrociti.

Per ottenere il vero valore della citosi EQUATE:

su 600 globuli rossi - 1 leucocito;

su 3600 leucociti X - eritrociti, Di conseguenza,,

X = 3600/600 = 6 леикоцитов.

Vero citosi liquido cerebrospinale 20-6 = 14 celle 1 l.

L'applicazione di questo metodo è limitata, dal liquido cerebrospinale di un considerevole mescolanza di sangue non è adatto per un tale studio.

Determinazione del numero di eritrociti nel liquido cerebrospinale Esso è impostato per stabilire la gravità della emorragie intracraniche del paziente.

In presenza di 1 l 2000-5000 eritrociti liquido cerebrospinale diventa rosa, 900-1000 Eritrociti - solo leggermente opalescente. Il liquido incolore può essere rilevato dai globuli rossi inferiori. Il significato clinico è l'aumento nella dinamica del livello di globuli rossi.

La differenziazione delle cellule del liquido cerebrospinale contenuto nella camera di conteggio in forma di nativa e macchiato.

Ad alto ingrandimento (oculare 10X o 15X, Lente 40X) nella camera di conteggio prestando attenzione alla quantità di cellule, modulo, la posizione e le dimensioni dei nuclei, la presenza di inclusioni nel citoplasma. È facile distinguere linfociti, granulociti neutrofili, macrofagi. Normalmente, nel liquido cerebrospinale contenente solo linfociti.

Per la caratterizzazione completa della composizione cellulare del liquido cerebrospinale studiato preparati colorati. Le cellule sono state colorate peggio fluido, di cellule del sangue. Ci sono diversi modi di colorante: di Rosina, Stravincere, Papanicolaou, Alekseev, Può Gryunvalydu, Pappengeymw.

Determinare la natura del metodo di microscopia a fluorescenza pleocytosis

Scremare rivestito vetrino e una goccia di liquido cerebrospinale mescolare con un colorante fluorocromo (una miscela di soluzioni saline acquose di arancio di acridina e rodamina nell'allevamento 1:20000). Il farmaco mista viene esaminato al microscopio a fluorescenza ML-2 nella luce blu-violetto nello spettro visibile, utilizzando combinazioni di filtri di eccitazione: FS 1-4, FBS 14-4, BS 8-2 e la lente filtro di blocco LS-1 immersione. Come neflyuorestsiruyuschego olio da immersione utilizzata per dimetil ricerca (ortoftalico dimetil estere).

Sullo sfondo scuro del campo di vista e linfociti polynuclears facilmente individuati dal bagliore verde del citoplasma. Fila Conte 100 cella, dato il numero di linfociti e neutrofili.

Linfociti diversa dalla natura dei neutrofili nucleo (Struttura glybchatoy con inclusioni di colore arancione) e fluorescenza verde brillante.

Granulociti neutrofili hanno una struttura chiara, loro cromatina nuclei diffusamente illuminata, luminoso uniforme- verde. Giallo citoplasmatica- verde, it mattoni sparsi granuli rossi.

Nei casi di citosi minore liquido cerebrospinale nativa viene centrifugato e lo studio precipitato.

Fluorescente esame microscopico del liquido cerebrospinale rende facile concludere che neutrofili, linfocitica o la natura delle cellule polimorfonucleati pleiocitosi.

Caratteristiche morfologiche delle cellule del liquido cerebrospinale

Linfociti

Nel liquido cerebrospinale di soggetti sani trovati piccole e medie linfociti (1-2 1 l) dimensioni di 4-6 micron. Questo cellule a forma di rotonde con un grande nucleo e glybchatym molto stretto citoplasma.

Quando linfoide pleiocitosi (meningite tubercolare, cisticercosi) insieme appaiono piccole e medie grandi linfociti (8-9 M), occasionalmente è possibile rilevare le cellule con fissione diretta.

Il numero di linfociti (insieme con altre cellule) aumenti di liquido cerebrospinale nei tumori cerebrali, Durante la meningite cronica. Quando malattie neurochirurgiche aumento del numero di linfociti nel periodo postoperatorio avviene dopo l'aumento del numero di neutrofili e indica un esito favorevole.

