Midollo osseo – Preparazione di materiali e attrezzature da cucina i preparativi per l'esame microscopico del midollo osseo

Uno studio dettagliato della composizione e struttura del midollo osseo cellulare è iniziata con l'introduzione nella pratica clinica metodo di puntura sternale, proposto M. E. Arinkin in 1927 città, poi istologico intravitale Ricerca punctate ileo utilizzando trepanobiopsy.

Il metodo di puntura sternale

Per eseguire la puntura sternale per M. E. Arinkin-usato foratura agobiopsia, avente un foglio protettivo, che può essere impostata fino alla profondità desiderata, a seconda dello spessore della pelle e grasso sottocutaneo, garantendo la puntura la piastra posteriore dello sterno.

Il midollo osseo nasasyvayut siringa 10-20 ml-montaggio pistone per fornire il vuoto richiesto. Puntura prodotta nella posizione di test supina a livello di attacco del III-IV costole linea mediana, come la parete anteriore del corpo dello sterno è più sottile e ha una superficie piana o leggermente concava, più conveniente per la puntura. Inoltre, nel campo delle cellule del midollo osseo che contiene un gran numero di.

Può costole e forato i processi spinosi delle vertebre (spesso - III e IV lombare). Quando puntura delle apofisi spinose delle vertebre del paziente si siede, proteso in avanti. Nei bambini, il rischio di puntura sternale a causa della sua maggiore elasticità, e le differenze individuali nello spessore dell'osso. Quindi bambini, soprattutto neonati e bambini, preferibile effettuare una foratura nel terzo superiore della tibia sul lato interno dell'epifisi femorale distale o calcagno. Puntura di iliaca produrre 10-20 mm posteriormente alla spina dorsale anteriore.

Il metodo di ottenimento studio midollo osseo mediante puntura sternale

Il sito di puntura è disinfettata con alcol e una soluzione alcolica di iodio. Poi la pelle, grasso sottocutaneo e periostio infiltrati ago sottile 2 ml 1-2 % Novocaina. Forse pungere senza anestesia o anestesia della pelle utilizzando cloroetil.

L'ago della siringa e di puntura è sterilizzato mediante bollitura o metodo a secco, asciugata con alcool, poi etere.

Prima di fare una puntura, utilizzando una filettatura, uno schermo di sicurezza alla profondità desiderata e la puntura inserita mandrino. Dati indicativi, da seguire durante l'installazione dello schermo di sicurezza in una foratura dello sterno, sono riportati nella Tabella.

Direzione l'ago perpendicolarmente allo sterno della sua linea mediana, movimento rapido forare la pelle, grasso sottocutaneo e una piastra esterna dello sterno. A questo punto, la resistenza diminuisce e l'ago, come se affondare, inclusi nel midollo osseo. Allo stesso tempo è montato verticalmente, immobile. Se l'ago non è in posizione verticale, poi, senza rimuoverla, spingere il fusibile è leggermente superiore e ri-promuovere l'ago.

Dovrebbe essere presa in considerazione, che il cancro, mieloma multiplo, osteomielite e altro ago processo osteolitico, entrare nella lesione, incontra meno resistenza e non è fissato all'osso.

Dopo che l'ago è entrato nel midollo osseo, mandrino viene rimosso e la siringa viene spinto saldamente. Ulteriore, tirando lo stantuffo della siringa, nasasyvayut non più 0,5 ml di midollo osseo (quando più puntata si può ottenere un sacco di sangue periferico).

Se si ottiene un midollo osseo non riesce, poi, senza rimuovere l'ago, rimuovere la siringa, reintrodotti nel mandrino dell'ago e trasferito in un'altra posizione - sopra, sotto o al lato. Poi di nuovo la siringa nasasyvayut leggermente puntiformi. Dopo la raccolta ago midollo osseo, Non razъedinяя con shpricem, rimosso dallo sterno, e il sito di puntura è chiuso adesivo sterile.

Il materiale risultante è stato trasferito ad un vetro d'orologio e rapidamente nel mixer nasasyvayut leucociti o globuli rossi al marchio 0,5 (sotto numero di globuli bianchi normale o elevata nel sangue periferico si raccomanda di utilizzare un mixer-melanzhera eritrociti, e se leucopenia - Miscelatore melanzhera per leucociti).

Accanto al marchio "11" nel mixer per leucociti o per etichettare "101" al mixer per ottenere eritrociti 3-5 % acido acetico. Il contenuto del mixer vengono accuratamente miscelati, scaricato dalla parte capillare del liquido, e successive gocce e riempire la camera di conteggio sono stati contati come cellule leucociti del sangue, considerando la diluizione in un adatto mescolatore. Totale myelokaryocytes (cellule con nuclei) vanno da 50 G a 250 Lattina 1 l, apparentemente, a causa della disparità di composizione midollo nelle sue diverse aree.

