Metodi per il rilevamento di Leishmania nel midollo osseo striscio

I reagenti per la rilevazione di Leishmania

• Alcol metilico, o alcool etilico assoluto, o una miscela di Nikiforov (miscela di uguali quantità di etanolo etere e assoluto).
• Фосфатный буфер pH 6,9-7,1, per la cui preparazione è mista 40 ml KH₂RO₄ (9,078 g di sostanza secca KH₂RO₄ in 1 litro di soluzione) e 60 ml Na₂PHO₄ (11,876 g di sostanza secca 1 litro di soluzione).
• Azureozin Romanovsky.

Metodi di rilevamento di Leishmania nel midollo osseo striscio

Dal midollo osseo puntata subito dopo l'adozione cura, non schiacciare o deformare cellule,preparare strisci sottili. Se denso punctate, fare impronta. Quando il sangue significativa puntata da esso isolato sul vetro un po 'grumi biancastri di grasso, se sono distinguibili, e prepararli strisci.

Lo striscio preparato è aria secca, allora fisso, come gli strisci di sangue. Strisci fissi secchi possono essere conservati per diversi giorni.

In striscio riversato diluito in tampone colorazione Romanovsky (circa 3-5 ml) e lasciato per 30 50 m. Dopo la colorazione risciacquato con acqua distillata, essiccato ed esaminato sotto un microscopio con sistema ad immersione.

Valutazione dei risultati di rilevazione di Leishmania nel midollo osseo striscio

Nel bel mezzo di malattia Leishmania solitamente trovati nella puntata del midollo osseo in quantità significative e, di conseguenza, sono facili da trovare. Tuttavia, nella fase iniziale della malattia e nei pazienti trattati per, per identificare l'agente eziologico, Si richiede una visione a lungo di tutto striscio (non meno 40 m).

Leishmania trovato nei macrofagi o extracellulare come cellule rotonde o risovidnyh 3-5 micron di diametro. Il citoplasma è colorato colore grigio-blu, e il nucleo - in un rosso-viola. Nel citoplasma, kinetoplasts situati - canna a forma o arrotondati educazione, nucleo intensamente colorate.

Per Leishmania volte prendere piastrine o "schegge" di cellule (Komocki citoplazmy, contenenti materiale nucleare), trovato in strisci di midollo osseo, microrganismi stranieri (ad esempio,, alghe unicellulari), intrappolati in uno striscio durante la verniciatura. Il striscio colorato sono più difficili, di Leishmania (citoplasma blu scuro e il nucleo di cremisi brillante), kinetoplasts mancanti.