Le plasmacellule

Le plasmacellule possono essere rilevate nel liquido cerebrospinale solo quando la corrente lungo infiammazione nel cervello e meningi. Morfologia cellule del plasma, come, nel sangue o del midollo osseo puntata.

Questo cellule a forma di rotonde con nucleo in posizione eccentrica e intensamente colorati, citoplasma basofilo. In alcuni casi, la quantità può raggiungere il loro 26%. Ci sono le plasmacellule nel periodo post-operatorio e corso lento dei processi riparativi a lesioni cerebrali.

Gistiocitы

In un liquido cerebrospinale normale si trovano a volte in forma di singole copie.

Le preparazioni istiociti macchiate hanno un grande nucleo e citoplasma relativamente stretta. La quantità di cellule 7 a 10 m, rotonda o forma irregolare. Il nucleo di fagioli o di forma blade non corretta, normohromnaja. Nucleoli sono visibili in preparati native con microscopio a contrasto di fase.

Quando la meningite tubercolare nel liquido cerebrospinale ha rivelato un gran numero di istiociti, distanziate e cluster, loro basofili citoplasma, dipinti più intensamente.

Secondo i dati disponibili, alcuni tipi di cellule gliali possono trasformarsi in istiociti. È stato rilevato un numero elevato di istiociti nel liquido cerebrospinale di pazienti, subito un intervento chirurgico sul cervello o alla colonna vertebrale (che indica una reazione tessuto attivo e normale guarigione delle ferite), e in individui, soffre di meningite tubercolare e cisticercosi nell'infiammazione pigra corrente. Quando i tumori cerebrali con invasione nello spazio subaracnoideo o istiociti nella parete ventricolare possono apparire nel liquido cerebrospinale in combinazione con le cellule alterate e macrofagi, che è tipico per la nascita attorno alla zona reattiva tumorale.

I macrofagi

I macrofagi sono formate da un unico- cellule endoteliali e mater multi-aracnoide e monociti. Elementi di endoteliale aracnoide è separato dal syncytium e diventano cellule arrotondate, possedendo movimento ameboide e penetrazione nel liquido cerebrospinale.

I macrofagi inglobano e digeriscono attivamente le cellule e altri elementi, cadere nel liquido cerebrospinale in processi patologici, contribuendo alla sua purificazione. Le inclusioni nel citoplasma di macrofagi differenziati facilmente nella camera e in macchiati.

I macrofagi phagocytose eritrociti, granulociti neutrofili distrutte o non modificati, goccioline di grasso, cristalli gematoidina, etc.. Spesso nel citoplasma dei macrofagi vacuoli di varie dimensioni sono disponibili, o un grande vacuolo, che occupa quasi tutto il citoplasma, mentre il nucleo viene spostato verso la periferia. In tali casi, la cella ha la forma di anello - macrofagi cricoid.

I macrofagi normalmente assente nel liquido spinale. La loro comparsa nel normale conta delle cellule indicativi di emorragia o infiammazione nel sistema nervoso centrale. Un gran numero di macrofagi nel liquido cerebrospinale nel periodo postoperatorio indica la bonifica attiva (outlook positivo). Un piccolo numero di macrofagi o la loro assenza quando espresso pleiocitosi - un segno prognostico sfavorevole.

Palle granulari – cellule schiumose

Palle granulari (cellule schiumose) I macrofagi sono grandi con più inclusioni di goccioline di grasso nel citoplasma.

Questo è spesso il cellule forma arrotondata, magenta colorato in colore marrone scuro. Nel trattamento di fluido spinale palle granulari Sudan III verniciata arancio-rosso.

Rilevato nel liquido cerebrospinale in contatto con il liquido in esso da cisti di diverse eziologie, il decadimento del tessuto cerebrale (con gocce di grasso), volte nel periodo postoperatorio, in alcuni tumori cerebrali (kraniofaringiome, ependimomi e altri.). Se il tumore si trova in prossimità dei ventricoli, le palle granulari spesso individuati nel liquido cerebrospinale dai ventricoli. La fonte di palle granulari sono microglia, e oligodendrociti, le cellule del guscio esterno delle navi e arachnoid.