Contando il numero assoluto non è myelokaryocytes essenziali. Nella maggior parte dei casi, limitata a contare la percentuale di varie cellule nucleari striscio puntiformi. Allo stesso tempo il numero di cellule giudicato striscio stimata.

Per la preparazione di farmaci dal puntiforme sterno su un midollo osseo particelle di vetro orologio raccolti e prepararli tratti sottili, mescolanza sangue viene rimosso mediante una carta da filtro o una pipetta Pasteur.

Di grande importanza pratica è la corretta preparazione di uno striscio di midollo tessuto osseo, come un miscuglio di sangue periferico distorce la composizione delle sue cellule. In un campione opportunamente preparati cellule sono densamente, ma separatamente e la loro struttura è chiaramente visibile. Si raccomanda di preparare una serie di colpi, utilizzando tutto il materiale viene ottenuto nella puntura. Strisci devono essere preparati in fretta, poiché la piegatura del midollo osseo si verifica in precedenza, rispetto alla coagulazione del sangue periferico, e le cellule possono essere danneggiate, che non possono differenziarsi.

Aplastica stati midollo osseo strisci rivelato un piccolo numero di cellule, a volte non ci sono. Chiarire, Questa è una conseguenza del processo di malattia o foratura condotto impropriamente, richiesto punzonamento ripetuta e punctate ricerca.

Colpi di fissaggio e di pittura eseguite nella stessa puntata, nonché striscio di sangue periferico, meglio di tutti sono colorati da Pappenheim-Kryukov.

Iliaca biopsia ossea

La necessità di studiare in vivo di preparati istologici di midollo osseo, ottenuto dalla trepanobiopsii, nasce, quando la puntura non è possibile ottenere materiale sufficiente per confermare la presenza di un processo patologico.

Particolarmente importante acquisisce metodi istologici per malattie come, Come la leucemia, policitemia vera (erythremia), osteomyelofibrosis, gipoplasticheskaya anemia.

Per forare ed estrazione del tessuto osseo è proposto di utilizzare un ago-trocar, costruito sul principio della puntura-biopsia. Lo spessore dell'ago-trocar 3 mm, diametro interno 2 mm, lunghezza 40 mm. L'estremità distale dell'ago come una taglierina, eiloid, per cui è possibile tagliare osso su tessuto rotazione. L'ago è costituito da un mandrino (stiletto con una estremità appuntita) e maniglie.

Il metodo di ottenimento studio del midollo osseo da trepanobiopsy

Puntura prodotto nella cresta iliaca, certa distanza 20-30 mm posteriormente alla colonna vertebrale anteriore superiore. Tecnicamente, è più conveniente fare una biopsia della sinistra.

Il sito della puntura viene disinfettato con alcool e una soluzione alcolica di iodio. L'ago è pre-sterilizzato mediante bollitura o metodo a secco, e quindi essiccato con alcool ed etere. Con filettatura della vite, uno scudo ago di sicurezza alla profondità di puntura desiderata, tenendo conto dello spessore del grasso sottocutaneo.

Prima dell'introduzione del trocar dell'ago prodotti anestesia della pelle, tessuto sottocutaneo e periostio 2 % soluzione di novocaine.

Penetrante ago trocar nel tessuto molle, il mandrino lancia sentire per un posto con l'osso, dove si vuole fare una puntura. L'ago viene poi movimenti rotatori sotto pressione viene introdotto nell'osso. Quando si sente forte fissazione del mandrino dell'ago viene rimosso. Scollegare il mandrino e la maniglia, Quest'ultimo è avvitato l'ago, fisso nell'osso. Movimenti circolari in senso orario l'ago viene inserito nell'osso. Poi, come il moto di rotazione rimuoverlo. Colonna cilindrica osso, situato nella punta, spingere il mandrino dal lume dell'ago su un vetrino, e da lì trasferito in un vaso con formalina e inviato per l'esame istologico.

Del vetro rimanente, ago e mandrino del midollo osseo strisci fare. Molto spesso riesce a tagliare e rimuovere un pezzo di osso di lunghezza 6 a 10 mm, e talvolta più.

Nel midollo osseo di persone sane e pazienti con i processi iperplastici rivelato molte cellule diverse. In caso di grave ipoplasia (aplastica) processo trepanat è giallo, a causa della quasi totale mancanza di midollo osseo e sostituendolo con il tessuto grasso.

In tutte le forme di osteomyelofibrosis mielofibrosi ed estratto un pezzo di osso sembra "secco" e da esso è possibile estrarre solo una piccola quantità di strisci di midollo osseo per la cottura.