Granulociti neutrofili

Granulociti neutrofili nel liquido cerebrospinale simile al sangue neutrofili granulopitami, loro citoplasma (nella camera di conteggio e preparazioni native) spesso allungato o ha una sporgenza (pseudopodi). Questa diversità di cellule osservate nei primi 10-15 minuti dopo l'assunzione del liquido cerebrospinale e indica la conservazione dei neutrofili- la capacità di granulociti muoversi. Caratteristico è un nucleo segmentato, il numero di segmenti in cui varia da due a cinque; granulociti neutrofili stab sono rari.

Quando si ripone la cerebrospinale granulociti neutrofili liquido modificati prima, di altre cellule. I nuclei di granulociti neutrofili possono essere lisati o segmenti sono arrotondati, con contorni chiari, collegata da un ponte sottile; poi prendono la forma di singoli pellet. Microphage, che è memorizzato un solo segmento nucleo arrotondato forma, in apparenza assomiglia cella Loevit. Là granulociti neutrofili gonfie dai contorni indistinti di segmenti, che occupa quasi tutto il citoplasma. In preparati colorati può osservare tutte le fasi del crollo di granulociti neutrofili - gonfiore del nucleo per la completa distruzione della struttura cellulare, quando i contorni non sono visibili citoplasma, e segmenti principali sono informe, costituito da molle cromatina maglia. L'adesione di queste cellule a granulociti neutrofili può essere impostato solo dalla reazione di perossidasi: la presenza di granuli verde-giallo o marrone nel citoplasma del distrutti.

A volte, nel liquido cerebrospinale trovato granulociti neutrofili con nucleo picnotico sotto forma di grumi di forma irregolare ipercromatico.

Granulociti neutrofili appaiono nel liquido cerebrospinale con emorragie nello spazio subaracnoideo, malattie infiammatorie del sistema nervoso, dopo interventi neurochirurgici. La presenza di granulociti neutrofili nel sangue nel liquido cerebrospinale indica infiammazione delle meningi.

La predominanza di neutrofili invariato prova di infiammazione acuta.

Improvviso la comparsa di pleiocitosi neutrofila visto nel rompere l'ascesso sotto il rivestimento del cervello.

Quando ascesso, Situato in profondità nel tessuto cerebrale, di solito osservato espresso pleiocitosi mite con una predominanza di linfociti.

Quando l'attenuazione di infiammazione nel liquido cerebrospinale apparire forme degenerate di granulociti neutrofili.

La presenza di neutrofili alterati e inalterati è caratteristica del processo infiammatorio in atto. Dovrebbe essere presa in considerazione, che granulociti neutrofili non modificate appaiono nel liquido cerebrospinale in miscela di sangue fresco, in tali casi, definizione correttivo citosi.

Granulociti eosinofili

Granulociti eosinofili in campioni nativi di liquido cerebrospinale differenziano con altre cellule dalla presenza di una caratteristica grande graniglia lucido, riempire il citoplasma. Le cellule con il kernel a due pale rare, modulo mononucleare spesso osservato. Morfologia in macchiati granulociti eosinofili stessi, nel sangue. Le liquido cerebrospinale spesso trovati granulociti eosinofili distrutte.

Contenuti di granulociti eosinofili nel fluido spinale in varia da cisticercosi 1 a 46%.

Il verificarsi di meningite come complicazione di aracnoidite tsistitserkoznogo è accompagnata da pleocitosi neutrofila e una diminuzione del numero di granulociti eosinofili. Per abstsedirovaniya bolla echinococco nel cervello caratterizzata dalla presenza nel suo contenuto di neutrofili e eosinofili granulociti, che serve come una funzione ausiliaria nel differenziare dal ascessi. Talvolta un gran numero di granulociti eosinofili può essere trovato nel contenuto delle cisti tumori del cervello e del midollo spinale (neuroma, kraniofaringiome, ependimoma, metastasi del cancro del cervello). Il marcato aumento del numero di granulociti eosinofili nel liquido cerebrospinale può essere osservata dopo ventricolare tsisternoskopii.

Dopo la rimozione di tumori cerebrali con ferita attiva ferita chirurgica aumenta il numero di granulociti eosinofili, che può essere considerato come una reazione allergica locale al trauma delle meningi e l'assorbimento dei prodotti di decadimento tissutale.

Le cellule modificate e le cellule ombra

Grazie citolitiche proprietà di cellule del liquido cerebrospinale, contenuta in esso per lungo tempo, conservare solo i contorni del citoplasma e nuclei di residui. Per determinare la loro affiliazione morfologica non è possibile. Nella maggior parte dei casi tali modifiche sono oggetto di granulociti neutrofili, volte è le cellule di tumori maligni. Facile da sottoporsi citolisi cellule aracnoidee e ventricoli ependimali.

Basofili tessuto si trovano nel liquido spinale dopo neurochirurgia.

Cellule aracnoide nel liquido cerebrospinale

Cellule aracnoide (arahnoэndoteliya) - Un singolo strato di cellule epiteliali, possono essere differenziati come numero di celle camera contaglobuli, e in macchiato, preparato da liquido cerebrospinale fanghi. Questo relativamente grande forma irregolare cellule o arrotondata con un relativamente piccolo nucleo circolare o ovale, una posizione centrale.

I nuclei delle cellule sono colorate ipocromica, e il citoplasma - pallido- o il colore grigio-blu, quindi è spesso contorni irregolari e contiene inclusioni di particelle fagocitato (goccioline di grasso, elementi cellulari, vacuole). Il citoplasma delle cellule del aracnoide spesso distrutto, in tali casi vengono rilevati caratteristica dei frammenti nucleo e nel citoplasma. Cromatina ha nuclei melkopetlistuyu o struttura di grano, a volte molto uno blu nucleolus. La dimensione dei nuclei di 5 a 19 m.

La presenza nel fluido cerebrospinale di celle unitarie della aracnoide non è ancora alterazioni patologiche, come queste cellule allineano spazio subaracnoideo e, esfoliante, cadere nel liquido cerebrospinale. L'aumento del numero di cellule osservate nel aracnoidite aracnoide, cisticercosi cerebrale. Il contenuto delle cisti aracnoidee si trovano in posizioni separate cellule aracnoidee e loro symplast come gruppi di nuclei di diverse dimensioni e l'intensità del colore, circondata da un citoplasma pallido, senza confini netti tra le cellule.

Le cellule del plesso coroide

Dalle plesso coroideo dei ventricoli nel liquido spinale può entrare poligonale, arrotondato, a volte grande cilindrica (15-19 M) cella. Piccolo (4-5 M) Situato nel centro del nucleo, o eccentricamente, ipercromatico, citoplasma eosinofilo, intensamente colorato. Nel citoplasma delle cellule del plesso coroide ha granulosità, volte sotto forma di inclusioni e ciuffi, taglia 1-3 micron, rotonda o forma irregolare, colore verdastro o bluastro. Alcune cellule possono essere rilevati o catturati dai globuli rossi vacuolare.

Le cellule del plesso coroide è più spesso si trovano nel liquido dai ventricoli del cervello.

Cellule ventricolare ependimale liquido cerebrospinale nel cervello

Cellule ventricolare ependimale liquido cerebrospinale nel cervello, ottenuto per puntura lombare, È facilmente distrutto nel processo di cottura e colorazione. In strisci colorati che hanno il tipo di educazione, costituito da nuclei ovali con struttura delicata. In alcune cellule citoplasma conservato circonda il nucleo in forma di un bordo stretto.

Il fluido dai ventricoli del cervello sono le cellule ependimali più comuni con struttura conservata, morfologicamente assomigliano le cellule del aracnoide, ma il nucleo della loro pallido dipinta e hanno più tenera, distribuzione omogenea della cromatina. I poli delle cellule ependimali ovali spesso sottolineato, Il citoplasma è una tonalità grigiastra. Ci si trovano separatamente e grandi gruppi di cellule, che non può essere determinata dai confini delle singole celle.